组蛋白去乙酰化酶3 (histone deacetylase 3, HDAC3) 是一种表观遗传修饰酶, 在糖尿病及其并发症的发生与发展中发挥重要作用。研究报道, 在1型糖尿病中, HDAC3活性增加与胰岛β细胞功能障碍有关; 而在2型糖尿病中, HDAC3通过调控肝脏、脂肪和肌肉组织的代谢, 影响胰岛素抵抗和信号转导。此外, HDAC3在糖尿病心肌病、视网膜病变和肾病等并发症中扮演了关键角色。通过选择性抑制HDAC3, 可以改善胰岛素敏感性并减轻慢性炎性, 改善胰岛细胞功能, 有望成为糖尿病及其并发症治疗的新策略。

随着社会经济的飞速发展和人类生活水平的持续提高, 心血管疾病(cardiovascular disease, CVD) 的发病率、致死率及复发率逐年上升, 严重影响着人们的生命健康。常规的治疗药物对致残率的改善有限, 因此, 寻求新的治疗药物及作用靶点成为目前研究的热点之一。近年来, 天然化合物迷迭香酸(rosmarinic acid, RA) 在CVD的治疗作用备受关注, 其能够通过调控多条信号通路防治CVD, 发挥抗氧化、抗细胞凋亡、抗炎、抗血小板聚集以及抗凝血、保护内皮功能等生理活性。本文系统梳理了RA在CVD防治中的作用, 对其作用机制进行归纳分析, 以期为深入挖掘RA在CVD中防治价值及进一步开发成为防治药物提供科学依据和重要支撑。

异斯特维醇是天然产物甜菊糖苷在酸性条件下水解得到的四环二萜类化合物, 具有多种药理活性, 例如抗肿瘤、降糖、降脂、抗炎和抗菌等。由于异斯特维醇本身具有水溶性低、活性不高、生物利用度低等缺点, 导致了其成药性能较差。为了克服这些缺点, 学者们对其进行了大量的结构修饰与改造, 发现了许多结构新颖、活性优良的异斯特维醇衍生物。本文综述了近年来异斯特维醇的结构修饰、生物活性、构效关系及微生物转化的相关研究进展, 以期为异斯特维醇及其衍生物类新药开发提供参考。

补体系统的旁路途径是多种疾病发病的关键因素, 包括阵发性睡眠性血红蛋白尿、非典型溶血性尿毒症综合征、C3肾小球病、年龄相关性黄斑变性等。补体因子B (complement factor B, CFB) 是一种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白, 以潜伏形式在人体血液中循环。其作为补体旁路途径的关键节点, 是治疗补体系统介导疾病的重要靶点。随着伊普可泮(iptacopan) 的成功上市, 使得CFB小分子抑制剂成为目前的研究热点, 国内外多家制药公司都在积极研发CFB小分子抑制剂。本文主要就近年来CFB小分子抑制剂的研究进展做了系统总结, 按照结构类型和设计思路对代表化合物及其活性进行了介绍, 从而为后续CFB小分子抑制剂的研究提供借鉴和思路。

随着免疫功能受损患者数量的增加及真菌耐药性的产生, 人类感染致命真菌的风险也在不断增加。真菌和人类都属于真核生物, 因此确定抗真菌药物研发的独特靶点较为困难。此外, 目前现有的抗真菌药物在实际应用中受到毒性、药物相互作用和耐药性等多方面的限制, 从而导致真菌感染的发病率和致命率的不断提高。因此, 开发新型抗真菌药物已迫在眉睫。利用来自天然来源的微生物发酵产物作为先导化合物的半合成技术, 由于其反应步骤少、易于操作的优点成为目前抗真菌药物结构改造中使用最多的方法。本文将介绍目前临床使用的天然来源的抗真菌药物的现状, 以及新型半合成抗真菌药物研发的最新进展, 并对其作用机制、结构修饰及优缺点进行总结, 为后续新型抗真菌药物的开发提供参考。

