药理活性和成药性原则上取决于药物的微观结构和宏观性质，这些都寓于分子结构之中。药物化学将活性化合物演化成药物，是将二者融合一起，优化而得。融合操作既可以是内在的结构体现，也可以是外在的片段连接。新世纪以来的生物学进展为此提供了许多切入点，例如人源化单克隆抗体、蛋白酶体-泛素系统、变构调节、天然大环化合物、结构生物学等。本文以上市的或处于临床试验的药物研发要点，尝试解析生物学驱动的研发理念。

多梳抑制复合物（polycomb repressive complex 2，PRC2）的异常表达与多种疾病的形成、发展相关，抑制正常或过度活跃的PRC2可以在几种癌症中降低细胞存活率并抑制肿瘤生长，因此，相关小分子抑制剂的研发成为了当前表观遗传学相关抗肿瘤策略的热点领域。靶向enhancer of zeste homologue 2（EZH2）的S-腺苷-L-甲硫氨酸（S-adenosyl-L-methionine，SAM）结合位点的小分子抑制剂中已有药物经过FDA批准上市，然而，此类抑制剂的获得性耐药性问题同时值得关注。靶向胚胎外胚层发育蛋白（embryonic ectoderm development，EED）的两个不同结合位点的药物也在不断向前发展，EZH2-EED PPI抑制剂的研发因全新且独特的作用机制受到广泛关注。本文综述了各类靶向PRC2相关蛋白小分子抑制剂的研究进展，为相关药物的进一步研发提供参考。

动物药是传统中药的重要组成部分，由于缺乏适宜的研究思路与方法，中药动物药功效物质基础、质量评价研究等不够系统与完善，制约着动物药临床使用、制药工艺和质量控制等方面的应用与发展。为此，本文基于对角类、胶类动物药的研究及认识，结合国内外动物药研究进展与现状，探索性地提出基于“蛋白质/肽组学-修饰组学”研究动物药蛋白质、肽类物质与功效关联规律的思路及方法，即以蛋白质/肽组学的方法系统研究动物药物质组成，并以修饰组学研究蛋白质、肽类成分发生的化学修饰情况与规律，进一步探讨传统功效、成分和修饰组间的规律性与关联性，以期为中药动物药现代化研究和功效物质基础研究等提供借鉴与参考。

氧气是生命活动的必要元素，主要在线粒体参与能量代谢过程。对于包裹在细胞核里的基因组，氧气可以通过许多渠道对其结构和化学性质进行调控，其中活性氧是一类重要的信使分子，对基因组进行种类繁多的修饰，而铁离子提供了多方面的辅助作用。它们的共同作用影响到基因组复制、转录和损伤修复等几乎所有的生化功能。在此基础上，环境氧浓度的变化，特别是多种主要疾病和重要生理过程相关的低氧环境，可以引起基因组层面的响应。鉴于引起这一系列基因组上变化的因子有可能成为药物靶标，值得系统深入地研究。在此，作者汇总了活性氧、铁离子和细胞低氧对基因组的影响，并简单讨论相关的药物分子。

N-乙酰天冬氨酸（N-acetylaspartate，NAA）是一种在大脑中大量存在的代谢物。NAA作为一种反映神经系统功能情况的重要标志物，广泛应用于核磁共振波谱（proton magnetic resonance spectroscopy，¹H MRS）技术对脑内代谢产物的分析中。NAA在神经元内的线粒体内合成，进入少突胶质细胞内代谢，或在神经元内合成N-乙酰天冬氨酰谷氨酸（N-acetylaspartylglutamate，NAAG），经星形胶质细胞摄取分解。研究发现，NAA与多种中枢神经系统疾病相关，包括Canavan疾病、多发性硬化以及抑郁症、精神分裂症等精神疾病，因此，NAA可能作为这些疾病的生物标志物，其相关酶可能作为治疗靶点进行药物筛选。本文将从NAA分子机制研究入手，介绍NAA在脑内的生成、代谢与转运过程，阐述其可能发挥的生理作用，并对NAA在中枢神经系统疾病中的相关研究进展进行综述，探讨NAA在疾病的预测、诊断方面的前景，以及可能成为难治性疾病突破口的靶向治疗方式。

药物转运体和代谢酶均为机体处置药物的关键蛋白，且大部分药物的体内处置过程需要药物转运体和代谢酶的共同参与。近年来研究发现，药物转运体与代谢酶间存在协作关系，且药物转运体和代谢酶功能的变化可影响其协作处置药物的能力。因此，明晰药物转运体与代谢酶间的协作关系及规律，对于探究药物体内过程，药效和不良反应具有重要的意义。肠和肝是药物发生代谢的主要组织，且其分布有丰富的药物转运体和代谢酶，为此，本文综述了药物转运体和代谢酶间的协作关系对肠肝药物处置的影响。

