植物细胞外囊泡（extracellular vesicles，EVs）是一种由植物细胞分泌的，以脂质双层为基本骨架、包裹各种蛋白和核酸等活性物质的膜性小泡，对植物的生长发育、组织修复和自体防御等过程起重要作用。近年来，参照EVs的分离方法，从植物样本中制备得到细胞外囊泡样纳米粒（extracellular vesicle-like nanoparticles，EVNs）具有与EVs相似的结构组成，也显示出独特的活性功能。本文将上述结构统称为植物来源囊泡（plant-derived vesicles，PDVs），系统介绍了PDVs生源途径、分离表征方法和体内外性质，讨论其作为天然治疗剂和药物功能载体等方面的生物医学应用，最后对该领域存在的问题及未来发展方向提出观点和建议。

中药制剂现代化进程中面临诸多挑战，中药粉末、中药提取物和中药组分作为中药制剂前最具有代表性的3类物料，其性质是指导中药制剂剂型设计的核心基础。本团队在长期研究中药制剂物料性质的基础上，根据中药制剂物料在一定条件所处的状态及物质之间相互作用特点，构建了中药制剂物料的性质体系，由物质构成、空间构造、体性质、面性质及理化性质5大类18小类构成，并进一步建立了相应的指标体系，包含61项指标及表征技术，为中药制剂的现代化奠定基础。

中药活性成分具有显著的药理活性，在临床疾病治疗中发挥了重大作用。然而，许多中药活性成分存在溶解度低、熔点高和稳定性差等问题，不仅导致其生物利用度低，还限制了其在临床的应用。调控药物晶型结构对改善中药活性成分理化特性或功效具有重要的作用。本文从多晶型、共晶型、无定形/共无定形和纳米晶体等方面总结了几种晶型结构技术在中药活性成分中应用的研究进展，综述了药物晶型结构对中药活性成分理化特性与功效的影响，为中药活性成分创新制剂研究和开发提供依据。

中药在制剂现代化方面取得了很大的进步，但目前中药制剂的结构研究较少。结构药剂学的理论与实践表明，制剂的结构属性对药物质量和药效发挥具有重要作用，这对传统及现代的中药剂型研究与开发具有借鉴意义。近年来，应用同步辐射X射线计算机断层扫描成像（synchrotron radiation X-ray micro-computed tomography，SR-μCT）等新技术，制剂结构研究取得进展，为开展中药制剂研究提供借鉴和方法支撑。本文对近年来药物制剂结构研究的进展、方法及中药制剂的结构研究进行归纳和总结，探讨中药制剂结构研究的意义，以期为中药制剂的剂型设计、工艺改善和质量评价提供依据，助推中药制剂的现代化。

从可食用植物中分离到的细胞外囊泡样纳米粒（extracellular vesicle-like nanoparticles，EVNs）被证明具有多重活性，而药源性植物EVNs鲜有报道。本文选择药食两用的鲜姜黄、鲜百合、鲜黄精和鲜天麻，从其药用部位鲜榨汁液中分离到EVNs，并研究了EVNs的理化性质、抗氧化能力和细胞摄取行为。结果表明，不同来源EVNs的粒径分布在150~200 nm之间，多分散系数均小于0.2；不同EVNs均含有脂质、蛋白质和糖类成分，但含量不同；4种EVNs在4℃和-80℃条件下储存的稳定性不同，其中姜黄来源EVNs稳定性最佳；抗氧化实验证实，4种EVNs具有不同的抗氧化活性，破坏EVNs结构能明显降低其抗氧化能力；摄取实验表明，RAW264.7细胞对不同EVNs的摄取能力不同，破坏EVNs结构可影响EVNs的摄取，证明EVNs的活性和转运性质与其特定结构有关。

