新型冠状病毒尚无特效药。新型冠状病毒靶向药物研发面临诸多挑战，其药物研发策略包括筛选广谱抗病毒药，老药新用，以及开发特异的全新药。药物既可抑制病毒靶点（如蛋白酶、合成酶、树突蛋白及病毒壳膜），又可靶向宿主（如病毒受体抑制剂、病毒内吞和跨膜蛋白酶抑制剂等）。最近核糖核酸合成酶抑制剂瑞德西韦在孤例重症患者表现出良好疗效，广谱病毒蛋白酶抑制剂克力芝也在临床上应用。这两种药刚启动Ⅲ期临床试验，以评价其安全性和有效性。多种药物联用也是当前针对新型冠状病毒的一个主要策略，但应遵从科学依据和临床需求。通过大量文献和多种数据库检索，针对病毒和宿主细胞的关键成药靶点，作者挑选出75个临床在研的靶向药物，包括20个上市药，以助力临床前、临床试验研究和药物改良。

肝脏选择性胰岛素抵抗是胰岛素抵抗状态下，胰岛素在肝脏不能抑制糖异生进而导致葡萄糖产生增加，但同时脂质合成过程保持亢进的状态。正是这种亢进状态导致2型糖尿病患者除高血糖外还伴随高血脂。本文通过固醇调节因子结合蛋白1c（SREBP1c）、哺乳动物雷帕霉素靶复合体1（mTORC1）、内质网应激、FOXO1、脂质合成底物等促进肝脏脂质合成的相关研究，综述胰岛素抵抗状态下肝脏脂质合成增加的分子机制研究进展。

抑郁症是一种以心境障碍为主要临床特征的常见精神类疾病，严重危害人类健康。近年来，越来越多的研究表明抑郁症患者体内线粒体功能、结构等出现异常，而线粒体超微结构的变化可导致机体能量代谢障碍，遂提出线粒体能量代谢障碍可能是抑郁症的发病机制之一。本文从线粒体结构、功能、复合体、分子水平等方面综述线粒体能量代谢与抑郁内在关联及潜在机制，为了解抑郁症发病机制、发现抗抑郁药物作用的可能靶点提供参考。

神经病理性疼痛（neuropathic pain，NP）作为一种慢性疼痛综合征，严重危害患者生活质量，且发病机制复杂，临床疗法有限，极易复发。越来越多的报道发现Wnt信号通路与神经病理性疼痛的发生和发展密切相关。因此，对Wnt信号通路的进一步研究可能为探索NP的发病机制及发现有效治疗手段提供新思路。本文就Wnt信号通路在神经病理性疼痛中的作用及机制进行综述。

脑型疟（cerebral malaria，CM）是恶性疟原虫感染引起的最致命的并发症，即使经过有效抗疟药物治疗，儿童死亡率仍可高达18%，且有近三分之一的幸存者会出现神经功能缺损和认知障碍。目前CM的发病机制尚不明确，机械阻塞和免疫学说是其主流学说。CM辅助治疗的主要目的是改善临床结果和/或降低死亡率，以及预防长期神经认知缺陷。提高生存率和减少幸存者的神经损伤是新型抗疟药与辅助治疗的新策略。本文从保护血管内皮、减轻黏附阻塞效应、调节免疫平衡、干扰疟原虫代谢、神经保护、提高NO生物利用度、改善能量代谢、减轻炎症等方面，对近5年CM辅助治疗研究的进展进行系统总结，为CM的相关研究提供参考。

一些罕见、难治愈疾病仍然难以攻克，继化学小分子和单克隆抗体药物之后，寡核酸药物因其在RNA水平上调控疾病基因转录翻译的独特机制，有望填补空白治疗领域。此外最近3年FDA批准6个寡核酸药物，吸引制药行业广泛关注这个领域。作为新一类药物分子，寡核苷酸药物极性大、带电荷、需要借助化学修饰和递药系统改善成药性，因而具有不同于化学小分子和单抗药物的临床药理学特性，为临床早期研发带来新挑战。本文主要从寡核苷酸药物的技术发展、作用机制、人体药代动力学、药效和安全性的角度综述其特征。

