本文通过学习领会中药生产全过程质量控制的内涵要求，综述现代科学技术和传统中医药研究方法，了解中药质量的基础研究现状，探讨建立和完善以临床为导向、符合临床实际和中医药特点的中药质量整体评价体系。本文探讨了以下问题：①中药质量的整体评价如何体现中药功效；②如何量化中药功效和中药药性；③如何理解中药功效和中药药性的关联性及其应用；④中药质量整体评价中，如何体现功效成分的专属性；⑤中药质量整体评价中，如何体现功效成分在生产全过程和体内代谢过程中的量值传递。中药整体质量评价需更好地体现临床相关的安全性和有效性。建议在关注中药化学成分含量的基础上，建立临床相关的质量评价方法，即探索建立体现中药功效的符合临床实际的中药质量整体评价方法。

肠道菌群参与了机体物质代谢、能量交换等多项重要生理活动，宿主与肠道微生物的相互作用已经获得了越来越多学者的关注。黄酮类成分是广泛存在于中药的一类多酚类化合物，具有调节糖脂代谢、抗炎等作用，但是生物利用度较低，这对阐明黄酮类成分的药效物质基础和作用机制提出了挑战。目前，对于黄酮类成分体内代谢行为研究主要集中于肝脏代谢，而最新研究表明，人体中的肠道菌群可与黄酮发生相互作用，一方面肠道菌群对黄酮的化学结构进行生物转化，产生了新的代谢物可能不同于母药的药理活性；另一方面，黄酮成分及其代谢产物又能反过来调节肠道菌群的组成与生理活性，这似乎对黄酮类成分的药效物质基础研究提供了新的思路。本文总结了关于肠道菌与黄酮类成分相互作用的最新研究进展，介绍了天然黄酮类成分在肠道菌作用下的转化类型及代谢特征，同时阐述了黄酮类成分对肠道菌的调节作用；此外，本文对肠道菌作用下黄酮多种药理活性进行了讨论，为深入研究黄酮类成分和其他多酚类天然产物的体内代谢特征及药效作用机制提供了有价值的科学参考。

汉防己甲素（TET）是中药粉防己的主要提取物，临床治疗矽肺已有五十年历史。TET具有明确的抗肺纤维化和治疗肺癌作用。由于新冠肺炎的暴发，发现TET还可能通过阻滞双孔蛋白通道（TPC2）而抑制新冠病毒的复制，有望成为抗新型冠状病毒肺炎的天然药物。本文通过回顾TET作用于肺部的药理活性及其用法用量、相关的毒性风险以及药代动力学特征研究等文献，探讨TET靶向肺部发挥药效以及潜在毒性的物质基础暴露。在此基础上，进一步论证其治疗新冠肺炎的应用前景及其目前存在的问题。

体内屏障及肿瘤细胞上的ABC转运蛋白家族是影响药物生物利用度、跨血脑屏障转运和多药耐药性等的重要因素。中药活性成分会对ABC转运蛋白的功能或表达产生影响，当与化学药物联用时，潜在的中药-化药相互作用会改变化学药物的疗效。本文介绍了ABC转运蛋白及其分布，综述了肠道屏障和血脑屏障上ABC转运蛋白介导的中药-化药相互作用、以及ABC转运蛋白介导的逆转肿瘤多药耐药的中药-化药相互作用，并重点归纳了近五年取得的研究进展。

本研究基于免疫应激大鼠模型，研究补骨脂与赤芍配伍前后对其特异质肝损伤作用的影响及其代谢网络调控机制。采用低剂量脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）注射致免疫应激SD大鼠模型，分别比较补骨脂单用及补骨脂-赤芍配伍给药后，模型动物肝脏谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）的活性及肝脏病理变化；通过UHPLC-QTOF/MS分析不同组别大鼠血清代谢轮廓特征，结合主成分分析法（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘判别分析法（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA），研究补骨脂与赤芍配伍后对特异质肝损伤大鼠血清中内源性代谢产物的影响，并应用HMDB数据库及MetaboAnalyst在线通路富集工具进行生物标志物的鉴定和代谢通路富集分析。结果显示，对于LPS致免疫应激大鼠模型，补骨脂组AST、ALT均显著升高（P < 0.01），肝脏切片可见明显的病理损伤，而其配伍赤芍后肝损伤作用显著降低。代谢组学分析显示赤芍主要通过调节花生四烯酸代谢和甘油磷脂代谢等信号通路改善补骨脂致肝毒性大鼠体内的血清代谢异常。

