绘制肠型胃癌的超级增强子重塑图谱，揭示超级增强子的肿瘤生物学功能及可能激活的下游靶基因。

收集陆军特色医学中心消化内科2022年1-12月收治行内镜检查、治疗的患者的31例正常胃黏膜组织、23例肠型胃癌组织及9例肠型胃癌类器官进行靶向组蛋白H3K27ac修饰的染色质靶向捕获（cleavage under targets and tagmentation，CUT&Tag）测序，基于生物信息学工具描绘肠型胃癌的超级增强子重塑特征并鉴定关键靶基因；利用CRISPRi技术干预超级增强子，Western blot检测靶基因的表达，并采用CCK-8法和Transwell迁移、侵袭实验检测对照组细胞及干预组细胞的增殖、迁移、侵袭能力。

肠型胃癌组织与正常胃黏膜组织超级增强子信号差异明显（P<0.05），癌组织中的活性超级增强子可能参与免疫系统的负向调节、细胞黏附等生物学过程；在肿瘤细胞中表达上调的细胞迁移诱导蛋白（cell migration-inducing protein，CEMIP）受到超级增强子的调控，干预超级增强子后肿瘤细胞CEMIP蛋白表达量下降（P<0.05），细胞增殖率、相对迁移面积和相对侵袭面积也随之下降 （P<0.05）。

肠型胃癌发生了超级增强子重塑，其下游靶基因CEMIP可促进癌细胞生长、迁移和侵袭。

探讨内镜下亮蓝嵴（light blue crest，LBC）包绕的乳头状区域（LBC capsuling papillary lesion，LCPL）征象在高危胃黏膜肠上皮化生（intestinal metaplasia，IM，简称“肠化”）中的诊断价值。

选取2021年1月至2023年6月在陆军特色医学中心消化内科接受内镜检查及活检的314例患者（共352块活检样本）。采用HE染色及高铁二胺-阿尔新蓝（high iron diamine-alcian blue，HID-AB）染色（诊断高危肠化的金标准）检查样本的组织学类型及肠化类型，并据此将样本分为慢性炎症组、低危肠化组、高危肠化组、高-中分化肠型胃癌组、低分化肠型胃癌组。结合活检部位内镜下图像，统计分析LCPL在各组中的阳性率；采用Logistic回归分析LCPL征象与高危肠化的关系，以及与LCPL相关的临床病理特征；采用灵敏度、特异度、约登指数、受试者工作曲线下面积等指标，评价LCPL对高危肠化的诊断效能。

LCPL征象在高危肠化组的阳性率达75.70%，显著高于其他各组（P均<0.001）；Logistic回归分析显示LCPL与高危肠化密切相关（OR=30.286，95%CI：13.528~67.804，P<0.001）。LCPL征象诊断高危肠化的灵敏度为69.84%、特异度为93.75%、约登指数为0.636、曲线下面积为0.818（95%CI：0.773~0.857）；除灵敏度指标外，上述各诊断效能参数均显著优于诊断肠化与否的传统内镜下征象LBC（P均<0.001）。并且，LCPL征象的判别不易受到患者年龄（OR=1.130，95%CI：0.709~1.800，P=0.607）、病变部位（胃角：OR=2.360，95%CI：0.732~7.613，P=0.151；胃窦：OR=2.257，95%CI：0.756~6.744，P=0.145）、是否合并消化性溃疡（OR=1.085，95%CI：0.208~5.652，P=0.923）等因素的影响；94.12%的阳性、66.94%的阴性LCPL征象可在3 s内被快速识别（OR=4.536，95%CI：1.372~14.997，P=0.013）。

内镜下LCPL征象在诊断胃黏膜高危肠化中有较好效能，具有潜在临床应用价值。

通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（signet-ring cell carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。

