过刊目录病毒是常见的眼内感染病原体之一。对疑诊为眼内病毒性感染的患者进行眼内液病毒核酸检测已成为明确病因的重要手段。同时,确诊为眼内病毒性感染的患者进行眼内液病毒核酸检测,对调整后续治疗方案、判断治疗终点、预测治疗效果等具有重要意义。标准化的眼内液标本采集与实验室病毒核酸检测流程是确保检测结果稳定、可靠、有效的前提。鉴于此,中国医学装备协会眼科专业委员会眼科检验检测学组与中国中西医结合学会检验医学专业委员会眼科疾病实验诊断专家委员会的专家共同制定了《眼内液病毒核酸检测流程及临床规范化应用专家共识》,包括实验室建设标准、具体检测流程、标准化质量控制体系以及临床应用价值等方面,以期促进眼内液病毒核酸检测的规范化与标准化进程,助力眼内病毒性感染相关疾病的精准诊断与治疗。
目的 探讨含角鲨烯的水包油纳米乳剂-热灭活卡介苗(SE-hBCG)对重组巨细胞病毒糖蛋白B(CgB)及冻干人用狂犬病疫苗(Rab)免疫原性的影响。方法 选取145只SPF级6~8周龄雌性BALB/c小鼠进行以下实验。实验1:取25只小鼠,分成SE组、SE-hBCG组、CgB组、SE+CgB组、SE-hBCG+CgB组等5组,每组5只;于实验开始第0、2、4周分别给每只小鼠肌内注射SE、SE-hBCG、CgB、SE+CgB、SE-hBCG+CgB各0.2 ml,末次免疫后2周解剖小鼠。实验2:取120只小鼠,分成PBS组、Rab组、SE+Rab组、SE-hBCG+Rab组等4组,每组30只;于实验开始第0周及第1周每只小鼠分别腹腔注射PBS、Rab、SE+Rab、SE-hBCG+Rab各0.2 ml,于初免后第4、8、10、12、14、35天各解剖5只小鼠。无菌摘取小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液,采用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测抗原特异的IFN-γ或IL-4的斑点形成细胞数(IFN-γ-SFC或IL-4-SFC);取小鼠眼球血,离心后收集血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗原特异的IgG水平。结果 SE-hBCG组诱导小鼠产生CgB特异的IFN-γ-SFC(266.0±87.9)高于SE组(104.5±28.8,P<0.05);SE-hBCG+CgB组诱导小鼠产生抗-CgB IgG抗体滴度(18 800.0±2396.0)及CgB特异的IFN-γ-SFC(440.5±38.4)高于CgB组(抗体滴度为3333.0±737.9,IFN-γ-SFC为189.2±21.4,P<0.05)。SE+Rab或SE-hBCG+Rab初免后第4天可诱导低水平抗-Rab IgG抗体(OD450≤0.2);Rab、SE+Rab及SE-hBCG+Rab组抗-Rab IgG抗体均于初免后第12天达到峰值;SE-hBCG+Rab组于初免后第8、10、14及35天检测的抗-Rab IgG抗体(分别为1700.0±200.0、19 400.0±1661.3、23 000±358.9、23 600.0±6038.2)均高于Rab组(分别为310.0±97.9、6730.0±1655.4、6000.0±1655.6、4400.0±1655.5,P<0.05)。SE-hBCG+Rab组初免后第4、8、14及35天检测的Rab特异IFN-γ-SFC(分别为110.8±52.5、213.0±29.7、105.2±33.7、80.4±36.8)均高于对照组(分别为6.4±3.5、32.2±12.9、11.4±5.1、4.4±2.5,P<0.05)。结论 SE-hBCG可增强CgB及Rab的免疫原性,是一种较好的免疫增强剂。
目的 探讨全胃肠外营养(TPN)对幼鼠心肌的损伤作用及机制。方法 选取24只6~8周龄雄性SD幼鼠,随机分为四组(n=6):正常组、对照组、TPN-7 d组和TPN-14 d组。其中,正常组不置管,自由进食水;对照组经右颈静脉置管,持续输注生理盐水并自由进食水;TPN组经右颈静脉置管,持续输注TPN营养液并禁食禁水。分别在建模第14、14、7、14天处死各组幼鼠,获取心肌组织。采用HE染色观察各组幼鼠心肌组织的病理变化,TUNEL染色观察各组幼鼠心肌细胞凋亡情况,ELISA法检测各组幼鼠心肌组织中丙二醛(MDA)及过氧化氢(H2O2)含量变化,qRT-PCR和Western blotting、免疫荧光染色检测各组幼鼠心肌组织中髓过氧化物酶(MPO)的表达情况。结果 TPN-7 d组中50%的幼鼠心肌组织出现轻度损伤,TPN-14 d组幼鼠的心肌组织均出现轻到重度损伤;与正常组和对照组比较,TPN组心肌细胞凋亡率明显增高(P<0.05),MDA及H2O2含量明显增高(P<0.05),MPO mRNA、MPO蛋白及免疫荧光表达增强(P<0.05);TPN-14 d组心肌细胞凋亡率、H2O2含量、蛋白及免疫荧光表达水平均明显高于TPN-7 d组(P<0.05)。结论 1周以上的TPN可导致幼鼠心肌损伤,其损伤程度随TPN使用时间的延长而加重;氧化应激可能是其损伤机制之一。
