α4β2型烟碱受体(nAChR)是一种配体门控离子通道, 在整个神经系统几乎都有分布, 参与乙酰胆碱、多巴胺、γ-氨基丁酸、去甲肾上腺素等神经递质的调节和释放, 在机体的学习、记忆、认知、注意力、炎症以及疼痛中发挥重要作用。大量研究表明, α4β2型nAChR是阿尔茨海默症、帕金森病、癫痫、抑郁症、尼古丁依赖、疼痛等神经系统性疾病的重要治疗靶点, 对以老年痴呆为主的神经退行性疾病早期诊断和疗效检测具有重要意义。本文总结了α4β2型nAChR在神经系统性疾病治疗中的作用、机制以及相关药物研究进展, 为筛选和开发更合适的α4β2型nAChR相关化合物提供理论依据。

纤维化是组织受到损伤后, 组织内细胞外基质异常增生和过度沉积的病理过程。各类慢性疾病导致的损伤/炎症是纤维化发生的主要诱因。肝和肾的纤维化是较常见的脏器纤维化。近年来, 肠道微生物群被证明与肝肾相关疾病的发展进程有密切关联, 其内在机制可能与肠道微生物的组成变化以及肠道完整性等相关。肠-肝-肾三者之间通过内分泌和细胞信号通路等各种途径进行相互影响并促进肝和(或)肾纤维化的发展。本文基于肠-肝-肾轴对肝纤维化与肾纤维化的相关研究进展进行综述, 以期为诊疗肝肾纤维化提供新的策略和理论依据。

前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一, 近十年来我国前列腺癌的发病率呈明显上升的趋势。目前, 以雄激素阻断为主的内分泌治疗是除根治手术和放疗或化疗之外临床上比较主流的前列腺癌治疗方案, 虽然在治疗前期能获得良好的临床收益, 但近九成的患者仍会进入去势抵抗阶段, 且其中又有近九成的患者会发生骨转移, 患者的生活质量随着疾病进程急剧降低。有研究表明在形成去势抵抗的过程中, 除雄激素信号通路外还涉及了多种其他分子信号的变化, 包括经典的致癌信号通路和免疫炎症致癌信号通路等。了解这些独立于雄激素信号通路的其他信号通路在去势抵抗形成中的作用机制, 将有助于了解雄激素阻断治疗在去势抵抗中的脱靶效应以及引入新的治疗靶点和治疗策略, 推动去势抵抗摆脱临床“无药可用”的困境。

抑郁症是一种发病率较高的严重精神疾病, 目前对其病理机制尚未全面了解, 临床治疗效果十分有限。最近的研究表明, 发生在大脑特定脑区的表观遗传调控——即不改变脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)编码的情况下调节基因活性, 可能是环境因素与个体遗传相互作用以影响抑郁症发病风险的关键机制。因此, 靶向表观遗传调控的药物可能成为开发抗抑郁药的新方向。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors, HDACi)是一类具有抑制组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase, HDAC)活性的化合物。本文从HDAC与抑郁症的关系入手, 集中讨论了在临床前研究中具有抗抑郁药效的HDACi, 及其治疗抑郁症的潜在机制与主要局限性, 并对未来研究进行了展望和讨论。

慢性肾病(chronic kidney disease, CKD)是一种发病率高、预后差、并发症复杂的重大慢性疾病, 对人类健康造成极大危害。硫酸吲哚酚(indoxyl-sulfate, IS)和硫酸对甲酚(p-cresol sulfate, PCS)是两种典型的肠源尿毒素, 由肠道菌群与宿主共代谢生成。随着慢性肾病的进展, 慢性肾病患者体内的IS和PCS等肠源尿毒素不断蓄积, 并进一步促进CKD进展。肠道菌群与CKD密切相关, 靶向肠道菌群调控肠源尿毒素合成及代谢通路很可能是延缓CKD进展的新思路及新策略。本文通过对肠道菌群及肠源尿毒素与慢性肾病进展之间的关系进行分析, 提出基于肠源尿毒素代谢调控干预慢性肾病进展的治疗策略。

低氧条件下机体的循环系统、神经系统、内分泌系统等的功能发生显著改变, 这些变化影响药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄。药物代谢酶和转运体是影响药物代谢的主要因素, 微小RNA (microRNA, miRNA)除调控与药物代谢相关的基因如缺氧诱导因子、炎症因子、核受体等, 还可直接作用于药物代谢酶和转运体, 影响药物的体内代谢。本文通过综述低氧对miRNA及药物代谢酶和转运体的调节, miRNA调控药物代谢酶和转运体及药物代谢相关基因, 低氧调节药物代谢酶和转运体的相关机制等, 探讨miRNA在低氧调节药物代谢酶和转运体中的作用, 提出以miRNA为核心的低氧影响药物代谢的分子机制。

