赖氨酸特异性去甲基化酶1 (lysine-specific demethylase 1, LSD1) 是黄素腺嘌呤二核苷酸依赖型单胺氧化酶家族的成员之一, 在多种肿瘤细胞中均高表达。LSD1参与肿瘤细胞增殖、侵袭、分化及免疫细胞杀伤等多种进程, 在肿瘤进展中起到关键作用。研究发现, LSD1不仅通过去甲基化组蛋白和非组蛋白底物发挥作用, 同样也可以通过不依赖去甲基化酶活性的蛋白-蛋白相互作用多样化地发挥促肿瘤功能。随着对LSD1促肿瘤机制研究的日益深入, 靶向LSD1治疗肿瘤已经成为领域研究热点。本文对LSD1作用于不同蛋白所发挥的促癌功能进行综述, 同时对进入临床阶段的LSD1抑制剂进行了整理。对LSD1在肿瘤中功能的全面理解将为开发更有效及更具特异性的LSD1抑制剂提供理论支撑, 为靶向LSD1发挥更好的抗肿瘤治疗指明方向。

高尿酸血症是以尿酸水平异常升高为主要特征的代谢性疾病, 是痛风的关键病理基础。高尿酸血症的口服治疗药物主要通过减少尿酸生成和/或促进尿酸排泄达到降低血尿酸水平的目的。黄嘌呤氧化还原酶是尿酸合成的限速酶, 抑制其活性可显著减少尿酸生成, 使血尿酸水平降低。尿酸盐转运蛋白1是介导肾脏尿酸重吸收的关键蛋白, 也是抗高尿酸血症的主要靶点, 通过抑制其活性, 可促进尿酸排泄从而降低血尿酸水平。目前, 已有3款黄嘌呤氧化还原酶抑制剂、2款尿酸盐转运蛋白1抑制剂上市, 多个化合物进入临床研究阶段。本文围绕尿酸的生理功能与代谢过程, 以及高尿酸血症的病因和治疗靶点等关键问题, 对高尿酸血症的口服治疗药物(包含上市药物和在研化合物) 进行疗效和安全性分析, 为治疗高尿酸血症的新药研发和合理用药提供参考。

铁死亡(ferroptosis) 是一种以铁依赖性、脂质过氧化物累积为核心特征的新型程序性细胞死亡方式, 其发生受细胞内铁代谢、脂质过氧化及抗氧化系统等多重信号通路精密调控。近年来研究表明, 铁死亡在肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs) 与肝细胞命运抉择中扮演双重角色, 与肝纤维化发生发展密切相关。本文阐述了铁死亡关键分子机制, 铁死亡抗肝纤维化的双重作用, 系统综述了以铁死亡关键分子为靶点的天然产物与人工合成化合物在抗肝纤维化研究的最新进展。旨在为基于调控铁死亡通路抗肝纤维化创新药物研发提供坚实的理论依据与策略方向。

动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS) 是众多心脑血管疾病的共同病理基础, 民族医药凭借其独特的理论体系和丰富的药物资源, 在AS治疗中展现出独特优势。本综述系统梳理了不同民族医学对AS的病机认识及常用药物, 揭示“生理失衡”为其共性病机; 并重点从改善肠道菌群、调控脂质代谢、拮抗氧化应激、抑制炎症反应、调节血管稳态等多维度, 阐释了民族药的多靶点作用机制。此外, 本文进一步总结了现有临床证据, 剖析了当前研究在理论现代化、机制系统解析与临床证据升级方面的核心问题, 并对未来研究方向作出展望。

胆汁酸在胆固醇稳态维持、脂质代谢调节中发挥核心作用, 具有广泛药用价值。由于提取分离和化学合成难以满足当前工业化生产需要, 生物催化成为极具前景的胆汁酸生产替代方案。细胞色素P450 (cytochrome P450, CYP450) 催化惰性C(sp³)-H键的羟基化, 是胆汁酸生物合成途径的核心酶。通过CYP450酶的分子改造、氧化还原伴侣工程及催化体系优化等策略, 显著提升其催化效率, 已实现多种胆汁酸的高效生物合成。本文综述胆汁酸的特性、合成策略与CYP450羟化酶应用的优化, 为胆汁酸的绿色生产与相关药物研究提供参考。

木瓜样蛋白酶(papain-like protease, PL^pro或PLP) 是冠状病毒复制过程中关键的非结构蛋白, 负责病毒多聚蛋白的剪切加工, 并具有去泛素化(deubiquitination) 和去ISG15化(deISGylation) 活性, 可抑制宿主的天然免疫反应。由于PL^pro在SARS-CoV-2、SARS-CoV、MERS-CoV等多种冠状病毒中高度保守, 已成为开发广谱冠状病毒抑制剂的重要靶点。新冠疫情暴发以来, 针对PL^pro的研究迅速推进, 已发现多类结构明确、机制清晰的候选分子, 包括非共价抑制剂(如GRL0617及其衍生物)、共价抑制剂(如乙烯酯类化合物) 及天然产物来源的抑制剂。本文综述了以PL^pro为靶点的抑制剂研究进展, 涵盖其结构特征、活性数据、作用机制与发现策略, 旨在为广谱抗冠状病毒药物的研发提供理论支持和设计思路。

Toll样受体(toll-like receptor, TLR) 作为重要的模式识别受体(pattern recognition receptors, PRR), 广泛分布于巨噬细胞、树突状细胞等免疫细胞的内体膜表面, 其中TLR7因其特异性识别病毒来源的单链RNA (ssRNA) 的分子模式而备受关注。TLR7识别单链核糖核酸后, 会激活一系列信号级联反应, 启动高水平的系统性适应性免疫应答来杀死病毒。近年来, 人工合成的TLR7激动剂已在临床中用于治疗HPV感染、基底细胞癌等疾病, 其通过模拟病毒RNA结构激活免疫微环境, 显著增强抗原呈递细胞功能并促进Th1型免疫应答。本文概述了TLR7激动剂近10年的研究进展和在各种疾病中的应用, 旨在为相关研发工作提供参考。

