小分子药物包含有多维属性, 新药创制须满足安全性、有效性、稳定性、可控性和患者顺应性等要求。这些属性可概括为药理活性和成药性, 都隐含在药物的化学结构之中。药理活性和不良反应是药物分子与向靶(on-target) 或脱靶(off-target) 蛋白分子间相互作用, 产生的活性(毒性) 强度和选择性是由药物的微观结构所决定。药代动力学和物理化学性质是由药物的宏观性质所决定, 微观结构与宏观性质交织融合在分子结构之中。构建双功能分子是实现“微观结构与宏观性质统一”的一个途径, 是从结构上理顺药效-药代、药效-不良反应(选择性) 关系的策略和方法。本文以成功上市或处于临床研究的药物为例, 对抗体偶联药物、蛋白靶向降解嵌合体、分子胶、多肽修饰等行之有效的技术方法从药物化学视角诠释双功能分子的结构特征。此外, 笔者将共价键结合药物和过渡态类似物以及前药也归纳到双功能分子范畴, 强调在分子设计和结构优化中功能基团双功能性的区分和重要意义。

胰腺癌是致命的恶性肿瘤之一, 现有的手术切除和化疗手段均未能很好地改善患者的预后情况, 因此亟需寻找更安全有效的治疗方法以满足临床治疗需求。抗体偶联药物(antibody drug conjugate, ADC) 是一类利用化学连接子将单克隆抗体与小分子细胞毒药物偶联而成的靶向抗肿瘤药物, 具有选择性高、效力高、毒副作用低等优势。近年来, ADC在多种肿瘤治疗中的成功应用掀起了抗胰腺癌ADC的研究热潮。本文就ADC的结构和作用机制及其在抗胰腺癌领域中的研究现状作一综述, 为今后抗胰腺癌ADC的研究提供一定的参考依据。

流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA) 是病毒入侵宿主细胞的关键因素, 涉及病毒与靶细胞的结合及膜融合过程。宿主体内的蛋白酶对HA进行裂解和激活, 是病毒识别宿主细胞及启动膜融合的先决条件, 也是病毒感染宿主的必要条件。本文总结了Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶、人类组织激肽释放酶及其他宿主蛋白酶对不同亚型流感病毒HA的蛋白水解激活作用, 并对其作为潜在抗病毒治疗靶点的可能性进行了探讨。

合成药物化学在新药研发中扮演着至关重要的角色。本文介绍了2023年度国家自然科学基金药物学学科合成药物化学相关申请代码H3401和H3407面上项目、青年科学基金项目和地区科学基金项目的申请与资助情况, 分析了2023年度申请项目的研究热点, 并针对申请项目中存在的问题, 为合成药物化学项目申请人提出建议, 以期更好地发挥合成药物化学在新药研发过程中的作用, 持续推进我国原创新药研发的高质量发展。

药品检验涉及的分析仪器与检验项目众多, 样品前处理过程繁琐, 且当前行业智能化水平不高, 导致药品检验仍属于劳动密集型工作。然而, 在工业4.0智能制造的时代背景下, 质量控制(quality control, QC) 实验室的智能化转型已成为行业焦点。同时, 受仿制药一致性评价和药品集采政策的推动, 制药企业竞争加剧, 进一步激发了企业对实验室智能化的内在需求。本文结合制药工业现状及未来趋势, 探讨了如何构建数字化和自动化的QC实验室, 并指出为了适应连续制造工艺, 需从传统的中央实验室模式逐步升级为智能化的分布式质量控制模式。同时还深入剖析了实施过程中的潜在挑战及应对策略, 以期为相关从业人员提供构建智能化QC实验室的思路。

肺部疾病是人类健康的主要威胁之一, 目前针对肺部疾病的临床治疗药物普遍存在肺部递送效率低、清除速率快及毒副作用明显等问题。近年来, 膜仿生纳米载体受到越来越多的关注, 因其具有靶向性高、循环时间长、生物相容性好和免疫逃逸能力强等优势, 已成为肺部疾病靶向治疗的一大研究热点。本文综述了膜仿生纳米粒的主要制备方法、不同细胞来源的膜仿生纳米载体的特点及其在肺部疾病靶向治疗中的应用; 此外, 结合不同膜的性质特点分别讨论其缺点, 并讨论当前的技术局限性及未来的展望, 为膜仿生纳米载体的设计及其在肺部疾病治疗中的潜在应用提供参考。