目的 探讨lncRNA NEAT1通过激活PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡的影响及可能机制。方法 以0、5、10、20 μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞,构建AD细胞模型。用5 μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞,并于24、48、72 h采用qRT-PCR检测lncRNA NEAT1相对表达水平。取PC12细胞,(1)设置对照组、敲降lncRNA NEAT1组、si-NC组、空载体组及过表达lncRNA NEAT1组,对照组不做任何处理,其余4组分别用含si-lncRNA NEAT1、si-NC、pcDNA3.1-NC、pcDNA3.1-lncRNA NEAT1的Opti-MEM培养基培养并转染8 h,然后使用20 μmol/L Aβ25-35处理。采用qRT-PCR检测lncRNA NEAT1相对表达水平;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况,并以G1和G2期细胞比例反映细胞增殖情况;ELISA法检测细胞上清中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。(2)设置对照组、空载体组及过表达lncRNA NEAT1组,采用Western blotting检测p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达水平。(3)设置对照组、si-NC组、敲降lncRNA NEAT1组、空载体组、过表达lncRNA NEAT1组及过表达lncRNA NEAT1+LY294002组,过表达lncRNA NEAT1+LY294002组细胞转染pcDNA3.1-lncRNA NEAT1后,加入10 μmol/L PI3K通路抑制剂LY294002处理,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 不同浓度的Aβ25-35均可明显抑制lncRNA NEAT1的表达,且呈浓度依赖性(P=0.001)。与空载体组相比,过表达lncRNA NEAT1组lncRNA NEAT1相对表达水平、细胞增殖率、G2期细胞比例明显增高,细胞凋亡率、G1期细胞比例明显降低(P<0.05);与si-NC组相比,敲降lncRNA NEAT1组lncRNA NEAT1相对表达水平、细胞增殖率、G2期细胞比例明显降低,细胞凋亡率、G1期细胞比例明显升高(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与空载体组相比,过表达lncRNA NEAT1组细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平明显降低(P<0.05);与si-NC组相比,敲降lncRNA NEAT1组细胞上清中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平明显升高(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与空载体组相比,过表达lncRNA NEAT1组信号通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt相对表达水平增高(p-PI3K:0.86±0.05 vs. 0.15±0.02,P=0.003;p-Akt:0.86±0.06 vs. 0.11±0.04,P=0.000)。与过表达lncRNA NEAT1组相比,过表达lncRNA NEAT1+LY294002组细胞凋亡率明显升高(9.00%±0.10% vs. 5.13%±0.21%,P=0.004)。结论 lncRNA NEAT1可通过调控PI3K/Akt通路促进Aβ25-35诱导的PC12细胞增殖,抑制PC12细胞凋亡。