口腔黏膜给药（oral transmucosal drug delivery）指药物经过口腔黏膜吸收进入体循环而发挥药效，具有生物利用度高、起效快等优势。本文介绍了口腔黏膜的生理特点，详细分析了影响口腔黏膜给药系统药物动力学性质的因素，如口腔生理屏障、不同给药部位、药物理化性质、剂型因素和处方因素，阐述了体外渗透性、在体口腔吸收、体内药物动力学以及生理药代动力学模型等研究在口腔黏膜给药系统药物动力学研究中的应用，为口腔黏膜给药系统开发提供方法和借鉴。

为了探究雷帕霉素对大鼠系膜细胞增殖、细胞周期的影响及其作用机制，将大鼠系膜细胞（HBZY-1）分为以下6组：对照组（control）、血小板衍生生长因子（platelet derivedgrowth factor，PDGF）20 ng·mL^-1组、PDGF+雷帕霉素1、10、100和1 000nmol·L^-1组；MTT法和流式细胞术检测雷帕霉素（1、10、100、1 000 nmol·L^-1）作用后对细胞增殖和周期的影响；Western blot法检测周期蛋白D1（cyclin D1）、周期蛋白E（cyclin E）、周期素依赖性蛋白激酶2（cyclin-dependent kinase 2，CDK2）、周期素依赖性蛋白激酶4（cyclin-dependent kinase 4，CDK4）、p70S6K/p-p70S6K和p27的蛋白表达；Real-time-PCR法检测p27 mRNA。结果显示，雷帕霉素能显著抑制PDGF刺激系膜细胞（glomerular mesangial cells，MCs）引起的增殖，且呈剂量及时间依赖性，但随着浓度增加（1~1000 nmol·L^-1），时间依赖性逐渐减弱；雷帕霉素可以将细胞周期阻滞在G0/G1期；对照组cyclin D1、cyclin E及CDK2、CDK4表达较低，PDGF组各蛋白表达均上调，与对照组比较差异有统计学意义（P < 0.05），但雷帕霉素干预组与PDGF组比较，cyclin D1、cyclin E及CDK2、CDK4的表达均未见明显改变；雷帕霉素可以明显抑制p70S6K磷酸化，上调p27蛋白及mRNA的表达。上述结果表明，雷帕霉素具有抑制系膜细胞增殖的作用，该作用是通过mTORC1/p70S6K通路调控p27mRNA转录，使其蛋白表达增加，导致cyclin-CDK的活性降低，将细胞周期阻断在G0/G1期实现的。

本文考察了黄芪蛋白对肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用，结合转录组学探讨黄芪蛋白抗肿瘤作用机制。黄芪干燥根部经硫酸铵沉淀，得到分子质量大小不一的黄芪蛋白（Huang Qi protein，HQP）。通过血球计数法检测黄芪蛋白对肿瘤细胞HepG2的影响及其毒性作用；结合流式细胞术和Hoechst/propidium iodide（PI）双染测定细胞死亡情况；Western blot测定坏死标志蛋白受体相互作用的丝氨酸/苏氨酸激酶1（RIP1）；将对照组与加药组RNA进行转录组测序，对RNA测序（RNA-seq）结果进行差异表达基因分析；qRT-PCR验证候选基因mRNA相对表达量。结果表明，随着HQP浓度增加，对肝癌细胞HepG2增殖抑制作用愈加明显，当HQP质量浓度为100 μg·mL^-1时，细胞坏死率增加到18.78%，同时在显微镜下观察到PI单染的红色坏死细胞增多，Western blot结果显示RIP1蛋白水平增加。RNA-seq结果分析得到2.6万个相关基因受HQP调控，其中979个基因受调控较明显。KEGG分析发现部分差异表达基因与p53信号通路相关，qRT-PCR验证测序结果可靠。黄芪蛋白使HepG2细胞发生程序性坏死可能与p53信号通路有关。