建立天麻药材中6种成分的高效液相色谱方法，并采用双标线性校正法计算保留时间，考察预测保留时间的准确性和色谱柱符合率，用于辅助色谱峰的定性分析。选用24根不同品牌和型号的C₁₈色谱柱，测定天麻中6种成分的保留时间，计算平均值得到标准保留时间（SRT），以峰3巴利森苷E和峰6巴利森苷A两个成分为参照物，使用双标线性校正法（LCTRS）预测保留时间，并在4根其他品牌和型号的C₁₈色谱柱上进行方法的验证。同时以巴利森苷E为参照物，计算校正因子，使用相对保留时间法（RRT）预测保留时间。比较双标线性校正法和相对保留时间法的优劣。结果表明，与相对保留时间法相比，双标线性校正法具有更高预测保留时间准确率和色谱柱符合率，色谱柱的适用范围更广。双标线性校正法具有更好地辅助色谱峰定性作用，具有广阔的应用前景。

为研究白芷配伍川芎前后其中4种香豆素类化合物（佛手柑内酯、氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素）在大鼠体内的药代动力学行为变化，建立超高效液相色谱-荧光检测法（UPLC-FLD法）并对大鼠单次给药后不同时间点血浆中的药物浓度进行测定，使用DAS 3.2.8求算药物的药代动力学参数，SPSS 20.0软件分析白芷配伍川芎前后主要药代动力学参数的变化。结果表明：配伍川芎后，佛手柑内酯、氧化前胡素及欧前胡素的药时曲线下面积（AUC_{0-24 h}）分别增加177.2%、97.14%和54.43%，AUC_0-∞分别增加282.3%、104.2%和75.40%，清除率（CL_Z/F）分别降低68.26%、51.08%和43.98%；4种香豆素类化合物药峰浓度（C_max）均显著升高；佛手柑内酯的表观分布容积（V_Z/F）显著减小。该结果表明川芎可以促进白芷中香豆素类化合物的吸收，同时减缓其在体内的消除速率，提高其生物利用度。本研究中动物实验方案已获得北京中医药大学实验动物伦理委员会的批准（批准号：BUCM-4-2020083105-3072）。

本研究旨在探讨芍药苷对结肠炎小鼠肠道菌群失调及胆汁酸代谢紊乱的调节作用及相关机制。经西安交通大学伦理委员会审议同意并批准后（批准号：XJTU2019-679），采用3%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导急性结肠炎小鼠模型，同时给药组连续灌胃芍药苷（25、50 mg·kg^-1·d^-1）或5-氨基水杨酸（50 mg·kg^-1·d^-1）7天。实验期间每日监测小鼠体重、粪便黏稠度及便血情况。采用HE染色观察结肠组织病理改变，ELISA检测结肠炎性因子，荧光素异硫氰酸酯（FITC）-葡聚糖检测肠通透性，16S rDNA高通量测序分析肠道菌群组成，最后采用靶向胆汁酸代谢组学方法检测粪便中胆汁酸分子含量的变化。结果表明：芍药苷显著抑制了结肠炎小鼠结肠组织中致炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平，促进了抑炎因子IL-10的释放；并且芍药苷可降低结肠炎小鼠的肠通透性，改善肠屏障功能损伤。肠道菌群分析结果显示芍药苷显著改善了DSS引起的小鼠肠道菌群紊乱，尤其提高乳酸杆菌的相对丰度，降低拟杆菌的相对丰度。此外，芍药苷治疗后显著逆转结肠炎小鼠粪便中胆汁酸分子的代谢紊乱（主要包括胆酸、脱氧胆酸、石胆酸以及β-鼠胆酸）。最后，对肠道菌属与粪便中胆汁酸分子水平进行相关性分析发现，乳酸杆菌与具有维持肠道稳态作用的脱氧胆酸和石胆酸呈显著正相关。因此，芍药苷可能通过重塑结肠炎小鼠肠道菌群结构，调节菌群介导的胆汁酸代谢紊乱，进而修复肠屏障损伤、降低肠道炎症，最后对结肠炎小鼠发挥保护作用。

建立简便、灵敏的气质联用（GC-MS）法测定大鼠血浆中β-榄香烯浓度，并研究香茅草提取物在大鼠体内的药代动力学特征。血浆样品采用0.5倍体积正己烷液液微萃取的前处理方法。DB-5ms色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；程序升温，载气为氦气，流速为0.15 mL·min^-1；进样量为2 μL。采用电子轰击离子源和单离子监测模式，电子轰击能量70 eV，选择监测的离子为m/z 128（内标萘）和m/z 93（β-榄香烯）。大鼠分别灌胃和静脉给药香茅草提取物（合β-榄香烯55 mg·kg^-1），使用小动物自动采血技术收集和制备血浆。结果血浆中β-榄香烯在1.0~250 ng·mL^-1浓度内线性关系良好（r=0.997），定量下限为1.0 ng·mL^-1，准确度为-4.47%~-0.85%，提取回收率在56.02%~66.89%之间，无明显基质效应（94.28%~108.63%）。大鼠灌胃香茅草提取物，β-榄香烯主要药代学参数AUC_0-t为（23.56±4.40）ng·mL^-1，t_max为（1.67±0.58）h，C_max为（7.36±0.69）ng·mL^-1，MRT_0-t为（2.76±0.27）h，t_1/2z为（2.73±1.36）h，V_z为（7.39±3.18）L·kg^-1，CL_z为（1.95±0.51）L·h^-1·kg^-1，绝对生物利用度约为8.78%。该方法简便、准确，灵敏度高，适用于香茅草提取物中β-榄香烯在大鼠体内的药代动力学特征研究。所有动物实验过程和动物关怀均得到中国中医科学院中药研究所伦理委员会的批准。