锦鸡儿属(Caragana Fabr.) 是豆科荒漠植物, 在传统民族医药中应用广泛, 具有滋阴养血、祛风除湿、清热解毒之功效。锦鸡儿属植物的抗炎作用备受关注, 相关机制研究取得一定进展, 但是目前没有任何文献对该属植物的抗炎成分及抗炎作用进行综述。本文通过对锦鸡儿属活性成分的抗炎作用进行总结, 发现其对体外不同炎症细胞模型有很好的抗炎活性, 且对类风湿性关节炎、结肠炎、复合型肾炎和急性肺损伤等疾病模型均具有较好的改善作用。该属植物活性成分抗炎作用主要包括降低多种促炎因子水平, 涉及到的信号通路主要包括TLR4/NF-κB、TLR4/MAPK、TLR4/NF-κB/IRF3、JAK/STAT-1、ERK/STAT-1等。因此, 该文主要对锦鸡儿属植物及其活性成分的抗炎作用与机制研究进展按疾病种类进行综述, 以期为其抗炎活性的深入研究及相关功能新产品的开发提供参考。

由于患者的依从性和方便性, 口服给药可能是最常用和最可接受的给药途径。然而, 传统的给药剂型, 如片剂或胶囊制剂, 可能导致药物的生物利用度低和治疗效率差。因此, 随着材料科学和微纳米制造技术的发展, 各种载体被开发出来以保护和提高药物在胃肠道的吸收。在此, 首先讨论了阻碍药物运输和吸收的主要生理因素(各种解剖学因素、物理因素和生化因素); 在此基础上, 综述了近年来提高药物生物利用度和靶向性的传统和新型口服给药途径的研究进展; 最后, 展望了口服药物输送系统的未来前景及临床转化的潜在挑战。

粪菌移植(fecal microbiota transplantation, FMT) 技术起源于我国东晋时期, 近20年来发展迅速, 已经成为研究肠道菌群与疾病发生发展因果关系的主要方法; 同时, FMT技术在肠道疾病治疗中的应用也获得广泛认可, 并逐步扩展到其他疾病领域。然而, FMT操作较为复杂, 且无标准化方法, 其成功与否受到供体、受体、菌液处理和植入方式等多种因素的影响。鉴于肠道菌群与多种疾病之间存在密切关系, FMT在科学研究和临床应用领域已成为大家关注的焦点, 其相关研究也取得了系列的重要进展, 为帮助科研工作者更深入了解该项技术, 本文将概述FMT技术的发展历程, 总结科研和临床上常见的操作方法, 梳理其应用进展, 并展望其未来发展发向。

本文旨在探讨管花苷B (tubuloside B, Tub B) 对β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein, Aβ) 纤维化的抑制作用及潜在作用机制。采用体外孵育Aβ_1-42建立蛋白质淀粉样纤维化模型, 利用硫黄素-T (thioflavin T, ThT)、刚果红(Congo red, CR)、8-苯胺-1-萘磺酸(8-anilino-1-naphthalene sulfonic acid, ANS) 染色和透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM) 考察Tub B对Aβ_1-42纤维形成的抑制作用; 圆二色谱(circular dichroism, CD) 分析Tub B对Aβ_1-42二级结构的影响; 3-(4, 5-二甲基-2-噻唑)-2, 5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-(4, 5-dimethyl-2-thiazolyl)-2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide, MTT] 和红细胞溶血实验研究Tub B对Aβ_1-42诱导的细胞毒性的抑制作用; 2', 7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2', 7'-dichlorofluorescin diacetate, DCFH-DA) 染色检测Tub B对Aβ_1-42诱导的细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS) 含量的影响; 以及利用分子对接实验研究Tub B与Aβ_1-42分子相互作用。结果显示, Tub B对Aβ_1-42淀粉样纤维形成具有一定抑制作用, 可降低Aβ_1-42二级结构中α-螺旋结构向β-折叠结构的转化, 减少疏水区域暴露, 减弱Aβ_1-42引起的细胞毒性和红细胞溶血性, 降低细胞损伤。综上所述, Tub B能够抑制蛋白质淀粉样纤维形成, 且这种抑制作用可能与其抗氧化活性及与蛋白质分子间的氢键和疏水作用力有关。本研究的动物实验经空军军医大学动物实验伦理委员会批准(批准号: 20190051)。