利用网络药理学和系统生物学方法探究黄芩汤治疗溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）分子机制。从中药系统药理学分析平台TCMSP挖掘黄芩汤中4味中药相关的化学成分和作用靶点；通过OMIM数据库、TTD数据库以及GeneCard数据库筛选UC的预测靶点。利用Cytoseape_v3.7.1软件构建化合物-靶点网络；基于STRING数据库，构建黄芩汤治疗UC靶点互作网络，根据拓扑学参数筛选黄芩汤治疗UC的核心靶点。利用Bioconductor中的R包clusterprofileversion 3.12.0对疾病与药物交集靶点进行GO（gene ontology）生物学过程富集分析和KEGG（KEGG pathway analysis）通路注释分析。结果发现，黄芩汤化合物-UC靶点网络包含128个化合物和相应靶点141个，核心靶点涉及AKTI、IL6、PTGS2、IL10、IL1β等。GO功能富集分析得到151个GO条目，KEGG富集筛选得到33条和UC有关通路，主要涉及PI3K-AKT信号通路、NF-κB信号通路、TNF信号通路、Toll样受体信号通路等。本文预测了黄芩汤治疗UC疾病的可能作用机制，为进一步寻找其有效成分和作用机制奠定基础。

消栓通络方临床上主治脑血栓引起的精神呆滞、言语迟涩等症状，疗效显著，但其作用机制尚不明确。本文通过搜集消栓通络方中的化学成分和治疗脑卒中相关靶点，获得1251个化学成分和10个脑卒中相关靶点，采用朴素贝叶斯和递归分割等机器学习算法，基于分子指纹和分子描述符，结合分子对接方法，构建了脑卒中10个相关靶点的18个化合物-靶点相互作用预测模型。应用这些模型预测了消栓通络方的活性化学成分及其作用靶点，发现了153个潜在活性化学成分，其中22个可以与2个以上脑卒中药物靶点相互作用。在此基础上，利用网络构建专业软件，构建了化学成分-靶点网络，并通过Gene-Ontology（GO）富集分析，确证了靶点重要的生物过程，如凝血（blood coagulation）、血管生成正调控（positive regulation ofangiogenesis）和离子转运正调控（positive regulation of ion transport）等。在此基础上，构建了靶点-通路网络。本研究利用机器学习、分子对接、虚拟筛选、数据挖掘及网络构建等技术方法，探索并部分揭示了消栓通络方抗脑卒中的活性物质基础及其化学成分-靶点-通路的网络作用机制，为消栓通络方的深入研究提供重要信息依据。

血液中的铀[U（Ⅵ）]与去铁转铁蛋白（apotransferrin，apo-Tf）形成稳定的络合物在U（Ⅵ）进入细胞致细胞毒性中发挥重要作用。本研究通过探讨螯合剂与apo-Tf竞争结合U（Ⅵ）的作用，建立了一种基于酶联免疫吸附实验（enzyme linkedimmunosorbent assay，ELISA）的U（Ⅵ）促排螯合剂体外筛选新模型，通过方法学研究确定了该检测方法的最佳包被抗原apo-Tf、Tf抗体、二抗稀释比例和U（Ⅵ）处理的浓度，验证了该方法的稳定性和重现性，并采用该模型考察了4种螯合剂邻苯二酚-3，6二甲撑亚氨基四乙酸（CBMIDA）、Tiron、DTPA-CaNa₃、DTPA-ZnNa₃与apo-Tf竞争结合U（Ⅵ）的能力，其强弱顺序为：CBMIDA ≈ Tiron > apo-Tf > DTPA-CaNa₃ ≈ DTPA-ZnNa₃；采用动物实验观察以上螯合剂的排U（Ⅵ）效果发现，CBMIDA和Tiron立即给药能显著提高U（Ⅵ）内污染小鼠24 h尿U（Ⅵ）排出、明显降低肾脏和股骨U（Ⅵ）蓄积；而DTPA-CaNa₃和DTPA-ZnNa₃则无明显促排效果，与竞争ELISA法的检测结果相一致。动物实验符合复旦大学药学院动物伦理委员会规程。以上结果表明，该方法快速、简便、重现性好，能够用于U（Ⅵ）促排螯合剂的快速筛选。