通过“代谢产物-效应检识”模式进行相关性分析，初步明确菟丝子在体内发挥拟雌激素作用的直接作用物质。以去势（卵巢摘除）雌性大鼠为研究对象，灌胃给予菟丝子的95%乙醇提取部位、大孔树脂40%乙醇洗脱部位、正丁醇萃取部位作为给药部位，采用UPLC/Q-TOF-MS技术建立不同给药部位、不同给药次数的血清指纹图谱。同时检测血清中雌二醇（E₂）、促卵泡激素（FSH）、促黄体生成素（LH）水平，并进行双变量相关分析和灰关联度分析，筛选雌激素效应组分。结果表明，含药血清中发现9个与雌激素效应高度相关的体内直接作用物质，分别是：金丝桃苷、紫云英苷、甲基化槲皮素葡萄糖醛酸苷、槲皮素-二葡萄糖醛酸苷、槲皮素、芹菜素、异槲皮苷、山柰酚葡萄糖醛酸苷和山柰酚。基于血清谱效相关性的研究思路可初步发现菟丝子拟雌激素作用的体内直接作用物质。为菟丝子雌激素作用药效物质的揭示和质量标志物的确证提供了初步参考。本实验获得了哈尔滨商业大学伦理委员会的批准（批准号：HSDU2020-065）。

成纤维细胞生长因子受体（fibroblast growth factor receptor，FGFR）作为受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinases，RTKs）家族的成员，通过与配体成纤维细胞因子（fibroblast growth factors，FGFs）结合并激活下游信号通路参与多种生物学过程的调控，如细胞增殖、迁移、抗凋亡和血管生成等。FGFR基因扩增、错义突变、致癌融合引起的表达及调控异常与多种癌症发生发展有关，FGFR已成为癌症治疗中一个重要的潜在靶点。目前，这些研究大多集中在FGFR1~3上，然而越来越多的证据表明，FGFR4在多种肿瘤的发生和抗肿瘤耐药性的治疗中发挥着重要而独特的作用。FGF19-FGFR4信号通路的异常已被证实是肝癌的致癌因素。多个FGFR4选择性抑制剂已经进入临床试验，因此FGFR4是一种治疗FGF19-FGFR4信号异常导致的肝癌的有前途的靶点。本综述将重点介绍FGFR4在肝癌中的作用，包括对FGFR4的结构和配体、下游信号通路、在肝癌中的异常激活以及小分子FGFR4抑制剂、FGFR4单克隆抗体和联合免疫治疗的研究进展进行总结。

心肌缺血再灌注损伤是心血管疾病研究中的难点之一，细胞中过多活性氧（reactive oxygen species，ROS）的积累是其主要致病原因。通过抗氧化药物降低ROS水平并保护心肌细胞是目前研究的热点。本文对近年来抗氧化药物在心肌缺血再灌注损伤中的相关研究进行了综述。

逐年增加的研究发现衰老与肿瘤之间存在高度关联：细胞衰老可抑制肿瘤发生；衰老细胞改变细胞微环境，促进肿瘤细胞的增殖和转移。衰老和肿瘤在其发生发展过程中享有共同的细胞信号通路，这些信号通路的失调会导致衰老和肿瘤的发生和发展。因此，可平衡调节这些通路的药物可能具有抗衰老和抗肿瘤作用。一些中药有效成分在衰老和肿瘤相关的多种信号通路和分子靶标上均有作用，且不良反应较少。因此，本文对衰老和肿瘤中交叉的细胞信号进行了回顾，并在此基础上总结了目前具有抗衰老和抗肿瘤特性的中药有效成分，以及这些成分在交叉通路中的潜在机制，旨在为中药有效成分治疗衰老和肿瘤提供新的研究策略和视野。

抑郁症的发病率不断上升，但其病理机制仍有许多未知之处。越来越多的证据表明，抑郁症的发生发展与肠道菌群的变化存在密切关系。然而，由于不同环境因素造成个体间菌群组成的巨大差异，研究者通常需要较大量的样本才能得到可靠结果。而实验动物模型因其具有高度一致性的背景、可控的实验环境及可人工干预的特点，在疾病发生机制及药物作用机制研究中发挥着重要作用。选择合适的实验动物模型不仅可用于模拟人类抑郁症疾病的临床症状表现，还可揭示临床特征与肠道菌群改变的因果关系。本文对粪菌移植技术的发展历程及其应用、菌群与抑郁症之间的密切联系、人源化粪菌移植实验动物模型在抑郁症研究中的应用，以及人源化菌群制备的方法和关键技术进行综述，为人源化粪菌移植实验动物模型在抑郁症发病机制研究及抗抑郁药物作用机制研究方面的合理应用提供参考依据。