目的 探讨孕次、产次、流产、哺乳、初潮年龄、绝经年龄、生育年限等生殖因素与女性2型糖尿病(T2DM)发病风险之间的关系。方法 采用队列研究REACTION研究中兰州地区的资料,于2011年5月开始对兰州市天庆嘉园社区、张广社区和五泉山社区三个社区年龄为40~75岁的女性居民进行流行病学调查,通过调查问卷确定生殖史、月经史。纳入调查资料完整的7094名女性,其中基线糖耐量正常2963名,随访5年内结局事件T2DM的发生情况;采用logistic回归分析和Cox风险回归模型探讨生殖因素与女性T2DM发病风险的关系。结果 较高孕次、产次女性T2DM的发病风险明显增加,尤其是孕次、产次超过3次时,T2DM发病风险增加约1.6倍,且产次对女性T2DM的影响更明显(孕次2、3、≥4次的HR分别为1.08、1.26、1.60,95%CI分别为0.68~1.72、1.07~1.99、1.01~2.45,P=0.000;产次2、3、≥4次的HR分别为1.21、1.60、1.65,95%CI分别为1.08~1.69、1.09~2.78、1.11~2.43,P=0.000)。是否流产并不影响女性T2DM的发病情况,雌激素累积水平(初潮年龄、绝经年龄、生育年限)与女性T2DM也无相关性。哺乳是女性T2DM较好的保护因素,母乳喂养女性T2DM的发病风险降低约30%(HR=0.70,95%CI 0.46~0.96,P=0.001)。结论 孕次、产次是女性T2DM的危险因素,随着孕次、产次增加,T2DM发病风险明显增高;而哺乳是女性T2DM的保护因素,可降低女性T2DM的发病风险。
目的 探讨血浆可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)及尿中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)、尿肾脏损伤分子-1(KIM-1)对成人心脏手术相关性急性肾损伤(CSA-AKI)的早期诊断价值。方法 采用前瞻性病例对照研究,连续纳入2020年3月—2021年2月在陆军军医大学第一附属医院心脏外科行体外循环心脏手术的患者170例,在术前和术后2 h、2 d、7 d分别留取静脉血及尿液,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1水平。按术后7 d是否发生AKI分为AKI组(n=34)和非AKI组(n=136),比较两组血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1水平的差异;采用logistic回归分析CSA-AKI的危险因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆suPAR,尿NGAL、尿KIM-1对CSA-AKI的早期诊断价值。结果 AKI组血浆suPAR水平明显高于非AKI组(P<0.01),AKI组术后2 h的尿KIM-1及术后2 h、7 d的尿NGAL水平均明显高于非AKI组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,术前、术后2 h血浆suPAR,术后2 h尿KIM-1、NGAL诊断CSA-AKI的曲线下面积(AUC)分别为0.683、0.717、0.643、0.631;联合检测术后2 h血浆suPAR+尿KIM-1+尿NGAL的AUC最大(AUC=0.793,95%CI 0.708~0.879,P<0.001),敏感度为64.71%,特异度为82.35%。Logistic回归分析结果显示,在校正了性别,术前左室射血分数(LVEF)、白蛋白(ALB)及术后2 h肌酐、估算肾小球滤过率(eGFR)、血尿素氮(BUN)、KIM-1、NGAL后,术后2 h suPAR仍为CSA-AKI的独立危险因素。结论 血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1均可早期诊断CSA-AKI;单独检测时,术后2 h血浆suPAR的诊断效能最佳;联合检测术后2 h血浆suPAR、尿NGAL、尿KIM-1可进一步提高对CSA-AKI的诊断效能。