DNA折纸术是一种产生具有动态特性和智能可控纳米结构的强大技术。精确的几何形状、高度可编程性及优异的生物相容性使得DNA折纸纳米结构成为一种新兴的药物递送载体。载体材料的形状、大小及药物的负载和释放是影响药物生物利用度的重要因素。本文着重介绍了可控设计DNA折纸纳米结构、高效负载药物及智能释放药物, 归纳总结了DNA折纸技术在生物医学中的前沿应用, 最后讨论了研究人员可以在哪些方面为进一步推进DNA折纸载体的临床应用作出贡献。

微针作为一种新型的透皮给药系统, 能够显著改善皮肤的渗透性, 增强药物的透皮递送效果, 在突破皮肤角质层屏障方面显示出独特的优势。这一特性使得微针给药系统在生物技术药物的递送方面展现出巨大的潜力。传统的生物技术药物递送途径主要是注射给药, 这种方式给患者带来疼痛、皮肤红肿等问题, 导致患者依从性较差。此外, 生物技术药物的生产、运输和储备都需要严格的低温条件来保持其活性, 增加成本。相比之下, 微针给药系统具有诸多优势, 为生物技术药物的递送提供了新的途径和解决方案。本文对递送生物技术药物的微针给药系统进行概述, 总结了微针体系在生物技术药物方面的研究进展。

探讨巴戟天环烯醚萜苷(Morinda officinalis iridoid glycosides, MOIG) 对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA) 大鼠骨丢失的治疗作用, 并对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) 诱导的破骨细胞功能和活性的作用机制。应用牛Ⅱ型胶原诱导类风湿关节炎大鼠(type Ⅱ collagen-induced rheumatoid arthritis rats, CIA) 为模型(实验中所有操作均获得浙江中医药大学生物伦理委员会批准, 批准号: IACUC-20180410-03), 灌胃给药8周, 显微CT观察CIA大鼠的骨小梁微结构变化, LPS诱导破骨细胞模型进一步观察体外抗炎症性骨质疏松的作用机制。结果表明MOIG显著增加CIA大鼠骨密度, 改善骨小梁微结构。体外实验表明, MOIG抑制破骨细胞形成分化、抗酒石酸酸性磷酸酶活性和F-actin环的形成, 抑制TNF受体相关因子6 (TNF receptor associated factor 6, TRAF6) 的募集和核因子κB抑制蛋白[inhibitor of nuclear factor kappa-B (NF-κB), IκBα] 的降解及p65的磷酸化表达, 从而抑制NF-κB通路的激活; 同时有效抑制破骨细胞活化T-细胞核因子1 (nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1, NFATc1) 和c-Fos (cellular oncogene fos) 的表达, 以及基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase 9, MMP9) 和组织蛋白酶K (cathepsin K, CtsK) 的活性; MOIG还抑制Janus激酶2 (Janus activating kinase 2, JAK2)/信号传导和转录激活蛋白3 (signal transducer and activator of transcription 3, STAT3) 蛋白的磷酸化表达, 从而抑制JAK2/STAT3通路的激活。进一步研究发现, MOIG显著抑制丝氨酸/苏氨酸激酶-3β (glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β) 的活性, GSK-3β基因沉默显著抑制破骨细胞F-actin环的形成、p65的磷酸化以及STAT3信号的激活, 且MOIG和GSK-3β基因沉默同时作用后的效果没有明显差异。因此, MOIG可通过调控GSK-3β抑制JAK2/STAT3和NF-κB通路的激活来减缓RA的骨破坏。