抗癌靶向药作为癌症治疗的重要手段, 通过特异性地作用于酶、受体、蛋白质等靶点, 精准阻断癌细胞的生长和增殖, 不仅提高了治疗效果, 还显著降低了毒副作用, 改善了患者的生活质量。碳硼烷是药物化学领域一类结构独特的硼簇化合物, 在优化抗癌靶向药物性能方面展现出巨大的应用潜力。碳硼烷具有三维芳香性、高疏水性和较大体积, 许多研究人员将碳硼烷引入已知抗癌靶向药物结构, 利用其独特的理化性质来调控母体分子的行为, 从而实现药物与靶点的相互作用增强、药物对特定靶点的选择性提高、药物代谢稳定性的改善等。此外, 优异的硼含量使碳硼烷成为硼中子俘获治疗有效的硼携带剂。本文重点阐述碳硼烷在抗癌靶向药物构建中的应用研究进展, 以期为碳硼烷类抗癌靶向药的研发提供参考和支持。

雷公藤甲素作为中药雷公藤的关键活性成分, 在肾脏疾病治疗领域展现出重要潜力。本文系统综述了其用于肾脏疾病治疗的研究进展, 涵盖化学特性、药理与毒理机制及靶向递药策略。在药理机制方面, 雷公藤甲素主要通过保护足细胞、抑制炎症及抗纤维化等多途径发挥肾脏保护作用。然而, 其显著的毒性是临床应用的关键限制因素, 涉及复杂的代谢途径、信号通路及细胞过程。为提升疗效并降低毒性, 研究者已开发多种靶向肾脏递送系统, 如基于偶联技术的递送系统、纳米颗粒、聚合物胶束、脂质体修饰及其衍生物策略等。尽管当前研究已取得积极进展, 但为确保临床安全应用, 仍需深入阐明其药理与毒理机制, 并对现有增效减毒策略进行长期毒理学评估。这些工作将有助于科学评估雷公藤甲素的临床应用前景, 为其在肾脏疾病治疗中的转化应用奠定基础。

蛋白质稳态失衡是多种重大疾病的核心病理机制, 传统小分子抑制剂因“不可成药”靶点与耐药等局限难以满足临床需求。靶向蛋白降解技术(targeted protein degradation, TPD)可通过清除异常蛋白突破传统小分子抑制剂面临的新药开发瓶颈。其中蛋白降解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera, PROTAC)技术借助泛素-蛋白酶体系统实现靶蛋白降解, 在肿瘤及免疫疾病治疗领域展现出临床转化潜力。为进一步提高PROTAC治疗的靶向性, 本文将总结近年来应用于新型PROTAC开发的生物正交策略, 这些策略不但可有效降低系统毒性还能提升特异性实现时空精准调控, 为PROTAC的设计提供新路径。

本文围绕中药制剂物质基础研究的关键问题, 聚焦“组分结构”理论的演进及其相关研究技术的新进展。首先, 从个体成分、群体协同到整体整合三个层面梳理中药“组分”概念的发展脉络, 明确“组分结构”理论从1.0版本的“三层次多维结构”, 到2.0版本的结构配比理论, 再到3.0版本整合体内相态与生物处置特征的演进过程, 最终构建“要素结构-量比结构-物相结构”三位一体的理论体系; 其次, 系统归纳了该理论指导下中药物质基础研究的技术进展, 涵盖小分子和大分子组分的精细分析技术、组分量比关系解析与优化技术、组分物相结构解析技术。最后指出, 未来研究应在组分结构多维解析、智能化技术融合与标准化体系构建等方面进一步突破, 为中药现代化提供坚实的理论基础与方法支撑。

大分子药物因其高特异性与良好生物活性, 在疾病治疗中具有重要价值。口服给药途径以其优良的患者依从性和较高的安全性, 成为大分子药物递送的理想选择。然而, 胃肠道中的多种生物屏障严重限制了大分子药物的口服生物利用度及其靶向递送效率。现有研究多聚焦于单一屏障突破或单一载体设计, 本文系统地论述了口服大分子药物靶向递送过程中面临的多重生物屏障, 概况了适应于大分子药物口服靶向递送的各类纳米载体, 并深入探讨了器官特异性靶向策略的最新进展, 为口服大分子药物的精准治疗提供了新视角。此外, 还结合了多肽、蛋白质、核酸等大分子药物的应用实例, 为提升大分子药物的口服递送效率提供了理论依据与研究思路。

PI3K-AKT信号通路被发现在多种癌症中过度活跃, 致使细胞异常增殖, 抑制细胞凋亡, 促进肿瘤转移, 并与化疗和放疗耐药的出现息息相关。因此, 靶向PI3K-AKT信号通路治疗肿瘤成为当下研究的热点。目前针对PI3K-AKT信号通路常用小分子抑制剂、天然产物、siRNA、miRNA等进行抑制。但这些治疗手段往往由于不良反应明显、生物稳定性差、溶解度低或无靶向性等问题导致临床应用受限。将纳米技术应用于药物递送, 可以提高药物稳定性和溶解度, 减少药物在正常组织中的蓄积, 实现良好的靶向性。纳米载体搭载药物靶向PI3K-AKT通路治疗肿瘤可以优化治疗效果、减少药物所产生的不良反应, 还可以增加化疗或放疗的敏感性, 改善癌症患者的预后, 在治疗癌症方面具有广阔的发展前景。本文就PI3K-AKT信号通路的分子机制及其在肿瘤中所起到的作用进行了介绍, 详细综述了纳米递送系统在基于通路治疗癌症的最新进展, 并对未来的前景进行了分析展望, 以期为将来研究提供参考。

超声造影剂作为提升超声成像对比度的核心工具, 近年来在医学诊疗领域取得了显著进展。其发展历经四代更迭, 每一代均在核心气体、壳膜材料、稳定性及临床应用等方面实现突破。造影剂的成像原理基于微泡与超声波的相互作用, 通过增强背向散射实现清晰成像。在体内, 微泡的行为受多种因素影响, 最终其核心气体以及壳膜材料均可安全排出体外。制备方法包括超声空化、高剪切技术、机械振荡法等, 所制微泡具备安全、有效、稳定的关键特性。在现代医学应用中, 超声造影剂不仅广泛应用于心脏、肝脏及肿瘤的诊断成像, 还能通过靶向配体修饰与载药技术实现诊疗一体化, 更可借助气体疗法发挥独特优势。本文系统阐述了超声造影剂的发展历程、成像原理、体内运作机制、制备工艺、特性及前沿应用。