高脂血症是一种常见的血脂异常疾病, 是导致各种心血管疾病的重要危险因素。中药具有疗效确切、不良反应少、作用温和等优点, 广泛应用于预防和治疗高脂血症。然而, 由于中药成分复杂且作用靶点多, 其降脂作用机制尚不明确。脂质组学作为研究生物系统中脂质及脂质相互作用的一门学科, 能对不同生理病理状态下的脂质进行定性定量分析, 寻找与中药降脂作用相关的潜在生物标志物, 为系统地研究中药降脂作用提供可借鉴的思路。本综述介绍了脂质组学的主要研究方法, 总结了近年来脂质组学在中药降脂作用研究中的应用, 以期为中药降脂作用研究提供方法参考。

慢性阻塞性肺病和哮喘是以气道阻塞为主要表现的复杂炎症性疾病, 已成为严重影响人类健康的呼吸道常见疾病。与临床单独使用PDE3或PDE4抑制剂相比, 双靶点PDE3/4抑制剂具有协同的抗炎和支气管扩张作用, 近年来引起广泛关注。本文综述目前处于临床前和临床研究阶段的双靶点PDE3/4抑制剂代表性研究成果, 总结其最新进展及用于治疗慢性阻塞性肺病和哮喘的潜力。

心血管疾病是全世界发病和死亡的主要疾病之一。尽管药物治疗在过去几十年中取得了重大进展, 但心血管疾病的预防与治疗还存在很多不足之处, 其中血脂异常仍然是心血管疾病的一个普遍危险特征, 它还没有得到足够的认识和控制。越来越多的证据显示, 心血管疾病的发生发展与许多其他独立的危险因素, 如偏高的低密度脂蛋白水平、偏低的高密度脂蛋白水平以及高甘油三酯水平有关。血脂异常患者的多项临床试验表明, 积极降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)可以显著减少心血管疾病事件。三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶(ACLY)是一种胞质同源四聚体酶, 在三磷酸腺苷(ATP)的作用下, ACLY可以催化柠檬酸和辅酶A转化为乙酰辅酶A和草酰乙酸酯。由于ACLY是产生胞浆乙酰辅酶A的主要酶, 而胞浆乙酰辅酶A是胆固醇和脂肪酸从头合成所需的前体, 因此抑制ACLY有可能达到减少乙酰辅酶A的生成从而降低胆固醇以及甘油三酯水平的目的。目前ACLY可作为降低血脂的一个分子靶标, 人们对ACLY抑制剂的研究也越来越多。本文简单介绍了ACLY的结构、作用机制以及与脂质代谢之间的关系, 并对目前的一些ACLY抑制剂进行了综述。

恶性黑色素瘤是一种高致死性的皮肤肿瘤, 发病率在全世界范围内呈上升趋势。恶性黑色素瘤严重至危及生命的原因主要是其具有较强的侵袭转移能力。出现远处转移病灶的患者, 即使采用最新的治疗, 仍会出现复发现象, 中位生存期仅有数月。目前关于黑色素瘤的防治手段主要包括手术切除、化学疗法、免疫治疗及靶向治疗。然而, 这些治疗策略会导致耐药性和严重的不良反应。近年来, 越来越多的研究发现天然产物具有良好的抗黑色素瘤活性, 包括抑制肿瘤生长、诱导细胞凋亡、抑制血管生成和转移、消除肿瘤干细胞等。此外, 许多研究报告了天然产物和传统抗黑色素瘤药物的联合作用增强了治疗效果。本文就天然产物对黑色素瘤的预防潜力、治疗效果进行简要总结讨论。

固态药物的多晶型研究对药物质量控制、生产工艺选择、临床疗效评价等发挥重要作用。振动光谱是药物多晶型表征的有力手段之一。本文重点概述了近年来利用傅里叶变换红外(FTIR)光谱技术和拉曼(Raman)光谱技术在活性药物成分(APIs)及药物共晶/盐的多晶型表征中的应用研究进展, 阐明两种光谱技术在APIs和药物复合物的晶型分析中的应用特点, 为药物开发过程中的结构分析提供理论支持。

中药物质基础研究是中药现代化研究的基础。现代高分辨质谱(HRMS)已成为成分定性分析的有力手段。近年来, 一些基于高分辨质谱的数据处理策略, 如全信息串联质谱扫描采集策略、基于MS/MSALL的所有理论碎片离子的连续窗口采集技术、质量亏损过滤技术、特征离子过滤技术、质谱树状图过滤技术等极大地推动了中药物质基础的阐明。本文分别从中药类成分、全成分和中药体内成分三个方面综述高分辨质谱数据处理策略在中药体内外成分检测和表征中的应用进展, 为中药成分和体内代谢物的快速发现和结构表征提供方法参考。