(E)-1-(4-(3-(5-氯-6-氧代-3, 6-二氢吡啶-1(2H)-基)-3-氧代丙基-1-烯-1-基)苯基)-3-(4-氟苯基)脲(以下简称C12) 是课题组前期合成的一个新型荜茇酰胺衍生物。本研究以人非小细胞肺癌H1299细胞为研究对象, 探讨C12对人非小细胞肺癌的体外抗肿瘤作用及其作用机制。采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium、MTT) 法、划痕实验、平板克隆实验和Transwell细胞侵袭实验检测C12对H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响; 通过流式细胞术检测C12对H1299细胞周期、活性氧(reactive oxygen species, ROS) 的产生、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP) 和细胞凋亡的影响; 通过蛋白印迹实验检测p21、Cyclin B1、CDK1、Bax、Bcl-2、JNK、p-JNK、Erk1/2、p-Erk1/2、p38和p-p38的表达, 探讨C12的抗肿瘤作用机制。结果显示, C12呈时间和浓度依赖性地抑制H1299的增殖、迁移和侵袭; 流式细胞结果显示, C12能阻滞H1299细胞周期于G2/M期, 升高ROS水平, 降低MMP并诱导细胞凋亡; 蛋白印迹结果显示, C12通过下调Cyclin B1和CDK1蛋白表达将H1299细胞阻滞于G2/M期, 上调Bax/Bcl-2水平诱导细胞凋亡, 上调MAPK通路中p-JNK、p-Erk1/2和p-p38的表达。综上所述, C12能够显著抑制H1299的增殖、迁移和侵袭, 并诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡, 其机制可能与激活MAPK信号通路有关。

G蛋白偶联受体40 (G protein-coupled receptor 40, GPR40) 是G蛋白偶联受体家族成员, 对糖脂代谢有重要调控作用。本研究旨在考察新型GPR40激动剂SZZ15-11对自发性2型糖尿病KKA^y小鼠糖脂代谢的影响, 并探讨其潜在机制。将KKA^y小鼠随机分为4组, 一组以0.5%羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethylcellulose, CMC) 灌胃为模型组(vehicle)、一组以TAK875 (50 mg·kg^-1) 灌胃为阳性对照组(TAK), 另两组分别以不同剂量SZZ15-11 (50和100 mg·kg^-1) 灌胃为给药组(SZZ 50 mg·kg^-1和SZZ 100 mg·kg^-1), 每天一次, 共45天。于给药期间, 检测空腹血糖、随机血糖、血甘油三酯(triglyceride, TG) 和总胆固醇(total cholesterol, TC) 水平, 进行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验, 同时通过酶联免疫吸附方法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 测定小鼠血胰岛素和胰高血糖素水平。实验结束后处死小鼠, 取肝组织, 测定TG和TC含量, 用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE) 染色观察肝组织病理形态, 通过Western blot和RT-PCR探讨肝组织脂代谢相关信号通路改变。实验经中国医学科学院药物研究所实验动物管理和使用委员会的审查批准。在人肝肿瘤细胞HepG2和TNFα诱导3T3-L1胰岛素抵抗脂肪细胞模型, 通过Western blot探讨SZZ15-11对胰岛素信号通路和脂联素表达的影响。结果显示, SZZ15-11不仅可降低KKA^y小鼠的高血糖、高血脂, 增强胰岛素敏感性, 还可增加小鼠空腹血胰高血糖素水平, 促进糖负荷后胰岛素分泌; 能改善小鼠肝组织脂肪变性, 保护肝功能; 在肝组织中, 可上调AMPKα磷酸化, 使胆固醇代谢相关基因Abcg8表达增加; 在肝细胞和胰岛素抵抗脂肪细胞模型, 可增强胰岛素信号, 明显减弱TNFα对脂联素表达的抑制作用。提示GPR40激动剂SZZ15-11能有效调控糖脂代谢紊乱, 是一新型的、有潜力的抗糖尿病候选化合物。