目前国内外对于丹皮炭的研究主要集中在制炭前后化学成分的变化，缺乏与药效直接关联的物质基础研究。本研究以丹皮为前驱体，高温烧制成丹皮炭，从丹皮炭中提取分离出丹皮炭纳米类成分（Moutan cortex carbonisatanano-components，MCC-NCs），并探究其凉血止血作用。实验通过马弗炉（350℃，1 h）高温烧制丹皮炭，再从中提取分离出MCC-NCs，并利用透射电子显微镜、紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、傅里叶变换红外光谱和X射线光电子能谱对其进行了表征；此外，该研究评估了MCC-NCs的凉血止血作用。结果显示，MCC-NCs的尺寸分布范围为0.80~2.8 nm，晶格间距为0.26 nm，主要由C、O和N元素组成，具有OH、C=O、C-N、C=C等丰富的表面官能团，荧光量子产率为7.18%。所有动物实验均符合北京中医药大学伦理委员会的规定。结果表明，预先给予MCC-NCs可显著降低全血高、中、低黏度和血浆黏度；降低红细胞压积和红细胞分布宽度，减少血红蛋白含量和红细胞计数（P < 0.05）；此外，MCC-NCs可以显著降低活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间和纤维蛋白原水平（P < 0.05）。病理学检查结果发现，MCC-NCs可以明显减轻肺组织损伤，减小出血和炎性细胞浸润；同时，也可以明显减轻胃黏膜出血症状。综上，实验结果显示MCC-NCs具有凉血止血的作用，其止血作用主要与内源性凝血途径或纤维蛋白原系统的激活有关，为探索中药止血的物质基础提供了新的策略。

天然生物相容性材料如兼具抗癌活性及自组装功能的萜类小分子天然产物，在生物医学领域展现出巨大的潜力和应用前景。然而，其分子自组装结构的机制并未深入系统性研究，且作为活性载体用于药物输送的研究工作报道较少。因此，本研究进一步探讨了四环三萜麦角甾醇、豆甾醇及五环三萜甘草次酸和熊果酸的分子组装机制，并揭示萜类小分子自组装可能存在的共性规律。研究表明，分子排列的共面性和有序性是影响其自组装成球、杆或片层等结构的可能主要因素之一。此外，以抗癌活性良好的麦角甾醇（ergosterol，ET）为代表物，通过氢键及π-π共轭等弱作用力装载紫杉醇（paclitaxel，PTX）成功构建协同抗肿瘤纳米试剂ET-PTX NPs，并根据哈尔滨医科大学实验动物研究中心批准的方案实施荷瘤小鼠抗癌疗效评估，发现所制备的纳米药物具备明显增强体内外抗癌活性及优异的生物安全性，再次证实萜类天然小分子作为药物输送体系潜在的医学价值。本研究为探索天然产物自组装分子结构提供一定的理论依据，并为开发活性天然生物相容性纳米材料用于协同抗癌药物输送及其他生物医学应用提供潜在的参考价值。

麻杏石甘汤为经典方药，但方中多成分间的互作关系和相态变化不清，多成分物理相态与药效的关联性不明。本研究实时监测麻杏石甘汤煎煮过程中的粒径变化，采用离心法分离不同相态并分析其组成分布和抗菌活性；引入化学干扰剂配合粒度和形貌观察明确多成分物理相态的互作力类型，研究抗菌活性与相态物理结构的关联性。结果显示，麻杏石甘汤煎煮过程中颗粒的混杂度下降，粒度分布变窄并最终稳定在170 nm附近，有机和无机成分在各相态间呈非均匀分布；经13 500×g离心后所得的上清液（S-13500相态）抗菌活性最佳，其含有麻黄碱、苦杏仁苷和甘草酸等有机活性小分子和Ca、K、Mg等无机成分；活性物理相态中的分子互作力主要为疏水相互作用和氢键作用，破坏互作力将导致相态结构变化和体内外抗菌活性的下降。本研究证实，麻杏石甘汤煎煮过程中化学成分交织互作形成了新的物理相态，导致汤剂成分的异质性分布。活性相态的抗菌活性由其化学成分和物理结构共同决定，为中药药效的物理基础提供了直接证据。