随着二胎生育政策落实和儿童健康用药需求的不断增长, 儿童用药问题引起国家和社会的广泛关注, 儿童药物新品种、新规格和新剂型的研发是药学研究工作者和制药企业面临的迫切任务。本文围绕口服药物液体制剂研发中存在药物溶解性、液体制剂稳定性、辅料安全性和服药的顺应性等技术难点, 对已上市儿童口服药物液体制剂的技术特征和目前研究所涉及的药物纳米晶体、自微乳、离子交换树脂和Pickering乳剂等新技术在儿童药物液体制剂的研究情况进行讨论分析, 以期对儿童口服药物液体制剂的研究开发起到理论指导作用。

纳米药物在肿瘤治疗中有巨大的潜力, 但复杂的肿瘤微环境给纳米药物向肿瘤的递送带来了很多障碍。纳米药物从入血到在肿瘤中发挥作用, 需要经历循环、聚集、渗透、内化和释放5个步骤, 其中聚集和渗透环节更重要。本文综述了纳米药物在提高肿瘤聚集性和渗透性方面的新进展, 尤其是近5年出现或发展的技术手段。

天然低共熔溶剂是一种由生物相容性好的天然物质作为氢键供体和受体所构成的低共熔溶剂, 如胆碱、氨基酸和糖等, 具有低成本、易制备及环境友好等优点, 已在许多领域中有着广泛的应用。由于其生物相容性好, 使用较为安全, 特别适用于医药领域。本文首先从天然低共熔溶剂的形成原理出发, 对目前所采用的分子模拟设计方法进行了综述; 然后对目前天然低共熔溶剂所使用材料和制备方法进行了总结, 并阐述了其理化性质; 最后对其目前在药剂学中的应用进行了总结, 包括增加药物溶解度、促进药物渗透性、促进药物口服吸收等, 并对其在药剂学中的应用前景进行展望。

注射用乳酸-羟基乙酸共聚物(polylactide-polyglycolide, PLGA)微球作为一种储库型释药系统, 自1989年第1个产品Lupron depot获准在美国上市起, 已成功用于多种疾病的治疗, 具备在体内几天到几个月长时间释药的能力, 可显著改善用药安全性, 提升患者顺应性。体内外相关性(in vitro-in vivo correlation, IVIVC)研究给微球制剂的发展带来更多可能。IVIVC可以通过微球的体外释放行为阐述体内释药的动态信息, 在表征微球性能的同时减轻各阶段的工作量, 对药物的研发、生产变更和监督管理等具有指导或支持作用。本文将注射用PLGA微球的释放机制、体内外释放测定涉及的常用方法和理论进行归纳总结, 重点讨论了IVIVC尤其是A级IVIVC在微球制剂领域的建立及应用, 为进一步的微球体内外相关性研究提供参考。

星点设计(central composite design, CCD)是效应面优化法(response surface methodology, RSM)中最常用的一种设计方法, 在药剂学领域制剂处方优化方面获得了广泛的使用。值此引入国内20周年之际, 本文回顾了CCD在国内药剂学研究中的应用情况。在简述其基本原理与使用步骤基础上, 总结了使用历程中的常见错误, 并对因素与效应的选择问题进行了讨论, 以促使研究者系统了解CCD, 在研究中进行合理使用。

新兴的纳米黑磷材料为生物医学研究创造了新的平台, 纳米黑磷具有以下优势: 在近红外光照射下产生单线态氧, 可作为光动力治疗的光敏剂; 能够在较长的波长区域有广泛的光吸收, 这种近红外光热特性可应用于光热治疗; 黑磷纳米片具有较高的比表面积及独特的褶皱结构, 这使其具有极高的载药量。本文主要围绕近年来黑磷在生物成像、光热治疗、光动力治疗和作为药物载体方面的应用进行了综述。黑磷纳米材料的光电特性结合智能给药平台, 可以产生光/热/化学、光/化学/基因和光/化学/免疫协同治疗作用, 具有广阔的应用前景。