为了探究水蛭与熊胆联合作用于肝胆疾病的可能作用和分子机制, 本研究首先利用网络药理学方法筛选水蛭和熊胆成分及其靶点和肝胆疾病的相关靶基因, 将筛选出的关键基因进行交互作用网络和GO、KEGG富集分析, 然后利用油酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积模型和DL-乙硫氨酸诱导的小鼠脂肪肝模型, 在体内外对水蛭熊胆单独处理及联合作用降低肝脂的活性进行评价, 并采用Western blot法检测网络药理学提示的关键通路相关蛋白的表达。网络药理学分析结果显示, 水蛭、熊胆有效成分与肝胆相关疾病有295个交集靶点, 涉及200多条信号通路, 其中包括与糖脂代谢密切相关的PI3K/Akt信号通路、磷脂酶D信号通路等。体外验证实验结果显示, 水蛭与熊胆单独及联合应用均可显著抑制油酸钠诱导的人肝细胞内脂质沉积, 能够降低细胞培养上清TG水平, 抑制肝细胞内脂质含量, Nile red染色共聚焦显微镜观察结果表明, 水蛭与熊胆联合应用降低肝细胞内脂质沉积的活性相对单独用药更佳。在体内小鼠脂肪肝模型中, 水蛭与熊胆联合应用能够更好地降低升高的脏器指数、血脂和肝脂水平, 降低血清肝损伤生物标志物含量。本实验所用动物及相关处置符合动物福利的要求, 实验开展前经过中国医学科学院药物研究所实验动物管理和使用委员会(IACUC) 的审查批准。Western blot实验结果显示, 水蛭与熊胆联合应用能够显著上调p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平, 增加p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值, 与网络药理学预测结果一致。水蛭熊胆联合应用有治疗脂肪性肝病的良好潜能, 激活PI3K/Akt通路可能是其降低肝细胞脂质沉积的重要机制之一。

通过网络药理学和分子对接技术, 结合体外实验验证探究飞蛾藤(Porana racemosa Roxb., PRA) 治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA) 的作用机制, 为飞蛾藤治疗RA提供现代药理学依据。通过Swiss Target Prediction数据库预测已解析飞蛾藤中化学成分的潜在靶点; 采用OMIM、GeneCards、TTD、Disgenet数据库检索RA的疾病靶点; 利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用(PPI) 网络和药材-成分-靶点网络; 使用DAVID数据库进行GO (gene ontology) 功能富集和KEGG (kyoto encyclopedia of genes and genomes) 通路分析, 并利用分子对接软件对飞蛾藤潜在活性成分与核心靶点进行对接; 最后选取MH7A细胞进行细胞活力、划痕愈合、关键基因mRNA表达水平分析等实验, 以探索飞蛾藤及其潜在活性成分对MH7A细胞增殖、迁移、凋亡的影响。该研究共筛选出飞蛾藤潜在活性成分靶点628个, RA靶点1 890个, 交集靶点235个, 筛选出飞蛾藤治疗RA的主要潜在活性成分是咖啡酸乙酯、N-对反式香豆酰酪胺、亚麻酸甲酯等, 核心靶点涉及肿瘤坏死因子(TNF)、基质金属蛋白酶9 (MMP9)、前列腺素内过氧化物合酶2 (PTGS2) 等, 富集分析确定了1 200个GO功能富集条目和166条信号通路; 分子对接结果显示, N-对反式香豆酰酪胺和咖啡酸乙酯与TNF、MMP9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (CASP3)、PTGS2、B淋巴细胞瘤2 (BCL2) 均具有较好的结合活性; 体外实验显示, 飞蛾藤、咖啡酸乙酯和N-对反式香豆酰酪胺均可抑制MH7A细胞增殖、迁移和侵袭能力, 上调凋亡相关基因CASP3 mRNA的表达, 下调MMP9、PTGS2、BCL2 mRNA的表达, 还能下调磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (AKT) mRNA和PI3K、p-AKT蛋白的表达。该研究初步揭示了飞蛾藤治疗RA可能与抑制MH7A细胞增殖、迁移和侵袭, 诱导细胞凋亡, 调控PI3K/AKT信号通路等有关。