为明确五酯胶囊相较地尔硫䓬对他克莫司血药浓度的影响与细胞色素P450（cytochrom P450，CYP）3A5基因多态性的关系。本研究回顾性收集2014年11月至2018年3月于我院行肾移植术且术后应用他克莫司并联用地尔硫䓬（30 mg，bid）的患者病例共计170例，根据患者术后是否换用五酯胶囊（11.25 mg，bid）分为观察组（105例）与对照组（65例），检测患者CYP3A5*3基因多态性，比较不同CYP3A5*3基因型患者五酯胶囊相较地尔硫䓬对他克莫司血药浓度的影响，研究方案均符合相关伦理学规范。结果表明，五酯胶囊相较地尔硫䓬对他克莫司谷浓度/剂量（C₀/D）的提升幅度在自身对照及对照组对照中均与患者CYP3A5*3基因型显著相关，观察组患者在由地尔硫䓬换用五酯胶囊后能够提升CYP3A5表达型患者他克莫司C₀/D约76.8%，但在CYP3A5非表达型患者中则几乎无这一作用。五酯胶囊较地尔硫䓬在CYP3A5表达型患者中对他克莫司血药浓度的提升作用更强。

近年来，补骨脂肝毒性问题引起高度重视，探索建立补骨脂减毒方法具有重要意义。本文基于《雷公炮炙论》对补骨脂修制前处理方法记载的酒浸水漂法，以3D培养的人源肝脏类器官为模型，结合高内涵成像技术来评价补骨脂不同修制品的减毒效果；同时以U*12（10⁸）均匀设计法对补骨脂酒浸水漂法的修制工艺进行优化研究。结果表明：不同修制品对类器官模型的毒性表现出显著差异，其中酒精浓度、酒浸次数、酒浸料液比、水浸时间和水浸次数为独立显著因素（均P < 0.01）。进一步基于回归建模预测最优减毒工艺并得到验证，最优减毒工艺为：酒精浓度80%、酒浸次数3次、酒浸料液比3倍、酒浸时间30 h、水浸料液比2倍、水浸次数3次、水浸时间12 h和蒸制时间5 h。本研究表明《雷公炮炙论》记载的酒浸水漂法可有效降低补骨脂的潜在肝毒性，从药材前处理为降低补骨脂肝损伤风险提供了参考依据。

采用反复硅胶柱色谱、开放ODS柱色谱、重结晶和半制备型HPLC等方法，从维药格蓬脂的甲醇超声提取物中共分离得到8个三萜类化合物。根据波谱数据及理化性质鉴定了化合物的结构，分别为：3β，19α，21α-三羟基-12-烯-28-油酸（1）、苏门树脂脑酸（2）、3β，19α-二羟基-12-烯-28-油酸（3）、齐墩果酸（4）、3β，6β，19α-三羟基-12-烯-28-油酸（5）、19α-羟基齐墩果酮酸（6）、6α-羟基齐墩果酮酸（7）和3α，6α-二羟基-11R，12R-环氧齐墩果烷-28，13α-内酯（8），其中化合物1为新化合物，化合物2~8首次从该科植物中分离得到。运用改进Ellman法对化合物1~8进行胆碱酯酶抑制活性筛选，化合物1表现出较强的丁酰胆碱酯酶抑制活性，进一步对其进行了分子对接研究，提示Trp82、His438、Phe329及Ala328四个氨基酸残基是化合物1与丁酰胆碱酯酶结合的关键位点。

采用多种色谱技术从九蒸九晒熟地黄70%丙酮提取物中分离得到6个生物碱，根据化合物的理化性质及波谱特征对其结构进行鉴定，分别为地黄新碱A（4-{[（5-O-α-D-galactopyranosyloxy）methyl]-1H-pyrrole-2-carbaldehyde-1-yl}butyricacid methyl ester）（1）、baimantuoluoamide B（2）、capparisine C（3）、harman-3-carboxylic acid（4）、（2S）-1-[2-（furan-2-yl）-2-oxoethyl]-5-oxopyrrolidine-2-carboxylate（5）和1-[2-（furan-2-yl）-2-oxoethyl]pyrrolidin-2-one（6）。其中，化合物1为新化合物，化合物2~6均首次从地黄中分离得到。采用细胞实时监控检测方法（RTCA）探究6个化合物对脂多糖（LPS）诱导的NRK-52e细胞损伤的干预作用，结果表明，化合物1~3对LPS诱导的NRK-52e细胞损伤均具有保护作用。