疲劳是2型糖尿病(T2DM)常见的并发症。本文研究了T2DM性疲劳与骨骼肌5-羟色胺(5-HT)系统的关系。动物实验用高脂饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素建立小鼠T2DM模型, 用5-HT_2A受体(5-HT_2AR)拮抗剂盐酸沙格雷酯(SH)及5-HT合成抑制剂卡比多巴(CDP)分别或联合给药治疗。细胞实验用D-葡萄糖、棕榈酸或5-HT刺激C2C12细胞。用SH、CDP或单胺氧化酶A(MAO-A)抑制剂氯吉兰分别抑制5-HT_2AR、5-HT合成及5-HT降解。本文中动物福利和实验过程均遵循中国药科大学动物伦理委员会的规定。结果表明, 小鼠骨骼肌及C2C12细胞均存在5-HT_2AR、5-HT合成酶及MAO-A表达。T2DM以及棕榈酸、D-葡萄糖刺激C2C12细胞时, 它们的表达明显上调, 且棕榈酸是比D-葡萄糖更敏感的刺激它们表达的因子。转棒实验及生化指标检测均表明, T2DM性疲劳起因于骨骼肌5-HT_2AR、5-HT合成及5-HT降解的增加。5-HT_2AR通过介导MAO-A表达、5-HT合成, 间接调控5-HT降解。而MAO-A通过介导5-HT降解, 调控细胞炎症、线粒体的ROS产生及膜电位去极化, 还抑制过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1 (PGC-1)、肉碱棕榈酰转移酶1 (CPTI)及ATP合成酶6 (ATP6)表达, 从而抑制线粒体功能, 如脂肪酸β氧化和ATP合成。用SH和CDP可有效地治疗T2DM性疲劳, 同时也可降血糖和血脂, 且联合给药有明显的协同效应。

研究蓝萼甲素(glaucocalyxin A, GLA)对肥大细胞介导的过敏反应的影响。动物福利和实验过程均遵循延边大学动物伦理委员会的规定。动物实验采用BALB/c小鼠耳部皮内注射anti-DNP-IgE (anti-dinitrophenylimmunoglobulin E)致敏, 尾静脉注射DNP-HSA (human serum albumin)和4%伊文思蓝混合液激发制备动物皮肤被动过敏反应(passive cutaneous anaphylaxis, PCA)模型, 收集双耳用于测量染料着色和组织学。细胞实验选用大鼠腹腔肥大细胞(rat peritoneal mast cells, RPMCs), 分为对照组、IgE+antigen (Ag)组和IgE+Ag+GLA组, 测定组胺释放以及钙内流水平。Western blot法检测高亲和力IgE受体(FcεRI)介导的信号通路蛋白及HMGB1/TLR4/NF-κB(high mobility group box 1/toll like receptor 4/nuclear transcription factor kappa B)信号蛋白。动物实验结果提示, GLA抑制小鼠PCA反应, 减少伊文思蓝染料渗出, 减轻耳朵炎症反应及耳朵厚度。细胞实验结果提示, GLA能减少组胺释放及钙离子内流, 并抑制肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素(interleukin, IL)-4、IL-13和IL-1β生成; Western blot实验结果显示GLA可抑制FcεRI介导的脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, Syk)、Lck/Yes新型酪氨酸激酶(Lck/Yes novel tyrosine kinase, Lyn)、酪氨酸激酶Fyn (tyrosine kinase, Fyn)、生长因子受体结合蛋白2 (growth-factor receptor-bound protein 2, Gab2)和磷脂酶C-γ1 (phospholipase C-γ1, PLCγ1)的磷酸化水平, 同时GLA抑制HMGB1/TLR4信号通路使NF-κB p65核转移受限。结果表明, GLA通过HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路抑制肥大细胞脱颗粒并减轻过敏性炎症。

新型Rho激酶抑制剂DL0805-2在高血压危象的治疗中不仅能快速降低系统血压, 也可降低肺动脉压力, 并对肺部损伤具有明显保护作用。本实验拟探究DL0805-2防治肺动脉高压的药效并初步探究其分子机制。动物福利和实验过程均遵循中国医学科学院药物研究所动物伦理委员会规定。将SD (Sprague Dawley)大鼠随机分为DL0805-2低、中和高剂量组(1、3和10 mg·kg^-1)、波生坦阳性对照组、模型组及空白对照组, 在野百合碱造模后的第7天开始给药, 实验终点第25天检测各项指标, 观察DL0805-2对肺动脉高压的防治作用。DL0805-2对野百合碱导致的与肺动脉高压相关的生理指标的异常改变具有明显改善作用, 包括降低右心室收缩压, 减轻压力负荷导致的心脏损伤, 降低肺部疾病标志物内皮素-1及炎症因子的水平, 改善肺动脉重构情况, 初步的机制研究发现DL0805-2通过Rho激酶通路发挥对肺动脉高压的防治作用。DL0805-2对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压具有良好的药效, 其在疾病发生早期进行干预可有效缓解疾病的发展进程, 降低模型动物死亡率, 其机制与Rho激酶通路相关。