微藻作为一类光合微生物, 具有良好的生物相容性和代谢多样性, 能合成多种具有抗氧化、免疫调节及抗肿瘤作用的天然产物, 同时展现出良好的药物递送潜力。其自驱动运动、光合产氧、生物可降解等特性, 有助于增强药物在肿瘤组织中的富集与治疗效果。然而, 天然微藻在靶向性、负载能力等方面仍存在一定局限, 需通过工程化手段加以改造以满足复杂的肿瘤治疗需求。本文对代表性微藻的种类、结构特性及其应用进行了总结, 并系统讨论了工程化微藻的构建策略, 包括物理相互作用、化学修饰、生物膜包覆及基因工程改造等多种方式。重点探讨其在肿瘤治疗中的多模式应用进展, 如光响应、磁控和免疫联合治疗平台, 并对其未来发展方向与临床转化前景进行展望。

纳米载体作为新型给药系统, 在提高药物溶解度、稳定性及靶向性方面展现出显著的优势, 已成为当前药物递送领域的研究热点。然而, 其穿透细胞膜及跨越机体多重生理屏障的能力有限, 严重制约了临床应用效果。细胞穿膜肽(cell-penetrating peptides, CPPs) 因其具有高穿膜效率、低毒性及良好的生物相容性特点, 可通过直接渗透或内吞途径有效促进纳米载体穿透生物膜屏障, 显著提升药物递送效率; 归巢肽(homing-peptide, HPs) 则能通过识别靶组织特异性受体, 精准介导纳米载体靶向富集于病变部位, 减少对正常组织的非特异性穿透。因此, CPPs与HPs作为两类重要的功能性多肽, 通过不同机制增强纳米载体的生理屏障跨越能力和病变部位靶向富集效率, 已被广泛应用于纳米载体修饰。本文从CPPs与HPs分类、转运机制和CPPs与HPs修饰纳米载体突破生理屏障进行概述, 为今后CPPs与HPs的相关研究应用提供参考。

植物来源纳米囊泡富含核酸、蛋白质及脂质等生物活性分子, 在疾病干预领域展现出良好的应用前景。研究表明, 五味子中含有多种具有保肝作用的活性成分。对乙酰氨基酚(acetaminophen, APAP) 过量服用是临床上导致药物性肝损伤最常见的原因之一。本研究旨在探究五味子来源纳米囊泡(Schisandra chinensis-derived nanovesicles, SSDNs) 对APAP诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。研究首先采用梯度超速离心法从五味子中分离SSDNs, 透射电子显微镜和粒径分析结果显示其具有典型的双层膜结构, 形态均一, 平均粒径为205.4 nm。CCK-8检测结果表明, SSDNs在体外实验浓度范围内无明显细胞毒性。采用液相色谱-串联质谱技术检测发现, SSDNs中的木脂素类成分以五味子醇甲为主。进一步通过动物实验评价SSDNs预防性给药对APAP致急性肝损伤的干预效果。所有动物实验经南方医科大学动物伦理委员会审核批准(批准号: SMUL202408016)。C57BL/6小鼠预先尾静脉注射SSDNs 4 d后, 单次腹腔注射APAP (400 mg·kg^-1) 造模。结果显示, SSDNs显著降低血清中ALT与AST水平, 改善肝细胞坏死与肝小叶结构紊乱。此外, SSDNs上调了肝脏谷胱甘肽(glutathione, GSH) 水平, 下调了细胞色素P450 (cytochrome P450, CYP) 2E1和CYP3A11的表达, 上调了增殖细胞核抗原与细胞周期蛋白(细胞周期蛋白依赖性激酶4、细胞周期蛋白A1、细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白E1) 的表达水平。综上所述, 本研究发现SSDNs可通过减少肝脏GSH耗竭, 下调APAP代谢相关CYP450酶表达, 促进肝细胞增殖, 从而缓解APAP诱导的小鼠急性肝损伤, 为五味子的开发利用及APAP相关肝损伤的临床防治提供新方向。

本研究基于中医“气有余便是火”的理论观点, 探讨甘温补气类中药黄芪在过量应用时是否诱发“上火”现象, 并分析其相关成分与潜在机制, 以期加深对其药性的理解并为临床精准使用提供参考。通过建立I型单纯疱疹病毒(HSV-1) 潜伏感染的小鼠“上火”模型, 本研究系统观察了小鼠一般状态、行为学表现, 并检测了病毒相关基因与蛋白表达以及脂质过氧化等指标。结果显示, 黄芪及其各组分干预后, 小鼠出现眼部炎症、口渴多饮、大便干结及多动不安等“上火”表现, 同时伴随脑内潜伏HSV-1的激活, 以及脂质过氧化相关蛋白花生四烯酸15-脂氧合酶(arachidonate 15-lipoxy-genase, ALOX15) 与4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal, 4-HNE) 表达上升; 在肠组织中, 酪氨酸蛋白激酶(cluster of differentiation 117, c-Kit) 蛋白表达下调, 4-HNE水平升高。组分分析进一步表明, 黄芪多糖对行为学改变影响显著, 而低含量的黄芪异黄酮与皂苷同样可激活潜伏HSV-1。综上, 黄芪各组分可能通过协同作用激活潜伏HSV-1并诱发“上火”, 其机制可能与机体脂质过氧化反应增强有关。本实验已获暨南大学动物实验伦理委员会批准(IACUC-20250417-04)。

奥希替尼(osimertinib, Osi) 作为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC) 一线治疗药物, 显著延长了患者的无进展生存期和总生存期, 而其耐药性无法避免。本研究以桔梗皂苷D (platycodin D, PD) 为研究对象, 通过CCK-8检测细胞活力; 通过克隆形成实验检测细胞的增殖; 通过LDH检测对细胞的杀伤作用; 通过PI-Hoechst双染与流式细胞术检测细胞凋亡; 通过蛋白质免疫印迹检测凋亡相关蛋白及Akt/p70S6K通路关键蛋白的表达与磷酸化水平。结果表明, 桔梗皂苷D能抑制奥希替尼获得性耐药的NSCLC细胞活力, 并与奥希替尼联用表现出协同增殖抑制作用, 二者联用能够显著抑制生长并诱导凋亡, 且明显强于单独用药组。机制研究表明, 与单独给药组相比, 联合处理能更有效抑制Akt和p70S6K的磷酸化。综上, 本研究揭示桔梗皂苷D可通过抑制Akt/p70S6K信号通路, 增强奥希替尼对耐药NSCLC细胞的杀伤作用, 逆转奥希替尼的耐药性, 为克服奥希替尼耐药性提供了思路。