在结核分枝杆菌分枝菌酸的生物合成通路中，聚酮合成酶13（polyketide synthase 13，Pks13）起到最后一步的组装作用。通过抑制Pks13可以抑制分枝菌酸的合成，进而起到杀灭结核分枝杆菌的作用。目前已发现五类化学骨架不同的Pks13抑制剂，本文将简要介绍这几类Pks13抑制剂的发现过程、作用机制以及不同抑制剂的构效关系。

近年来多模式联合抗肿瘤成为临床肿瘤治疗的有效策略。光热治疗以其微创、可控、高效、特异性强等特点，可有效弥补传统药物治疗造成的毒副作用、肿瘤耐药等不足。研究表明将光热治疗与化疗联合，表现出较好的协同抗肿瘤效果。然而，化疗药物和光热试剂可能具有不同的体内药动学行为，难以保证两者在肿瘤部位的有效传递，且存在游离形式在体内易被代谢降解等问题。如何将两种治疗模式的药物/光热试剂专属、高效、同步递送到肿瘤组织，以达到最佳联合抗肿瘤效果，是两者联合抗肿瘤应用亟需解决的重要问题。纳米递药技术的发展为肿瘤治疗的应用提供了新思路，本文结合该领域的最新研究进展，从光热治疗联合化疗抗肿瘤机制、纳米共载递药优势、常用的纳米材料类型特点及载药原理方面进行综述，旨在为肿瘤多模式联合治疗的进一步发展提供参考。

DNA条形码技术是通过一段标准的DNA序列进行生物物种鉴定的方法，在中药鉴定领域应用广泛，推动中药鉴定学的“文艺复兴”。中药全产业链包括上游中药种植、采收环节，中游中药材、中药饮片、中成药生产环节，以及下游中药流通与使用环节。DNA条形码技术以其准确、通用、客观的特点在中药全产业链各关键环节发挥作用。在产业链上游，对中药种子种苗、药用植物进行鉴定，保证源头正确；在产业链中游，对中药材、中药饮片以及中成药组方药进行鉴定，保证企业投料正确、临床用药安全；在产业链下游，参与构建中药溯源体系，实现中药“来源可查，去向可追”，跟踪中药生产全过程，保障消费者权益，有助于中药监督管理。结合近年来具体研究实例，本文介绍DNA条形码技术在中药全产业链过程的应用，对促进中药产业现代化、推动中药国际化进程具有重要意义。

探讨博来霉素（bleomycin，BLM）损伤所致小鼠肺纤维化发病过程中肺泡巨噬细胞的细胞周期抑制因子p21（cell cycle inhibitor p21，p21）蛋白表达及其对巨噬细胞活化的调节作用。免疫荧光染色法检测肺纤维化组织中肺泡巨噬细胞中CD206的表达；RT-PCR（reverse transcription-polymerase chain reaction）法检测巨噬细胞活化标志蛋白的表达；巨噬细胞/成纤维细胞共培养法检测巨噬细胞对成纤维细胞活化及胶原收缩能力的影响；采用免疫荧光和免疫印迹法检测巨噬细胞中p21蛋白表达的变化；采用p21敲低和过表达病毒感染肺泡巨噬细胞，RT-PCR和巨噬细胞/成纤维细胞共培养法检测改变p21表达对肺泡巨噬细胞促纤维化表型的调节作用。动物实验操作过程依照中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所实验动物管理与动物福利委员会的要求执行。结果显示：与对照组比较，模型组肺泡巨噬细胞CD206的表达增加、巨噬细胞活化标志蛋白表达增加、模型组肺泡巨噬细胞促进成纤维细胞的活化并增强其胶原收缩能力。模型组小鼠肺泡巨噬细胞中p21蛋白表达增加。敲低p21可显著抑制巨噬细胞促纤维化表型，而过表达对照小鼠肺泡巨噬细胞中p21则促进其促纤维化表型的转化。以上研究结果表明，肺纤维化小鼠肺泡巨噬细胞中p21表达增加，p21可通过促进巨噬细胞活化参与肺纤维化发病。