缺血性心脏病（ischemic heart disease，IHD）是威胁人类健康的主要原因，全球发病率和死亡率逐年升高，其主要病因是由于冠状动脉的狭窄或阻塞。线粒体功能异常是缺血性心脏病和再灌注损伤的主要病理基础，适度的线粒体自噬可以选择性清除受损蛋白质和细胞器维持细胞内环境稳定，对于心肌细胞的稳态非常重要。天然药物在缺血性心脏病中应用广泛、作用明显，近年来越来越多的研究表明有关天然药物可通过调控线粒体自噬水平，达到降低线粒体损伤、改善心肌缺血、减轻缺血性心脏病的目的。本文就近年来调节线粒体自噬的抗缺血性心脏病的天然药物进行综述。

干扰素基因刺激因子（stimulator of interferon genes，STING）作为参与固有免疫反应的关键信号转导分子，被来自病原体和宿主的胞质DNA触发，在诱导Ⅰ型干扰素和促炎性细胞因子分泌、防御病毒及胞内细菌感染、调节体内自发性抗肿瘤免疫反应产生过程中发挥重要功能。STING激动剂能够有效治疗病原体感染和癌症。近10年来，对STING及其激动剂的研究发展迅速。本文从STING的结构和激活、cGAS-STING通路的机制等方面概述了STING的最新研究进展，尤其对STING激动剂进行了概述，重点分析了STING与其激动剂复合物的晶体结构以及STING激动剂的构效关系，并总结了研发STING激动剂所面临的严峻挑战，试图为设计和发现小分子STING激动剂提供思路。

真菌感染对人类健康的威胁呈螺旋式上升，尤其临床中侵袭性真菌感染影响重症或免疫功能改变的患者，感染的发病率和死亡率很高。药物治疗中，脱靶毒性以及耐药真菌问题日益严峻。随着生物材料和纳米技术广泛应用于生物医药，针对抗真菌药物展开了很多研究，如成功上市的两性霉素B脂质体制剂极大降低了药物肾脏毒性。纳米载体结构与其微观的物理化学特性，可降低药物的毒副作用，提高稳定性，改善药物的体内生物利用度，由特异性结构修饰实现组织的选择性作用于靶组织和靶细胞。本文针对抗真菌药物的临床应用和局限性，围绕这些药物研究的纳米药物系统包括脂质体、类脂囊泡、脂质纳米粒、微乳、聚合物纳米粒、树枝状聚合物和无机纳米载体等进行了综述。纳米技术和纳米药物递释系统为提高抗真菌活性、克服抗真菌药物耐药性的新型制剂的研发提供了有希望的策略。

纳米晶体药物具有无需载体材料、易工业化和剂型多样化，且能显著提高难溶性药物的溶解度和生物利用度等优势，已经有多种药物上市。传统的纳米晶制备技术存在制备效率低和最小可实现粒径的工艺限制的问题。随着药物制剂制备技术的进步，纳米晶体药物的制备技术也在不断提升，不断涌现出新的制备技术。新技术的出现大大缩短了工艺时间，使制备更小粒径的纳米晶体药物成为可能。本文从“Top-down”技术、“Bottom-up”技术及组合技术三个方面对纳米晶体药物的制备技术，尤其是高重力控制沉淀法、微射流反应技术和多种组合技术等新型制备技术进行了综述，并对新型制备技术的发展进行了展望，以期为纳米制剂相关研究提供借鉴。

本研究旨在探讨RCE-4与非甾体抗炎药联用抗宫颈癌Ca Ski细胞增殖的协同作用及分子机制。采用MTT法和CalcuSyn V2.0软件检测细胞增殖并计算联合用药指数（combination index，CI）；Western blot法分析蛋白表达；Jc-1染色检测线粒体膜电位；吖啶橙/溴化乙锭（acridine orange/ethidium bromide，AO/EB）染色检测细胞凋亡；免疫共沉淀法检测Bcl-2-Beclin 1复合体的相对含量。结果显示，塞来昔布与RCE-4的协同效果最好，最佳协同指数为0.32。二者联用能显著抑制环氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）和核转录因子κB（nuclear transcription factor kappa B，NF-κB）的表达，促进非甾体抗炎药活化因子1（non-steroidal anti-inflammatory drugs activity gene-1，NAG-1）的表达。同时，联用也显著抑制了微管相关蛋白轻链3（microtubule-associated protein 3，LC3）-Ⅱ、Beclin 1、p62以及自噬相关基因（autophagy-related gene，ATG）3/4B/5/7/14的表达，促进了线粒体膜电位的去极化，显著抑制了B淋巴细胞瘤-2（B cell lymphoma-2，Bcl-2）和B淋巴细胞瘤-xl（B cell lymphoma-xl，Bcl-xl）的表达，促进了Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、Bcl-2/Bcl-xl相关死亡启动因子（Bcl-2/Bcl-xl-associated death promoter，Bad）以及活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase，cleaved-caspase）3/7/9的表达。另外，二者联用也极显著地抑制了Bcl-2-Beclin 1复合体的形成。综上所述，RCE-4与塞来昔布联用可能通过抑制Bcl-2-Beclin 1复合体的形成，抑制RCE-4诱导的自噬并增强其凋亡，从而提高RCE-4对宫颈癌Ca Ski细胞的敏感性。