探讨新型MoS₂纳米酶通过调控线粒体动力, 以减轻炎性血管内皮细胞损伤的保护机制。利用水热法制备出了花状MoS₂纳米片, 结合电子自旋共振(electron spin resonance, ESR) 光谱检测技术, 表明花状MoS₂纳米片对羟基自由基(·OH) 和单线态氧(¹O₂) 都具有很强的清除能力, 呈剂量依赖效应。通过体外脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) 诱导的血管内皮细胞炎性氧化应激损伤模型, 用花状MoS₂纳米片预处理, 本研究分别用MTT及Annexin V-FITC/PI双染法检测内皮细胞毒性及凋亡; 用MitoTracker荧光探针观察内皮细胞线粒体分裂及融合形态; 用活性氧(reactive oxygen species, ROS) 探针DCFH-DA及超氧阴离子(O^2-) 探针DHE检测细胞氧化应激水平; 用质粒GFP-LC3转染及荧光共定位技术观察并分析细胞自噬及线粒体自噬形成。结果表明, MoS₂纳米酶可以显著减少炎性内皮细胞的细胞毒性及细胞凋亡, 减轻炎性内皮细胞线粒体的分裂, 并维持融合状态下的线粒体动力; 还可以缓解LPS介导的内皮细胞线粒体自噬, 进而保护内皮细胞免受炎性氧化应激性损伤。以上结果确立了新型MoS₂纳米酶可以通过调控内皮细胞线粒体动力及线粒体自噬, 实现对炎性内皮细胞损伤的保护, 有望拓展MoS₂纳米酶用于防治慢性炎症性血管内皮损伤相关疾病。

本研究专注于心脏缺血期间由代谢异常和离子平衡紊乱导致的微环境酸化现象, 这种酸化现象会显著触发药物抗性, 从而限制冠心病的治疗效果。为了解决该问题, 本研究深入探讨了碳酸酐酶抑制剂在通过pH调节来增强药效方面的潜在作用。首先, 在细胞模型中评估了碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺与阿司匹林在缓解心肌缺氧损伤方面联合使用的功效。通过高通量筛选技术, 本研究系统地分析了这两种药物组合的协同作用, 并确定了其最佳配比。在此基础上, 利用化学修饰的方法, 以乙酰唑胺为结构修饰基团, 对阿司匹林进行了结构改造, 旨在合成出具有更强心肌保护活性的新型衍生物。通过体外和体内心肌缺氧损伤模型, 全面评估了上述衍生物的生物活性和治疗效果。动物实验已获得东南大学动物伦理委员会的批准(批准号: 20240109001)。研究结果显示, 经过结构修饰的阿司匹林衍生物在改善心肌缺氧损伤方面展现出了显著的协同效应。本研究揭示了碳酸酐酶抑制剂在冠心病治疗中的作用机制, 并为新型冠心病治疗药物的开发提供了实验和理论依据, 对药物设计和冠心病治疗策略具有重要的指导意义。

川崎病(Kawasaki disease, KD) 是一种主要发生在儿童的急性全身性血管炎疾病。如果在疾病发作早期未给予及时的治疗, 可能会导致冠状动脉扩张或形成动脉瘤, 严重者可引起心肌梗死。川崎病的发病机制与免疫细胞浸润冠状动脉壁有关。巨噬细胞在川崎病发展中扮演关键角色, 参与炎症反应和血管新生。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF) 在川崎病患者血清和冠状动脉中表达上调, 促进炎症和血管生成, 增加动脉瘤的风险。阿司匹林(aspirin, ASA) 是川崎病常规治疗方法之一, 其主要作用是通过减少炎性介质和抑制血小板聚集来发挥抗炎和抗血栓作用。研究中实验动物的动物福利和动物实验过程均遵循南京医科大学附属儿童医院医学伦理委员会的伦理指南。单细胞核转录组测序技术(single-nucleus RNA sequencing, snRNA-seq) 可以深入到川崎病细胞和分子层面的图景探索, 本文通过snRNA-seq分析得到, 阿司匹林可通过下调心脏血管内皮细胞VEGF水平并抑制巨噬细胞向内皮传导血管新生信号, 来改善血管内皮功能失调、阻止血管新生, 进而防止动脉狭窄或动脉瘤形成。

