蛋白翻译后修饰是一种蛋白功能调节的重要方式，对生理和病理条件下蛋白质的结构和功能都至关重要，且修饰种类繁多。肿瘤的免疫治疗是指通过激活体内的免疫细胞或使失能的免疫细胞正常化从而治疗肿瘤的有效方法。近年来研究发现，许多类型的蛋白翻译后修饰都参与了肿瘤微环境中免疫细胞的增殖、活化以及代谢重编程等过程，并可能影响肿瘤免疫治疗的疗效。因此，本文就几类不同蛋白翻译后修饰对肿瘤微环境中免疫细胞的作用进行综述，旨在为肿瘤免疫治疗提供新的思路。

肿瘤的发生发展与肿瘤微环境密切相关。其中，肿瘤免疫微环境和肿瘤代谢微环境对肿瘤的发生发展和侵袭转移起着重要作用。肿瘤免疫治疗是通过激活人体本身的免疫系统或使免疫正常化从而起到杀伤或抑制肿瘤生长的作用。肿瘤免疫疗法已在多种实体瘤中表现出良好的治疗效果。近年来，针对肿瘤的免疫治疗取得了一些显著的进展。Warburg效应表明肿瘤细胞主要通过有氧糖酵解获取能量，肿瘤中能量代谢发生异常，肿瘤微环境会诱发肿瘤细胞代谢发生重编程。因此，靶向肿瘤代谢对肿瘤治疗也具有十分重要的意义。本文对近年来肿瘤免疫和肿瘤代谢的主要药物靶点及其相关药物研发进展进行了综述。

程序性死亡受体1（programmed cell death protein 1，PD-1）是一种重要的免疫抑制分子，其通过与细胞程序性死亡-配体1（programmed cell death 1 ligand 1，PD-L1）结合启动T细胞程序性死亡使肿瘤细胞获得免疫逃逸。免疫检查点抑制剂通过阻断PD-1与PD-L1结合，重新激活患者自身的免疫细胞来杀伤肿瘤，进而治疗多种癌症。随着美国FDA陆续批准抗PD-1单抗nivolumab、pembrolizumab和抗PD-L1单抗atezolizumab等免疫检查点抑制剂用于治疗黑色素瘤和进展期非小细胞肺癌等，癌症治疗迎来新曙光。但是只有约20%患者在接受治疗后获得了长期疗效，且多数患者后期耐药复发。因此，确定有效的生物标记物和开发新靶点是当前提高患者免疫治疗响应率的重要任务。本文就抗PD-1/PD-L1药物在肿瘤中的作用机制、预测PD1获得性耐药的潜在生物标志物以及联合治疗的发展进行综述。

随着靶向程序性死亡受体-1（programmed cell death 1，PD-1）/程序性死亡受体配体-1（programmed cell death1 ligand 1，PD-L1）药物在多种恶性实体瘤的临床治疗中取得突破性的成就，靶向肿瘤免疫检查点调控肿瘤已被认为是极具前景的新型肿瘤治疗方式，并已开启了肿瘤免疫治疗的新时代。然而，近年来研究发现靶向PD-1/PD-L1抗体药物在治疗过程中出现的疾病"超进展"现象（hyperprogressive disease），已成为一个亟待解决的关键问题。本文综述了有关靶向PD-1/PD-L1抗体药物疾病"超进展"现象的研究现状，从3个方面总结了因阻断PD-1/PD-L1信号轴而造成的疾病"超进展"潜在原因；并在此基础上，进一步基于生物标志物在靶向PD-1/PD-L1抗体药物的合理应用方面做一简单探讨。

化疗药即细胞毒类药物，主要通过影响肿瘤细胞DNA复制、转录和微管稳定性等对细胞增殖和存活至关重要的生物学事件，杀伤肿瘤细胞，是肿瘤药物治疗的传统手段。近年来，随着肿瘤免疫治疗在临床取得重大突破，化疗药因与免疫治疗潜在的联合用药空间，也迎来了新的发展契机。值得注意的是，化疗药对免疫系统的影响涉及免疫应答多个环节，作用广泛、机制复杂。当前，化疗药与肿瘤免疫联合治疗还较为随机，临床治疗获益尚不明确，亟需基于机制的理论指导。本文结合该领域的最新研究进展，从化疗药对免疫细胞的作用及对肿瘤细胞的免疫原性重塑这两方面，综述了化疗药调控肿瘤免疫应答的机制，特别就细胞死亡相关的免疫原性信号调控进行了详尽介绍。本文有望加深对化疗药肿瘤免疫调控的理解，并为探索化疗药的治疗空间提供理论指导。

肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病原因复杂，早期症状不明显，进展迅速，预后差，严重威胁居民生命安全。免疫治疗和靶向治疗是近年来治疗晚期和转移性肝癌的重要手段。随着FDA批准索拉菲尼（sorafenib）等酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor，TKI）、程序性死亡受体1（programmed cell death protein 1，PD-1）和细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4）免疫检查点抑制剂等用于肝癌治疗，单药治疗和联合治疗的研究都获得较大的进展，为晚期肝癌患者生存率提高带来新的转机。但当前对免疫治疗的作用机制、耐药机制尚不清晰，联合治疗的临床研究也在进行中。本文就免疫治疗及相关联合治疗在晚期肝癌方面的临床研究进展进行综述，力求把握当前肝癌治疗的发展动向，为免疫治疗进一步发展提供参考。

代谢重塑是肿瘤细胞的重大特征之一，用以满足肿瘤细胞快速增殖对能量和生物大分子的需求，对肿瘤的恶性化至关重要。近年来的研究提示，肿瘤细胞代谢通路的改变，往往伴随着肿瘤相关代谢物的累积。这些代谢物自身可以作为信号分子，通过竞争性抑制、蛋白质翻译后修饰、蛋白质的直接结合等多种途径，引起代谢非依赖的肿瘤信号通路改变，影响肿瘤发生发展。当前，代谢物的信号分子功能，成为肿瘤代谢领域的重要研究方向。本论文结合该领域的最新研究进展，聚焦肿瘤细胞和肿瘤微环境中的关键代谢物，就代谢物对肿瘤发生发展相关信号通路调控的机制进行概述。希望通过本文深入对肿瘤代谢异常的认识，从代谢对肿瘤信号通路重塑角度重新阐释肿瘤的发生发展，同时也有助于发现新的潜在治疗靶标。

N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m⁶A）修饰是真核生物信使RNA（messenger RNA，mRNA）中最常见的修饰之一，近年来已成为生命科学领域的研究热点。mRNA的m⁶A修饰动态可逆，主要由甲基化酶（writers）、去甲基化酶（erasers）和识别蛋白（readers）所调控，从而参与RNA剪接、出入核、蛋白质翻译及降解等多种生物学过程。近年研究表明，m⁶A在肿瘤发生发展中发挥重要作用。本文围绕m⁶A的生物学功能，研究其在肿瘤细胞增殖、转移、能量代谢和血管生成等恶性生物学行为中的作用，阐述其在急性白血病、肝癌、结直肠癌等多种肿瘤中的作用及机制。目前，包括脂肪和肥胖相关蛋白和AlkB同源物5在内的m⁶A相关酶的抑制剂正在开发中。本文进一步讨论了m⁶A的潜在价值及其在癌症治疗中的相关靶点。

非编码RNA是一类无蛋白编码功能的RNA，在肿瘤的发生和发展过程中发挥着重要的作用。免疫系统对肿瘤的发展更有着复杂的作用，它不仅可以抑制肿瘤的生长，还可以为肿瘤的发展创造条件，从而促进肿瘤的生长。肿瘤免疫治疗作为肿瘤治疗的一个重要的手段，可以通过非编码RNA调控肿瘤免疫来实现治疗的目的。本文就非编码RNA对肿瘤免疫的调控做一综述。

胶质瘤是成年人及儿童中最常见的原发中枢神经系统肿瘤，其中以胶质母细胞瘤（glioblastoma，GBM）恶性程度最高。肿瘤的高度异质性使GBM对放化疗耐受，同时由于其侵袭性，手术难以将其完全切除。因此患者普遍预后差、平均生存期短，标准治疗后中位生存期仅为14.6个月，5年生存率不到10%，经治疗处理后极易复发。免疫疗法与传统疗法具有本质差异，其目标是通过调控自身的免疫系统以及与肿瘤相关的免疫环境进行治疗，具有较高的特异性、记忆性及安全性。免疫疗法作为有望改善GBM预后的新途径，近年来受到越来越多的关注。本文对于胶质瘤免疫治疗固有的困难、现有主要的胶质瘤免疫疗法及仍然存在的瓶颈做一总结，旨在为探索发展新的有效的GBM治疗手段提供新思路。

