药监部门审定的新药分两类, 一是新分子实体(new molecular entities, NME), 另一是固定剂量复方(fixed dose combination, FDC) 制剂, 二者都是经科学实验和临床验证确定下来的安全有效的治疗手段。复杂难治疾病具有多因素病因, 只针对单一靶标施以治疗的药物未必达到满意效果; 而且一个药物的药效、药代、安全和患者依从达到全优化也是勉为其难, 因而用两个(或更多) 药物以固定的剂量组成复方药物可为患者提供更优良的治疗手段。临床和药理学家在洞悉病理过程的各个环节和分子调控的基础上, 在临床实践中把控药物的作用机制和药效/药代/物化配伍等环节的优化, 创造出FDC, 其意义不亚于NME, 因为FDC更贴近于临床, 直接满足患者的需求。本文以有影响的实例, 从病理的微观特征与药物作用的分子机制入手, 对研制FDC作简要的分析。

越来越多的研究指出, 肠道菌群在肿瘤免疫治疗中扮演着关键角色。通过优化肠道菌群的组成, 可以有效改善免疫治疗耐药性并增强其治疗效果。本文综合分析了肠道菌群失调介导肿瘤免疫治疗耐药机制, 阐述了当前采用的中药和植物成分、粪便菌群移植、益生菌、益生元和饮食疗法等靶向调节肠道菌群策略, 探讨了这些策略改善患者对肿瘤免疫治疗耐药性的潜在机制。同时, 文章还简要讨论了靶向肠道菌群改善肿瘤免疫治疗耐药性的前景与挑战, 为相关研究提供了参考, 以助力逆转肿瘤免疫治疗耐药的策略研究。

皮肤是人体最大的器官, 也是人体抵抗外界侵害的第一道屏障。胶原蛋白是皮肤的重要组成部分, 皮肤胶原蛋白的流失不仅影响皮肤的美观, 同时损伤皮肤健康并影响正常功能的行使, 寻找延缓皮肤衰老与抑制胶原蛋白流失的方法具有重要意义。皮肤胶原流失的发生机制复杂、影响因素多样, 天然活性成分具有多靶点、多途径的特点, 在治疗皮肤胶原蛋白流失中具有独特优势。本文对皮肤中胶原蛋白流失的机制及天然活性成分通过促进胶原蛋白合成抗皮肤衰老的研究进展进行综述, 以期为相关研究提供参考。

高尔基体的结构破坏和功能性障碍对生物体的健康有害, 导致各种疾病。去除受损的高尔基体对于维持细胞稳态至关重要, 高尔基体自噬逐渐引起大家的关注。本文对高尔基体自噬进行了总结, 简述了高尔基体自噬的特点和作用、高尔基体自噬受体、高尔基体自噬在疾病治疗中的作用, 并提出高尔基体医学(Golgimedicine) 这一新概念, 由此展望了高尔基体在疾病诊断、治疗和预后、遗传病和罕见病的作用。本文旨在从Golgimedicine角度探索高尔基体自噬、高尔基体结构和功能的科学内涵, 为药物靶标研究、新药开发以及人类健康发展提供理论参考。

抗体偶联药物(antibody drug conjugates, ADC) 作为抗肿瘤治疗的前沿技术, 近年来取得了显著进展。ADC通过连接子将高活性小分子毒素与高特异性抗体进行偶联, 不仅能够实现对肿瘤细胞的精准打击, 同时降低了药物的全身毒性, 进而扩大了治疗的有效性和安全性窗口。然而, 由于ADC分子设计的复杂性, 其疗效和安全性受多种因素影响。模型引导的药物开发(model informed drug development, MIDD) 是一种通过数学和统计模型进行建模和模拟, 对药物研发进行定量分析和决策指导的方法。这种方法为新药研发提供强大的工具支持。通过MIDD整合ADC相关的多方面数据和信息, 有助于理解ADC的复杂机制、药代动力学和药效学等作用特征, 为优化ADC研发流程和临床转化决策提供独特见解。本文将介绍MIDD和ADC的基本概念, 并浅析MIDD在ADC研发不同阶段的应用案例, 旨在为ADC的发展提供有益参考。

随着“人类基因组计划”的完成和“本草基因组计划”的顺利开展, RNA组学(RNomics) 的研究浪潮也逐步推进中药现代化的研究大门, 开启了药用植物RNA组研究的后基因组时代。因此, 本文首次提出了本草RNA组(HerbRNomes) 的概念, 即通过构建药用植物、药用真菌、药用动物的不同时期、不同产地以及不同器官的本草RNA组数据库, 开展本草RNA在自身遗传信息传递、功能调控以及与不同物种间跨界调控的功能机制、关键技术与应用场景研究, 从而为中药或药用植物的抵抗逆境胁迫及分子辅助育种、小核酸药物的新药开发等提供理论基础与研究思路。本文综述了近年来从RNA水平阐明本草遗传信息传递与表达、自身调控与跨界调控的分子机制及关键技术等相关研究进展, 并提出了基于本草RNA组的小核酸药物研发思路, 为基于本草RNA组的中药现代化研究提供了理论依据与引领支撑。