本研究旨在探讨小陷胸汤(Xiaoxianxiong Decoction, XXXD)通过激活生长停滞特异因子6 (growth arrest specific 6, GAS6)/受体酪氨酸激酶AXL (receptor tyrosine kinase AXL, AXL)抑制内皮细胞铁死亡在动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)中作用及具体机制研究。本研究获得了陕西省中医药研究院动物实验伦理委员会的批准(批准编号: 2022-10)。在动物水平使用高脂饮食(high-fat diet, HFD)喂养载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein E knockout, ApoE^-/-)构建AS模型, 检测体重、主动脉脂质斑块、脂质堆积及血清脂质水平等指标的变化。在细胞水平中, 使用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL)建立内皮细胞损伤模型, 检测细胞活率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、活性氧(reactive oxygen species, ROS)、Fe²⁺以及脂质过氧化指标丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、总谷胱甘肽过氧化物酶(total glutathione peroxidase, GPx)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GR)的变化。Western blot检测GAS6、AXL、谷胱甘肽过氧化物酶4 (glutathione peroxidase 4, GPX4)和溶质载体家族7成员11 (solute carrier family 7 member 11, SLC7A11)蛋白表达。结果发现, XXXD可减少AS小鼠体重、主动脉斑块面积和脂质堆积, 改善血脂异常, 增加主动脉和内皮细胞脂质抗氧化能力(增加SOD、GPx和GR, 抑制MDA), 降低内皮细胞中LDH、ROS、MDA和Fe²⁺水平, 上调GAS6、AXL、GPX4和SLC7A11蛋白水平改善AS和内皮细胞损伤。上述结果证实, XXXD通过GAS6/AXL信号通路调控内皮细胞铁死亡, 发挥AS保护作用。

本研究旨在探究止嗽化痰丸对痰热阻肺型慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)大鼠的治疗作用及其作用机制。动物实验经河南中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号: IACUC-202506002)。将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药红霉素组(100 mg·kg^-1)、止嗽化痰丸低(206.55 mg·kg^-1)、中(413.1 mg·kg^-1)、高(826.2 mg·kg^-1)剂量组, 采用烟熏联合气管滴注脂多糖(lipopolysaccharide, LPS, 1 mg·kg^-1)及冷空气刺激的方法构建痰热阻肺型COPD大鼠模型。检测各组大鼠肺功能、咳嗽次数、气管酚红排泌量、肺组织水肿程度、动脉血氧分压(arterial partial pressure of oxygen, PaO₂)、动脉血二氧化碳分压(arterial partial pressure of carbon dioxide, PaCO₂); H & E、Masson、PAS染色检测肺组织病变; 流式细胞术检测大鼠肺组织凋亡、氧化应激、线粒体膜电位及外周血免疫细胞水平; 转录组学筛选核心靶点和信号通路; 酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清、肺组织中白介素17A (interleukin 17A, IL-17A)、CC趋化因子配体7 (C-C chemokine ligand 7, CCL7)、C-C基序趋化因子配体20 (C-C motif chemokine ligand 20, CCL20)的含量; qRT-PCR法检测肺组织中IL-17A、CCL7、CCL20 mRNA水平; 蛋白印记法检测IL-17A蛋白水平。结果显示, 止嗽化痰丸显著提高痰热阻肺型COPD大鼠肺功能、血氧分压、肺组织线粒体膜电位及外周血Treg细胞水平, 促进气管酚红排泌, 减轻肺部病理损伤, 降低咳嗽次数、二氧化碳分压、肺组织干湿比、总含水量、肺系数、肺组织凋亡、氧化应激及外周血中性粒细胞、Th17细胞水平, 降低血清、肺组织中IL-17A、CCL7、CCL20水平, 在肺组织中mRNA表达水平及肺组织中IL-17A蛋白水平。转录组分析发现78个差异基因, 主要富集于IL-17信号通路、趋化因子及细胞因子-受体相互作用。结果表明, 止嗽化痰丸对痰热阻肺型COPD大鼠有明显的改善作用, 其作用机制可能与IL-17信号通路有关。

本研究通过网络药理学、体外实验及非靶向代谢组学探讨三七皂苷R1 (notoginsenoside R1, NGR1)通过调节小胶质细胞代谢紊乱缓解神经炎症的作用机制。通过多数据库挖掘获取神经炎症疾病靶点与NGR1作用靶点, 借助Venny筛选交集靶点, 并对其进行GO和KEGG富集分析及蛋白互作网络构建, 从而筛选核心靶点。利用分子对接软件评估NGR1与核心靶点的结合能力。以脂多糖诱导BV2小胶质细胞建立炎症模型, 利用蛋白质印迹法检测不同浓度NGR1对小胶质细胞炎症相关蛋白表达的影响, 并确定NGR1影响NF-κB信号通路的有效浓度。在NGR1有效浓度内进行非靶向代谢组学检测, 结合多元统计方法筛选差异代谢物并进行代谢通路富集。进一步利用Cytoscape和MetaboAnalyst平台筛选与NF-κB信号通路密切相关的关键代谢物。通过外源性添加代谢物实验验证NGR1是否可以通过调控相关代谢物水平抑制NF-κB信号通路的激活。结果显示, 神经炎症疾病靶点与NGR1作用靶点共有交集43个基因, 其中核心靶点16个。KEGG富集结果提示, 交集靶点显著富集在NF-κB等炎症相关信号通路。分子对接结果显示, NGR1与多个NF-κB信号通路蛋白具有较高的结合亲和力。蛋白质印迹法结果表明, NGR1可显著调控NF-κB信号通路相关蛋白及炎症因子的表达, 25和50 μmol·L^-1为其影响NF-κB信号通路的有效浓度。代谢组学结果发现, NGR1可显著影响谷胱甘肽代谢等多条通路。代谢物与靶点关联分析结果发现, NGR1能够逆转与NF-κB信号通路靶点密切相关的L-亮氨酸、同型半胱氨酸及前列腺素E2乙醇酰胺等代谢物的异常变化。外源性添加代谢物实验发现同型半胱氨酸可以削弱NGR1对NF-κB信号通路的抑制作用, 提示同型半胱氨酸可能参与NGR1介导的NF-κB抑制过程。综上, 三七皂苷R1可能通过不同途径协同抑制NF-κB信号通路激活: 一方面直接与IκBα结合发挥调控作用, 另一方面能通过代谢调控降低神经炎症中同型半胱氨酸的异常升高。

肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages, TAMs)在肿瘤微环境中扮演着双重角色, 既可参与免疫激活, 也能介导免疫抑制。具体而言, M1型TAMs具有免疫激活功能, 可杀伤肿瘤细胞; 而M2型TAMs则发挥免疫抑制作用, 促进肿瘤生长。因此, 如何激活TAMs并增强其抗肿瘤免疫功能, 已成为肿瘤免疫治疗领域的重要研究方向。本研究发现了一种新型吡唑衍生物IHMT-140, 该化合物能够将促肿瘤的M2型巨噬细胞重编程为抑肿瘤的M1型巨噬细胞, 从而发挥抗肿瘤效应。机制研究表明, IHMT-140可提高M2型巨噬细胞中溶酶体的pH值, 阻断自噬过程, 进而激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPKs)与核转录因子-κB (nuclear factor κB, NF-κB)信号通路, 最终诱导M2型TAMs向M1型TAMs转化, 实现对肿瘤的抑制作用。IHMT-140作为一种潜在的抗肿瘤免疫调节剂, 不仅为TAMs重编程机制研究提供了新型工具分子, 也为肿瘤免疫治疗策略的开发提供了研究基础。动物实验方案均经中国科学院合肥物质科学院所批准, 批准号为DWLL-2023-116。

本研究利用细胞增殖示踪技术(ProTracer)探索利福平(rifampicin, RIF)在小鼠区域性肝损伤模型中促进肝再生的作用。ProTracer系统可以记录体内细胞增殖情况, 将发生增殖的细胞标记为GFP绿色荧光。构建四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl₄)损伤模型或胆管结扎(bile duct ligation, BDL)损伤模型, 给予RIF和溶剂处理, 检测血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、总胆汁酸(total bile acids, TBA)、总胆红素(total bilirubin, TBIL)和直接胆红素(direct bilirubin, DBIL)评估肝功能; H&E染色评估肝脏损伤面积; 肝组织整体荧光成像评估肝再生情况; 免疫荧光共染定量增殖肝细胞数量、细胞类型和区域分布; RNA‑Seq定位关键差异表达基因和信号通路, Western blot进行蛋白水平验证。在HepG2肝细胞系进行体外验证。结果显示, RIF组显著降低CCl₄肝损伤中小鼠血清ALT、AST水平和BDL损伤中TBA、TBIL、DBIL水平, 有效减小肝脏损伤面积。整体荧光显示RIF处理组小鼠肝脏GFP信号增强, 发生增殖的细胞增加。免疫荧光染色的结果显示, RIF主要促进肝细胞的增殖, 肝小叶2区增殖细胞显著增加(≈2.5倍), 1区、3区亦有提升。RNA‑Seq和Western blot显示Mcm家族、Ccnd1、Ccna2、Mki67等细胞周期和增殖基因上调, 富集cell cycle通路。体外细胞实验发现, RIF处理后HepG2细胞活力增强, 增殖标志物Ki67阳性细胞比例增加。综上, RIF可通过激活细胞周期信号通路促进肝细胞增殖, 促进区域性肝损伤后肝细胞再生。本研究动物实验得到滨州医学院动物伦理委员会的批准(批准号: 2025-2018)。

本研究为构建表达重组人凝血因子Ⅸ (recombinant human coagulation factor Ⅸ, rhFⅨ) 的人源胚胎肾上皮细胞293 (human embryonic kidney 293 cells, HEK293) 稳定细胞株, 并鉴定表达产物的促凝血生物学活性, 将重组质粒pcDNA3.1-FⅨ转染HEK293细胞, 经遗传霉素(geneticin, G418) 压力筛选获得单克隆稳定转染细胞株。逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR) 鉴定F9基因在单克隆稳定转染细胞株中是否发生转录表达, 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE) 和Western blot鉴定rhFⅨ的表达; 二辛可宁酸法(bicinchoninic acid assay, BCA) 测定rhFⅨ的浓度, 活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time, APTT) 测定rhFⅨ的促凝血活性。结果表明, G418 (200 µg·mL^-1) 加压筛选后获得5株单克隆稳定细胞株能够正常转录, 且可通过转录翻译过程实现蛋白表达; 细胞上清液蛋白纯化后呈现rhFⅨ单一条带; rhFⅨ表达量最高达到(1.58 ± 0.10) mg·L^-1, 凝血活性最高为(66.8 ± 0.5)%。所建立的HEK293单克隆稳定转染细胞株能够高效、稳定地表达rhFⅨ, 且具有良好的促凝活性, 为推进rhFⅨ的成药性评价与临床前研究提供了细胞来源。

本研究拟探讨中药防风对溃疡性结肠炎(UC) 的保护作用及其与芳香烃受体(AHR)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 (NLRP3) 通路的关系。采用2.5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS) 连续饮水7天建立C57BL/6J小鼠急性结肠炎模型, 同时灌胃给予防风醇提物(2、5 g·kg^-1·d^-1) 或5-氨基水杨酸(100 mg·kg^-1·d^-1) 干预。记录体重及疾病活动指数(DAI), 结合结肠长度、苏木素-伊红和阿利新蓝-过碘酸希夫染色及免疫荧光评价结肠组织损伤和杯状细胞、紧密连接蛋白变化, 并采用ELISA、RT-qPCR和Western blot分析血清及结肠组织炎症因子、紧密连接蛋白以及AHR/NLRP3相关分子表达。实验动物经上海中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号: PZSHUTCM2510310022)。结果显示: 与DSS模型组相比, 防风可剂量依赖性减轻DSS诱导的体重下降和DAI升高, 延长结肠长度, 减轻黏膜病理损伤; 同时下调血清及结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子表达, 上调紧密连接蛋白-1、膜整合蛋白的mRNA与蛋白水平, 并提高AHR蛋白表达, 抑制NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白、Caspase-1和IL-1β等炎症小体相关蛋白。在AHR敲除小鼠中, 未观察到防风醇提物对DSS诱导的小鼠急性UC的缓解作用。综上, 防风可能通过激活AHR抑制下游NLRP3炎症小体活化, 进而维护肠黏膜屏障功能, 减轻肠道炎症, 为其防治UC的应用提供实验依据。