异甘草素(isoliquiritigenin, ISL) 是甘草中提取的查尔酮类化合物, 具有抗糖尿病、抗癌及抗氧化等多种生物活性。课题组前期研究发现, ISL可降低2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM) 小鼠的血糖水平, 改善T2DM引起的糖脂代谢和能量代谢紊乱, 本文拟进一步探究ISL缓解T2DM所致异常内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS) 的效果并解析其分子机制。体内实验采用8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠, 通过饲喂高脂高糖饮食结合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ) 构建T2DM动物模型, 动物福利和实验过程均遵循北京中医药大学实验动物伦理委员会规定(批准号: BUCM-2022021503-1134); 体外实验采用人肝癌HepG2细胞, 以衣霉素(tunicamycin, TM) 诱导ERS细胞模型。利用转录组测序分析ISL对T2DM小鼠肝脏基因转录水平的影响; 采用实时荧光定量PCR (real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR) 检测ISL对ERS关键基因的调控作用; 采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、蛋白质印迹法(Western blot, WB) 以及免疫荧光技术检测ISL对ERS关键蛋白的调控作用。实验结果表明: ISL可显著下调ERS关键基因的表达, 降低葡萄糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78, GRP78) 的水平, 并抑制蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase, PERK) 的磷酸化, 从而缓解T2DM所致异常ERS; 同时, ISL可提高胰岛素受体底物(insulin receptor substrate, IRS) 1和IRS2的蛋白水平, 促进蛋白激酶B (protein kinase B, Akt) 的磷酸化, 改善胰岛素敏感性。综上, ISL可通过改善ERS和胰岛素敏感性, 缓解T2DM相关症状。

代谢相关脂肪性肝病(metabolic-associated fatty liver disease, MAFLD) 和骨质疏松症(osteoporosis, OP) 是两种非常普遍的代谢性疾病。越来越多的实验证据支持MAFLD和OP之间有病理生理联系, MAFLD常伴随OP的发生。吴茱萸次碱(rutaecarpine, RUT) 是中药吴茱萸的主要活性成分之一, 课题组前期研究发现RUT具有降脂、抗炎和抗动脉粥样硬化作用, 并且可以改善大鼠的OP。但是, RUT能否同时改善MAFLD小鼠的脂肪肝和OP症状, 目前尚待研究。本研究利用高脂饲料饮食(high fat diet, HFD) 4个月喂养的C57BL/6小鼠构建MAFLD模型。灌胃给予RUT低剂量(5 mg·kg^-1) 和高剂量(15 mg·kg^-1) 4周, 实验结束时评价RUT在体内对肝脏脂肪变性和骨代谢的影响(本实验获得中国医学科学院医药生物技术研究所动物伦理委员会批准, 批准号: IMB-20190124D₃03)。研究结果表明, RUT治疗显著减少了肝脏脂肪变性和脂质积累, 同时显著减少骨丢失并促进了骨形成。综上, 本研究表明RUT具有改善MAFLD小鼠的脂肪肝和OP的作用。

本研究设计、合成19个肉桂酰胺/酯三氮唑类化合物, 并对其抗阿尔茨海默症(Alzheimer's disease, AD) 活性进行评价。在APPswe细胞模型实验中, 化合物4f具有良好的抗Aβ介导的神经细胞毒性(EC₅₀ = 2.03 ± 2.45 μmol·L^-1) 和由此引起的AChE活性的异常升高(IC₅₀ = 4.88 ± 4.70 μmol·L^-1); 进一步研究发现, 化合物4f (1、5和25 mg·kg^-1) 可有效改善β-淀粉样蛋白1-42 (β-amyloid protein 1-42, Aβ_1-42) 损伤小鼠的空间认知和学习记忆障碍, 通过促进非淀粉样蛋白、抑制淀粉样蛋白途径和Tau蛋白磷酸化改善Aβ_1-42诱导的神经退行性病变(实验中所有操作均获得中国医学科学院医药生物技术研究所伦理委员会批准, 批准号: IMB-20220908D701)。化合物4f作为治疗AD的一个有前途的先导物, 本研究为其后续研发提供了理论依据。

黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XO) 是高尿酸血症及痛风治疗药物的重要靶点。基于前期获得的高活性XO抑制剂1, 采用生物电子等排策略, 设计并合成了噁二唑类化合物及其开环类似物共17个。其中, 化合物2l、2n、3b在10 μmol·L^-1浓度下具有显著的XO抑制活性; 化合物3b抑制XO的IC₅₀值达到1.45 μmol·L^-1。

以熊果酸为母体, 对其C-3和C-28位进行结构修饰, 引入1, 2, 3-三氮唑, 合成了10个新型熊果酸衍生物, 结构经MS、¹H NMR和¹³C NMR确证。通过MTT法, 选用高表达人癌细胞(乳腺癌MCF-7和胃癌SGC-7901细胞) 对化合物进行初步体外抗肿瘤活性筛选, 结果表明, 所有化合物对MCF-7和SGC-7901肿瘤细胞的抑制活性均明显高于熊果酸。其中化合物Ⅱ₄对MCF-7和SGC-7901细胞具有较强的抗肿瘤作用, 活性与阳性对照药尼洛替尼相当, 分子对接也显示其与c-Kit具有较高的结合能力, 值得进一步研究。