本文旨在探究黄连甘草水煎煮过程中甘草蛋白与黄连素发生相互作用机制及其对药效的影响。本实验从甘草饮片水提丙酮沉淀得到甘草粗蛋白，发现甘草粗蛋白与黄连素共同煎煮后可形成类球形超分子颗粒，利用马尔文粒度仪和发射扫描电镜进行形态学表征，观察到该超分子颗粒为纳米级，与甘草蛋白和黄连素形态明显不同。综合紫外、红外及荧光光谱技术研究表明，该分子相互作用发生机制为静电引力和疏水作用等弱键诱导。进一步通过耐药金葡菌模型评价，发现甘草蛋白-黄连素超分子粒子显著影响黄连素的抑菌活性，且与机械混合物明显不同；该研究从新的视角揭示甘草-黄连水煎剂中蛋白类等大分子物质基础的药效价值，有助于推动临床有效方药二次开发，尤其是经典名方药效物质基础研究。

本文通过研究粒子修饰技术改善中药生粉类药材的流动性和压缩成型性，为满足下一步制剂制备的需求。以金银花粉末作为模型药物，采用流化床底喷技术，使用共聚维酮作为修饰剂，制备修饰粒子；分别测定各粉体的粉体学性质、片剂压缩成型参数以及崩解时限和溶出度，并结合扫描电镜技术对修饰前后粉体粒子和压制的片剂表面形态进行表征。结果表明，经过粒子修饰后，金银花粉体粒子粒径增大，其粉体的流动性、可压缩性以及成型性均得到一定的改善，并且其崩解时限也有一定的降低，体外溶出度也不受影响。因此，本研究可以为中药生粉类药材因流动性、可压性等粉体属性较差而不能满足制剂生产需要这一共性问题提供参考和思路。

人工智能技术在药物筛选中的应用日益广泛。本文介绍了人工智能技术的特点，着重从机器学习尤其是深度学习角度，按照基于配体和受体结构两个方面，总结了人工智能技术在药物筛选中的应用和进展，以及如何应用人工智能从这两个方面进行药物设计。本文也讨论了人工智能技术在药物虚拟筛选领域的主要局限性和挑战，对其发展前景作以展望。

人参皂苷Rg1是“百草之王”人参最主要的活性成分之一，是一种重要的血管生成保护剂。体内外研究表明，Rg1主要通过促进平滑肌细胞增殖、抑制内皮细胞衰老、抗氧化应激、抑制炎症反应、激活血管生成关键因子、改善血管舒张等途径展现了广泛的心血管药理作用。许多miRNA参与到Rg1促进血管生成的过程，介导调控下游相关靶标的特异性表达以促进血管生成和血管重塑，具有成为新的临床生物标志物和治疗靶标的潜力，将新型制剂技术及材料用于弥补Rg1透血脑屏障能力弱的缺点，也进一步推动并丰富了Rg1的临床应用。

大脑的生化完整性对于维持大脑的正常运转十分重要，氧化损伤是导致大脑生化完整性破坏的重要原因之一。大脑富含磷脂和多不饱和脂肪酸，由于高脂质和高耗氧量的特殊性，大脑比其他器官更容易受到氧化应激的影响，氧化应激诱导的磷脂过氧化是大脑的氧化-抗氧化系统失衡的结果。当抗氧化系统不足以抵御氧化损伤时，神经元膜磷脂易受自由基活性氧的攻击发生磷脂过氧化，进而生成多种毒性氧化产物、细胞膜损伤、线粒体障碍和淀粉样蛋白的急剧累积，且神经元的大多数蛋白和核酸可以被过氧化产物共价修饰，导致蛋白原有功能的丧失，进而引发大脑程序性细胞死亡和神经炎症，最终导致神经退行性疾病的易感性的增加。本文在总结磷脂过氧化机制的基础上，重点综述了磷脂过氧化作为关键因素在神经退行性疾病的发生发展中的特点，为靶向干预磷脂过氧化用于预防神经退行性疾病的潜在策略提供理论依据。

低氧性肺动脉高压（hypoxia pulmonary hypertension，HPH）是一种不可逆的疾病，HPH患者常伴有呼吸困难和乏力头痛，随着病情的发展，右心室逐渐衰竭最终导致死亡。低氧性肺血管重构是HPH的重要病理基础，重构的肺血管会形成永久性增厚。低氧性肺血管重构的机制较为复杂，目前市面上针对肺血管重构治疗药物研究甚少，主要停留在缓解肺血管收缩的层面。研究发现低氧会诱导肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth musclecells，PASMCs）内发生钙超载从而引起PASMCs增殖，其主要机制包括低氧所导致的：①钙泵的异常表达；②肺动脉平滑肌细胞质膜钙通道的异常开放；③细胞钙敏感受体过表达；④钠钙交换蛋白表达异常。本文总结了以上低氧诱发钙超载从而导致肺动脉重构的机制，希望能为治疗HPH提供新的思路。