通过建立M细胞模型, 探究黄芪多糖APS-Ⅱ在体内的吸收机制。首先将黄芪多糖(Astragalus polysaccharides, APS) 通过超滤法分为2种不同相对分子质量多糖APS-Ⅰ (> 2 000 kDa) 和APS-Ⅱ (10 kDa), 并制备出黄芪多糖APS-Ⅱ (10 kDa), 然后对其进行荧光标记; 同时通过Caco-2细胞和Raji细胞构建M细胞模型, 并对其进行模型验证。采用转运抑制剂对M细胞模型进行处理, 探究黄芪多糖APS-Ⅱ在M细胞上的转运情况。结果显示, 通过结构与活性验证FITC已成功标记到了APS-Ⅱ的末端, 同时M细胞模型构建成功, 并发现APS-Ⅱ可以被M细胞所转运, 通过5-(N-乙基-N-异丙基) 阿米洛利(EIPA)、染料木素(genistein)、dynasore和诺考达唑(nocodazole) 4种转运抑制剂说明APS-Ⅱ可能通过网格蛋白和小窝蛋白介导的内吞作用进入细胞。

通过筛选内部化合物库, 鉴定出了具有一定抗胰腺癌活性的片段。经系统改造合成了4类共计18个化合物, 并进行了抗胰腺癌活性评价。化合物Ⅱ-1 (IC₅₀ = 6.40 ± 0.34 μmol·L^-1) 和Ⅱ-2 (IC₅₀ = 7.15 ± 0.51 μmol·L^-1) 活性表现突出。随后用细胞划痕实验及侵袭实验评价了Ⅱ-1的抗迁移能力及侵袭能力, 结果显示, Ⅱ-1具有良好的抗迁移能力及突出的抗侵袭能力。利用分子对接技术及分子动力学模拟技术, 锁定了Ⅱ-1的靶点为双特异性酪氨酸磷酸化调控激酶1A (DYRK1A)。经酶活测试Ⅱ-1和Ⅱ-2分别有48%及32%酶抑制能力。

运用MCI Gel CHP 20P、Sephadex LH-20、ODS和硅胶等柱色谱, 结合TLC、半制备液相色谱等分离纯化方法, 从苏合香水提物的95%乙醇溶解物中得到12个松香烷二萜化合物。运用1D、2D NMR、UV、MS等现代波谱学方法对所分离得到的化合物进行结构鉴定, 并运用计算ECD的方法确定了新化合物的绝对构型。其中, 化合物1为新化合物, 鉴定为(4R, 5R, 9S, 10R, 12S)-12-methoxy-neoabietic acid, 化合物2~12为首次从苏合香中分离得到。

基于种属特异性多肽, 采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UHPLC-MS/MS) 建立了地龙鉴别和伪品保宁腔蚓的检查方法, 并应用于地龙及两种成方制剂的检测分析。采用CORTECS T3 C18色谱柱分离, 以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相, 梯度洗脱, 采用ESI⁺离子源、多重反应监测(MRM) 模式, 同时监测3组离子对。结果表明, 本方法具有良好的专属性, 可以鉴定出广地龙、沪地龙、保宁腔蚓, 鉴定结果与DNA条形码分子鉴定结果一致。掺伪检查研究表明, 保宁腔蚓多肽M的检出限为1 μg·g^-1, 广地龙中掺入1%保宁腔蚓时即可检出, 方法灵敏度高。54批市售地龙样品中广地龙占比35%、沪地龙35%、保宁腔蚓15%, 另外15%未检出任何目标离子, 经DNA条形码分子鉴定发现这些样品主要来源为远盲蚓属, 部分样品性状与沪地龙相似。成方制剂分析结果显示, 3批小活络丸(3/6) 未检出任何多肽离子, 2批伸筋丹胶囊(2/4) 中检出保宁腔蚓。本研究所建立的方法专属性好、灵敏度高、可行性强, 可以用于地龙及其相关制剂的质量控制研究中, 对于提高质量标准、规范地龙药材市场具有重要意义。