采用硅胶、碳十八烷基反相键合硅胶（ODS）、SephadexLH-20、HPLC等色谱方法进行分离纯化，从夹竹桃科植物鸡骨常山枝叶的总生物碱部位中分离并鉴定了4个生物碱类化合物，根据理化性质与波谱数据分别鉴定为N₄-甲基脱氧阿枯明（N₄-methylpseudoakuammigine，1）、脱氧阿枯明（pseudoakuammigine，2）、维诺林（vinorine，3）、匹克拉林碱（picraline，4）。其中化合物1为一个新的生物碱类化合物。

探讨了虎红与盐酸美西律在溴代十六烷基吡啶存在下相互作用的共振光散射（RLS）光谱特征，建立了测定药物中盐酸美西律的双波长共振光散射（DWO-RLS）新方法。在弱酸性溶液中，虎红与盐酸美西律及溴代十六烷基吡啶相互作用生成红色三元缔合物，使共振光散射信号显著增强，并在372和596 nm波长处产生2个强的特征散射峰。在这二波长处，盐酸美西律在0.004~0.65 mg·L^-1内的质量浓度与共振光散射增强强度（ΔI_RLS）呈线性关系，检出限分别为0.003 2 mg·L^-1（372 nm）和0.003 8mg·L^-1（596 nm）。当用DWO-RLS技术测定时，其检出限更低，仅为0.001 8 mg·L^-1，将DWO-RLS法用于市售盐酸美西律药片中盐酸美西律的测定，回收率为98.5%~103%，相对标准偏差为2.0%~2.7%。

研究逍遥散低极性部位对抑郁模型大鼠干预作用，从肠道菌群和代谢物角度探讨逍遥散低极性部位抗抑郁作用机制。所有动物实验均通过山西大学科学研究伦理审查委员会审查。采用慢性温和不可预知应激（CUMS）程序对大鼠进行造模，以逍遥散低极性部位及阳性药（文拉法辛）为干预药物，结合16S rRNA基因测序和LC-MS代谢组学分析方法，探究逍遥散低极性部位对CUMS大鼠盲肠内容物肠道菌群和代谢物的影响，并对肠道菌群与代谢物进行Pearson关联分析。结果显示，逍遥散低极性部位显著改善CUMS大鼠的抑郁样行为；回调CUMS大鼠海马脑源性神经营养因子（BDNF）水平。肠道微生物群分析显示：逍遥散低极性部位给药可以增加CUMS模型大鼠微生物群的多样性，显著回调CUMS模型大鼠肠道微生物中罗斯氏菌属（Rothia）、普雷沃氏菌属（[Prevotella]），其主要与肠道炎症和短链脂肪酸的产生有关。代谢组学结果表明，盲肠内容物中鉴定出与抑郁症相关的20种生物标志物，逍遥散低极性部位干预后可回调17种，涉及的通路为亚油酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、初级胆汁酸生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢。相关分析进一步表明，逍遥散低极性部位调节的肠道菌群与盲肠内容物代谢产物之间存在很强的相关性。综上，逍遥散低极性部位可能通过调节肠道菌群的组成及盲肠内容物的代谢物及通路发挥抗抑郁疗效，该研究为后续探索逍遥散低极性部位抗抑郁机制提供创新思路和实验依据。

基于LC-MS代谢组学的方法，研究龟龄集（Guilingji，GLJ）对D-半乳糖致衰老大鼠的自主活动的影响并探究其作用机制。采用皮下注射D-半乳糖（300 mg·kg^-1）致大鼠衰老的模型，分析不同浓度龟龄集（37.5、75和150 mg·kg^-1）对衰老大鼠旷场实验的影响。造模后8周对收集的血清进行LC-MS检测，分析探讨龟龄集的延缓衰老作用机制，动物实验获得山西大学伦理委员会的批准（SXULL2014032）。旷场实验表明龟龄集能显著改善衰老大鼠的自主活动能力。代谢组学分析共找到23个潜在生物标志物，主要涉及3条代谢通路，分别为原发性胆汁酸生物合成、鞘脂代谢和缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成。龟龄集可以显著调节模型大鼠血清中的4种代谢物，主要回调胆汁酸合成和鞘脂代谢两条通路。龟龄集可延缓大鼠的衰老行为，该实验为龟龄集延缓衰老的潜在机制的研究提供了借鉴。