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD) 是一种慢性神经退行性疾病。现有药物只能缓解症状, 尚未达到治愈的效果。鉴于其多因素致病特性, 开发同时作用于多个靶点的小分子化合物显得尤为重要。中药小分子具有同时调节多个生物靶点和信号通路的特点, 在AD的治疗中具有独特优势。本文以具有潜在神经保护作用的中药小分子京尼平(genipin) 为先导化合物, 设计并合成了一系列多靶点抗AD小分子化合物。其中, 化合物JD-5和JD-7具有较好的GSK-3β抑制活性(JD-5, IC₅₀ = 3.54 μmol·L^-1; JD-7, IC₅₀ = 2.47 μmol·L^-1), 显著优于先导化合物京尼平(IC₅₀ = 28.16 μmol·L^-1)。并且, 化合物JD-5和JD-7在tBHP诱导和Aβ_25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤实验中, 都表现出显著的神经保护作用。进一步研究发现, 化合物JD-5和JD-7均可显著降低原代神经元细胞中Tau磷酸化(S396) 水平, 且呈剂量依赖性(所有动物实验均获得南京拉姆达医药有限公司实验动物伦理委员会的批准, 批准号: IACUC-20220202)。根据以上结果推测, 化合物JD-5可能通过抑制GSK-3β活性及降低Tau蛋白磷酸化水平, 发挥神经保护活性、抗氧化应激作用, 为进一步开发多功能抗AD药物提供了参考。

采用经典硅胶柱色谱及薄层色谱对黑沙蒿有效物质群的化学成分进行分离, 并对分离得到化合物的波谱数据进行分析, 确定其结构。从黑沙蒿有效物质群中分离鉴定了9个炔类化合物, ordosin (1)、茵陈烯块(2)、茵陈二炔酮(3)、capillinol (4)、反-去氢母菊酯(5)、茵陈素(6)、邻羟基-茵陈烯块(7)、capillaridin (8)、邻羟基-茵陈二炔酮(9) 和1个二氢黄酮, 5-羟基-7,4′-二甲氧基二氢黄酮(10), 其中化合物1为新的炔烃, 2~4、6、8和9为从黑沙蒿中首次分离得到。通过测定化合物1~4、6、8和9对脂多糖(LPS) 诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞培养液中一氧化氮(NO) 释放量的影响, 评价其对炎症反应的抑制作用。活性筛选结果显示, 在10 μmol·L^-1浓度下, 化合物1~4、6、8和9均具有明显的NO抑制活性, 其抑制率分别为96.7%、88.4%、91.6%、77.8%、98.7%、86.7%和75.1%。

综合应用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等技术, 对黑桑Morus nigra L.枝95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行分离纯化。运用现代波谱技术(UV、IR、MS、NMR) 进行结构鉴定得到14个化合物, 分别鉴定为nigrasin M (1)、nigrasin N (2)、sanggenol F (3)、sanggenon A (4)、nigrasin K (5)、nigrasin H (6)、petalopurpurenol (7)、solophenol D (8)、nigragenon A (9)、nigragenon I (10)、nigragenon J (11)、notabilisin A (12)、notabilisin C (13)、licoflavone C (14)。其中化合物1、2为新的黄酮类化合物, 化合物13、14为首次从黑桑枝中分离得到。为评价化合物1~13的降糖潜能, 本研究利用L6细胞模型进行了葡萄糖摄取活性筛选。结果表明, 化合物6、9、11及12能够显著增强L6细胞的葡萄糖摄取, 提示这些化合物具有潜在的降糖活性。

采用硅胶、ODS和Sephadex LH-20等柱色谱以及半制备型HPLC等多种分离技术, 从山胡椒根95%乙醇提取物的二氯甲烷萃取相中分离得到了9个倍半萜类成分。结合IR、UV、NMR、HRESIMS和ECD等现代波谱学技术进行结构鉴定, 确定其结构分别为glaucatotone M (1)、glaucatotone K (2)、glaucatotone G (3)、pseudoguaianelactone C (4)、pseudoguaianelactone B (5)、elema-1,3,11(13)-trien-12-oic acid (6)、α-costic acid (7)、3β-hydroxycostic acid (8) 和rupestonic acid I (9)。其中, 化合物1为一个新的愈创木烷型倍半萜类化合物, 化合物6和7为首次从山胡椒属植物中分离得到。评价化合物1~7和9对TNF-α诱导的类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A细胞增殖和炎症因子IL-6、IL-1β释放的抑制活性, 结果显示, 化合物1对TNF-α诱导的MH7A细胞的增殖表现出了较为显著的抑制效果, 且能够有效降低IL-6和IL-1β的生成量。

采用硅胶柱色谱、C₁₈柱色谱以及半制备高效液相色谱等分离技术, 对姜黄的95%乙醇提取物进行了分离纯化。运用高分辨质谱、红外光谱、核磁共振等波谱技术对化合物进行了结构鉴定, 通过计算ECD和计算NMR确定了新化合物的绝对构型。最终, 从姜黄中分离鉴定了3个没药烷型倍半萜, 其中化合物1和2为两个新颖的降碳没药烷型倍半萜, 分别为(1R,7S)-15-norbisabolane-2-ene-11-ol-4,9-dione (1) 和(7S)-15-norbisabolane-1,3,5,10-tetraene-4-ol (2), 化合物3为已知化合物8-hydroxyl-ar-turmerone。

采用硅胶、凝胶柱色谱及半制备液相等色谱分离技术, 从蕉木[Meiogyne hainanensis (Merr.) N. T. Ban] 枝叶的提取物中分离得到13个化合物。通过核磁、紫外及质谱等方法鉴定化合物结构, 分别为蕉木聚炔N (chienhainanin N, 1)、(S)-15, 16-didehydrocoriolic acid methyl ester (2)、13(S)-羟基-9Z, 11E, 15E-十八碳三烯酸(3)、(S)-coriolic acid (4)、13-氧代-9Z, 11E-十八碳二烯酸(5)、13-氧代-9E, 11E-十八碳二烯酸(6)、9-氧代-10E, 12Z-十八碳二烯酸(7)、9-氧代-10E, 12E-十八碳二烯酸(8)、α-生育酚(9)、托可醌(10)、α-tocospiro A (11)、17³-脱镁叶绿素乙酯(12)、mustakone (13), 其中化合物1为新化合物, 化合物2、3、5~8、10~12为首次从番荔枝科植物中分离得到, 化合物4、9和13为首次从鹿茸木属植物中分离得到。采用肉汤微量稀释法评价化合物的抗菌活性, 结果发现化合物2、3、5~7对耐甲氧西林金葡菌有一定的抑制作用, 最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC) 分别为64、128、128、128和128 μg·mL^-1; 化合物13对新型隐球菌有一定的抑制作用, MIC值为128 μg·mL^-1。