对苍术属植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根进行化学成分研究。运用正相硅胶、ODS、半制备HPLC等色谱方法从白术乙酸乙酯部位分离纯化得到4个倍半萜类化合物, 采用1D和2D NMR、HR-ESI-MS、IR、UV、CD等技术手段鉴定其结构为白术酮A (1)、9β-羟基紫菀内酯(2)、白术内酯H (3)、白术内酯J (4)。化合物1~4均为新的倍半萜类化合物, 其中化合物1具有一个少见的6/7双环骨架结构。

采用MCI Gel CHP-20、ODS、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱柱以及半制备液相等方法对红花(Carthamus tinctorius L.) 乙醇提取物的正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化, 得到1个炔烃和2个苯丙素类衍生物。运用现代波谱学方法(1D NMR、2D NMR、UV、IR和MS) 鉴定结构分别为(5R, E)-十四碳-12-烯-8, 10-二炔-1, 5, 14-三醇(1)、(E)-8-O-β-D-吡喃葡萄糖肉桂酸丁酯(2) 和(7S, 8S)-7-(4-羟基-3, 5-二甲氧基苯)-7-正丁基-8, 9-二醇(3)。1~3均为新化合物。对化合物1~3进行体外抗肾纤维化活性筛选, 均未表现出明显活性。

利用硅胶、Sephadex LH-20、MCI Gel和ODS等柱色谱, 结合半制备液相等分离方法, 从羊角棉90%乙醇提取物中分离纯化得到9个化合物。运用现代波谱学方法(1D和2D NMR、UV、IR、MS等) 对所分离得到的化合物进行结构鉴定, 分别鉴定为mairoside A (1)、3′, 6-二-O-芥子酰基蔗糖(2)、肉豆蔻醚酸(3)、肉豆蔻醚酸甲酯(4)、肉豆蔻醚酸乙酯(5)、3, 4, 5-三甲氧基桂皮酸(6)、3, 4, 5-三甲氧基苯甲酸(7)、维诺林(8)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(9), 其中化合物1为新糖苷类化合物, 化合物4和5为新天然产物, 且化合物4的核磁数据为首次报道。

采用MCI Gel CHP-20、ODS、Sephadex LH-20和硅胶等方法, 结合制备薄层和半制备液相色谱对佛手85%醇提物的乙酸乙酯部位进行分离纯化, 从中得到6个化合物, 通过NMR、HR-ESI-MS、UV和IR等方法鉴定其结构为citrusin G (1)、citrusin H (2)、citrusin E (3)、紫丁香酚苷(4)、松柏苷(5)、甲基松柏苷(6)。其中化合物1和2为新化合物, 3~6均为首次从佛手中分离得到。化合物1在TGF-β1诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52e) 肾纤维化体外模型上显示抗肾纤维化活性。

利用硅胶、Sephadex LH-20和半制备高效液相等色谱方法, 对独活(Angelica biserrata) 75%乙醇提取物的二氯甲烷部位进行分离纯化, 从独活二氯甲烷部位中分离得到2个新的香豆素苷。综合运用现代波谱学手段分别鉴定为angelmanetin A (1) 和angelmanetin B (2)。

采用硅胶、MCI gel CHP-20、ODS、Toyopearl HW-40C等柱色谱技术, 并结合TLC和半制备液相等手段对覃怀1号鲜地黄70%丙酮提取物的乙酸乙酯部位进行分离纯化, 得到8个单体化合物。运用现代波谱学技术 (NMR、MS、UV、IR) 鉴定化合物的结构, 分别鉴定为地黄新苷A (1)、osmanthuside B₆ (2)、地黄苷 (3)、异马蒂罗苷 (4)、反式对羟基肉桂酸 (5)、咖啡酸 (6)、阿魏酸 (7)、咖啡酸甲酯 (8)。其中, 化合物1为新苯乙醇苷, 鉴定为地黄新苷A, 化合物2为首次从地黄中分离得到。药理活性研究表明, 化合物2、6和7可以显著增加相对葡萄糖消耗量, 表现出潜在的降糖活性。