两面针是我国传统中药，可用于风寒湿痹、筋骨疼痛、跌打骨折、疝痛、咽喉肿痛、牙痛等病症的治疗。由于其具有优良及温和的药理活性，迄今为止，国内外学者对两面针开展了较为深入的研究，目前已从两面针中分离得到100多个化合物。氯化两面针碱是两面针中最重要的生物碱成分之一，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等活性。本文将对两面针的化学成分、氯化两面针碱药理活性以及作用机制进行综述，希望为两面针的研究和开发提供依据。

生物电子等排是药物结构优化中最常见的一种策略，随着药物化学和有机化学的发展，越来越多的经典的和非经典的生物电子等排体被运用到新药的设计中，近几年来，含氟基团作为生物电子等排体越来越受到药物化学家们的重视，本文扼要地综述二氟甲基（CF₂H）的理化性质、化学制备方法及其在药物设计中的应用，旨在为新药研究人员提供参考。

胃内pH是影响药物吸收的重要生理因素，尤其对于弱碱性药物，胃内pH的升高可能引起生物利用度下降。质子泵抑制剂、H₂受体阻滞剂、抗酸剂等抑酸药（acid-reducing agents，ARAs）可升高胃内pH，产生药物相互作用（drug-drug interactions，DDIs），影响疗效。生理药代动力学（physiologically based pharmacokinetics，PBPK）模型是研究口服药物相互作用的重要工具，常用的有高级房室吸收和转运（advanced compartmental absorption and transit，ACAT）模型和高级溶出吸收和代谢（advanced dissolution，absorption and metabolism，ADAM）模型。在PBPK模拟软件中输入相关参数，建立基础模型后，通过调整模型参数模拟胃内pH的变化，预测对药物吸收的影响，可用于临床上给药方案的调整和新药研发过程中的候选药物筛选。本综述简述了PBPK模型用于预测药物吸收的理论基础及常用模型，总结了不同ARA类药物对胃内pH的影响，并列举了目前PBPK模型在预测胃内pH对药物吸收影响的一些应用实例。

解吸电喷雾电离质谱（desorption electrospray ionization-mass spectrometry，DESI-MS）是一种近年来新兴的原位电离质谱分析技术，其离子化过程发生于常压敞开式大气环境中，具有样品前处理简单、分析快速、检测灵敏等特点，在生物医学、药物分析、食品安全、环境监测以及材料表征等方面应用广泛。天然药物如中草药中含有种类繁复的化学组成，对其开展提取、分离鉴定和体内外药效评价，特别是针对药效显著活性成分的研究，长期受到人们的持续关注。近年来，随着DESI-MS技术的不断发展，为直接和快速分析天然药物中活性成分提供了许多新的机会。本文概述了DESI-MS技术的原理、特点、影响因素及技术进展，并系统总结了该技术在中草药及其他具有药理活性的植物样品等天然药物中的研究应用进展情况，进一步对该领域的应用前景做了展望。

探究香豆素类衍生物IMM-H004对小鼠肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemia reperfusion injury，HIRI）的保护作用及其机制。本文中所有动物实验都获得中国医学科学院药物研究所伦理学委员会批准。实验分为3组，假手术组、模型组和IMM-H004给药组，检测各组的血清生化指标和病理情况。qPCR检测炎症因子肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的mRNA含量，免疫组织化学和免疫荧光检测中性粒细胞浸润的情况，Western blot检测NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）炎症小体通路相关蛋白的表达。IMM-H004可显著降低HIRI过程中谷丙转氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate transaminase，AST）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）的含量，病理结果提示IMM-H004给药组肝组织空泡性坏死程度较模型组显著减轻，炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平与模型组相比显著降低。免疫组化和免疫荧光的结果表明，IMM-H004可显著减少中性粒细胞的聚集。Western blot的结果显示，IMM-H004可显著降低NLRP3、衔接蛋白（apoptosis-associated speck-like protein，ASC）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（cysteinyl aspartate specific proteinase-1，caspase-1）、IL-1β的蛋白水平。综上所述，IMM-H004对小鼠HIRI有显著的保护作用，其保护作用与降低HIRI过程中炎症因子mRNA的表达，抑制中性粒细胞的聚集以及抑制NLRP3炎症小体通路的激活相关。