补骨脂来源于豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥果实, 具有补肾壮阳、温脾止泻等功效, 用于治疗肾虚阳痿、腰酸冷痛、骨质疏松等多种疾病, 是我国中医临床常用的补益类中药。然而, 近年来补骨脂及相关制剂临床不良反应报道日益增多, 尤其是肝毒性问题成为制约补骨脂及相关制剂临床应用的瓶颈问题。古代典籍较少记载补骨脂安全性问题, 但现代临床和基础研究表明补骨脂不仅具有直接毒性, 还具有免疫特异质毒性。为此, 本文综合分析了古今典籍文献中关于补骨脂效/毒记载演变, 并结合现代药理毒理学研究进展, 对补骨脂肝毒性的临床特点、成因机制以及风险因素进行了深入探讨。在此基础上, 基于笔者团队提出的中药安全风险“人-药-用”三维精准防控策略, 研究制定了补骨脂及相关制剂安全风险防控措施, 旨在指导补骨脂及相关制剂的临床安全合理用药, 推动补骨脂相关产业的健康可持续发展。

炎症性疾病(inflammatory diseases, IDs) 是以慢性炎症为主要发病机制的疾病的总称, 严重影响患者的生活质量, 造成重大的社会和医疗负担。目前, 针对这类疾病的药物主要包括非甾体抗炎药、皮质类固醇、免疫调节剂、生物制剂和抗氧化剂等, 但是这些药物可能会引起胃肠道不良反应、诱发或加重感染、无应答或者不耐受等问题。鉴于金属-多酚网络(metal polyphenol network, MPN) 在药物递送、生物医学成像、催化治疗和光热治疗等领域展现出的卓越性能, 其在IDs诊疗方面的应用备受关注, 且已取得显著进展。本文首先对IDs的种类及其产生机制进行了概述, 随后梳理并归纳了近年来MPN的不同存在形式, 最后详细探讨了MPN的性能特点及其在IDs诊疗方面的最新研究进展, 力求为相关领域的科学研究和临床实践提供有益的参考。

随着抗生素广泛使用, 耐药菌感染已经成为人类健康重要威胁, 寻找能有效控制耐药菌感染的新型抗菌策略已成为当务之急。区别于以细菌蛋白为靶点的小分子药物, 反义寡核苷酸可以靶向细菌耐药、致病、生长繁殖及生物膜形成等机制相关的基因, 通过调控相关基因表达来抑制或者杀灭细菌, 为抗菌药物的研发提供了全新的思路。为改变反义核酸细菌内递送难题, 已有多种递药系统应用于细菌递送领域, 主要包括细胞穿透肽、脂质纳米颗粒及无机纳米颗粒等, 为反义核酸在抗菌领域的发展提供了崭新动力。本综述围绕近些年小核酸药物的发展现状, 反义核酸抗菌机制、靶点及序列, 以及递送载体等方面进行了总结归纳, 为反义核酸在抗菌感染治疗领域的研究发展提供参考。

纳米递送系统在精准治疗领域具有良好的应用前景, 但纳米材料在制备过程中存在体内循环时间较短, 易被机体内免疫系统识别、清除等问题。近年来为解决这些问题, 由天然细胞膜介导的仿生纳米递送系统已成为研究热点。天然膜仿生递送系统使用机体内源性细胞膜对纳米载体表面进行包覆修饰, 巧妙地将天然生物膜“自体”性质和“人工”功能载体的优势相融合, 赋予其肿瘤靶向性、低免疫原性和血液长循环等特点。目前仿生纳米递送系统已用于治疗恶性肿瘤、心血管疾病、细菌感染等多种疾病。本文对天然细胞膜伪装的仿生纳米递送系统的发展状况与当前的研究热点进行分析, 综述了近年来红细胞膜伪装的仿生纳米递送系统在疾病治疗领域的最新研究进展, 重点探讨基于红细胞膜伪装的仿生纳米递送系统在改善药物递送方面的优势作用, 未来发展前景及局限性, 以期为该系统的深入研究与开发提供参考。