本研究以山西、内蒙古、甘肃3个主产区的栽培黄芪为研究对象, 采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UHPLC-Q-TRAP-MS) 拟靶向代谢组学技术, 进行系统的碰撞能量(CE) 和去簇电压(DP) 参数优化后对16批样本中109种化合物进行相对定量分析, 并结合多元统计方法分析不同产地黄芪的化学组成差异。结果表明, 不同产地栽培黄芪的整体化学成分存在一定差异。约60%测定成分在不同产区间含量无显著差异, 差异化合物主要体现在山西黄芪与内蒙古、甘肃黄芪之间, 且以次生代谢物为主。与内蒙古和甘肃的栽培黄芪相比, 山西栽培黄芪在黄酮类化合物的主要特征体现在酰基化黄酮苷含量较高, 以及黄酮苷类成分较高, 而黄酮苷元较低。因此糖苷/苷元比值可用于区分山西栽培黄芪。这些差异特征可作为栽培黄芪产地溯源与道地性评价的潜在标志物, 并为黄芪质量评价体系构建提供依据。

为了考察动物药地龙中铅(Pb) 和砷(As) 的生物可利用量, 并对Pb和As的风险进行评估, 本研究采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS) 法测定了地龙中Pb和As的残留量; 首次创新性地建立了适用于中药基质的体外消化/小肠器官芯片模型, 模拟地龙中Pb和As的胃肠消化与吸收过程, 测定其生物可利用量, 并以危害指数(HI) 法分别评估了重金属总量与生物可利用量对于人体的健康风险。结果表明, 9批地龙中Pb和As的残留总量范围分别为0.16~12.10和0.15~1.20 mg·kg^-1; 经小肠器官芯片转运后, 其生物可利用浓度分别为0.02~0.92和0.01~0.09 mg·kg^-1。基于总量的风险评估显示, 多批样品Pb和As的危害指数(HI) 大于1, 存在不可接受风险; 而基于生物可利用量的HI均小于1, 风险可接受。本研究首次建立的体外消化/小肠器官芯片模型能更加准确地反映中药中重金属经口摄入后的实际暴露风险, 为中药安全性评价及标准制定提供了方法学基础。

本研究旨在探讨“人参-五味子”药对治疗肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC) 的药效物质与作用机制。研究采用高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(HPLC-QTOF/MS) 技术分析“人参-五味子”药对入血成分。基于LC-MS技术全面分析“人参-五味子”药对干预后HCC大鼠血浆、肝脏和粪便中胆汁酸(bile acid, BA) 水平变化, 结合正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis, OPLS-DA) 和t检验筛选HCC相关生物标志物。最后, 基于相关性分析确定“人参-五味子”药对治疗HCC的关键药效物质, 并通过分子对接技术进行验证。本实验经过沈阳药科大学伦理委员会批准(伦理审批号: No. CSE202106002)。研究结果鉴定了22种“人参-五味子”药对入血原型成分, 证实了“人参-五味子”药对能够显著回调HCC大鼠血浆、肝脏和粪便中BA代谢失调, 并成功筛选了9种BA为HCC相关生物标志物。相关性分析和分子对接结果表明, 人参皂苷Rb1和五味子甲素与BA代谢调控关键蛋白法尼醇X受体(farnesoid X receptor, FXR)、胆固醇7α-羟化酶(cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1, CYP7A1)、胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump, BSEP) 和有机阴离子转运多肽1B1 (organic anion transporting polypeptide 1B1, OATP1B1) 均具有较强的结合活性, 是“人参-五味子”药对治疗HCC的关键药效物质。研究结果为“人参-五味子”药对治疗HCC的临床应用提供了科学依据。

采用超高效液相-四级杆-飞行时间高分辨质谱联用(UPLC-QTOF-MS/MS) 技术对大补肺汤的化学成分进行分析和鉴定, 并结合网络药理学探究大补肺汤作用于慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD) 稳定期的作用机制。在正、负离子模式下, 通过化合物精确分子量、MS/MS裂解规律和文献报道数据等信息对大补肺汤中的化学成分进行鉴定, 再结合TCMSP数据库、文献挖掘大补肺汤有效成分和作用靶点, 通过OMIM、Gene Cards数据库获得COPD稳定期靶点, 筛选出药物靶点和疾病靶点的交集靶点, 导入STRING数据库及Cytoscape 3.10.3构建PPI网络, 通过Metascape数据库对核心靶点进行GO和KEGG富集分析。结果显示, 大补肺汤中共鉴定出132个化学成分, 有87种成分来自“用”组药味, 49种来自“体”组药味, 4种来自“化”组药味, 8种成分为体、用组药味共有成分。基于Swiss ADME胃肠道吸收和类药性五项原则筛选出大补肺汤中84个潜在活性成分, 与COPD稳定期有294个共同靶点, 基于Cytoscape计算得到87个核心靶点, KEGG富集通路主要包括PI3K-AKT信号通路、HIF-1α信号通路、AGE-RAGE信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、MAPK信号通路等发挥治疗COPD稳定期的作用, 其中体组药味主要作用于C型凝集素受体信号通路, 用组药味作用于PI3K-AKT信号通路, 化组药味作用于Th17细胞的分化过程。研究结果为该方临床应用及深入研究提供科学依据与支撑。

本研究以中药黄芪来源的黄芪多糖为天然载体, 以中药莪术中具有抗肿瘤活性的疏水性成分莪术醇(curcumol, CUL) 为模型药物, 构建药载一体的纳米免疫递药系统CUL@AHNP, 并系统评估其体外性质、口服吸收性能及抗肿瘤免疫活性。CUL@AHNP经高压均质法制备, 粒径约为116.4 nm, 呈球形结构, 表面带负电, 具备良好的分散性和稳定性。体外实验结果表明, CUL@AHNP可显著增强CUL对乳腺癌4T1细胞的抑制作用, 并有效诱导免疫原性细胞死亡, 激活抗肿瘤免疫应答。细胞摄取及肿瘤球渗透实验验证其具备优良的跨膜转运及组织穿透能力。体内研究显示, 口服给药的CUL@AHNP可显著抑制肿瘤生长, 增强CD8⁺及CD4⁺ T细胞的浸润密度, 且与化疗药物多柔比星联合使用时表现出一定的协同抗肿瘤效果, 并未见明显的肝肾毒性反应。本研究所有动物实验均获得天津中医药大学动物实验伦理委员会批准(No. 2023114)。本研究构建了基于黄芪多糖的口服纳米免疫递药系统, 为中药治疗乳腺癌提供了更安全、高效的治疗选择。