全球范围内超过一半的肝癌病例发生在我国，亟待发现新的抗肝癌药物。已有报道表明，原阿片碱具有较好的抗肿瘤活性，但其作用机制尚不清楚。本研究采用CCK-8实验证实原阿片碱对肝癌细胞具有显著的抑制作用，流式细胞术和JC-1染色实验表明原阿片碱能够降低肝癌细胞线粒体膜电位、诱导肝癌凋亡，Western blot分析表明原阿片碱能够激活线粒体凋亡通路，上调Bax、细胞色素C（cytochrome C，Cyto-C）、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-9（cleaved-caspase-9）、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-3（cleaved-caspase-3）、剪切的DNA修复酶（cleaved-poly ADPribose polymerase，cleaved-PARP）和凋亡酶激活因子-1（apoptotic protease activating factor-1，Apaf-1）的表达，下调Bcl-2的表达。人肝癌裸鼠移植性肿瘤实验证实，50 mg·kg^-1原阿片碱腹腔注射给药，抑瘤率可达到72.46%，并对小鼠体重没有明显影响。动物实验严格按照西南医科大学动物伦理委员会的规定执行。本研究提示，原阿片碱有潜力开发为治疗肝细胞癌的药物前体。

剧烈或过度运动过程中机体耗氧量大量增加，会产生过量的自由基。其中，肝脏组织中的自由基水平会因力竭运动增加2~3倍甚至更多，从而导致肝脏组织发生氧化应激损伤，影响肝脏的正常功能。安五脂素是南五味子木脂素中具有代表性的单体成分之一，本研究前期工作已报道，安五脂素对力竭训练小鼠表现出显著的抗疲劳作用，且该作用可能与激活骨骼肌组织中NRF2[nuclear factor（erythroid-derived 2）-like 2]/ARE（antioxidant responsiveelement）通路抗氧化功能相关。本研究通过建立力竭训练小鼠模型，观察安五脂素对其肝脏组织损伤的保护作用，并应用NRF2抑制剂ML385，通过H₂O₂所致HepG2细胞损伤模型实验明确安五脂素与NRF2的相关作用机制，动物福利和实验过程均遵循北华大学动物伦理委员会的规定。结果显示，安五脂素能够明显降低力竭训练小鼠血清中ALT（alanine aminotransferase）、AST（aspartate aminotransferase）水平，改善肝脏组织病理损伤，显著提高SOD（superoxide dismutase）、GSH-Px（glutathione peroxidase）、CAT（catalase）水平，降低MDA（malondialdehyde）、8-OHdG（8-hydroxy-2 deoxyguanosine）含量，显示出较强的抗氧化作用。安五脂素能够上调肝组织中NRF2/ARE抗氧化调节通路，增加Bcl-2（B-cell lymphoma 2）表达并降低Bax（Bcl-2-like protein 4）、caspase3的表达，且体外实验结果中安五脂素对抗氧化及凋亡相关蛋白的影响与动物实验中完全一致。给予ML385干预后，安五脂素对上述所有指标的影响均被抑制。安五脂素通过抗氧化作用发挥对力竭训练小鼠肝损伤的保护作用，该作用与其激活NRF2作用相关。