研究隐丹参酮改善小鼠化疗性肠黏膜炎（chemotherapy-induced intestinal mucositis，CIM）的活性及作用机制。腹腔注射5-氟尿嘧啶及伊立替康制备CIM小鼠模型；灌胃混合抗生素（甲硝唑、万古霉素和青霉素）建立伪无菌小鼠模型。动物福利和实验过程均遵循中国医学科学院药物研究所动物伦理委员会的规定。观察动物体重、疾病活动指数（disease activity index，DAI）及肠黏膜损伤程度，确定隐丹参酮对CIM小鼠的改善作用。测定血清炎性因子、总甘油三酯（total triglycerides，TG）和总胆固醇（total cholesterol，TC）含量及脂肪酶活性，进行小鼠粪便菌群多样性分析、粪便菌群与环境因子相关性分析，探索隐丹参酮改善小鼠CIM的作用机制。结果显示：隐丹参酮显著降低CIM小鼠DAI及血清中白介素6（interleukin 6，IL-6）、白介素11（interleukin 11，IL-11）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）及二胺氧化酶（diamine oxidase，DAO）含量。此外，隐丹参酮显著增加CIM小鼠血清中TG含量，而降低血清中TC含量及脂肪酶活性。伪无菌造模组小鼠CIM发生率显著降低，血清炎性因子及TG/TC比例与正常对照组无显著差异。CIM小鼠粪便菌群多样性及组成结构与正常小鼠相比差异显著，隐丹参酮可有效恢复CIM小鼠粪便菌群至接近正常状态，并显著增加g_norank_f_Muribaculaceae丰度。相关性分析显示：g_Ruminiclostridium及g_norank_f_Muribaculaceae的相对丰度与血清TG含量呈正相关，而与血清中DAO、MPO、IL-6、TC含量及脂肪酶活性呈负相关。隐丹参酮显著增加CIM小鼠粪便中g_norank_f_Muribaculaceae和g_Ruminococcaceae_UCG-014丰度。本研究报道了隐丹参酮可有效改善5-氟尿嘧啶及伊立替康诱导的小鼠肠黏膜炎，这一作用与其对肠道菌群、炎性因子及血脂的调控密切相关。

利用网络药理学和生物信息学技术预测附子理中丸治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）的作用机制。选取附子理中丸中26个入血成分（23个原型化合物及3个代谢产物）为研究对象，利用PharmMapper数据库、SwissTargetPrediction平台、GeneCards和OMIM数据库筛选及预测附子理中丸入血成分的潜在作用靶点；运用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白相互作用（PPI）网络模型；运用DAVID平台、KEGG及Reactome数据库对潜在靶点进行GO分析和通路分析；应用Cytoscape软件构建“药物成分-作用靶点-作用通路”网络；使用AutoDock vina软件对入血成分与关键靶点进行分子对接。结果得到附子理中丸治疗UC的潜在靶点82个，靶点主要涉及有机物反应、细胞凋亡的调节、细胞程序性死亡的调控等生物过程，通过参与癌症、结直肠癌、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）和花生四烯酸代谢等信号通路来发挥治疗UC的作用。本研究从网络药理学的角度预测了附子理中丸治疗UC的作用机制，表明附子理中丸治疗UC具有多成分、多靶点和多途径的特点，为进一步深入研究其作用机制奠定了基础。

本文旨在观察线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore，MPTP）抑制剂环孢素A（cyclosporin A，CsA）对脓毒症大鼠血管通透性的保护作用。通过在体采用盲肠结扎穿孔模拟脓毒症模型，观察CsA（1和5 mg·kg^-1）对脓毒症大鼠肺脏、肾脏和肠道的血管通透性，肾脏、肠道的线粒体呼吸控制率（respiratory control ratio，RCR），以及存活时间的影响；通过离体采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激血管内皮细胞实验，观察CsA对微血管渗漏、闭锁小带蛋白1（zonula occludes-1，ZO-1）免疫荧光和跨膜电阻（transendothelial electrical resistance，TER）的影响。动物福利和实验过程均遵循陆军军医大学动物伦理委员会的规定并已获批准。与假手术组比较，脓毒症大鼠肺脏、肾脏血管和肠道组织的通透性明显增加（P < 0.05）；与常规治疗组比较，CsA可明显降低脓毒症大鼠肺脏、肾脏血管和肠道组织的通透性（P < 0.05或P < 0.01），延长动物存活时间，微循环实验结果也显示CsA可显著降低脓毒症大鼠肠系膜微静脉的通透性（P < 0.01）。细胞水平研究发现，LPS刺激可显著增加血管内皮细胞通透性，包括跨膜电阻降低和ZO-1蛋白表达减弱（P < 0.05），而CsA可明显降低LPS刺激所引起的血管内皮细胞通透性的增加（P < 0.01）。脓毒症大鼠肾、肠线粒体功能出现明显障碍，线粒体呼吸控制率降低；LPS刺激血管内皮细胞后使得MPTP开放明显增多，而CsA能显著抑制MPTP开放，改善线粒体功能。本研究发现CsA可能通过抑制MPTP的开放，从而保护线粒体功能并发挥了其对脓毒症大鼠血管通透性的保护作用，将为脓毒症血管渗漏治疗提供参考。