使用不同方法建立固定比率（fixed ratio，FR）为10（FR10）的大鼠吗啡药物辨别模型以探究何种方法可缩短建模时长并进行剂量反应关系测试和半数有效剂量（median effective dose，ED₅₀）值测定。动物福利和实验过程均遵循上海益诺思生物技术股份有限公司动物伦理委员会的规定。40只大鼠进行食物训练，将食物训练成功的动物分为2组[组1（单杆+双杆训练）、组2（双杆训练）]，每组均腹腔注射5.6 mg·kg^-1的吗啡或生理盐水进行辨别训练，辨别训练成功的动物给予不同剂量的吗啡进行替代，探究辨别效应和剂量之间的关系，并计算ED₅₀值。结果显示：食物训练阶段：有34只大鼠食物训练成功进入到辨别训练；辨别训练阶段：组1中首次满足辨别训练标准的动物共14只，约需（40.71±2.93）天，组2中首次满足辨别训练标准的动物共13只，约需（51.15±2.55）天，由此可见使用单杆+双杆训练的方法优于仅使用双杆训练，且与组1相比有统计学差异（P < 0.05）；替代测试阶段：共17只大鼠完成吗啡所有剂量的替代，不同剂量吗啡（0、0.1、0.5、1、3、5.6和10 mg·kg^-1）替代所产生的伴吗啡杆反应百分数分别为（9.56±3.13）%、（9.01±5.83）%、（13.82±7.95）%、（29.04±10.13）%、（41.70±10.65）%、（85.36±7.16）%、（94.56±2.76）%，表明吗啡剂量在0~10 mg·kg^-1之间诱导的辨别刺激效应呈剂量依赖性增加，产生很好的剂量反应曲线，通过线性拟合求得吗啡ED₅₀值为4.74 mg·kg^-1。上述结果表明，通过不同方法成功建立了FR10吗啡药物辨别模型，使用单杆+双杆训练的方法优于仅使用单杆训练且可相对缩短辨别训练周期。

生物类似药是在质量、安全性和有效性方面与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品。BAT1706是百奥泰生物制药股份有限公司研发的一款贝伐珠单抗生物类似药，可与血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGF-A）特异性结合，阻断其与内皮细胞表面VEGF受体（VEGF receptor，VEGFR）的结合，阻断配体-受体介导的下游信号通路，抑制内皮血管新生，从而抑制肿瘤生长。采用多种分析技术对BAT1706与原研药Avastin^®的体外生物学功能活性进行了全面对比分析，以评价两者的相似性。结果显示，BAT1706与不同形式VEGF-A的结合活性同Avastin^®高度相似；两者中和VEGF-A的生物学活性等效，抑制VEGF-A介导的VEGFR-2自磷酸化活性高度相似；此外，BAT1706与不同类型Fcγ受体的亲和力同Avastin^®高度相似，且两者均不能诱导肿瘤细胞产生抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）及补体介导的细胞毒性作用（complement-dependent cytotoxicity，CDC）效应。本研究证明了BAT1706与Avastin^®在体外生物学功能活性方面的相似性。

黄芪多糖是黄芪中免疫调节活性主要物质，由于多糖结构难于精确测定，限制了黄芪多糖体内分子作用机制的深入研究。“多糖受体学说”认为免疫活性多糖分子中存在一种或多种寡糖片段“活性中心”，因此将黄芪多糖降解为寡糖，从寡糖水平研究多糖的活性中心，为黄芪多糖结构及作用机制研究提供了新思路。本文采用内切α-1，4-葡聚糖酶酶解，通过单因素试验和正交试验确定最佳降解条件，将本课题组已制备的免疫活性多糖APS-Ⅱ（10 kDa组分）降解为不同聚合度寡糖组分，通过聚丙烯酰胺凝胶色谱制备及特异性和非特异性免疫细胞实验，对不同寡糖组分进行免疫活性筛选。动物福利和实验过程均遵循山西大学动物伦理委员会的规定。结果发现，与免疫活性多糖APS-Ⅱ相比，不同寡糖组分在不同免疫活性上有明显差异。本文通过寡糖水平研究黄芪多糖的不同免疫活性，为进一步阐明黄芪多糖结构与功能奠定了基础，丰富了多糖受体学说，也为黄芪多糖的开发提供了新思路。