本文研究麦冬皂苷D（ophiopogonin D，OPD）对麦冬皂苷D'（ophiopogonin D'，OPD'）诱导大鼠心肌细胞损伤的干预作用及可能机制，为中药麦冬的临床使用提供相关的实验依据。采用CCK-8（cell counting kit-8）法检测麦冬皂苷D'及麦冬皂苷D与麦冬皂苷D'共处理对大鼠心肌细胞存活率的影响；流式细胞仪检测细胞内活性氧（reaction oxygen species，ROS）含量；FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe²⁺含量变化；相应的试剂盒检测细胞内谷胱甘肽（glutathione，GSH）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）含量的变化；Western blot检测转铁蛋白受体1（transferrin receptor 1，TFR1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX2）、NADPH氧化酶1（NADPH oxidase1，NOX1）、长链脂酰辅酶A合成酶4（long-chain acyl-CoA synthetase 4，ACSL4）、阳离子氨基酸转运蛋白11（cationicamino acid transporter 11，SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）及铁蛋白重链1（ferritin heavy chain 1，FTH1）等铁死亡相关蛋白表达的变化，探究麦冬皂苷D保护心肌细胞损伤的作用机制是否与铁死亡有关。实验结果显示，1 μmol·L^-1的麦冬皂苷D'可显著诱导铁死亡相关蛋白的表达，导致细胞Fe²⁺、ROS和GSH-Px含量明显升高，GSH含量明显降低；经不同浓度麦冬皂苷D（0.5、1和2 μmol·L^-1）处理后在一定程度上逆转麦冬皂苷D'引起的心肌细胞损伤，并且剂量在1~2 μmol·L^-1时效果最佳。结果表明，麦冬皂苷D可干预麦冬皂苷D'引起的铁死亡，进而对大鼠心肌细胞产生保护作用。

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和高效液相色谱等方法从海带内生菌Alternaria sp.W-1发酵液粗浸膏中分离得到6个化合物，经高分辨质谱、核磁共振谱及文献比对的方法将它们鉴定为：6-iso-tricycloalter‐narene 6a（1）、tricycloalternarene 6a（2）、tricycloalternarene B（3）、uracil（4）、5-methyluracil（5）和lumichrome（6），其中，6-iso-tricycloalternarene 6a（1）是一个未见文献报道的新化合物。体外细胞毒活性测定显示，化合物1~3对人肝癌细胞株SMMC-7721和人胃癌细胞株SGC-7901有微弱的抑制活性。

α7烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）广泛分布于中枢和外周神经系统，与多种神经系统疾病、炎症反应密切相关。α-芋螺毒素[A10L]PnIA作为靶向α7 nAChR的拮抗剂，对研究α7 nAChR相关生理、病理过程具有重要作用。利用荧光素5-羧基四甲基罗丹明标记[A10L]PnIA，体外两步法氧化折叠获得活性肽（[A10L]PnIA-F）。利用非洲爪蟾卵母细胞表达体系和双电极电压钳技术检测[A10L]PnIA-F荧光肽的活性。同时，利用小鼠巨噬细胞和CCK8检测其细胞毒性。合成的[A10L]PnIA-F荧光肽，质谱鉴定其分子质量为2 077.28 Da，与理论值一致；电生理测定其对鼠源α7 nAChR的半阻断剂量（IC₅₀）为17.32 nmol·L^-1，较[A10L]PnIA本体（IC₅₀，13.84 nmol·L^-1）基本保持一致；细胞毒检测结果显示，在5 nmol·L^-1~10 μmol·L^-1的浓度范围内，对小鼠巨噬细胞的生长无显著抑制。结果表明α-芋螺毒素荧光探针[A10L]PnIA可以为α7 nAChR相关的神经生理、病理机制的研究提供工具。

为明确急进高原对大鼠小肠胆汁酸池的影响，本文采用超高液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)技术检测平原组和急进高原组大鼠小肠内容物胆汁酸组成。研究表明：在大鼠小肠内容物中共检测出39种胆汁酸，通过PCA和OPLS-DA分析证明了平原和急进高原组大鼠小肠内容物中胆汁酸组成存在着明显差异。以VIP > 1，|log₂FC|≥ 1，P < 0.05对胆汁酸进行筛选，共得到具有显著性差异的胆汁酸7种，其中结合型胆汁酸5种，游离型胆汁酸2种，且结合型胆汁酸含量均呈上升趋势。本研究证明了高原低氧环境对大鼠胆汁酸代谢的影响。本研究中动物实验过程均获得第九四〇医院伦理委员会的批准(批准号：2020KYLL012)。