研究羟苯磺酸钙（calcium dobesilate，CaD）对顺铂（cisplatin，CP）致人肾近端小管上皮细胞（HK-2）凋亡的影响并探讨其可能的作用机制。利用顺铂诱导建立HK-2凋亡模型，采用CCK-8法检测CaD对HK-2增殖的影响；用流式细胞术检测细胞凋亡；用活性氧（reactive oxygen species，ROS）检测观察氧化应激水平；用JC-1法测线粒体膜电位；利用Western blot法检测顺铂诱导HK-2的p53、caspase-3、bcl-2和bax蛋白表达水平；用ELISA法检测肾损伤因子1（kidney injury molecule-1，KIM-1）、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（neutrophil gelatinase associated lipocalin，NGAL）的表达。研究显示，CaD能够降低顺铂引起的氧化应激水平，抑制细胞凋亡。顺铂可上调p53、caspase-3、bax、KIM-1及NGAL的蛋白表达，降低bcl-2的表达。使用CaD可明显减少KIM-1、NGAL、p53、caspase-3和bax蛋白水平，促使bcl-2表达水平升高。此研究结果表明，CaD可通过抑制HK-2凋亡减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤，其作用机制可能与调控bax/bcl-2/caspase-3凋亡信号通路有关。

本文主要研究喜炎平注射液对细菌内毒素脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的家兔发热的解热作用，并初步探讨机制，为其临床应用提供药理学依据。以LPS为诱导剂建立家兔发热模型，测定直肠温度变化；测定血清中前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin-1β，IL-1β）和磷脂酶A2（phospholipaseA2，PLA2）水平；测定下丘脑和脑脊液中PGE2、环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）和精氨酸加压素（arginine vasopressin，AVP）水平。本文中动物福利和实验过程均遵循中国药科大学动物伦理委员会的规定。结果显示：喜炎平注射液（12.5、25和50 mg·kg^-1）可显著降低LPS所致发热家兔的体温，作用持续时间可达5.5~8.5 h。在剂量为25和50 mg·kg^-1时，喜炎平注射液的退热作用与安乃近注射液（50 mg·kg^-1）相当。深入研究发现，喜炎平注射液和安乃近注射液均不同程度地降低发热家兔血清中PGE2、IL-1β、TNF-α和PLA2水平。此外，喜炎平注射液亦显著降低发热家兔下丘脑中PGE2、cAMP、AVP水平和脑脊液中PGE2、cAMP水平，升高脑脊液中AVP水平。本研究发现喜炎平注射液可显著改善LPS所致家兔发热，其机制与调节血清、下丘脑和脑脊液中PGE2、TNF-α、IL-1β、PLA2、cAMP和AVP水平密切相关。

本文建立了超高效液相色谱-串联质谱法（ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS）检测心力衰竭过程中全基因组DNA及总RNA的甲基化水平的方法，以观察心梗组织及外周血甲基化率的变化及同步性。动物福利和实验过程均遵循广州医科大学动物伦理委员会的规定。建立了心肌梗死（myocardial infarction，MI）大鼠模型，并分为梗死1、4及8周组，以模拟心功能不同级别，并将大鼠在同一周龄实施安乐死，以保持周龄一致。从梗死边缘区心肌组织及外周血淋巴细胞中提取DNA及RNA，应用酶解法将DNA及RNA分解成单个核苷，定量测定并计算全基因组DNA及总RNA的甲基化率。结果显示，大鼠心梗后梗死组织与外周血淋巴细胞的全基因组DNA及总RNA甲基化水平增加且结果呈现一致性。本研究获得了心衰的发生和发展过程中DNA及RNA甲基化率变化的初步数据，进一步表明了表观遗传改变可作为心衰早期诊断的生物标志物。

探讨长期给药诱导形成的氯胺酮性膀胱炎差异代谢物变化及可能的毒性机制。本实验以雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠为实验动物，随机分为对照组、氯胺酮低剂量（10 mg·kg^-1）和氯胺酮高剂量（50 mg·kg^-1）给药组，腹腔注射给药12周，测定大鼠2 h尿频次数，膀胱质量系数，采用酶联免疫法测定血清白介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）炎症指标。基于气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术分析大鼠尿液代谢物图谱，运用多元统计模式识别分析。本实验获得西南医科大学动物实验中心伦理委员会批准（批准号：201901-98）。结果显示给药12周后，2 h尿频次数及膀胱质量指数低剂量组和高剂量组与对照组相比具有显著差异（P < 0.05或P < 0.01）；血清IL-6和TNF-α炎症指标及膀胱HE染色结果显示，长期给予氯胺酮会诱导膀胱炎；根据代谢组学分析在对照组与低剂量组之间的差异代谢物为2，3-丁二醇、3-氨基异丁酸、柠檬酸、尿酸；在对照组与高剂量组之间的差异代谢物为3-氨基异丁酸、戊糖醇、柠檬酸、D-葡萄糖酸、尿酸。本研究表明，3-氨基异丁酸、柠檬酸和尿酸为共同的差异代谢物，与对照组比较，其相对浓度呈增加趋势，且在高剂量组中，其浓度增加更加显著，表明这3种差异代谢物可能与氯胺酮性膀胱炎发生发展密切相关。