探讨四氢异喹啉类新化合物SYT-1对肿瘤细胞增殖抑制作用及其机制。采用CCK-8 (cell counting kit-8)法检测细胞增殖; 克隆形成实验检测细胞克隆形成能力; JC-1探针法检测细胞线粒体膜电位; DCFH-DA (2', 7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate)探针法检测细胞内活性氧水平; Annexin V-FITC/PI (fluorescein isothiocyanate/propidium)复染法检测细胞凋亡; Western blot法检测相关蛋白表达水平。实验结果表明, SYT-1对6种人源癌细胞的增殖具有显著抑制作用, 其中对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用最强, 半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)为5.87 μmol·L^-1, 优于顺铂(IC₅₀为8.92 μmol·L^-1)。进一步研究表明, SYT-1可剂量依赖性抑制MCF-7细胞的单克隆形成能力, 并能引起细胞线粒体膜电位下降和活性氧水平升高。此外, SYT-1可以显著抑制PI3K-Akt (phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B)信号通路的激活并诱导MCF-7细胞的凋亡。上述研究结果表明, 作为一种新型四氢异喹啉类化合物, SYT-1具有抑制肿瘤细胞增殖的潜力。

研究黄芩素对人食管鳞癌转移的影响及可能的作用机制。采用划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验分别考察黄芩素对食管鳞癌细胞(EC9706和KYSE30)迁移和侵袭能力的影响; 使用KYSE30细胞构建裸鼠肺转移模型考察黄芩素在体内对食管鳞癌转移的影响。本文中动物福利和实验过程均遵循河南大学动物伦理委员会的规定。使用Western blot法检测黄芩素对食管鳞癌细胞中ERK/ELK-1/Snail信号通路相关蛋白表达的影响。实验结果显示: 黄芩素能够显著地降低EC9706和KYSE30细胞的迁移和侵袭能力; 黄芩素在体内对食管鳞癌转移也具有很强抑制作用; 分子机制研究发现, 黄芩素显著地降低ERK1/2 (extracellular signal-regulated kinase 1/2, T202/Y204)和ELK-1(ETS-domain containing protein-1, S383)的磷酸化, 下调果蝇蜗牛同源蛋白(Snail)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达, 同时促进上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达; 使用ERK1/2抑制剂U0126或siRNA能够显著地增强黄芩素对以上蛋白的调节作用。综上所述, 黄芩素可能通过调节ERK/ELK-1/Snail信号通路抑制食管鳞癌细胞迁移、侵袭和转移。

舒血宁注射液作为一种银杏叶提取物制剂, 在脑卒中急性期和亚急性期防治上表现出独特优势, 但其主要活性部位尚不明晰。本研究旨在基于前期构建的小鼠脑卒中亚急性期模型, 进一步探讨舒血宁的两个主要组分银杏总黄酮和银杏总内酯对促进脑卒中小鼠神经功能恢复的贡献度及作用机制。主要通过神经及行为学变化、脑梗死体积、血脑屏障渗透和脑水肿进行药效评价, 结合转录组和网络药理学进行通路和靶标预测, 最后在mRNA和蛋白水平进行机制验证。结果显示, 在药效评价和粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, GCSF)、巨噬细胞分化抗原1 (macrophage-1 antigen, MAC-1)和E选择素参与的粒细胞黏附与浸润的调节机制中, 银杏总内酯的作用均优于银杏总黄酮, 提示舒血宁注射液可能主要通过银杏总内酯组分下调G-CSF介导的粒细胞黏附与浸润通路来改善亚急性期卒中小鼠的预后。这一发现有望为优化处方和寻找靶向治疗缺血性脑卒中预后的天然药物提供参考。本研究动物实验过程遵循天津中医药大学动物伦理委员会的规定。

基于中药复方网络药理学方法探讨二黄汤(Erhuang decoction, EhD)治疗急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的多成分-多靶点-多通路作用机制。以EhD体内入血成分为研究对象, 利用SwissTargetPrediction、DisGeNET、Therapeutic Target Database (TTD)、GeneCards、Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM)等数据库预测成分潜在作用靶点, 并与ALI疾病预测靶点交集整合, 获得二黄汤治疗ALI的潜在靶点。利用String数据库和Cytoscape软件进行蛋白相互作用(protein-protein interaction network, PPI)网络构建; 利用DAVID平台进行基因本体论(Gene Ontology, GO)分析和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路注释; 应用Cytoscape软件构建“入血成分-靶点-通路”网络; 采用Swissdock在线平台对入血成分与关键靶点进行分子对接。建立小鼠ALI模型, 进行肺组织切片、炎症因子检测和Western blot蛋白表达实验, 验证EhD对ALI治疗效果。动物实验获得山东大学实验动物中心伦理委员会的批准(批准号: 2016020)。结果发现信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)、血管内皮生长因子A (vascular endothelial cell growth factor A, VEGFA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1 (RAC-alpha serine/threonine-protein kinase, AKT1)、核转录因子-κB/p65 (nuclear factor-kappa B/p65, RELA)等关键靶点148个, 主要涉及炎症、氧化应激和细胞凋亡等生物过程, 与癌症通路、VEGF信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路、Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)信号通路等通路相关。药效实验显示, EhD能显著降低ALI小鼠炎症因子含量、降低肺损伤程度。Western blot实验显示, EhD能显著下调NF-κB/p65表达, 上调核转录因子抑制剂(NF-kappa B inhibitor alpha, IκBα)的表达。本研究从网络药理学的角度初步揭示了EhD治疗ALI的多成分、多靶点和多通路的作用机制, 为中药复方作用机制研究提供借鉴。