本文建立了用于抗白念珠菌药物快速筛选的浓度梯度微流控芯片平台，通过荧光示踪剂荧光素钠在芯片上的分布定性考察浓度梯度生成情况，采用HPLC法对芯片内模型药物氟康唑的浓度梯度分布进行定量分析，进一步比较不同流速条件对浓度梯度形成的影响，最终确定两水相流速1:1的比例用于后续药物筛选研究。以阿尔玛蓝为细胞活力指示剂，通过该平台分别进行了两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、特比萘芬、5-氟胞嘧啶、卡泊芬净的药敏实验，快速高效地获得了药物的MIC范围，且与CLSI建议的白念珠菌敏感株的MIC值相一致，表明该平台可以通过一次实验快速筛选得到抗菌药物的MIC值范围。此外，该批次白念珠菌对特比萘芬呈现耐药，与96孔板法验证结果一致，表明该方法还可以用于耐药菌株的快速筛选。

药性是中药的“身份证”，而归经又是破解中药药性理论的密钥。本实验基于分子热力学，从微观的能量释放与吸收角度研究中药与离体器官相互作用的效应变化，以期构建表征归经理论的新思路。以黄芩为例，应用等温滴定量热技术（isothermal titration calorimetry，ITC）分别测定黄芩与其主要活性成分黄芩苷与离体组织脑、心、肺、脾、肾的相互作用过程中能量的变化，比较结合常数（association constant，K_a）、解离常数（disassociation constant，K_d）、结合计量比（stoichiometry ratio，n）、焓变（enthalpy change，ΔH）、熵变（entropy change，ΔS）和吉布斯自由能（Gibbs free energy，ΔG）等热力学参数。结果发现，黄芩与肺的作用强度明显高于其他脏器，此结论与古籍黄芩归经一致；此外，主要活性成分黄芩苷也显现与黄芩一致的作用规律。热力学参数分析结果表明该作用为熵和焓共同驱动的弱键诱导的自发化学结合反应。比旋度测量结果进一步证明黄芩苷与肺存在相互作用，并与ITC滴定结果相吻合，表明ITC能用于表征中药归经理论。动物实验获得北京中医药大学实验动物伦理委员会批准。因此，基于ITC建立的以中药水煎液与其活性成分分别与离体组织相互作用的能量变化大小表征中药归经的方法是科学、可行的，此实验为探讨中药及其功效成分归经理论提供了新思路。

从巴戟天中克隆MEP途径中的1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶基因MoDXR及其启动子序列，并进行生物信息学分析、启动子区顺式作用元件分析，以及进行原核表达分析。根据巴戟天转录组中DXR基因原始序列和NCBI-ORFfinder分析，设计特异性引物，并进行RT-PCR扩增和生物信息学分析；采用染色体步移克隆MoDXR基因的5'端启动子序列；通过亚细胞定位分析MoDXR基因在细胞中的位置；构建原核表达载体pET-28a-MoDXR，导入BL21（DE3）表达感受态细胞后，在IPTG诱导下表达。从巴戟天中克隆的MoDXR基因，其cDNA全长2 015 bp，预测的阅读框大小为1 425 bp，编码474个氨基酸，分子质量为51.27 kDa；BlastP序列比对分析表明MoDXR基因与其他植物的DXR基因具有高度同源性，如：咖啡树DXR（CaDXR）、萝芙木DXR（RvDXR）；系统进化发育树分析显示，巴戟天MoDXR蛋白与小粒咖啡和栀子的DXR蛋白聚为一类，其亲缘关系最近；由亚细胞定位可知MoDXR基因所编码的蛋白定位于叶绿体上；MoDXR基因5'端启动子序列长度为1 493 bp，包含了与光响应、胁迫响应和激素响应有关的多种调控元件；SDS-PAGE结果表明pET-28a-MoDXR重组蛋白的大小与预期相符，但是以不容性的包涵体的形式表达。成功克隆了MoDXR基因及其启动子序列并对其进行了生物信息学分析和启动子区顺式作用元件分析；后期需要优化MoDXR原核表达体系，为进一步纯化MoDXR蛋白，研究其结构和功能奠定基础。