信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid, mRNA) 是一种极具潜力的治疗药物, 在免疫学、肿瘤学、疫苗和先天性代谢疾病等研究领域具有广阔前景。但由于其自身不稳定且易被核酸酶降解所以需要高效的递送载体。脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle, LNP) 具有易于配制、稳定性高、细胞摄取高效、内体逃逸等优点, 是被公认的最成熟的递送载体。然而, LNP在肝脏中的积累严重限制了mRNA-LNP技术在肝脏以外的靶向与治疗。为了克服这一障碍, 研究人员一直专注于通过各种手段以实现肝外组织器官的精确递送。本文主要从内源性靶向、主动靶向和给药途径的选择这3方面阐述LNP器官特异性递送mRNA的研究进展, 以期为后续新型mRNA-LNP递送体系的设计提供思路及方向。

本研究旨在探讨金水缓纤组分方Ⅱ改善肺纤维化的作用和机制。动物实验已获得河南中医药大学动物实验中心伦理委员会批准(批准号: IACUC-202306012)。采用博来霉素(bleomycin, BLM) 构建小鼠肺纤维化模型, 苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, H&E) 检测各组小鼠肺组织病理形态; 马松染色(Masson staining) 检测各组小鼠肺组织纤维化; 免疫荧光(immunofluorescence, IF) 及实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR, qPCR) 检测各组小鼠肺组织I型胶原(collagen type I, COL I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin, FN)、白细胞介素(interleukin, IL)-1β、白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor α, TNF-α) 表达; 流式细胞术(flow cytometry, FCM) 检测各组小鼠肺泡灌洗液(BALF) 中M1型、M2型巨噬细胞比例; IF和qPCR检测各组小鼠肺组织脂肪酶家族成员N (lipase family member N, LIPN) 表达水平; Amplex Red游离脂肪酸检测试剂盒检测各组小鼠肺组织游离脂肪酸水平。采用IL-4诱导骨髓衍生巨噬细胞(bone marrow derived macrophages, BMDMs) M2极化, FCM检测各组细胞CD206⁺ M2型巨噬细胞比例; IF检测各组细胞LIPN表达及脂滴分解。结果显示, 在BLM诱导的肺纤维化小鼠中, 金水缓纤组分方Ⅱ显著减轻BLM引起的肺泡炎症和胶原沉积, 显著抑制小鼠肺组织成纤维细胞活化和下调BALF中M2型巨噬细胞比例, 显著抑制小鼠肺组织LIPN表达和游离脂肪酸水平; 在IL-4诱导的BMDMs M2极化模型, 金水缓纤组分方Ⅱ显著抑制CD206⁺ M2型巨噬细胞比例, 下调LIPN表达和阻抑脂滴分解。上述研究结果表明, 金水缓纤组分方Ⅱ可能通过抑制脂滴分解, 下调脂肪酸水平, 阻抑巨噬细胞M2极化, 减轻BLM诱导的肺纤维化。

近年来, 胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, GIST) 具有上升的发病率和死亡率, 大多数GIST是由c-KIT基因的激活突变引起的, 因此, c-KIT已成为GIST有前景的治疗靶点。目前, 批准用于治疗GIST的药物包括伊马替尼、舒尼替尼、瑞戈非尼和瑞派替尼等大多易产生耐药性并伴有不同程度的不良反应, 因此迫切需要开发新型c-KIT抑制剂来解决耐药问题。本研究探究了新型c-KIT抑制剂PN17-1在体外对胃肠道间质瘤GIST-882细胞的抗肿瘤作用, 发现PN17-1能够显著抑制GIST-882细胞增殖、克隆形成和迁移能力, 并且能够显著下调GIST-882细胞p-c-KIT及其下游信号蛋白p-AKT、p-STAT5和p-ERK的表达水平。此外, PN17-1还可诱导GIST-882细胞发生凋亡, PN17-1诱导的凋亡可能主要与线粒体依赖的内源性途径有关。综上所述, 新型c-KIT抑制剂PN17-1是一个有潜力的抗胃肠道间质瘤药物, 本研究为今后进一步开发c-KIT抑制剂提供了新的思路。