课题组前期研究发现黄芪免疫活性多糖APS-Ⅱ具有较强的免疫活性，鉴于其分子量较大且结构复杂，本文旨在建立APS-Ⅱ酸降解的最优方法，对降解产物进行结构初探与分离制备以后，通过体外免疫细胞实验筛选免疫活性最强的寡糖活性中心。本研究以APS-Ⅱ为研究对象，采用“自上而下”的研究策略，首先通过单因素试验和正交试验优化了APS-Ⅱ酸降解的最佳条件，接着以最佳条件制备的黄芪寡糖通过亲水作用色谱-电喷雾电离源-高分辨飞行时间质谱进行结构解析，然后将黄芪寡糖通过纯化制备色谱仪分离制备不同聚合度的寡糖片段，最后利用体外免疫细胞从多角度筛选免疫活性中心片段。结果表明APS-Ⅱ的最佳酸解条件为水解温度80℃，三氟乙酸浓度1.0 mol·L^-1，水解时间1 h；该降解条件具有良好的重复性；降解产物黄芪寡糖含有主链1→4连接的六碳醛聚糖结构；6个寡糖片段的免疫活性筛选实验表明分子量较大的寡糖具有更强的免疫促进作用，推测黄芪寡糖的免疫活性中心位于聚合度DP9~DP19的糖链中。动物福利和实验过程均遵循山西大学动物伦理委员会的规定。该结果对其他中药寡糖的研究具有一定示范作用，为黄芪寡糖的结构表征及构效关系研究奠定基础，同时可以促进黄芪寡糖药物的开发。

对HPLC-FMA (high performance liquid chromatography-fluorescence micelle assay)法测定单抗药物中聚山梨酯80含量的方法开展实验室间的联合验证，以研究该方法在多个实验室间的可应用性和可转移性以及纳入现行版药典的可行性。本文使用两个厂家(J.T.Baker公司和南京威尔)来源的聚山梨酯80在7个实验室开展验证。结果显示，在蛋白浓度≤ 20 mg·mL^-1，聚山梨酯80含量在0.05~0.5 mg·mL^-1内时，该方法专属性良好；加标样品的准确性分别为92.20%~117.70%(J.T.Baker公司)，93.90%~117.20%(南京威尔)；组内精密度分别为RSD < 4.30%(J.T.Baker公司)，RSD < 2.60%(南京威尔)；总体精密度分别为RSD < 5.45%(J.T.Baker公司)，RSD < 6.70%(南京威尔)；线性相关系数分别为r > 0.98(J.T.Baker公司)，r > 0.99(南京威尔)。联合验证结果证明，HPLC-FMA法准确性、精密度、线性和专属性均良好，可应用于不同实验室单抗药物中聚山梨酯80含量的放行检测及稳定性分析。

制备具有掩味效果的盐酸小檗碱树脂复合物。以盐酸小檗碱为模型药物，Amberlite IRP69为载药树脂，通过阐明一定温度范围内盐酸小檗碱在潜溶剂中的溶解度与温度关系曲线，指导复合物制备过程中盐酸小檗碱的加入量及反应温度等参数的研究。对制得的复合物进行物性表征和体外释放研究，验证复合物的形成并预测复合物的体内释放行为。实验结果表明，用60%乙醇作为潜溶剂在50℃下恒温搅拌1 h，制得的复合物载药量和药物利用率分别为35%和64%，且具有较好的掩味效果。本研究提供了一种制备盐酸小檗碱掩味制剂的方法。

本文利用ITS2序列及其二级结构对传统中药材牛尾独活、当归、独活和羌活进行分类鉴定。通过GenBank数据库中下载牛尾独活等药材共7个物种26条ITS序列，采用隐马尔可夫模型注释获得ITS2序列。采用MEGA软件计算种内、种间K2P遗传距离，构建NJ系统发育树。同时利用ITS2 Database预测各样本ITS2二级结构，并利用4Sale软件比对一级结构和二级结构的联合矩阵，最终采用ProfDistS软件基于距离法构建PNJ进化树。结果表明，各样本种间平均遗传距离均远大于种内平均遗传距离，各药材间存在明显的Barcoding Gap；系统发育树显示各样本均独立分支；样本间的二级结构均有一定的差异；PNJ进化树比NJ树显示出更高的分辨率。因此，本研究建议将ITS2作为鉴别药材牛尾独活、当归、独活和羌活及其基源植物的DNA条形码，为4种中药材的分类与准确鉴定提供一定的科学依据。