金芪降糖胶囊(JQJTC) 临床上常用于2型糖尿病的预防与治疗, 但其中主要的化学成分含量尚不清楚。本研究首先建立JQJTC中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芒柄花素、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷、小檗碱、表小檗碱、小檗红碱、黄连碱、药根碱、巴马汀、木兰花碱的超高效液相-串联质谱联用的含量测定方法, 再采用所建立的方法测定JQJTC中15种成分的含量, 并考察辅料对JQJTC多成分含量的影响。使用ACQUITY UPLC BEH C₁₈ (100 mm × 2.1 mm, 1.7 μm) 色谱柱, 流动相为0.1%乙酸-5 mmol·L^-1乙酸铵水溶液(A)-乙腈(B), 流速0.3 mL·min^-1, 柱温40 ℃, 采用电喷雾离子源, 在正离子模式下进行检测。结果显示建立的方法符合中国药典含量测定方法学的要求; 所检测的15种成分在JQJTC中含量高低不等, 含量前5位依次是小檗碱、绿原酸、巴马汀、黄连碱、隐绿原酸, 共占87.31%; 未含辅料全方提取物中黄连生物碱类(小檗碱、表小檗碱、小檗红碱、黄连碱、药根碱、巴马汀、木兰花碱) 和金银花有机酸类(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸) 成分含量显著低于胶囊内容物含量, 这10种成分含量占测定成分总含量的99.20%。本研究建立了准确、灵敏和高效的JQJTC多成分超高效液相色谱-串联质谱测定方法, 稳定可靠地检测了胶囊中15种成分含量, 可为更全面的质量分析提供基础; 并发现辅料可使测定的生物碱类和有机酸类成分含量增加, 这可能有利于胶囊整体药效的发挥。

三维有序多孔炭材料由于其高比表面积、可调控的孔径结构和优异的生物相容性, 在药物传递系统中作为优异的药物载体展现出潜在的应用前景。本文以刺五加中药渣为原料, KOH为活化剂, 采用一步热解法制备三维有序多孔炭材料。利用X-射线衍射仪、扫描电子显微镜、氮气吸附-脱附、傅里叶变换红外光谱等手段对制备的三维有序多孔炭材料进行了结构表征。结果表明: 以KOH为活化剂, 采用热分解法制备的三维有序多孔炭材料具有丰富的官能团、高空隙率和高比表面积, 其比表面积为1 471.6 m²·g^-1。在800 ℃下制备的三维有序多孔炭材料对5-氟尿嘧啶具有高载药率(78.0%) 和释药率(86.8%)。三维有序多孔炭材料在药物构建中展现出显著的应用优势, 其高比表面积和可调控的孔径结构显著提高了药物负载率和释药率, 为开发高效、精准的药物传递系统提供了坚实的基础。

分析三叶青叶片蓝光补光下酚类成分及基因表达谱的变化情况, 筛选酚类代谢相关差异表达基因, 为提高三叶青叶品质提供依据。以蓝光补光和可见光的三叶青叶片为研究材料, 蓝光补光可以显著提高新绿原酸、绿原酸和3-O-香豆酰奎宁酸等酚类成分含量。转录组共获得102 949条unigenes, 其中有14 564条差异表达unigenes。通过GO功能可分为52个亚类, 而KEGG富集分析显示差异表达基因显著富集在苯丙烷生物合成、黄酮类生物合成和异黄酮生物合成等酚类代谢途径中。在三叶青酚类成分生物合成相关通路中共鉴别出63条差异表达基因, 包含苯丙氨酸氨裂解酶(phenylalanine ammonia-lyase, PAL)、肉桂醇脱氢酶(cinnamyl-alcohol dehydrogenase, CAD) 和黄酮醇合成酶(flavonol synthase, FLS) 等19种关键酶。本研究丰富了三叶青的遗传数据信息, 为解析蓝光促进三叶青酚类成分生物合成机制、开展三叶青分子育种奠定基础。

