探究Piezo1通道在高钙磷刺激的大鼠冠脉平滑肌细胞（coronary arterial smooth muscle cells，CASMCs）钙化中的作用机制。

使用β-甘油磷酸盐和CaCl₂干预CASMCs 10 d以诱导钙化，分为对照组（GM）和钙化组（CM）。期间分别采用Piezo1抑制剂GsMTx4、siRNA-Piezo1及激动剂Yoda1进行干预，用茜素红染色确定细胞钙化程度，Western blot检测表型转化及线粒体动力学相关蛋白的表达情况。

相比GM组，CM组钙化更明显（P < 0.01），Piezo1及成骨表型相关蛋白Runx2、BMP2、OPN表达均呈上调趋势（P < 0.01），而收缩表型相关蛋白SM22α、SM-MHC表达下降（P < 0.01）；给予GsMTx4和siRNA-Piezo1干预后，钙化相比DMSO组明显缓解（P < 0.01），使用Yoda1干预后钙化进一步加剧（P < 0.01）。此外，高钙磷刺激下线粒体动力学相关蛋白DRP1^Ser616、FIS1表达升高（P < 0.01），MFN1、MFN2表达下降（P < 0.01），使用Yoda1处理可加剧线粒体分裂（P < 0.01），且给予线粒体分裂抑制剂Mdivi-1干预可改善CASMCs钙化（P < 0.01）。

Piezo1激活可介导高钙磷刺激的CASMCs钙化，其机制可能与诱导线粒体动力学失衡相关。

探讨类RAS激活物2（RAS-like activator 2，RASAL2）在代谢相关脂肪性肝炎（metabolic dysfunction-associated steatohepatitis，MASH）中的作用及其机制。

通过高脂饲养24周制备MASH小鼠模型。qRT-PCR检测肝脏组织炎症因子基因表达。流式细胞技术检测肝脏免疫细胞浸润情况。提取小鼠骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages，BMDM），体外培养并以脂多糖诱导M1极化。qRT-PCR检测BMDM极化标志基因（Nos2、Il1b、Il6、Tnf、Arg1、CD206、Il10）表达。Western blot检测p-IκBα、IκBα、p-IKKβ、IKKβ、p-P65、P65表达。

与同窝野生型小鼠相比，RASAL2敲除小鼠肝组织炎症细胞浸润减少，Il1b、Il6、Tnf基因表达均减少，Il10基因表达则增加。流式细胞术分析显示RASAL2敲除小鼠肝脏免疫细胞浸润减少，M1型巨噬细胞比例减少。体外培养的小鼠BMDM，RASAL2敲除组M1型极化标志基因（Nos2、Il1b、Il6、Tnf）表达减低而M2型极化标志基因（Arg1、CD206、Il10）表达增加，NF-κB通路活化受抑。

RASAL2敲除减轻MASH肝脏炎症损伤，阻滞巨噬细胞向M1极化，其机制可能与抑制NF-κB通路有关。

采用网络药理学和分子对接技术研究槲皮素对脓毒症心肌病的作用机制，通过体内实验验证预测结果。

通过数据库搜索槲皮素药物靶点与脓毒症心肌病靶点，将二者取交集。构建蛋白-蛋白互作网络，采用GO和KEGG进行富集分析，将关键通路的核心靶点与槲皮素进行分子对接。C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组：假手术组（Sham组）、脓毒症组、槲皮素高剂量组和槲皮素低剂量组。采用心脏超声评估心脏功能，检测血清心肌酶学、肌钙蛋白，使用苏木精-伊红染色法和透射电镜观察心肌组织病理和超微结构的改变，RT-PCR和Western blot验证核心靶点表达。

槲皮素与脓毒症心肌病相关靶点交集基因98个，GO分析获得生物学过程194条、细胞组分15条、分子功能共26条，KEGG通路分析发现槲皮素可能通过IL-17信号通路治疗脓毒症心肌病，分子对接显示富集于该通路的MMP-9、IL-1β结合能最小。动物实验显示，槲皮素明显改善脓毒症心肌病小鼠心功能，降低心肌酶和肌钙蛋白，减轻心肌水肿、炎性细胞浸润和线粒体损伤，降低脓毒症小鼠心肌IL-17通路关键靶点IL-17和TRAF6的mRNA和蛋白表达，及下游MMP-9和IL-1β的表达。

槲皮素可通过抑制IL-17通路减轻脓毒症心肌病。

探究补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）稳定期大鼠气道线粒体损伤的干预作用。

将40只大鼠随机分为对照（Control）组、模型（COPD）组、补肺益肾（Bu-Fei Yi-Shen formula，BYF）组、多索茶碱（Doxofylline，DOX）组。第1~8周通过香烟烟雾暴露（每天2次，每次30 min）联合肺炎克雷伯杆菌滴鼻感染（每周1次）建立COPD模型，第9~16周对照组和模型组给予生理盐水灌胃，每只2 mL；治疗组则分别给予BYF和DOX灌胃。第16周进行动物取材，之后通过检测肺功能、肺组织病理、超微结构、线粒体膜电位、呼吸链复合物酶活性和IP3R/GRP75/VDAC1 mRNA及蛋白水平等多维度评估COPD大鼠肺组织线粒体损伤程度。

与Control组相比，COPD组肺功能指标明显降低（P < 0.05，P < 0.01）。病理学特征显示为典型COPD改变，包括肺泡结构疏松，肺泡壁破裂融合，支气管壁增厚皱缩，并伴有大量炎细胞浸润。COPD组肺组织膜电位明显降低、呼吸链复合物Ⅱ、Ⅳ酶活性下降（P < 0.05）。血清白介素-1（interleukin 1，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、白介素-6（interleukin 6，IL-6）水平明显升高（P < 0.05，P < 0.01）。肺组织中IP3R、GRP75、VDAC1 mRNA及蛋白表达水平均明显高于Control组（P < 0.05，P < 0.01）。各治疗组可不同程度地改善上述表现，其中BYF组优于DOX组。

补肺益肾方能够改善COPD大鼠慢性炎症反应和线粒体损伤，其作用机制可能与抑制IP3R/GRP75/VDAC1信号通路有关。

应用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建T细胞受体β链（T cell receptorβchain，Tcrb）基因敲除小鼠模型，分析其基因型并初步研究其表型。

本研究通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，经胚胎显微注射及移植操作，成功获得Tcrb基因缺失（Tcrb^-/-）的F0代小鼠。F1代个体由性成熟的F0代基因敲除小鼠与同窝野生型个体交配繁育产生。采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）对鼠尾基因型进行鉴定，通过Western blot从蛋白水平及流式细胞术从细胞水平上加以验证。

本研究成功构建Tcrb基因敲除小鼠模型并获得具备稳定遗传性状的Tcrb基因野生型（Tcrb^+/+）、杂合子（Tcrb^+/-）、纯合子（Tcrb^-/-）三种类型个体。Western blot分析结果显示Tcrb^-/-小鼠的组织样本中未检测到TCRβ蛋白的表达。流式细胞术结果表明与Tcrb^+/+小鼠相比，Tcrb^+/-小鼠外周血、胸腺、脾脏中CD4⁺和CD8⁺ T细胞数量明显减少，而Tcrb^-/-小鼠中几乎不表达CD4⁺和CD8⁺ T细胞并且CD4⁺/CD8⁺比值明显降低。

成功构建了Tcrb^-/-小鼠，为深入探究自身免疫病的病理机制及潜在药物靶点研究提供实验动物模型。