DNA结合抑制蛋白-1(inhibitor of DNA binding 1，ID1)在结肠癌、肺癌和乳腺癌等多种肿瘤组织中异常高表达，并与肿瘤恶性进展及患者不良预后密切相关。已有研究发现，ID1在结肠癌中可以维持肿瘤细胞干细胞样特性，介导肿瘤干细胞耐药，但其分子生物学机制并未被完全阐明。通过免疫印迹、基因集富集分析、双荧光素酶报告基因检测及实时定量PCR，本研究发现ID1可从转录水平上调维持肿瘤细胞干性的关键转录因子八聚体结合蛋白(octamer binding transcription factor，OCT4)的蛋白表达及信号通路活性。利用体外成球实验，本研究证明过表达OCT4可逆转敲低ID1对干细胞成球能力的抑制作用。在进一步的机制研究中，利用JASPAR及GEPIA数据库，本研究预测并得到能够负向调控OCT4转录的转录抑制因子叉头蛋白D3(forkhead box D3，FOXD3)。通过免疫共沉淀、免疫荧光共聚焦及实时定量PCR等方法，本研究最终证明ID1通过与转录抑制因子FOXD3相互作用，抑制其活性从而上调OCT4的转录及信号通路活性。综上，本研究为结肠癌干细胞的分子调控机制提供了新的理论基础，研究中发现的ID1-FOXD3蛋白-蛋白相互作用为结肠癌治疗提供了新的潜在干预靶点。

肿瘤耐药是多机制、多因子参与的复杂生物学过程，而肿瘤细胞抗凋亡是导致其耐药的重要原因。前期研究显示，Runt相关转录因子3(Runt-related transcription factor 3，RUNX3)在胃癌赫赛汀耐药细胞中与DNA的结合活性显著增强，然而其活性变化是否与耐药有关，尚不明确。本实验以赫赛汀耐药细胞(NCI N87R)为对象，采用CRISPR/Cas9构建RUNX3敲除细胞株(△RUNX3/NCI N87R)，探究RUNX3在赫赛汀耐药中的作用及其潜在机制。在此基础上，基于非标记定量蛋白质组学研究△RUNX3/NCI N87R细胞蛋白质表达谱；采用倍数变化及显著性水平筛选差异表达分子；利用GeneAnalytics数据库通路富集分析；使用DAVID Bioinformatics Resources数据库基因本体分析；基于STRING数据库构建蛋白-蛋白互作网络。结果表明，敲除RUNX3使NCI N87R细胞对赫赛汀的敏感性增加。蛋白质组数据显示，577种基因在△RUNX3/NCI N87R中的表达显著改变，其中上调191种、下调386种。根据通路富集率及显著性水平，自噬、细胞周期、凋亡、线粒体脂肪酸β氧化、神经源性位点notch同源蛋白1(neurogenic locus notch homolog protein 1，NOTCH1)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)、Hedgehog及DNA损伤响应信号变化显著(P < 0.05)，表明敲除RUNX3干扰耐药细胞多条通路。免疫印迹证实，自噬相关蛋白(autophagy-related protein，ATG)13、7及BECN1在△RUNX3/NCI N87R中的表达显著增加，而细胞周期调节分子丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Chk2(serine/threonine-protein kinase Chk2，CHEK2)及凋亡调节分子Bcl-2(apoptosis regulator Bcl-2，BCL2)显著下调；与NCI N87R细胞相比，磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT (p-AKT)在△RUNX3/NCI N87R中的表达显著降低(P < 0.01)，且赫赛汀能够降低p-AKT水平，表明敲除RUNX3改变了耐药细胞周期、增加赫赛汀对p-AKT的抑制作用，促进其自噬并诱导凋亡，提示RUNX3可能是逆转或降低胃癌赫赛汀耐药的潜在靶标。

头孢类药物广泛用于感染疾病的治疗。上市头孢药物结构的差别，主要在其C-7位氨基侧链以及C-3位基团的不同。本研究尝试性地选取C-3位基团不同的4种头孢母核，采用C-7位氨基引入简单基团修饰的策略，设计并合成了5个系列25个头孢卤代酰基化分子，测试了抗人致病菌、抗毕赤酵母菌、抗柑橘溃疡病菌及病原真菌的活性。生物活性测试结果表明，大多数分子具有抗人致病菌活性，其中7个化合物，包括TM1f，对8株人致病菌的抑制活性强于或相当于上市药物头孢噻吩、头孢西丁钠和头孢唑肟钠；TM1s抑制柑橘褐斑病菌Al.6的活性强于头孢噻吩，与阳性对照咪鲜胺相当，首次发现头孢类分子具有强抗柑橘病原真菌活性。TM1f和TM1s值得进一步研究。

运用MCI Gel CHP-20、Sephadex LH-20、ODS、半制备高效液相等色谱技术，从姜皮正丁醇部位中分离得到3个二苯庚烷类化合物，通过MS和NMR波谱学技术鉴定其结构为：(2S，2'S，3R，3'R，4R，4'R，6R，6'R)-6，6'-bis ((S)-1-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)ethyl)-2，2'-bis (4-hydroxy-3-methoxyphenyl)octahydro-2H，2'H-[3，3'-bipyran]-4，4'-diol (1)、(E)-7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1-(4-hydroxyphenyl)hept-4-en-3-one (2)和alpinin B (3)，化合物1为新化合物，化合物2、3为首次从姜皮中分离得到。