运用硅胶柱色谱、MCI柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备液相色谱等多种色谱技术对金粟兰科植物宽叶金粟兰乙醇提取物进行分离纯化。从中分离得到5个倍半萜类化合物，并应用波谱学方法（MS、IR、NMR）和单晶X射线衍射对分离得到的化合物结构进行了鉴定，分别鉴定为：（1S，6S，8R）-8-ethoxychlomultin C（1a）、（1R，6R，8S）-8-ethoxychlomultin C（1b）、（+）-phaeocaulin D（2）、白术内酯Ⅰ（3）和8-β-ethoxyasterolid（4）。其中化合物1a和1b为1对新的倍半萜对映体，化合物2~4为首次从宽叶金粟兰中分离得到。在10 μmol·L^-1浓度下，化合物1a、1b、2和3使H₂O₂损伤的PC12细胞的细胞存活率从（43.41±1.59）%分别提高到（61.71±7.56）%、（66.05±5.61）%、（74.34±3.32）%和（69.58±5.02）%。

蛋白质精氨酸甲基转移酶5（PRMT5）是人体中重要的Ⅱ型甲基转移酶，可以催化多种组蛋白及非组蛋白的对称性双甲基化，并在多种肿瘤中高表达，是一种潜在的治疗癌症的新靶点。本文根据已报道的EPZ015666与PRMT5复合物晶型，并分析其相互作用模式，开展对GSK3326595（原为EPZ015938）的结构改造，使用构象限制原理设计合成了16个化合物，经过生物学评价发现化合物B8和C系列6个化合物均具备与GSK3326595相当的PRMT5抑制活性。Caco-2细胞透膜性实验表明化合物C3、C4的透膜性较差，可能是细胞抗增殖活性较差的一个原因，为下一步结构设计提供思路。

建立超高效液相色谱测定经典名方清金化痰汤物质基准中多指标成分含量的方法。采用Waters cortecs T3色谱柱（150 mm×2.1 mm，1.6 μm），以0.04%磷酸水（A）-乙腈（B）为流动相，进行梯度洗脱，流速为0.3 mL·min^-1，柱温为25℃，DAD检测波长为238、280 nm。该色谱条件下，各成分色谱峰完全分离且峰形良好，各待测成分的线性关系良好（r>0.999），重复性、稳定性良好，回收率在92.5%~104.7%之间。本实验所建立的方法简便、准确、可靠，为清金化痰汤物质基准的质量评价提供了科学依据，为其开发和标准制定提供了参考。

采用超高效液相色谱串联四级杆-飞行时间高分辨质谱（UHPLC/Q-TOF HRMS）法，从两种宣称具有缓解疲劳、增强免疫力的保健食品中发现了一种他达拉非衍生物。该化合物与2-羟丙基去甲他达拉非的质谱图特征非常相似，但保留时间却略有差异。采用制备液相色谱仪对该衍生物进行分离纯化，经质谱和氢核磁共振分析鉴定为3-羟丙基去甲他达拉非（3-hydroxypropylnortadalafil），为国内首次报道。

胶原蛋白为胶类动物药主要物质基础，鹿皮在高温煎煮熬制加工成鹿皮胶的过程中胶原蛋白的部分氨基酸位点会发生羟基化与脱酰胺修饰，本文基于“多肽组-修饰组”结合的研究思路系统比较了鹿皮与鹿皮胶的蛋白质肽类物质基础。采用纳升液相-串联质谱法分析鉴定鹿皮与鹿皮胶中蛋白质类、肽类成分组成，并进一步比较鹿皮与鹿皮胶的修饰数量与修饰位点。结果表明，鹿皮胶的羟基化修饰与脱酰胺修饰数量均显著多于鹿皮，提示在高温熬制加工过程中，鹿皮胶原蛋白的部分氨基酸位点发生了修饰，这些修饰与胶原蛋白的特定氨基酸结构单元、亲疏水性等因素有关，鹿皮胶原蛋白发生修饰的阶段与机制有待后续研究阐释。本文为鹿皮胶物质基础研究、加工过程及胶原蛋白修饰的相关性研究提供了重要理论依据，有利于开展鹿皮胶工艺优化、质量标准提升等研究。