目的 探讨血液嗜碱性粒细胞CD16和CD32在哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠(ACO)、慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的表达及其临床意义。方法 选取2019年12月—2020年12月就诊于锦州医科大学附属第三医院的COPD、ACO患者及招募的健康志愿者作为研究对象,分别设为COPD组、ACO组及健康对照组。收集研究对象的性别、年龄、病史、发病年龄、体重指数(BMI)及吸烟史等一般资料并采集外周静脉血,采用流式细胞仪检测嗜碱性粒细胞富集群中CD16和CD32的表达情况,ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果 与健康对照组相比,ACO组、COPD组外周血单个核细胞群中CD16+CCR3+细胞、CD16+CD123+HLA-DR-细胞、CD16+CCR3+CD123+HLA-DR-细胞比例增高(P<0.05),COPD组单个核细胞群中CD32+CD123+HLA-DR-细胞、CD32+CCR3+CD123+HLA-DR-细胞比例增高(P=0.003,P=0.030),ACO组粒细胞群中CD32+CD123+HLA-DR-细胞、CD32+CCR3+CD123+HLA-DR-细胞比例降低(P=0.019,P=0.031)。ACO组粒细胞群中CCR3+细胞和CCR3+CD123+HLA-DR-细胞的CD32平均荧光强度(MFI)较健康对照组降低(P=0.006,P=0.047)。ACO组血浆TNF-α表达水平较健康对照组升高,差异有统计学意义(P=0.036)。结论 嗜碱性粒细胞源CD16和CD32可能在ACO、COPD发病过程中发挥重要作用,TNF-α可能参与了ACO的发病,为后续ACO和COPD的临床治疗提供了新的靶点。
目的 探讨术中个体化血压管理策略对接受腹部大手术的老年患者术后神经认知功能的影响。方法 选取2018年9月—2020年9月于安徽医科大学第二附属医院择期行腹部大手术的老年患者210例,采用随机数字表法分为个体化组和对照组。个体化组术中维持收缩压(SBP)波动在基础值的±10%以内;对照组术中维持SBP≥90 mmHg或SBP下降不超过基础值的40%。记录诱导前(T0)、手术开始(T1),手术开始后30 min(T2)、60 min(T3)、90 min(T4)、120 min(T5)、150 min(T6),以及手术结束时(T7)的SBP、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)和脑电双频指数(BIS)。术前1 d采用简易智能精神状态量表(MMSE)评估患者基础神经认知功能,记录术后第1、3、7天的中文修订版谵妄诊断量表(CAM-CR)评分、MMSE评分,术后第1、3天的疼痛视觉模拟量表(VAS)评分。术后1个月进行修订版认知功能电话问卷(TICS-m)评分,并记录住院时间及严重并发症发生情况等。结果 与对照组比较,个体化组使用去甲肾上腺素患者占比明显增加[72.4%(76/105) vs. 19.0%(20/105),P<0.001],术后引流管放置时间和住院时间明显缩短[(10.9±3.5) d vs. (12.8±5.0) d,P=0.039;(21.0±5.6) d vs. (23.6±6.2) d,P=0.038];两组手术时间、输液总量、出血量、尿量、术后首次通气时间差异无统计学意义(P>0.05)。与T0时比较,两组T1—T7时SBP、MAP和BIS明显降低(P<0.05),T1—T6时HR明显减慢(P<0.05),个体化组T1—T3、T5—T7时DBP明显降低(P<0.05),对照组T1—T7时DBP明显降低(P<0.05)。与对照组比较,个体化组T1—T7时SBP、MAP明显升高(P<0.05),T4时DBP明显升高(P<0.05)。与对照组比较,个体化组术后第1、3天MMSE评分明显升高[(24.0±2.8)分 vs. (22.8±2.7)分,P=0.032;(24.7±2.7)分 vs. (23.6±2.4)分,P=0.037],CAM-CR评分明显降低[(15.4±3.6)分 vs. (17.2±4.2)分,P=0.040;(12.8±2.7)分 vs.(14.2±3.1)分,P=0.028];两组术后第7天MMSE和CAM-CR评分、第1天和第3天VAS评分、1个月TICS-m评分及严重并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 老年腹部大手术患者术中维持SBP波动在基础值±10%以内的个体化管理策略,有助于改善术后早期神经认知功能,缩短住院时间,但对术后1个月的神经认知功能无明显影响。