为实现肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)响应的精准药物递送, 本研究设计并构建了一种多功能的纳米治疗体系。该系统以球形二氧化锰(MnO₂)为内核, 通过负载金纳米粒子(Au nanoparticles, GNPs)和化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU), 成功整合了GNPs的近红外光热效应以及MnO₂对高浓度谷胱甘肽和酸性pH的响应特性, 实现了多重刺激下的药物按需释放。实验结果表明, 所构建的MnO₂/GNPs@5-FU纳米系统具有高载药量、优异的光热转换效率和显著的TME依赖的药物释放行为。体外细胞实验结果表明, 该体系通过MnO₂介导的化学动力学治疗与5-FU的化疗相结合, 对4T1肿瘤细胞产生了高效的协同杀伤效果。本研究为开发用于肿瘤靶向治疗的智能纳米药物递送平台提供了初步的体外实验依据与新的思路。

柑橘属植物是世界上广泛种植的经济作物, 具有显著的药用价值和经济价值。然而, 由于柑橘属遗传背景高度复杂, 该属药用物种的准确鉴定面临挑战。本研究基于全基因组分析法(analysis of whole-GEnome, AGE), 又称为时珍法, 对柑橘属15个物种的49个基因组进行生物信息学分析, 成功构建涵盖15个物种的候选特异靶标序列库, 各物种靶标序列数量主要集中在10 000~100 000条之间。从候选特异靶标序列库中为相应物种选取特异靶标序列, 并通过Sanger测序和CRISPR-Cas12a技术证实选取的特异靶标序列具有高度特异性, 可有效鉴定柑橘属药用物种。在此基础上构建基于时珍法的柑橘属近缘物种鉴定体系, 实现30份市售橘核药材及饮片的准确鉴定。本研究证明时珍法可用于柑橘属药用物种的准确鉴定, 突破传统鉴定方法的瓶颈, 有效解决柑橘属药用物种的鉴定难题, 为中药材质量控制和临床用药安全提供技术支撑。

为挖掘重楼皂苷合成下游通路中的关键基因, 本研究采用HPLC测定了2组滇重楼根茎中8种重楼皂苷含量, 进一步进行转录组测序分析。结果显示, 2组滇重楼根茎中8种重楼皂苷的含量存在显著差异, 其中高皂苷含量组(HS)与低皂苷含量组(LS)的总皂苷含量分别为24.81和5.99 mg·g^-1。此外, LS组中未检测到重楼皂苷Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ。结合皂苷含量分析, 2组滇重楼总皂苷含量差异显著的主要原因是薯蓣皂苷类皂苷在HS组中大量积累。转录组测序共获得了11 399个差异基因, HS组与LS组相比, 有5 708个基因表达上调, 5 691个为基因表达下调。研究成功筛选出7个参与重楼皂苷合成的候选基因, 并对其进行了蛋白结构预测。通过互作网络分析, 筛选出80个与候选基因的相关系数在0.95或以上的转录因子, 其中与2个或2个以上的候选基因有相关性的转录因子共有8个。本研究为预测重楼皂苷合成的相关基因、探索重楼皂苷生物合成途径及其积累规律提供了理论依据。

平贝母(Fritillaria ussuriensis Maxim)为东北的珍贵药用植物。本研究基于前期叶绿体基因组测序结果, 选取平贝母叶绿体基因组片段atpF和petB作为特异性DNA条形码, 对市售平贝母进行种质资源鉴定, 并利用紫外分光光度计分析贝母素乙的含量, 以明确市场流通平贝母的主要种质资源和质量。本研究从全国23个省份52个市收集了74份市售平贝母样品, 基于atpF和petB序列联合分析共鉴定出10种单倍型(h2、h3、h4、h5、h6、h11、h13、h16、h19和h20), 其中h19和h20为首次发现的单倍型; 单倍型h4为主要单倍型, 占总样本量的44.59%, 其次为单倍型h3。结果显示, 60份(81.08%)的市售平贝母样品符合2025版《中华人民共和国药典》的标准。各样品的贝母素乙含量在0.044%~0.075%之间, 样品质量参差不齐; 其中单倍型h16的贝母素乙平均含量最高, 为0.063%, 单倍型h6贝母素乙的含量最低, 为0.044%; 统计学分析表明, 单倍型与贝母素乙含量间无显著性差异。鉴于其最高含量, 单倍型h16展现出潜在的良种选育价值。本研究有利于指导平贝母市场样品流通及临床科学合理用药, 同时也为保护平贝母的遗传多样性和持续开发利用提供参考。

大黄作为川产道地药材之一, 中国药典(2025年版)收载的基原物种为掌叶大黄、唐古特大黄及药用大黄, 然而当前市售大黄存在多基原混杂及伪品掺入等现象, 品种基原亟待理清。本研究采用文献报道叶绿体ndhF-rpl32片段作为特异条形码并进行验证, 通过优化DNA提取步骤、扩增体系和扩增程序, 建立一种可用于大黄药材、饮片及中成药中大黄成分真伪及基原鉴定的VPCR方法。相较于传统的PCR方法, VPCR (Ⅴ-shaped polymerase chain reaction)法将扩增时间由1.5 h缩短至30 min。采用建立的VPCR方法检测市售流通领域收集到的85批大黄样品, 包括30批药材、40批饮片及15批含大黄的中成药。结果表明: 样品中31批为唐古特大黄(药材18批, 饮片10批, 中成药3批), 36批为药用大黄(药材1批, 饮片25批, 中成药10批), 13批为掌叶大黄(药材8批, 饮片5批), 合格率为94.1%。3批药材(编号CD1、CD2、CD3)、2批中成药(编号Z4为片剂、Z12为颗粒剂)判定为大黄伪品中的华北大黄。本研究建立的VPCR方法可作为对中国药典(2025年版)大黄项下薄层色谱检查土大黄苷方法的补充, 对规范大黄药材市场、保证大黄临床用药安全提供依据。