苦杏仁为药食两用品种，因其富含油脂等营养物质而易受到真菌污染。本研究基于DNA宏条形码技术对苦杏仁中污染真菌的多样性进行分析，为其安全使用提供参考依据。收集来自4个药材市场和3种炮制规格的苦杏仁样品共12批，提取真菌DNA并扩增ITS2序列，基于Illumina MiSeq PE300平台进行高通量测序。结果表明子囊菌门Ascomycota是苦杏仁污染真菌中的最优势菌群。在属水平，除样品SW1_P中最优势菌群为Diutina外，其余样品中最优势菌群均为曲霉属Aspergillus。共准确鉴定到3种有害真菌，分别是黄曲霉Aspergillus flavus、Wallemiasebi和少根根霉Rhizopus arrhizus。此外，不同收集地的苦杏仁样品中葡萄座腔菌目Botryosphaeriales和链格孢属Alternaria的相对丰度存在显著差异，不同炮制规格的苦杏仁样品中肉座菌目Hypocreales和枝孢属Cladosporium的相对丰度存在显著差异。综上，DNA宏条形码技术可有效阐明中药苦杏仁中污染真菌多样性，快速检测药材中潜在产毒真菌，为真菌毒素污染防控提供早期风险预警。

通过分析茉莉酸甲酯(MeJA)对川续断根中川续断皂苷Ⅵ积累及相关基因表达的影响，为深入研究MeJA调控川续断皂苷Ⅵ的合成奠定基础。本研究以川续断幼苗为实验材料，分别添加浓度为50、100、150、200、300 μmol·L^-1的MeJA进行处理，在处理后1、3、5天不同时间点取样。分析根中川续断皂苷Ⅵ和超氧化物阴离子的含量、叶片中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及川续断皂苷Ⅵ合成路径相关基因转录表达水平的动态变化。结果表明，采用浓度为150 μmol·L^-1的MeJA处理川续断能显著增加根中川续断皂苷Ⅵ的积累，处理3天后川续断皂苷Ⅵ的含量最高，是对照组的2.16倍。MeJA处理后叶片中SOD活性降低，MDA的含量升高，根中超氧化物阴离子含量升高。同时根中川续断皂苷Ⅵ合成关键酶基因鲨烯环氧酶(DaSE1)、牻牛儿基二磷酸合成酶(DaGPS)的表达量与对照组相比上调表达。以上研究表明MeJA 150 μmol·L^-1是促进川续断皂苷Ⅵ积累的适宜浓度，通过上调川续断皂苷Ⅵ合成关键酶基因的表达增加川续断皂苷Ⅵ的积累，从而抵抗MeJA对川续断造成的逆境胁迫。

随着我国生物制药自主创新能力的不断提高，越来越多的创新型单抗药物申报注册临床试验，同时国外已上市和/或国外开展临床试验的单克隆抗体药物在国内申报注册临床的数量也不断增加。2018年国家药品监督管理局对外发布了《新药Ⅰ期临床试验申请技术指南》(2018年第16号)，该指南对创新药申报临床试验阶段药学研究及申报资料提出了相关要求，极大提高了生物创新药的申报质量。但相比美国药品监管机构和欧盟药品监管机构，我国针对创新药申报临床阶段细化的技术指南尚不完善，如生物技术产品申报临床阶段的病毒安全性评价。本文调研了2018~2020年申请人针对创新单抗药物申报临床阶段的一般性技术问题，发现申请人聚焦的问题包括生产终末细胞和/或细胞收获液检定以及病毒去除或灭活验证。同时，审评中也发现由于申请人对国内外技术指南阶段性要求理解的差异，导致申报资料也存在一定差异。结合我国和美国、欧盟药品监管机构病毒安全性相关技术指南的调研并基于技术考量，本文对生产过程中外源病毒因子检测和病毒去除或灭活验证提出个人建议，旨在确保创新单抗药物在申报临床试验阶段的病毒安全性。