免疫治疗已成为继手术治疗、化疗、放疗和靶向治疗之后的重要肿瘤治疗手段。但是，肿瘤免疫治疗药物的体内递送仍面临挑战，如非特异性释放、较差的肿瘤渗透性和较低的肿瘤细胞摄取率等，在某种程度上影响了肿瘤治疗的效果。与正常组织不同，肿瘤组织具有特异性微环境，如肿瘤细胞外的微酸、乏氧和过表达酶以及胞内的酸、还原和自由基等。近年来，科研人员根据肿瘤组织和肿瘤细胞的微环境特征设计了多种微环境激活型纳米递送系统，可对肿瘤胞外或胞内微环境的刺激信号做出特异性响应，增强递药系统在肿瘤部位的滞留、蓄积、渗透及肿瘤细胞摄取，并实现药物在肿瘤胞外基质或肿瘤细胞内可控释放，提高抗肿瘤药物的递送效率，改善肿瘤治疗效果，降低毒副作用。本文简要回顾了本课题组利用微环境激活型纳米递药系统实现免疫治疗药物高效递送方面的研究进展，并对该领域的主要挑战和可能发展方向进行了展望。

许多单克隆抗体药物作为单一药物虽然显示出一定临床治疗效果，但其治疗效果不佳，而化疗药物疗效较强，其毒副作用也较大，如在单克隆抗体上化学偶联上小分子化学药物，是提高抗体药物疗效的重要方法之一。抗体偶联药物是由抗原特异性靶向作用的单克隆抗体和高活性细胞毒类化学药物偶联而成，是一种很有潜力的新型肿瘤治疗靶向药物。这类修饰抗体能够通过抗体部分特异性结合癌细胞表位的抗原而选择性地将高活性细胞毒药物运送到肿瘤细胞内，这将使癌症患者治疗疗效最大化，药物全身毒副作用最小化。抗体偶联药物能够协同发挥抗体的"特异性"靶向作用和高活性细胞毒类药物"高效"癌细胞杀伤作用。然而，抗体偶联药物的分子设计非常复杂，针对癌细胞不同靶点和药物适应症，需要同时充分考虑抗体、链接子和载荷药物的不同组合选择，尽管该类药物还存在诸多挑战，但最近临床研究的成功促使抗体偶联药物越来越受到极大关注和兴趣。

肿瘤免疫治疗旨在恢复或增强机体的免疫监视功能来对抗肿瘤，与传统的抗肿瘤治疗直接聚焦于肿瘤病灶局部不同，其具有不良反应小、作用持久、特异性强及适于个体化治疗等优势。树突状细胞（DCs）作为功能最强的抗原递呈细胞，能够在体内诱导强烈的特异性免疫应答。目前基于DCs的肿瘤免疫治疗，是将肿瘤抗原通过一定方法负载于DCs，从而激发特异性抗肿瘤免疫应答。用编码肿瘤抗原的mRNA致敏DCs是目前研究较为广泛的一种肿瘤抗原负载方式，对应的免疫治疗策略已在临床试验中显示出较好的抗肿瘤疗效。因此，mRNA致敏的DCs是一种极具潜力的肿瘤免疫治疗新模式。

肉毒碱棕榈酰转移酶1（carnitine palmitoyltransferase 1，CPT1）是存在于线粒体外膜上的脂肪酸β-氧化限速酶，与机体代谢性疾病和肿瘤之间有着密切的联系。研究表明，CPT1多种亚型在癌细胞中异常表达，在肿瘤代谢应激中起着重要调控作用。随着肿瘤免疫治疗的发展，其在免疫细胞及器官中发挥的作用也引起了人们的关注。本文旨在阐述CPT1的生物学功能、不同亚型在肿瘤代谢和免疫调控中的作用及其抑制剂的研究进展，为肿瘤治疗提供新的思路。