探究并明确含马兜铃酸类毒性物质药材中马兜铃酸类成分的种类、数量及含量，以进一步确保此类药材及其相关产品的使用安全。本研究选取了朱砂莲、杜衡、关木通、马兜铃、青木香、天仙藤、寻骨风、广防己和细辛9种含马兜铃酸类毒性物质的中药材，采用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱仪(HPLC-Q-TOF-MS)结合高效液相色谱-二极管阵列检测定性分析9种药材中的马兜铃酸类成分。选用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)分离，以乙腈-0.2%乙酸水为流动相，梯度洗脱，质谱使用ESI正离子模式，分析马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ、Ⅲa、Ⅳa、Ⅶa，马兜铃内酰胺Ⅰ、Ⅱ 7个对照品的质谱电离规律，并利用此规律对9种药材样品中筛选出的紫外光谱图与7个对照品光谱相似的成分进行结构解析。应用高效液相色谱紫外检测法(HPLC-UV)对鉴定出的马兜铃酸类成分采用外标法进行定量分析，检测波长为254 nm。结果显示：从9种药材中共筛选和鉴定出22个马兜铃酸类成分，包括11个马兜铃酸和11个马兜铃内酰胺。马兜铃酸类成分的种类在朱砂莲和青木香药材中最多，有15种，其次为马兜铃和关木通，为14种，成分的总量在朱砂莲和关木通中最高，在8.91~13.40 mg·g^-1之间；在杜衡中最少，只有2种成分，总量在0.10 mg·g^-1以下。本研究系统性地筛选和明确了含马兜铃酸类毒性物质中药材中马兜铃酸类成分的种类、数量及含量，为后续此类药材的网络毒性分析和体外毒性实验，以及其中马兜铃酸类成分在质量标准中的安全性控制提供了有价值的依据。

吉西他滨(gemcitabine，GEM)为临床治疗非小细胞肺癌的常用药物。然而，用其反复化疗后依然肿瘤迁延，治疗效果不佳，究其原因是化疗使得机体免疫力下降，肿瘤微环境(tumor microenvironment，TME)中介导免疫逃逸的细胞聚集，T细胞耗竭，使得整体偏向于免疫抑制状态，导致了肿瘤的发展。本研究中的动物实验获得江苏省中医药研究院伦理委员会的批准。在体外实验中观察了微粒型灵芝孢子粉β-葡聚糖(micro-particulate Ganoderma lucidum spore β-glucan，PGSG)对巨噬细胞的免疫调节作用，同时建立了小鼠皮下Lewis lung cancer (LLC)模型，口服PGSG联合GEM化疗给药以观察抗LLC肺癌的作用；流式细胞术分析小鼠肿瘤与脾脏中辅助性T细胞-1(helper T cell-1，Th1)与细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)的比例，以及髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells，MDSC)、肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages，TAM)与调节性T细胞(regulatory cells，Tregs)的比例。结果显示，PGSG上调了巨噬细胞CD40、CD86、CD80和主要组织相容性抗原(major histocompatibility antigens complex，MHC-Ⅱ)的表达，增强其对中性红的吞噬能力，增加炎症因子的释放。在体内实验中发现，与单独化疗相比，联合给药能够明显延缓小鼠肿瘤发展，显著降低肿瘤与脾脏中MDSC (CD11b⁺Gr-1-PE⁺)、M-MDSC (CD11b⁺Ly6G^-Ly6C^high)、Tregs (CD4⁺Foxp3⁺)和M₂(F4/80⁺CD206⁺)细胞比例，同时Th1(CD4⁺IFN-γ⁺T细胞)与CTL (CD8⁺IFN-γ⁺T细胞)明显增加。这提示PGSG能够重塑免疫抑制微环境，增强吉西他滨的抗肺癌效果。

本文主要研究纳米粒对可溶性微针机械性能的影响，从而构建优异机械性能的可溶性微针。采用不同种类的纳米材料(碳酸钙、羟基磷灰石、二氧化硅)、粒径(20、60、100 nm)和处方质量占比(2%、6%、10%)，与微针基质材料[聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、乙烯基吡咯烷酮-乙酸乙烯酯共聚物(PVP/VA)]共混形成可溶性微针。通过纳米压痕仪研究纳米粒对微针弹性模量以及硬度的影响。纳米碳酸钙对PVP微针的弹性模量与硬度均有显著性提高(P < 0.001)；纳米羟基磷灰石对PVP/VA微针的弹性模量与硬度均有显著性提高(P < 0.001)。当纳米羟基磷灰石粒径为20 nm时，PVP/VA微针的弹性模量为(10.6±1.0)GPa，硬度为(0.47±0.06)GPa，且随纳米粒粒径增大，微针机械性能降低；当纳米羟基磷灰石质量占比从2%至6%，PVP/VA微针的弹性模量与硬度得到显著性提高(P < 0.001)，但继续提高占比对微针的影响不大。纳米羟基磷灰石增强的PVP/VA可溶性微针对完好皮肤无刺激性影响，对破损皮肤有轻微刺激性，但在72 h后完全消失。动物实验已获得浙江工业大学实验动物福利与伦理委员会批准。因此，纳米羟基磷灰石增强的PVP/VA可溶性微针具有良好的生物安全性。综上可知，根据给定的基质材料构建微针时，需选择合适的纳米粒、粒径以及处方质量占比，才能有效且显著地提升微针机械性能。