为分析消胀贴膏敷脐改善肝硬化腹水的生物标志物与作用机制, 为其临床应用提供科学依据, 将2017年11月至2018年6月于上海中医药大学附属曙光医院确诊为肝硬化腹水伴有胃肠动力障碍的住院患者分为安慰剂组(4例)和消胀贴膏组(5例), 并纳入10例健康志愿者作为对照。试验获得上海中医药大学附属曙光医院伦理委员会批准(批件号: 2017-528-11-01)。消胀贴膏组患者给予消胀贴膏脐部贴敷, 安慰剂组给予生药含量低于5%的凝胶贴膏, 每日1贴, 连续3日。采用非靶向代谢组学研究方法, 结合UPLC-Q/Orbitrap-MS/MS分析技术, 对给药前后患者尿液中内源性代谢轮廓的变化进行分析。通过系统分析比较肝硬化腹水患者与健康志愿者的尿液代谢轮廓, 最终指认了31个生物标志物, 其中14个生物标志物受消胀贴膏干预有显著回调(P < 0.05), 通路富集分析发现苯丙氨酸与色氨酸代谢通路是消胀贴膏发挥药效的关键通路。消胀贴膏改善肝硬化腹水的作用机制可能与调节机体氨基酸及其代谢产物的水平相关。

仙灵骨葆为骨科常用药, 临床疗效好, 但近年来发现有致肝损伤风险。本研究通过对文献不良反应报告和重点医院病例进行分析, 发现文献检索到的仙灵骨葆肝损伤病例存在较大比例的报告信息不完整, 难以准确判断其因果关系。重点医院药物性肝损伤(DILI)病例中, 筛选出仙灵骨葆相关肝损伤患者6例, 其中2例经整合证据链法评价达到了“临床诊断”标准。进一步对区域全人群健康大数据进行分析, 估算其粗发生率为0.034%, 属于罕见水平, 具有显著的个体差异和特异质属性, 仙灵骨葆相关肝损伤总体发生水平低于其他骨病用药。基于免疫应激介导的特异质肝损伤模型, 通过拆方研究发现, 方中淫羊藿和补骨脂是引起肝损伤的相关药味, 全方的肝损伤严重程度弱于淫羊藿和补骨脂, 提示方中另外4味药(续断、知母、地黄、丹参)有减轻二者引起的肝损伤作用。进一步进行拆方研究, 发现4味药均有减轻淫羊藿和补骨脂所致肝损伤作用, 其中丹参的配伍减毒效果最好。综上, 仙灵骨葆可能在极少数易感个体引起特异质肝损伤, 但发生风险低于其他常用骨病药物。临床应用仙灵骨葆要注意避免在免疫应激患者应用。仙灵骨葆引起肝损伤的主要药味为补骨脂、淫羊藿, 且丹参在全方中起到配伍减毒作用。本研究可为仙灵骨葆临床合理用药提供参考。

中药注射剂在临床经常与化学药物联用治疗多种复杂疾病, 但其中药-药物的相互作用还没有得到充分的研究, 有时甚至被临床忽视。本文研究国家食品药品监督管理局批准的79种中药注射剂, 评价它们对人体药物代谢酶-细胞色素P450 (CYP450)的潜在抑制作用。使用9种人CYP450s (包括CYP1A、CYP2A6、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A)、特异性底物和中药注射剂共同孵育, 使用灵敏度、准确度高的液相串联质谱(LC-MS/MS)对探针形成的代谢产物进行定量分析, 评价79种中药注射剂对CYP450的体外抑制作用。在79种中药注射液中, 当在中药注射液5%(v/v)和注射用粉针剂2倍日最大使用剂量换算浓度C_MDD(mg·mL^-1)筛选时有37种中药注射剂对CYP1A、24种中药注射剂对CYP2A6、41种中药注射剂对CYP2B6、36种中药注射剂对CYP2C9、41种中药注射剂对CYP2C19、41种中药注射剂对CYP2D6、25种中药注射剂对CYP2E1和42种中药注射剂对CYP3A表现出50%的抑制率或更强的抑制作用。在预孵育或与人肝微粒体共孵育30 min后, 观察到2种中药注射剂对CYP1A、5种中药注射剂对CYP2A6、5种中药注射剂对CYP2B6、6种中药注射剂对CYP2C8、1种中药注射剂对CYP2D6、6种中药注射剂对CYP3A呈现时间依赖性抑制(TDI)作用。结果表明, 中药注射剂存在基于CYP450的中药-药物相互作用及时间依赖性的中药-药物相互作用, 需要临床医生用药提高警惕。