胰腺癌是一种高度恶性的肿瘤, 生存率低, 预后极差。一线化疗药物吉西他滨单药治疗效果有限, 但在杀伤肿瘤细胞的同时可以活化树突状细胞, 促进抗原提呈, 提高肿瘤对免疫疗法的敏感性。免疫疗法在肿瘤治疗中取得了一定进展, 但程序性细胞死亡受体-1 (programmed cell death protein 1, PD-1)/程序性死亡受体配体-1 (programmed death receptor-ligand 1, PD-L1) 免疫检查点疗法临床响应率仍较低。C-X-C趋化因子配体12 (C-X-C chemokine ligand 12, CXCL12) 能够募集免疫抑制细胞, 形成免疫抑制的肿瘤微环境, 其受体C-X-C趋化因子受体4 (C-X-C motif chemokine receptor 4, CXCR4) 在胰腺癌等多种肿瘤中高表达, 参与肿瘤的发生发展及侵袭转移。本研究通过双特异性anti-PD-L1&CXCR4纳米抗体(anti-PD-L1&CXCR4 bispecific nanobody, BsNb PX4) 联合吉西他滨, 能够协同增强人外周血单核细胞(human peripheral blood mononuclear cell, hPBMC) 的抗肿瘤免疫效应。在吉西他滨预处理的hPBMC与肿瘤细胞共孵育体系中, 加入双特异性anti-PD-L1&CXCR4纳米抗体, 能够提高hPBMC杀伤肿瘤细胞的活性; 流式细胞术分析证明, BsNb PX4与吉西他滨联用能够增加CD8⁺/CD4⁺T细胞的比例; 体内实验表明, 联合用药组的胰腺癌荷瘤NOD/SCID小鼠肿瘤组织中有更多CD8⁺T细胞浸润, 并且抑瘤效果优于单药组, 为胰腺癌的免疫治疗提供了新的潜在治疗方式。人外周血单核细胞分离实验获得上海交通大学地方伦理委员会批准, 动物福利和实验过程获得上海交通大学动物伦理委员会批准(批准号: A2024246)。

类风湿关节炎(RA) 是一种慢性难治性自身免疫病, 主要表现为滑膜炎症和关节破坏。血管生成在RA的病理进程中起着关键作用, 血管内皮细胞作为血管生成的核心参与者, 其功能紊乱加速促进滑膜炎症, 加剧血管翳的形成及关节破坏。中成药火把花根片临床上治疗RA效果显著, 但其通过调控血管内皮细胞功能抑制RA血管生成的机制尚未明晰。本研究采用转录组学数据挖掘、生物网络分析与体内外实验验证相结合的研究策略, 初步探讨了火把花根片抑制RA血管生成的潜在分子机制。动物福利和实验过程均遵循中国中医科学院中医基础理论研究所实验动物伦理委员会的规定(批准号: IBTCMCACMS21-2307-06)。网络分析结果表明核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2 (NOD2)、SMAD家族成员3 (SMAD3) 和血管内皮生长因子A (VEGFA) 等核心基因显著富集于NOD样受体信号通路、VEGF信号通路等, 提示火把花根片可能通过调控血管生成相关通路, 影响血管内皮细胞功能, 从而抑制血管生成。体内研究中火把花根片能显著下调佐剂诱导性关节炎(AIA) 模型大鼠踝关节组织中血小板-内皮细胞黏附分子(CD31) 和VEGF阳性表达。体外实验进一步验证, 火把花根片可有效抑制由VEGF诱导的HUVEC细胞迁移、侵袭及管腔形成, 显著降低血管生成相关因子VEGFA、CD31、血管生成素-1 (Ang-1) 的表达水平, 减少HUVEC细胞中CD31、VEGF的阳性表达。同时, 火把花根片还明显抑制NOD2、SMAD3、VEGFA等相关蛋白表达。综上, 本研究揭示火把花根片通过靶向NOD2/SMAD3/VEGF信号轴改善血管内皮细胞功能, 抑制RA异常血管生成的作用。上述研究丰富了中成药火把花根片在抑制RA病理性血管生成方面的科学内涵, 也为临床防治类风湿关节炎提供新的思路。

山竹醇(garcinol) 是藤黄中提取的苯三酚类化合物, 具有抗肿瘤活性, 但其靶标和分子机制尚不明确。本研究旨在探究山竹醇抗肿瘤作用的靶标及其分子机制。应用药物亲和力反应靶标稳定性实验(DARTS) 鉴定山竹醇的结合蛋白; 采用酶活实验联合基因沉默技术考察山竹醇对蛋白酶体活性的影响及其对靶蛋白26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11 (26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 11, RPN6) 的依赖性; 运用免疫荧光和邻位连接技术观测山竹醇对RPN6和泛素蛋白的作用; 利用流式分析技术探究山竹醇对细胞凋亡的影响; 类器官模型研究山竹醇对肿瘤的抑制作用。结果发现: RPN6是山竹醇的直接结合蛋白; 山竹醇抑制蛋白酶体的水解酶活性并诱导泛素累积, 且其蛋白酶体抑制作用依赖于RPN6; 进一步研究发现山竹醇诱导RPN6发生寡聚并在核内形成颗粒; 最后确证山竹醇诱导肿瘤细胞凋亡, 且显著抑制APC杂合突变小鼠小肠腺瘤(Apc^min/+) 类器官的生长。以上结果表明, 山竹醇靶向蛋白酶体RPN6亚基而抑制蛋白酶体活性, 诱导细胞凋亡并抑制肿瘤生长。