目的 分析鼻腔鼻窦肾透明细胞癌的临床特征及治疗方案,并探讨其治疗策略及预后。方法 回顾性分析2005—2020年解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科医学部收治的5例鼻腔鼻窦肾透明细胞癌患者的年龄、性别、发病部位、病程时限等临床特征,探讨其治疗方案及预后,并对相关文献进行复习与总结。结果 5例患者均为男性,鼻腔鼻窦肿瘤的发病年龄为49~81岁。5例均伴有反复多量鼻出血,其中1例伴视力下降。发病部位包括上颌窦2例,筛窦和蝶窦1例,筛窦和额窦2例。1例以鼻腔肿瘤为首发症状,全面查体时发现肾癌,后采用B超引导下腹腔灌注及微波消融进行治疗;4例鼻腔肿瘤迟发于肾癌,均在早年进行过肾脏根治性手术。5例患者均行鼻腔鼻窦肿瘤根治性切除,其中3例曾口服靶向药物治疗,1例鼻窦局部曾行放疗,但均无明显效果。截至2020年7月,1例失联,2例死亡,2例带瘤生存。结论 鼻腔鼻窦肾透明细胞癌为少见病,以严重鼻出血和周围临近组织器官侵袭受累为主要临床症状,放疗、靶向药物治疗、免疫治疗均无明显效果,鼻腔根治性手术是治疗本病的有效措施,可以缓解临床症状,提高生存质量。
消化系统肿瘤的发病率和死亡率呈逐年增长趋势,严重威胁着人类的生命健康。近年来研究发现,尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)是一种长链非编码RNA(lncRNA),在胃癌、结直肠癌及食管癌等多种消化系统肿瘤组织或细胞中的表达明显升高,且可通过与miRNAs相互调控而影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、上皮-间质转化、凋亡及耐药等过程。该文综述lncRNA UCA1与miRNAs在胃癌、结直肠癌及食管癌等消化系统肿瘤中的作用机制研究进展,并展望lncRNA UCA1作为新的生物标志物及治疗靶点的应用前景。
心肌纤维化是各种心血管疾病进展至心力衰竭的共同病理过程,多条信号通路共同参与了心肌纤维化的发生发展。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是一种在人体内广泛分布的三聚体复合物,被称为能量开关,涉及体内多种代谢反应的调控及信号通路的调节。AMPK与心肌纤维化相关信号通路网络相互影响,共同介导了心肌纤维化复杂的病理生理过程。干预AMPK信号通路为心肌纤维化的防治提供了一个新的思路。该文综述了AMPK在多种心肌纤维化相关疾病中的作用及可能机制,进一步探讨了其与几种信号通路的相互影响,并针对三种临床常用药物与AMPK的可能关系进行讨论,旨在加深对AMPK在心肌纤维化中作用的认识及其应用于临床治疗的可能性。
外泌体是一种直径为30~150 nm的微囊泡,其内包含蛋白质、脂质、代谢产物、微小RNAs(miRNAs)及长链非编码RNAs(lncRNAs)等活性物质,可通过介导细胞间信息交流、调节肿瘤微环境促进肿瘤的发生发展。miRNAs及lncRNAs是非编码RNAs中重要的组成部分,通过外泌体介导在乳腺癌的发生发展中起重要作用。该文主要总结乳腺癌细胞来源外泌体miRNAs及lncRNAs在乳腺癌进展、微环境及耐药等方面的作用,乳腺癌微环境来源外泌体miRNAs及lncRNAs对乳腺癌发生发展的影响,以及外泌体miRNAs及lncRNAs作为乳腺癌生物标志物的潜力。
内质网自噬是指细胞通过选择性自噬清除内质网的过程。选择性清除应激的内质网以及内质网腔内过度聚集的蛋白质对于内质网的质量控制及细胞稳态非常重要。多种内质网自噬受体介导了内质网与自噬体的特异性结合,促进内质网片段被溶酶体降解。内质网自噬异常与多种疾病密切相关,因此研究内质网自噬的分子机制具有重要的生理及病理意义。该文对内质网自噬的机制及其与疾病的关系进行了综述。
肠易激综合征(IBS)是最常见的功能性肠病,其中腹泻型肠易激综合征(IBS-D)为我国最常见的IBS分型。IBS致病原因众多,其中胆汁酸代谢异常及肠道菌群紊乱为主要的致病因素。IBS-D患者存在胆汁酸代谢异常及肠道菌群紊乱。肠道菌群在胆汁酸合成调控中十分关键,肠道菌群紊乱可能会导致胆汁酸代谢异常。胆汁酸通路(FXR)激动剂可通过调控受体胆汁酸代谢及肠道菌群而缓解IBS-D症状。该文就胆汁酸-肠道菌群与IBS-D的相互作用及其作用机制进行综述。
近年来,抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎及髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体相关疾病在同一患者体内同时或先后出现的报道逐渐增多,学者们将这类疾病统称为MOG抗体病及抗NMDAR脑炎重叠综合征(MNOS)。MNOS在临床表现、治疗、预后等方面不同于单纯的抗NMDAR脑炎或MOG抗体病,但因缺乏认识,临床医师往往容易忽视患者的一些临床表现,将这类综合征诊断为单纯的抗NMDAR脑炎或MOG抗体病,以致延误病情,影响预后。为加强对MNOS的认识,该文从MNOS的病因假说、发病人群特征、临床表现、影像学表现、疾病进程中的抗体特征、治疗方法等方面进行综述,以期为今后对该疾病的诊断及治疗提供参考。