近年来，酮体代谢在肿瘤生长、侵袭、转移过程中的作用备受关注。琥珀酰辅酶A转移酶（SCOT）是酮体代谢的关键酶。其作用是将琥珀酰辅酶A的辅酶A基团转移至乙酰乙酸从而催化乙酰乙酰辅酶A的形成，是酮体代谢的第一个限速步骤，随后乙酰乙酰辅酶A进一步断裂成两分子的乙酰辅酶A进入三羧酸循环。研究表明SCOT在多种肿瘤中显著高表达，与肿瘤进展及患者预后密切相关，这使SCOT可作为临床诊断及预后评估的潜在标志物；另外，抑制SCOT活性可使肿瘤细胞酮体代谢受阻，即减少ATP产生，进而抑制肿瘤生长、增殖、侵袭与转移。探讨SCOT在代谢途径中的重要作用以及与肿瘤发生发展的关系，为发掘肿瘤代谢靶向分子药物提供新的思路。

钙结合蛋白S100A9与炎症发生与肿瘤侵袭密切相关，是髓系来源的抑制性细胞（myeloid-derived suppressor cell，MDSC）的特异性标志物之一。本研究以霍乱毒素B亚基（CTB）五聚体为载体构建了一种靶向小鼠钙结合蛋白S100A9的重组多肽疫苗CTB-S100A9，并在大肠杆菌分泌表达系统中获得表达。经纯化后的重组CTB-S100A9五聚体蛋白辅以氢氧化铝佐剂免疫小鼠后能打破自身免疫耐受产生高滴度的S100A9抗体。在4T1小鼠乳腺癌的预防及治疗模型中，CTB-S100A9疫苗均能够有效抑制肿瘤生长。进一步发现CTB-S100A9疫苗能够有效减少荷瘤小鼠外周血中Treg细胞的含量及粒细胞来源的MDSC，逆转抑制性肿瘤免疫环境，增强抗肿瘤免疫应答。本研究的动物实验都是在南京中医药大学附属中西医结合医院动物伦理委员会批准的动物护理和方案下进行。该研究表明，CTB-S100A9是一种良好的靶向肿瘤免疫环境的重组疫苗，具有较大临床应用的潜力。

化疗耐药是导致晚期食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）患者预后不良的主要原因。细胞焦亡是化疗药物发挥抗肿瘤作用的机制之一。研究表明，包含DEP域的与哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白相互作用的蛋白（DEP-domain containing mTOR-interacting protein，DEPTOR）作为雷帕霉素靶蛋白（mammalian/mechanistic target of rapamycin，mTOR）的内源性抑制蛋白，与索拉非尼、吉非替尼耐药有关。本研究利用DEPTOR敲减（shDEPTOR）慢病毒载体，建立DEPTOR敲减的食管鳞癌细胞稳定表达株。结果表明：在DEPTOR敲减食管鳞癌细胞中，细胞对顺铂的敏感性降低。在顺铂刺激下，DEPTOR敲减的细胞发生典型细胞焦亡形态学的改变较对照组减少。进一步研究表明：DEPTOR表达的减少导致Caspase-1蛋白表达的降低及活化减少，从而抑制细胞焦亡经典途径的激活。本文结果表明，DEPTOR可以通过增加Caspase-1介导的细胞焦亡，提高食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性。

在某些肿瘤组织中，信号传导与活化转录因子3（STAT3）信号通路处于异常激活状态。在这种情况下，抑制STAT3信号通路被认为是一种潜在的肿瘤治疗方法。在体外，STAT3靶点抑制剂Bt354可以抑制癌细胞的增殖；在体内，Bt354还抑制了DU145异种移植小鼠的肿瘤生长，而不影响体重。在Bt354给药组中，10、20和40 mg·kg^-1组的瘤重抑制率分别为58.8%、62.7%和73.5%。另外，Bt354给药组均可见DU145移植瘤组织中Ki 67阳性细胞的数量显著降低。这些研究结果表明，Bt354可能是一种对STAT3激活的前列腺癌细胞有效的抗癌剂。此外，Bt354抑制了STAT3的核转位，从而诱导了DU145细胞的生长抑制和凋亡。动物实验中对动物的处理均遵循中国医学科学院药物研究所动物实验中心标准操作规程。