建立头孢他啶原料及制剂中聚合物杂质的分析方法。通过强制聚合法制备富含聚合物杂质的头孢他啶降解溶液；然后采用高效凝胶色谱法和柱切换-LC-MSⁿ法对降解溶液中的聚合物杂质进行分离和结构鉴定；采用Phenomenex Gemini-C18型色谱柱，以0.02 mol·L^-1磷酸盐缓冲液-甲醇-乙腈为流动相，进行梯度洗脱，建立RP-HPLC法分析头孢他啶聚合物，并进行方法学验证。结果表明高效凝胶排阻色谱法分离头孢他啶聚合物杂质时，部分小分子杂质与聚合物共出峰，方法专属性差、定量准确性差；RP-HPLC法分析头孢他啶聚合物杂质时，在25~45 min内检出头孢他啶二聚体及其衍生物、三聚体等4种聚合物杂质峰，专属性好、灵敏度高、方法耐用性好，因此RP-HPLC法可用于头孢他啶的聚合物杂质质控。头孢他啶降解溶液可作为分析头孢他啶聚合物的系统适用性溶液。

人参皂苷Ro广泛存在于红参药材中，具有抗炎、抗衰老、抗氧化、抗血栓等药理作用，为测定不同生长年限红参中人参皂苷Ro含量。本研究通过对比不同提取方式人参皂苷提取效率，构建人参皂苷Ro、Rg₁、Re、Rb₁的HPLC方法，测定不同产地、生长年限、生产厂家的43批红参药材。结果表明人参皂苷最佳提取方式为1 g样品加入70%甲醇超声50 min。采用核壳色谱技术，优化后总运行时间为50 min，比2015版《中国药典》方法时间缩短一半，各个指标性成分分离度均大于1.6。以乙腈和0.1%磷酸水为流动相，人参皂苷Ro峰形明显改善。测定43批红参发现人参皂苷Ro含量范围为0.13%~0.43%，平均含量为0.26%，含量低于人参皂苷Rb₁，但高于人参皂苷Rg₁、Re。随生长年限增加，人参皂苷Ro/Re比值逐渐增大。以人参皂苷Ro/Re为限定值，当限定值设为1.3时，100%的6年生红参大于1.3，94.4%的5年生红参大于1.3，同时46.6%的4年生红参大于1.3。优化后红参指标成分分析方法，具有简便、省时、合理等优点，可为红参药材及其相关产品提供实验依据。

清肺排毒汤中细辛用量超《中国药典》规定量一倍，其限量成分马兜铃酸I是否也超标引发广泛关注。本研究首先利用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用技术，证实了清肺排毒汤中确有马兜铃酸I；基于此，进一步构建了高灵敏的超高效液相色谱-三重串联四级杆质谱方法，对清肺排毒汤、细辛水煎液及细辛70%甲醇提取液中的马兜铃酸I进行了定量对比分析，发现细辛用量均为6 g时，其所含马兜铃酸I的量分别约为1.5、3.2和9.0 μg，均远低于《中国药典》中规定的每日最大限量（30 μg）。因此，本研究推测通过复方煎煮及优选细辛药材的方法，可以有效的降低细辛中马兜铃酸I的浸出，从而避免超限使用。本研究不仅可为中药复方汤剂中痕量马兜铃酸I的检测及定量分析提供方法，也可为清肺排毒汤中细辛的合理使用提供科学依据。

帕珠沙星滴耳液是一种治疗耳部炎症性感染的喹诺酮类局部使用制剂。本文建立了灵敏、快速的LC-MS/MS法测定人血浆及耳溢液中帕珠沙星浓度，用以评价帕珠沙星滴耳液的系统药动学及局部分布。人血浆样品及耳溢液样品均在蛋白沉淀法处理后通过HSS T₃色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm）分离，采用含0.1%甲酸的1 mmol·L^-1醋酸铵水溶液和甲醇为流动相，在0.55 mL·min^-1的流速下进行梯度洗脱，以降低基质效应的影响。采用电喷雾电离源，在多反应监测模式（MRM）下测定，用于定量分析帕珠沙星和内标帕珠沙星-d₄的离子对分别为m/z 319.1→281.2和m/z323.1→285.2。测定人血浆和耳溢液中帕珠沙星浓度的线性范围分别为0.010 0~8.00 ng·mL^-1和0.500~1 000 ng·mg^-1。两种基质样品的日内、日间精密度和准确度均在可接受范围内。本文临床试验经江苏省人民医院及南京市第一医院伦理委员会批准并在江苏省人民医院及南京市第一医院进行。经过验证后的方法成功应用于3名患有慢性化脓性中耳炎的受试者使用0.1%甲磺酸帕珠沙星滴耳液后的系统药动学及耳部药动学研究。