本研究旨在通过动物实验探究茵胆平肝胶囊(Yindan Pinggan capsules, YDPG) 对肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis, IHC) 的治疗效果, 结合网络药理学和分子对接技术挖掘其潜在作用机制并验证。首先通过动物实验评估YDPG对α-萘基异硫氰酸酯(α-naphthylisothiocyanate, ANIT) 诱导的小鼠IHC模型的治疗效果, 包括肝功能检测、血常规检测和肝脏病理分析。进一步采用网络药理学工具预测YDPG的有效成分、核心靶点和信号通路, 再以分子对接技术辅助验证YDPG中关键活性成分与核心靶点的结合活性, 最后采用蛋白免疫印迹法对关键靶标进行验证。发现YDPG能显著改善IHC小鼠的肝功能异常和肝细胞损伤, 网络药理学分析结果显示YDPG中94个药物活性成分关联到396个IHC的疾病治疗靶点, 并且显著富集于磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B (PI3K-AKT) 信号通路、脂质代谢和胆汁分泌等通路, 分子对接结果显示YDPG关键活性组分与PI3K-AKT通路核心靶点均有较好的结合活性, 进一步的蛋白免疫印迹法验证了YDPG能够降低肝组织中PI3K-AKT通路核心靶点PI3K、AKT蛋白的磷酸化水平。上述结果提示, YDPG可能通过调控PI3K-AKT信号通路缓解氧化应激和炎症反应等生物过程, 从而改善IHC小鼠的肝损伤, 发挥对IHC的治疗作用。本实验已获暨南大学动物实验伦理委员会批准(伦理审批号: IACUC-20241011-09)。

采用硅胶柱层析、凝胶柱层析、反相硅胶柱层析和半制备高效液相等多种分离技术对扩展青霉Penicillium expansum GY618的大米固体发酵物进行分离纯化得到12个化合物。经高分辨质谱(HR-ESI-MS)、核磁共振波谱等技术, 结合与文献数据对比等方法, 鉴定为: 11-hydroxyl-penicitrinone F (1)、penicitrinone F (2)、白桦脂醇(3)、高根二醇(4)、麦角甾-5, 7, 22E-三烯-3β-醇(5)、(22E)-5α, 8α-表二氧麦角甾-6, 22-二烯-3β-醇(6)、(22E)-5α, 8α-表二氧麦角甾-6, 9, 22-三烯-3β-醇(7)、(22E, 24R)-5α, 8α-过氧化麦角甾-23-甲基-6, 22-二烯-3β-醇(8)、(22E, 24R)-5α, 8α-过氧化麦角甾-23-甲基-6, 9, 22-三烯-3β-醇(9)、dankasterone A (10)、(17R)-4-hydroxy-17-methylincisterol (11) 和麦角甾-4, 6, 8 (14), 22-四烯-3-酮(12)。化合物1为新化合物, 化合物2~4、6~12均首次从扩展青霉中分离得到。在酪氨酸酶抑制活性评价中, 化合物1、3、12具有一定的抑制酪氨酸酶活性。化合物1的IC₅₀值为75 ± 9 μmol·L^-1, 化合物3和12的IC₅₀值分别为69 ± 8和64 ± 2 μmol·L^-1。其他化合物的IC₅₀值均 > 100 μmol·L^-1。曲酸作为阳性对照IC₅₀值为46 ± 4 μmol·L^-1。

采用基于分离富集模式的反相多维液相制备色谱体系对尖果沙枣(Elaeagnus oxycarpa Schlechtend) 叶水提取物进行分离纯化, 得到5个化合物。通过NMR、MS、UV、IR等波谱数据结合文献确定化合物的结构, 分别鉴定为尿嘧啶(1)、沙枣叶没食子酸糖酯B (2)、沙枣叶没食子酸糖酯A (3)、沙枣叶没食子酸糖酯C (4)、没食子酸(5), 其中化合物2~4为新化合物, 化合物1为首次从该植物中分离得到。运用二苯基苦基苯肼(DPPH)、2′-联氨双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)、铁氰化钾还原法及酪氨酸酶催化左旋多巴氧化速率法评价化合物的体外抗氧化活性、酪氨酸酶抑制活性, 发现化合物2~5具有抗氧化和抑制酪氨酸酶两种活性, 其中化合物4抗氧化活性最强, 其DPPH自由基清除能力(IC₅₀) 为3.59 ± 0.06 μmol·L^-1, ABTS自由基清除能力(IC₅₀) 为10.04 ± 0.20 μmol·L^-1, 总还原能力均强于Vc; 化合物3表现出较好的酪氨酸酶抑制活性, 其IC₅₀为0.25 ± 0.06 mmol·L^-1。