采用多种色谱技术从怀菊花茎叶中分离得到8个聚炔类化合物。通过UV、IR、ESI-MS、HR-ESI-MS及NMR等波谱技术对其进行结构鉴定, 分别为菊花新炔C (2E, 4E, 12Z-十四碳三烯-1-吡咯烷基-1-酮-8,10-二炔)(1)、tetradeca-2E, 4E, 12E-trien-8,10-diynoic acid pyrrolidide (2)、tetradeca-2E, 4E-dien-8,10-diynoic acid pyrrolidide (3)、tetradeca-2E, 4E, 10Z-trien-8-ynoic acid pyrrolidide (4)、2E, 4E, 12E-tetradecatriene-8,10-diynoic acid isobutylamide (5)、2E, 4E-undecyldiene-8,10-diynoic acid isobutylamide (6)、2E, 4E, 10E-N-isobutyl-2,4,10-tetradecatrien-8-ynoic acid amide(7)和十一-2E, 4E-二烯-8,10-二炔酸苯乙胺(8)。其中化合物1为新化合物, 化合物2~8为首次从植物菊花中分离得到。化合物5~8在一定浓度下对A549细胞具有显著的抑制活性, 说明其具有潜在的抗癌活性。

采用聚酰胺—大孔树脂柱色谱、ODS中压柱色谱以及半制备液相色谱分离技术, 对光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)水提取物中三萜皂苷类成分进行分离纯化, 共获得10个三萜皂苷类化合物, 依据理化性质及NMR、MS波谱数据鉴定化合物结构, 分别鉴定为3β-O-[β-D-glucuronpyranosyl-(1→2)-β-D-glucuronpyranosyl]-30β-O-β-Dglucuronpyranosyl-oleanane-11-oxo-12(13)-ene (1)、3β-O-[β-D-glucuronpyranosyl-(1→2)-β-D-glucuronpyranosyl]-30β-O-α-L-rhamnopyranosyl-oleanane-11-oxo-12(13)-en-22β, 30-diol (2)、uralsaponin C (3)、licorice-saponin A3 (4)、licoricesaponin P2 (5)、22β-acetoxyl-glycyrrhizin (6)、macedonoside A (7)、29-hydroxyl-glycyrrhizin (8)、licorice-saponin G2 (9)和glycyrrhizin (10), 其中化合物1和2为新化合物, 命名为licorice-saponin R3和licorice-saponin S3。

中药质量标志物是近年来中药质量研究的热点, 虽有较多相关探讨与研究实践, 但如何科学合理地表征质量标志物仍未有突破性进展。本文尝试建立了基于层次分析(analytic hierarchy process, AHP)-熵权法的中药质量标志物辨识方法, 在构建涵盖目标层、要素层、控制层的评价体系基础上, 首先采用AHP法对中药成分有效性、可测性、特有性3个核心质量属性进行权重分析, 其次对各属性下的具体指标基于文献和实验数据应用熵权法进行分析, 得到各具体指标的权重后加权计算各成分的综合评分并排序, 从而确认中药质量标志物。采用该方法以解痉止痛经典名方芍药甘草汤为例进行研究, 结果发现其质量标志物重要性排序靠前的8个成分为: 芍药苷 > 槲皮素 > 芍药内酯苷 > 甘草酸 > 柚皮素 > 甘草苷 > 氧化芍药苷 > 苯甲酰芍药苷, 为相关方剂质量标准建立与全程质量控制提供了重要支撑。该研究也为中药质量标志物的量化评价与精准辨识提供了创新思路与方法。

为提高5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid, 5-ALA)介导的光动力治疗(photodynamic therapy, PDT)的疗效, 本研究制备了共载5-ALA及二氧化碳(CO₂)的氟碳微乳凝胶(fluorocarbon microemulsion-based gel, FMBG)。通过表征其平均粒径、zeta电位、形貌和pH值等考察其理化性质; 利用酸碱中和滴定的方法测定CO₂的装载量; 建立荧光衍生化法测定5-ALA含量; 通过激光共聚焦显微镜及Franz扩散池测定装载5-ALA的FMBG的体内外扩散情况; 通过激光散斑血流成像仪测定CO₂增加血流灌注的情况; 最后通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, H & E)检测载药FMBG的皮肤刺激性。结果表明, 所制备的FMBG呈乳白色凝胶状, 平均粒径为202.4 nm, zeta电位为-25.3 mV, pH值为6.0, 黏度为1 062.0 mPa·s, 且室温下可以稳定保存7天; 测得5-ALA含量约为20%(w/w); 在室温、常压下, CO₂的装载量为5.016 mg·L^-1, 是相同量水溶液对CO₂装载量的1.5倍; 透皮吸收实验及血流灌注实验结果表明, FMBG可有效实现5-ALA和CO₂的经皮递送, 并显著增加皮肤的血流灌注; H & E染色证明, 载药FMBG的皮肤刺激性较小(动物实验已获联勤保障部队第九〇〇医院伦理委员会批准)。综上, 本研究成功制备了共载5-ALA及CO₂的FMBG, 安全稳定, 适合开发成经皮给药制剂, 有望显著增强PDT疗效。