龙胆科龙胆属Gentiana秦艽组(Sect.Cruciata)粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为中药秦艽及藏药“解吉那保”()基原植物之一，含有龙胆苦苷等环烯醚萜类活性成分，具有重要的药用价值。本文对粗茎秦艽转录组进行测序分析，分别构建其根、茎、叶、花转录组数据库，并对可能参与编码环烯醚萜苷类合成通路中关键酶的部分unigene进行qRT-PCR验证。结果如下：①共得到159 534条unigene，平均长度为679。根据GO功能分类，可将unigene分为3大类67分支；基于KOG功能可将unigene分为25类；② KEGG代谢通路分析发现粗茎秦艽中215条unigene参与到20个次生代谢标准通路中，有305条unigene参与编码环烯醚萜苷类合成通路中的28个关键酶，且在不同部位中的表达存在差异；③ qRT-PCR与RNA-Seq结果基本吻合，实验涉及的HMGS、DXS、MCS、GPPS、G10H、7-DLNGT及STR 7个基因皆为地上部位(茎、叶、花)的相对表达量高于地下部位(根)。环烯醚萜类为中药秦艽、龙胆、当药及青叶胆等药材的指标性成分及活性成分之一，本工作可为应用生物技术方法获取环烯醚萜类活性成分或其中间体，探讨药用植物次生产物累积规律、不同生态型品种的质量评价及药材道地性形成机制研究等提供基础科学资料。

以西藏大花红景天为研究材料，利用生物信息学和实时荧光定量PCR技术对RcUDPGTs基因家族中18个成员的序列和表达模式进行分析，并构建RcUDPGT(JX228125.1)的诱饵载体以筛选拟南芥酵母文库中互作蛋白。结果表明，RcUDPGTs基因核苷酸序列长度为1 400 bp左右，编码452~498个氨基酸。一级结构中N端序列保守性较低，C端的保守性较高，均含有尿苷二磷酸葡萄糖结合结构域(PSPG盒)。蛋白质三级结构均呈现一定相似性，具有UDP糖供体识别中心，且含有多个可磷酸化位点。qRT-PCR结果显示RcUDPGTs基因在根、茎、叶三个器官中均有表达，且其表达量能够受到低温/紫外和多种植物激素(脱落酸、生长素、茉莉酸甲酯)的调控，但表达模式差异较大。与阴性对照相比，RcUDPGT基因没有自激活活性和细胞毒性，并筛选到两个互作明显的拟南芥基因AtKCR1(AT1G67730.1)与AtSNL4(AT1G70060)。以上结果丰富了RcUDPGTs基因的研究成果，为了解大花红景天与高原环境的适应性机制，同时为深入研究根部次生代谢产物的合成和积累提供一定理论基础。

1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate synthase，DXS)是萜类化合物前体物质合成途径2-C-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(2-C-methyl-D-erythritol 4-phosphate，MEP)途径的第一个限速酶，在甘草次生代谢过程中发挥着重要的调控作用。本课题组在前期转录组研究中发现DXS基因表达水平与甘草的指标性成分甘草酸的含量呈负相关，因此本文拟通过毛状根培养体系，从基因过表达和沉默两方面开展研究，解析DXS基因对甘草酸生物合成的调控作用。本文克隆了甘草DXS基因(GenBank注册号：MN158121)；采用基因融合法构建了过表达载体pCA-DXS；根据DXS第一外显子设计sgRNA序列，构建了CRISPR/Cas9基因编辑载体pHSE-DXS；以甘草胚轴为外植体材料，采用发根农杆菌介导法诱导了DXS基因过表达和表达沉默的甘草毛状根体系。同时，诱导了野生型甘草毛状根及含空质粒的阴性对照毛状根。采用UPLC法测定各甘草毛状根样品中甘草酸的含量，结果显示：DXS基因沉默组毛状根样品中甘草酸含量显著高于野生型和阴性对照组，而DXS基因过表达甘草毛状根样品中甘草酸含量则显著低于野生型和阴性对照组。本文通过逆向遗传学策略，从基因过表达和沉默两个方面证实了DXS基因对甘草酸生物合成的负调控作用，为解析DXS基因在萜类化合物代谢中的作用提供了理论依据，也为进一步构建甘草酸生物合成分子调控网络奠定了基础。