采用大孔树脂、硅胶、ODS柱层析、半制备HPLC等色谱技术, 从木鳖子种仁中分离了5个皂苷类成分; 利用HR-MS、NMR技术, 结合碱水解、酸水解方法, 鉴定为: 丝石竹皂苷元-3-O-{β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基}-28-O-β-D-吡喃木糖基(1→3)-[β-D-吡喃木糖基(1→4)]-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃岩藻糖苷(1)、皂皮酸-3-O-{β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸基}-28-O-β-D-吡喃木糖基(1→3)-[β-D-吡喃木糖基(1→4)]-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃岩藻糖苷(2)、丝石竹皂苷元-3-O-β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷钠(3)、皂皮酸-3-O-β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷钠(4)、18α-皂皮酸-3-O-β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(5)。化合物1~5为新化合物, 分别命名为木鳖子苷A、B、C、D、E; 均能明显抑制白色念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌的生长。

以冠心七味片入血成分为基础, 结合网络药理学筛选冠心七味片抗动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS) 的关键通路, 明确冠心七味片抗AS的作用机制, 并通过细胞实验加以验证。采用HPLC-Q-Exactive-MS/MS技术对冠心七味片入血成分进行分析, 确定化合物的精确质荷比, 并利用二级质谱裂解碎片、文献比对所含成分进行全面分析, 最终共鉴定出冠心七味片入血成分42个。利用Swiss Target Prediction数据库对其成分靶点预测。在疾病数据库Genecard、OMIM、Disgent中搜索AS靶点, 用Venny 2.1.0软件绘制Venny图得到疾病靶点与成分靶点的交集靶点181个, 利用String数据库分析蛋白质相互作用, 并用Cytscape软件筛选得到核心靶点32个。DAVID数据库进行核心靶点的GO (Gene Ontology) 富集分析和KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes) 通路分析, 发现冠心七味片抗AS的通路主要包括脂质代谢与动脉粥样硬化(lipid metabolism and atherosclerosis)、高级糖基化终末产物-受体信号通路(AGE-RAGE signaling pathway in diabetic complications) 等。将核心靶点和核心化合物进行分子对接发现, 冠心七味片中隐丹参酮、丹参酮ⅡA与TNF、PPARγ、AKT1、PTG2等靶点结合较好。使用人hl-7702肝细胞构建脂滴模型, 验证冠心七味片调控脂质代谢与动脉粥样硬化的关键通路。这项研究初步鉴定了冠心七味片治疗AS的潜在药效成分并预测了作用通路, 对冠心七味片调节脂质代谢与动脉粥样硬化的关系进行体外实验验证, 为该方药效物质基础及作用机制的深入研究提供参考。本实验经过内蒙古医科大学医学伦理委员会批准(编号: YKD202401262)。

本研究以RAW264.7细胞为研究对象, 观察黄芪蜜炙对其能量代谢及极化的影响, 探讨蜜炙增强黄芪补中益气功效的科学内涵。将生品黄芪及蜜炙黄芪水煎液灌胃大鼠制备含药血清, 采用液质联用技术分析黄芪蜜炙前后含药血清中成分的变化。通过CCK-8实验检测细胞存活率, 筛选含药血清浓度。通过中性红吞噬实验、ATP检测试剂盒和NO检测试剂盒评价生品黄芪及蜜炙黄芪对细胞吞噬率、ATP能量代谢和NO分泌量的差异。通过ELISA试剂盒检测生品黄芪及蜜炙黄芪对RAW264.7细胞TNF-α分泌量的影响。通过流式细胞术评价生品黄芪及蜜炙黄芪对RAW264.7细胞极化的影响。采用液质联用技术筛选细胞裂解液和培养液中与糖酵解相关的差异代谢物。本实验获得山西中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号: AWE202407352)。结果显示, 黄芪蜜炙后的水煎液灌胃大鼠后制备的含药血清中甜菜碱、氨基酸和芒柄花苷等成分含量升高。CCK-8实验结果表明, 生品黄芪和蜜炙黄芪各浓度含药血清对RAW264.7细胞均无细胞毒作用。含药血清给药细胞后, 吞噬指数和ATP的产量均有不同程度的提高, 正常状态下RAW264.7细胞的NO分泌量提高, 炎症状态下RAW264.7细胞的NO分泌量减少, 且蜜炙黄芪的效果优于生品黄芪。ELISA试剂盒的检测结果表明, 生品黄芪及蜜炙黄芪的含药血清均能呈浓度依赖性地促进TNF-α的分泌, 且蜜炙黄芪的促进效果强于生品黄芪。流式细胞术的检测结果表明, 生品黄芪及蜜炙黄芪的含药血清均能促进RAW264.7细胞向M1型极化, 并抑制向M2型极化, 蜜炙黄芪的效果优于生品黄芪。与生品黄芪相比, 蜜炙黄芪的含药血清细胞裂解液和培养液中与糖酵解相关的代谢物总体呈上升趋势, 表明蜜炙黄芪促进糖酵解的效果优于生品黄芪。综上所述, 蜜炙黄芪能促进RAW264.7细胞的极化及能量代谢, 并参与正向的免疫调节, 这与其补中益气功效的增强具有相关性。