本研究成功构建了GLP-2R-HEK293细胞, 通过试验条件参数优化和方法学验证, 建立了基于均相时间分辨荧光免疫分析技术的替度格鲁肽体外生物学活性分析方法, 并用该方法开展了替度格鲁肽原液和注射用替度格鲁肽相对效价检测。研究表明, GLP-2R-HEK293细胞中cAMP含量与替度格鲁肽浓度存在量效关系且符合四参数模型。用该方法检测64%、80%、100%、125%、156%共5个相对效价浓度的替度格鲁肽, 验证结果符合《中华人民共和国药典》2020版四部通则9401的要求。分别对3批替度格鲁肽原液和3批制剂进行相对效价测定, 所得曲线线性、回归性和平行性均通过系统适用性要求, 6批样品的相对效价在83%~105%。本研究建立的替度格鲁肽生物学活性检测方法准确度高、精密度好、操作简便、耗时短, 可用于替度格鲁肽产品的质量控制。

二维核磁共振(2D NMR) 是一种广泛应用于小分子化合物结构解析的技术, 可获得化合物的氢-氢相关、氢-碳单键相关、氢-碳远程相关及氢-氢空间排布等信息, 在小分子化合物结构鉴定中具有不可替代的作用。然而植物化学研究中微量成分的样品量极低, 采用传统采样方法(即均匀采样法) 存在谱图质量较差和耗时过长的问题。通过增大扫描次数会导致单个二维谱的采集时间长达数小时, 这又引起核磁共振仪机时紧张的问题。非均匀采样(non-uniform sampling, NUS) 技术在保证2D NMR谱图质量的同时, 还可较大程度缩短数据采集时间, 这大大提高了二维谱图采集的效率。本文选择附子药材中小分子化合物——附子灵为研究对象, 以均匀采样(uniform sampling, US) 和NUS方法分别采集其¹H-¹³C HSQC、¹H-¹H COSY、HMBC和NOESY谱, 对比两种采样方法的附子灵中三类基团核磁信号的积分值, 证实了NUS技术在小分子化合物结构鉴定中具有提高谱图质量和缩短采集时间的优势; 并在HMBC谱中, 进一步证实了NUS技术能提高二维谱图质量和信号分辨率, 表明NUS技术可提高小分子化合物结构鉴定的效率和可靠性。

口服固体制剂需经过崩解和溶出等过程释放药物才可被机体吸收利用。本文采用可视化技术对国内15家格列齐特缓释片的体外静态释药过程进行连续化表征, 并结合传统的体外释放度试验, 测定格列齐特缓释片在pH 7.4磷酸盐缓冲液介质中的释放曲线, 采用相似因子(f₂) 法评价释放曲线的相似性并根据多种数学模型对释药曲线进行拟合分析。研究结果表明, 14家企业生产的格列齐特缓释片为亲水凝胶骨架片, 对比仿制制剂与参比制剂, 11家企业的仿制制剂与参比制剂的释放曲线相似(f₂ > 50)。其中与参比制剂可视化特征相似的仿制制剂其释放曲线相似。本研究为格列齐特缓释片的体外一致性评价提供了一种全新的思路和方法, 旨在更准确、全面地评估仿制制剂的体外释药行为。

为了探讨两种蜜环菌(Armillaria gallica和A. mellea) 侵染猪苓菌核后对其不同部位的甾体类与多糖含量的影响, 本研究通过检测不同采收年限猪苓菌核生物量以及菌核中侵染部位(隔离腔壁) 与非侵染部位的麦角甾醇、猪苓酮A、猪苓酮B与多糖4种有效成分的含量, 根据生物量与含量的差异和动态变化筛选优质蜜环菌, 获得猪苓的最佳采收年限。采用高效液相色谱法与紫外-可见分光光度法分别测定猪苓菌核中上述4种成分的含量。另外, 对蜜环菌侵染猪苓菌核不同部位多糖合成相关的差异基因进行筛选与分析。研究发现, 不同种类蜜环菌侵染的猪苓菌核随栽培年份的增长, 猪苓菌核生物量与4种成分的含量均存在显著差异, 猪苓隔离腔壁部位的4种成分显著高于其非侵染部位, 最佳采收年限是在栽培后的第3年。转录组学分析表明蜜环菌的侵染能够显著促进猪苓多糖合成相关差异基因高表达。本研究明确了蜜环菌侵染对猪苓菌核化学成分积累的影响, 为探索两者共生机制奠定了基础, 为筛选优质蜜环菌并指导猪苓人工栽培提供了科学依据。