本研究摸索及验证HEK-Blue-IL-17细胞模型的筛选条件，并应用该模型筛选抑制IL-17信号通路的化合物。按5×10⁴个/孔的密度，将HEK-Blue-IL-17细胞接种在96孔培养板中，分别加入不同浓度的IL-17A或IL-17F和待筛选化合物培养16 h，移取培养上清与QUANTI-Blue反应1或3 h，在λ_{655 nm}处检测吸光度值。通过碱性磷酸酶（secreted alkaline phosphatase，SEAP）的生成量来反映该细胞模型中IL-17信号通路的活化状态。实验显示：IL-17A和IL-17F均可显著性地激活HEK-Blue IL-17细胞。IL-17A和IL-17F分别在10和100 ng·mL^-1剂量下可产生较高的响应值。SEAP与QUANTI-Blue反应1 h基本可达到终点反应。牛蒡子苷元（arctigenin）和表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）对IL-17A和IL-17F刺激的信号通路具有一定的抑制活性。本实验建立并优化了HEK-Blue IL-17细胞模型，可用于IL-17信号通路抑制剂的筛选。

本文研究不同刺激剂在体外对人淋巴细胞活化的影响。采用梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），血液样本由中国食品药品检定研究院提供，并通过伦理委员会批准。用CD3/CD28抗体（anti-CD3/CD28 antibody）、植物血凝素（phytohaemagglutinin，PHA）、金黄色葡萄球菌B型肠毒素（Staphylococcus auresus enterooxin B，SEB）、白介素27（interleukin 27，IL27）、佛波酯（phorbol myristrate acetate，PMA）+离子霉素（ionomycin）在体外分别刺激24 h，观察CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺ T细胞亚群CD69表达。同时采用CellTiter-Glo发光法和ELISA法检测淋巴细胞增殖和IFNγ的分泌。CD3/CD28抗体、PMA+ionomycin、SEB和IL27作用PBMC 24 h不影响淋巴细胞增殖，但可以很好地活化CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺ T细胞，表现为CD69的平均荧光强度显著右移，并促进淋巴细胞IFNγ的分泌。CD3/CD28抗体、PMA+ionomycin、SEB和IL27是T细胞活化的有效刺激剂。

本研究以肿瘤免疫治疗相关蛋白吲哚胺2，3-双加氧酶1（indoleamine 2，3-dioxygenase 1，IDO1）为靶点，提出并设计构建了基于酶学-细胞水平的IDO1抑制剂筛选模型并进行了体内验证。首先采用基因工程手段表达纯化重组人IDO1蛋白并建立简单高效的IDO酶学筛选体系；其次通过干扰素γ（interferon-γ，IFNγ）刺激A172细胞或者构建高表达人IDO1蛋白的质粒瞬时转染HEK293细胞构建特异性的IDO1细胞水平筛选体系；最后在C57小鼠通过LC/MS/MS方法检测小鼠血浆中犬尿氨酸和色氨酸的含量和比值，从体内进一步验证筛选得到的化合物对IDO酶的抑制作用。本研究中建立和优化的酶学、细胞水平的筛选模型再结合体内的验证方法能高效、通量、特异性筛选到真正体内有效的IDO1抑制剂，为新药的快速研发奠定了良好的基础。动物实验均严格遵循中国医学科学院药物研究所动物实验中心标准操作规程，尽量减少实验对动物造成的伤害。

肿瘤免疫疗法已成为当今抗癌药物研发的重要领域，STING激动剂的研究为肿瘤免疫治疗提供了新思路。哺乳动物胞质中的核酸可有效引起固有免疫反应，近年大量研究证实cGAS-cGAMP-STING信号通路在胞浆DNA识别和免疫防御激活过程中发挥关键作用。cGAS-cGAMP-STING信号通路的异常与肿瘤的发生发展密切相关，是药物研发的热门靶点。本研究利用稳定表达cGAS-STING通路的THP-1-Dual细胞和稳定敲除STING的THP-1 KO-STING细胞，建立了荧光素酶检测的STING激动剂筛选模型。进一步应用阳性药物验证了本模型的准确性和灵敏度，为高通量筛选STING激动剂提供了简便、高效、准确的筛选平台。