采用近红外光谱技术(near infrared spectroscopy, NIRS) 结合化学计量学建立腰痹通胶囊生产过程中间体的质量分析通用模型, 实现三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd及水分6个关键质量指标的快速检测。以喷干细粉和总混颗粒为研究对象, 采用高效液相色谱法测定5种皂苷成分含量、烘干法测定水分含量作为参考值, 并采集近红外光谱。经蒙特卡洛交叉验证(Monte Carlo cross validation, MCCV) 剔除异常样本后, 使用蒙特卡洛-无信息变量消除(Monte Carlo uninformative variables elimination, MC-UVE)、竞争性自适应重加权采样(competitive adaptive reweighted sampling, CARS) 选择特征变量, 分别采用偏最小二乘回归(partial least squares regression, PLSR)、极限学习机(extreme learning machine, ELM) 和蚁狮算法优化的最小二乘向量机(ant lion optimization least squares support vector machine, ALO-LSSVM) 建立定量模型, 比较模型效果。结果表明, 经CARS筛选变量后建立的ALO-LSSVM模型效果最佳, 6种指标成分的模型相关系数均大于0.93, 相对标准误差控制在6%之内, ALO-LSSVM更适用于数量多、信息丰富的样本, 模型预测效果和稳定性得到显著提高。本研究建立的通用模型具有良好的预测效果, 可用于腰痹通胶囊中间体的快速检测。

近年来癌症的治疗方法和手段越来越多样化, 单一的治疗方法往往疗效有限, 而免疫联合化疗的协同作用可以更有效抑制肿瘤生长。基于此, 作者构建了一种负载化疗药和肿瘤疫苗的海藻酸钠(sodium alginate, SA) 水凝胶复合体系(命名为SA-DOX-NA), 以期实现化疗药物和肿瘤疫苗的联合使用。首先, 以鸡卵清蛋白(ovalbumin, OVA) 为模型抗原, 选择丙烯酰胺、甲基丙烯酸二甲氨乙酯单体, 通过原位聚合法构建了一种酸性条件下可降解的肿瘤疫苗(命名为NA), 然后以海藻酸钠为基质制备了一种共负载化疗药多柔比星(doxorubicin, DOX) 和NA的水凝胶复合体系SA-DOX-NA。电镜结果显示, SA-DOX-NA具有良好的原位成胶能力, 内部连通性良好, 形成的三维立体网状结构能实现DOX与NA的共负载及药物缓慢释放。抗肿瘤及其免疫调节结果显示, SA-DOX-NA既能有效抑制肿瘤细胞的生长, 又可以实现无外加佐剂的情况下高效促进DC2.4树突状细胞的增殖及活化。综上所述, SA-DOX-NA发挥了化疗及免疫治疗肿瘤的双重功效, 在肿瘤局部治疗中具有良好的应用前景。

花旗松素(taxifolin, Tax) 已被证实可作为药食同源的可食用物质, 具有保护酒精性肝损伤作用, 然而其亲水性和渗透性均较差, 阻碍了Tax的临床应用。本研究制备了花旗松素-磷脂/胆盐/聚维酮-K30 (taxifolin-phosphatidylcholine/sodium deoxycholate/PVP-K30 micells, Tax-MLs) 纳米胶束, 采用Box-Behnken试验得到最佳制备工艺, 以透射电镜、傅里叶红外光谱等对Tax-MLs进行表征; 测定临界胶束浓度、平衡溶解度及油水分配系数等理化参数, 并通过体外消化模拟试验探讨Tax-MLs的释放规律; 酒精性肝损伤模型探讨Tax-MLs的体内药效。结果显示, Tax-MLs的平均粒径、多分散性指数及zeta电位分别为36.90 ± 4.57 nm、0.194 ± 0.01及-32.6 ± 0.35 mV, 透射电镜观测到Tax-MLs呈现大小均一, 分布均匀的类球形, 差式扫描量热分析和傅里叶红外光谱等证明Tax-MLs的形成; 理化性质方面, Tax-MLs相较Tax在水中的溶解度提高了92.02倍, 其在水中的油水分配系数也从0.43增加到1.14, 证明Tax-MLs能够提高其溶解度及渗透性; 体内药效学结果显示, 与Tax组相比, Tax-MLs低、中、高剂量组肝脏指数及血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶水平显著降低(P < 0.05), 增强肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽活性, 降低丙二醛水平的效果更明显。Tax-MLs有效提高了药物的溶解度和渗透性, 并增强了对酒精性肝损伤的保护作用。本研究体内动物实验得到了长春中医药大学动物伦理委员会的批准(批准号: 2023601)。