抗肿瘤药物的非特异性释药是化疗药物对正常组织产生毒副作用的主要原因。利用纳米技术实现抗肿瘤药物的特异性与响应性递药是提高药物治疗效果、减少毒副反应的重要途径之一。本研究合成了pH敏感聚乙二醇单甲醚-聚乳酸-聚-β-氨基酯[poly（methoxy-ethylene glycol）-poly（lactic acid）-poly-（β-amino ester），PBAE]三嵌段共聚物，并制备胶束负载多西紫杉醇（DTX），以提高DTX抗肿瘤活性。通过开环聚合及Michael加成合成共聚物，核磁共振波谱法表征其结构和分子量，酸碱滴定法测定碱解离常数（pK_b），荧光法测定临界胶束浓度（CMC）。采用薄膜水化法制备载DTX纳米胶束，激光粒度仪测定粒径和分布及稳定性，HPLC测定载药量、包封率及累积药物释放量。载药胶束粒径为10~100 nm，粒径分布较窄；制备的2种载药胶束PBAE1-DTX和PBAE2-DTX中DTX的载药量分别为（5.3±0.10）%和（4.9±0.05）%，包封率分别为（93.8±1.70）%和（87.2±4.10）%。建立小鼠Lewis肺癌模型，利用尾静脉注射给药方式分别考察游离药物（DTX）、非pH敏感载药胶束聚乙二醇-聚乳酸-DTX（PELA-DTX）和pH敏感载药胶束（PBAE1-DTX）的抑瘤效果。所有动物实验均符合动物伦理学标准，并获得中国中医科学院中药研究所动物伦理委员会批准（批准号2017090110）。体内抑瘤实验表明，在给药剂量为10和20 mg·kg^-1时，纳米药物对小鼠肺腺癌移植瘤均显示出较好的抗肿瘤活性。比较各组小鼠肿瘤体积增长速率：PBAE1-DTX 20 mg·kg^-1 < PBAE1-DTX 10 mg·kg^-1 < PELA-DTX 10 mg·kg^-1 < DTX 10 mg·kg^-1 < 生理盐水，其中PBAE1-DTX组的疗效更为显著。本研究制备的pH敏感DTX纳米胶束值得进一步研究，以促进DTX在抗肿瘤领域的应用。

本文通过物理指纹图谱、多元分析方法评价不同来源羧甲基纤维素钠质量一致性，用R语言可视化功能探索了其性能参数之间的内在联系，并绘制自变量与粉体流动性的等高线图，求得设计空间。通过物理指纹图谱及多元分析方法，发现不同来源的羧甲基纤维素钠粉体学性质存在差异，其含水量、松密度及振实密度对流动性影响较大。运用R智能可视化分析得出样品流动性与填充性呈正相关，与可压性呈负相关，且具有统计学意义（P < 0.01）。在休止角为30°~40°时，确定了合适的设计空间，即5.092 2% < 含水量 < 7.006 7%、0.560 2 g·cm^-3 < 松密度 < 0.579 9 g·cm^-3、0.646 3 g·cm^-3 < 振实密度 < 0.816 5 g·cm^-3。结果表明，运用物理指纹图谱、多元分析及可视化方法对药用辅料质量一致性进行评价是科学可行的，为辅料生产、质量评价及仿制药处方开发提供了新的思路。

本文旨在构建球形和盘状两种不同形状的硅质体，以研究纳米载体的形状对其细胞摄取及跨膜能力的影响。经卤代、亲核加成及酰化反应合成硅质体复合脂质（cerasome-forming lipid，CFL），并利用质谱和核磁共振氢谱进行鉴定。将CFL与短链脂材1，2-dihexanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine（DHPC）通过薄膜水化法制备有机-无机杂化的纳米盘（nanodisc，简称纳米盘），并使用CFL制备球形硅质体（nanosphere，简称硅质体）。用激光粒度仪测定硅质体和纳米盘的粒径及电位，透射电镜观察其形状。以人源结肠癌Caco-2细胞为模型，采用激光共聚焦显微镜定性考察形状对纳米载体在细胞上摄取和转运的影响，采用高效液相色谱法定量考察形状对其跨膜量的影响。结果表明：制得的硅质体及纳米盘粒径相近，均约为110 nm，电位约为-25 mV，在电镜下形状规则均一。在20 min内，纳米盘的入胞速率显著快于硅质体，进一步在Caco-2细胞单层模型上的研究结果表明，摄取更快的纳米盘在细胞单层中累积量更少，即更快地被转运出胞，在2 h内纳米盘的跨膜量均高于硅质体。该结果提示通过合理设计纳米载体的形状可以调控纳米-细胞的相互作用，促进纳米载体的跨膜转运，增加药物的吸收。