本文以《中国药典》(2020年版)为指导, 对来自进口A厂、国产S厂和国产T厂的2208型羟丙甲纤维素以及同一厂家不同批次的羟丙甲纤维素的功能性相关指标进行了表征, 并通过主成分分析对羟丙甲纤维素的功能性相关指标进行全面综合评价。实验结果表明: 不同厂家的羟丙甲纤维素黏度和多分散系数(D)未见显著性差异, 而样品累积粒度分布百分数达50%时所对应的粒径(d₅₀)、样品累积粒度分布数达90%时所对应的粒径(d₉₀)、松密度(ρ_b)、振实密度(ρ_bt)和卡尔指数等均存在显著性差异。同一厂家不同批次产品各功能性相关指标均存在批间差异, A厂羟丙甲纤维素粒径的批间差异最大, 多分散系数批间差异次于S厂, 其他指标的批间差异均小于国产厂家。通过主成分分析提取出方差贡献率达89.44%的3个主成分。再通过构建综合评价模型, 得到羟丙甲纤维素的综合得分排序: S厂 > A厂 > T厂。

查尔酮异构酶(chalcone isomerase, CHI, EC5.5.1.6)是甘草黄酮类有效成分生物合成途径中的第二个限速酶, 发挥重要的调控作用。本课题组在前期研究基础上, 筛选出黄酮高含量甘草特异对应的CHI基因型, 通过基因融合法构建了过表达CHI基因的植物双元表达载体, 并通过电转法将其转化到发根农杆菌ACCC10060中, 用于侵染甘草子叶和胚轴, 获得过表达CHI基因的甘草毛状根系, 利用qRT-PCR法测定各甘草毛状根系中CHI基因的拷贝数, 并利用UPLC法测定各甘草毛状根系中4种黄酮类化合物的含量。结果显示获得了拷贝数分别为1和5的过表达CHI基因甘草毛状根系, 且其总黄酮、甘草苷、甘草素和异甘草素的含量均显著高于野生型毛状根, 表明过表达CHI基因能显著提高甘草毛状根中黄酮类化合物的含量。本文为解析CHI基因的功能提供了理论依据, 筛选出3个过表达CHI基因甘草毛状根系用于后续扩大培养, 可为离体积累甘草黄酮类化合物奠定基础。

鼠李糖合成酶(rhamnose synthase, RHM) 是尿苷二磷酸鼠李糖(UDP-Rha) 生物合成的关键酶, 其在还原型辅酶Ⅰ和还原型辅酶Ⅱ的存在下, 可将尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-Glc) 转化为UDP-Rha。本文以酵母提取物(yeast extract, YE) 诱导的欧洲花楸悬浮细胞为研究材料, 基于前期转录组数据, 筛选并克隆出2条RHM基因, 命名为SaRHM1 (GenBank登录号MK213340) 和SaRHM2 (GenBank登录号MK213341)。SaRHM1和SaRHM2基因的开放阅读框分别为2 007、2 040 bp, 分别编码668、679个氨基酸, 生物信息学分析推测其分子质量分别为75.25、76.26 kD, 理论等电点(theoretical pI) 分别为7.24、6.41, 两者均具有RHM家族的保守结构域(GxxGxxG/A和YxxxK)。多重序列比对与系统进化树显示, SaRHM1和SaRHM2与其他物种的RHM具有较高的同源性。体外酶促反应显示, 重组蛋白SaRHM1和SaRHM2均具有将UDP-Glc转化为UDP-Rha的功能。酶促动力学参数显示, SaRHM1和SaRHM2反应的最佳pH分别为9和8, 温度均为40 ℃, 其中SaRHM1和SaRHM2的K_m值分别为212.4 ± 56.70和361.0 ± 63.74 μmol·L^-1, V_max值分别为235.5 ± 18.98和516.5 ± 22.30 nmol·min^-1·μg^-1。本研究首次报道了欧洲花楸RHM基因, 并验证了其功能, 为后续天然产物鼠李糖苷的生物合成提供鼠李糖供体。