肾衰竭患者体内潴留尿素氮、血肌酐、尿酸等尿毒症毒素, 加重肾脏损伤。本研究以包醛氧淀粉(coated aldehyde oxy-starch, CAO) 为吸附剂, 考察其对肾衰竭指标: 尿素(urea)、硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate, INS)、一甲胺(monomethylamine, MMA)、二甲胺(dimethylamine, DMA)、尿酸(uric acid, UA) 和肌酐(creatinine, Cr) 的体外吸附性能。利用高效液相色谱法、气相色谱法等检测手段, 系统研究pH、温度、浓度、用量、时间等因素对CAO吸附能力的影响。研究结果表明, CAO对urea、INS、MMA具有较强的吸附能力, 对DMA、UA、Cr为一般吸附。吸附动力学和热力学研究发现, CAO对urea、UA的吸附符合准一级动力学方程, 等温吸附模型符合Freundlich模型。热力学参数吸附焓变ΔH > 0, urea的ΔH在40~60 kJ·mol^-1, 表明其吸附过程存在配位基交换强吸附力的作用; UA的ΔH大于80 kJ·mol^-1, 表明其吸附过程存在化学键的生成。两者的吉布斯自由能ΔG < 0, 在-20~0 kJ·mol^-1之间, 说明CAO对urea的吸附属于可自发进行的物理吸附。urea和UA的吸附熵ΔS > 0, 说明吸附过程是熵增过程。红外光谱结果证实CAO吸附urea后生成了新的亚胺键, 证明吸附过程中发生了化学反应。本研究阐明了CAO对多种肾衰竭指标的吸附机制, 为其临床用药提供科学依据。

直接压片是一种理想的片剂制备方法, 但其对粉体的功能性要求较高。压缩过程中, 粉体的功能属性将直接影响片剂的品质。本研究以Py、FES-8KN、FES-12KN、FES-16KN、CR-8KN、CR-12KN、CR-16KN等15个参数为特征变量, 采用无监督学习的主成分分析、聚类分析以及因子分析方法对36个中药复方粉体的压缩数据进行综合多变量数据分析, 并应用主成分-层次聚类和因子分析-K-Means聚类两种方法对其压缩行为特征进行分类。结果表明, 通过两种不同的降维分类方法均可以有效区分36个中药复方粉体的压缩行为特性。层次聚类分析的结果与粉末的实际压缩现象的一致性更优, 其中第1类粉体弹性高, 压缩性差; 第2类粉体压缩性好, 不易破碎; 第3类粉体压缩成型性好。该研究有望为中药粉体在压缩行为预测以及片剂处方筛选提供参考和思路。

Auxin/indole-3-acetic acid (Aux/IAA) 是植物中一个重要的基因家族, 在生长素信号传导中扮演着关键的角色, 参与了植物的生长、发育以及对逆境胁迫的响应和调节过程。本研究通过分析丹参(Salvia miltiorrhiza) 不同羽状复叶的转录组数据筛选了潜在的与叶片发育相关的基因SmIAA7, 设计特异引物成功从丹参中克隆了SmIAA7, 并进行生物信息学分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、生长素及非生物胁迫下的诱导表达分析。SmIAA7基因全长684 bp, 编码227个氨基酸, 蛋白分子质量25.3 kD。保守结构域分析表明SmIAA7含有超家族保守结构域Aux_IAA (pfam02309), 序列分析及系统进化树结果表明SmIAA7和其他植物中的IAA7以及IAA14同源性较高, 可能参与植物的生长发育并响应逆境胁迫。构建原核表达载体pET28a-SmIAA7并在大肠杆菌Rosetta (DE3) 菌株中成功表达SmIAA7重组蛋白, 纯化得到可溶性重组蛋白。亚细胞定位实验结果表明SmIAA7定位于植物细胞的细胞核中。实时荧光定量PCR结果表明, SmIAA7基因能够响应生长素的诱导导致表达水平升高。干旱、低温以及盐胁迫均能够显著提高SmIAA7基因的表达水平。本研究为进一步揭示SmIAA7在丹参叶片发育、信号传递及逆境防御中的作用奠定基础。