藏药“解吉那保”（རྒྱ་རྒྱུད་ནག་པོ་），能消肿，治白喉等。基于民族药物学考察、自然分布区广泛取样（6省区20个居群163株个体），结合模式标本查阅与形态学比较，将其主流品种之一鉴定为龙胆科龙胆属Gentiana粗茎秦艽Gentiana crassicaulis。粗茎秦艽，我国特有物种，仅在西藏、云南、四川、贵州、青海及甘肃等省区有分布，多见于海拔2 100~4 500 m的高山草甸、林下及林缘。应用AFLP技术，以龙胆科花锚属椭圆叶花锚Halenia elliptica及龙胆属近缘种麻花艽G.straminea为外类群，构建DNA指纹谱。从64对引物组合中筛选出12对，共扩增出315个条带，其中多态性条带254条，占比为80.63%。粗茎秦艽种内遗传多样性丰富，遗传变异主要存在于居群间（87%），居群内部遗传变异较小（13%）。非加权组平均法（unweighted pair-group method with arithmetic means，UPGMA）聚类树物种间拓扑结构与经典分类学观点相一致；物种内分为两大支：支I由西藏、甘肃、青海及四川各居群组成，支Ⅱ由贵州及云南各居群组成。PCA分析及Mantel检验等均表明粗茎秦艽居群间遗传距离与空间地理距离具有显著的正相关关系。同时，结合SSR与SNP标记，探讨了四川康定县居群S1的分化问题。本工作可为藏药“解吉那保”种质资源保护、药材生药学鉴定及道地性探究等提供基础资料。

为探讨DNA条形码在陕西关中野生商陆资源中的鉴定作用，本研究采用通用引物ITS2和psbA-trnH对29份商陆样品DNA进行PCR扩增和测序，用Codon CodeA-ligner V3.0进行序列拼接和校对，随后进行BLAST比对鉴定分析；同时运用MEGA 6.0分析序列特征、K2P遗传距离及种内或种间变异，并构建系统进化树，评价两对引物对该区域商陆及其混伪品的鉴别能力。研究结果表明，ITS2和psbA-trnH序列的PCR扩增和测序成功率均为100%；NJ系统进化树显示ITS2和psbA-trnH序列均可明显将所有样本分别聚为商陆、垂序商陆并与其同属近源种鄂西商陆、日本商陆及两种混伪品各自聚为不同分支；ITS2序列在种间遗传距离上较psbA-trnH有一定优势。ITS2和psbA-trnH序列均可作为DNA条形码对商陆及其混伪品进行识别和鉴定，为商陆资源品种现状与分布研究及合理开发利用提供理论依据。

乙烯响应因子（ethylene-response factor，ERF）是AP2/ERF家族中的亚家族，在植物信号转导、生长发育和植物防御反应中起到重要作用。本研究以白木香（Aquilaria sinensis）为材料，设计特异性引物，克隆了白木香的AsERF1基因的cDNA序列，并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、亚细胞定位、组织特异性分析、非生物胁迫诱导表达分析研究。白木香AsERF1基因的开放阅读框（ORF）长691 bp，编码229个氨基酸，其蛋白分子质量为25.36 kD。AsERF1蛋白含有1个保守的AP2区域，系统进化树分析表明AsERF1与毛果杨的ERF2蛋白亲缘性最高。利用本生烟瞬时表达系统研究表明AsERF1主要定位于植物细胞核中。构建原核表达载体pET28a-AsERF1，并在大肠杆菌BL21（DE3）菌株中成功表达AsERF1重组蛋白，纯化得到可溶性重组蛋白。实时荧光定量PCR结果显示AsERF1在叶中的表达量最高，茎次之，根和茎尖最低。盐、干旱、低温和重金属胁迫能够诱导AsERF1的表达，其中干旱胁迫对AsERF1的表达水平影响最显著。本研究为揭示ERF基因在白木香防御反应和沉香形成过程中的作用机制奠定基础。

重组腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）载体与其他病毒载体相比，具备感染能力强、可持续表达目的基因、无致病性和非基因组整合等优点，已成为体内基因治疗的主要病毒载体。目前，国际上已有3个rAAV相关的基因治疗产品获批上市，另有两百余个候选药物正在开展临床试验。但是，国内工业界在开发临床应用级rAAV产品时面临诸多挑战，监管方对于此类产品的药学评价也缺乏实际审评经验。为此，本文总结了rAAV基因治疗产品的最新研究进展，从原材料、生产工艺及质量控制等方面对此类产品的药学评价考虑要点展开讨论，以期促进此类产品的临床转化与应用。

抗体偶联物（antibody drug conjugates，ADCs）兼具抗体的靶向性和小分子化合物的细胞毒性，目前已经成为抗肿瘤药物研发的热点之一。靶抗原、抗体、毒素、连接子或偶联方式的选择是影响ADCs药物开发成功的要素。本文介绍了ADCs药物在开发和结构设计方面需考虑的主要因素，以及在此类产品申报时药学技术审评的要点，希望能为研发单位开发ADCs药物提供参考。