独一味是青藏高原特有的重要药用植物, 因青藏高原对气候变化的高度敏感性, 易引起独一味适生范围受气候变化强烈的影响。准确量化物种对气候变化的脆弱性对于评估物种灭绝风险和制定有效的保护策略至关重要。因此, 本研究基于α-shape方法确定的独一味栖息地和基于2种“社会共享经济途径(shared socioeconomic pathways, SSPs)”发展前景(SSP126和SSP585) 及3种大气环流模型(CMCC-ESM2、HadGEM3-GC31-LL、IPSL-CM6A-LR) 评估得到的2个不同时期(2041~2060、2081~2100年) 的未来气候变化数据, 采用气候生态位因子分析法, 通过综合独一味对平均日温差、温度季节性、最暖季平均温、最干月降水量和最暖季降水量5个气候变量的敏感性和暴露性指标, 分析了独一味对气候变化的脆弱性。结果发现, 独一味在最暖季降水量上的脆弱性最高, 在其栖息地范围内的脆弱性总体表现为南高北低、西高东低的空间格局, 且其脆弱性在SSP585情景下高于SSP126情景。不同大气环流模型的气候数据对结果存在一定影响, 可通过数据集成方法降低其不确定性。受气候变化影响, 未来独一味在低海拔区域如雅鲁藏布江、易贡藏布、察隅河、脚木足河等河滩地的生存压力加剧, 而高海拔地带如唐古拉山脉东部、横断山脉北部和秦岭西部地区中高度风化的碎石滩或石质高山草甸可能成为其避难所, 需要重点关注和加强对这些脆弱区和关键区独一味资源的保护和管理。

MADS-box家族基因是一类十分重要的转录调控基因, 在植物的整个生长发育过程中发挥重要作用。其中家族成员APETALA1 (AP1) 基因不仅在植物开花转变过程中发挥调控作用, 还控制着花器官的特征发育。灰毡毛忍冬以干燥花蕾和初开的花入药, 因此研究AP1基因参与调控灰毡毛忍冬花器官发育的潜在机制可以为分子手段提高其药用价值提供基础。本研究采用逆转录PCR (RT-PCR) 对AP1同源基因的cDNA全长进行扩增, 并将其命名为LmMADS4。结果显示, LmMADS4基因CDS序列长729 bp, 编码242个氨基酸, 且LmMADS4蛋白不含信号肽, 无跨膜结构, 为不稳定的亲水性蛋白。通过序列比对及系统进化分析, LmMADS4与忍冬MADS27蛋白聚为一类, 亲缘关系最近。最后利用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)、酵母双杂交技术对LmMADS4基因的表达模式、蛋白间的相互作用进行了分析。qRT-PCR结果表明, LmMADS4基因在灰毡毛忍冬花蕾型龙花和野生型白云的茎、叶以及花蕾不同发育时期均有差异表达; 其中LmMADS4基因主要在龙花和白云生殖器官花蕾中高表达, 且随着灰毡毛忍冬花蕾的发育, LmMADS4基因在花蕾型品种龙花中呈现持续上调表达的趋势, 而在白云花蕾末期的表达水平较花蕾晚期有所降低, 但差异不显著。酵母双杂交结果表明, 构建的诱饵载体pGBKT7-LmMADS4对酵母菌株无毒性, 也无自激活活性, LmMADS4蛋白与LmSVP1蛋白、LmSVP3蛋白和LmSOC1s蛋白间均存在相互作用。该研究可为分子层面探索灰毡毛忍冬蕾期长和花冠不展开的作用机制以及品种改良提供理论依据。

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及高效液相色谱法从络石(Trachelospermum jasminoides) 内生菌Myrothecium roridum IFB-E008发酵液的粗浸膏中分离得到3个化合物。经高分辨质谱、一维和二维核磁共振谱及文献比对等方法, 鉴定为: 3′-iso-isororidin A (1)、verrol (2) 和N-乙酰色胺(3), 其中, 3′-iso-isororidin A (1) 是一个未见文献报道的新单端孢霉烯大环内酯。体外细胞毒活性测定表明, 化合物2对人胃癌细胞株SGC-7901具有一定的抑制活性, 半数抑制浓度(half inhibition concentration, IC₅₀) 为59.79 μg·mL^-1 (158.1 μmol·L^-1), 阳性对照顺铂的IC₅₀值为6.58 μg·mL^-1 (21.9 μmol·L^-1)。