采集2021年1月至2023年12月陆军特色医学中心消化内科35例胃镜样本（正常胃窦/胃体15例，SRCC 20例）。采用以下多组学分析：染色质可及性测序（assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing，ATAC-seq）检测染色质开放区域；染色质靶向捕获测序（cleavage under targets and tagmentation，CUT&Tag）捕获H3K27me3沉默子区域；转录组测序（transcriptome sequencing，RNA-seq）分析转录组。测序于Illumina NovaSeq 6000平台完成（符合深度标准）。通过DESeq2筛选H3K27me3相关差异基因（|Log₂FC|>1，FDR<0.05），并通过基因本体论（Gene Oncology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）分析进行功能富集，Homer鉴定转录因子基序，Cytoscape构建调控网络，并使用免疫组化进行验证，探讨其调控机制。

SRCC沉默子主要分布于基因组远端基因间区（占37.06%）。与正常组织相比，SRCC中H3K27me3沉默子信号显著降低（95%CI：1.34~2.30，P=0.007），共鉴定出6 257个丢失位点（FDR<0.01）。CUT&Tag和RNA-seq整合分析显示，380个因沉默子丢失而上调的基因显著富集于免疫相关通路，如T细胞受体信号通路（OR=4.2，95%CI：2.8~6.3，P=0.002）。免疫组化验证表明，转录因子EHF表达显著升高（P<0.05）。

SRCC中存在H3K27me3沉默子重塑现象，转录因子EHF可能在SRCC恶性进展中发挥关键作用。

通过绘制胃黏膜高级别上皮内瘤变（high-grade intraepithelial neoplasia ，HGIN）组织中组蛋白H3K27ac修饰标记的增强子图谱，探究表观调控对HGIN发生发展的影响。

收集2022年6月至2023年6月来自陆军特色医学中心消化内科的14例正常胃黏膜组织（Nor组）、31例胃黏膜高级别上皮内瘤变组织（HGIN组）和17例胃癌（gastric cancer，GC）组织（GC组），利用染色质靶向捕获测序（cleavage under targets and tagmentation，CUT&Tag）技术捕获组蛋白H3K27ac修饰的增强子区域；联合多组学分析筛选HGIN组织特异的活性增强子及其潜在调控的基因；采用免疫组化染色观察目的基因在不同类型临床样本中的表达差异，并通过CRISPR-dCas9基因编辑技术沉默活性增强子，观察目的基因的表达水平，并验证潜在调控关系。

表观多组学测序数据质量较好，3组样本组间H3K27ac修饰的全基因组分布特征无显著差异，但H3K27ac增强子在HGIN、GC组织中发生明显重塑（P<0.05）。联合转录组数据分析发现，增强子重塑可能上调HGIN组织增殖相关靶基因CD24表达；抑制增强子活性，则CD24表达水平显著降低（P<0.05）。免疫组化结果显示，CD24表达与Ki-67呈正相关（P<0.001）。

H3K27ac标记的增强子重塑是HGIN的重要表观遗传学特征，H3K27ac标记的活性增强子上调CD24表达，可能促进HGIN增殖。

探究钙腔蛋白（calumenin，CALU）在胃癌中的表达及其对胃癌迁移、侵袭的影响，并分析其与胃癌患者预后的关系。

利用癌症基因组图谱（the cancer genome atlas，TCGA）数据库分析CALU在胃癌中的表达水平及其对患者预后的影响。收集2018年1月至2022年12月在陆军军医大学第一附属医院普通外科进行胃部分切除术的189例胃癌患者的胃癌和癌旁组织样本102对。通过免疫组化实验检测CALU在胃癌和癌旁组织中的表达情况，并统计分析CALU表达与临床病理参数的关系。构建CALU敲低和过表达胃癌细胞株，通过Western blot以及RT-qPCR评估敲低及过表达效率。结合Transwell小室实验检测CALU对胃癌细胞的迁移、侵袭能力的影响。

公共数据库结果分析发现CALU在胃癌组织中显著高表达（P<0.05），在95%置信区间下，CALU的表达水平与患者预后呈负相关（P<0.05）。免疫组化结果发现相较于癌旁组织，CALU在胃癌组织中显著高表达（P<0.01），其表达水平与浸润深度（P<0.01）、淋巴结转移（P<0.01）、TNM分期（P<0.05）呈正相关，统计分析102例患者临床资料发现CALU的表达与TNM分期（P=0.021）、T分期（P<0.001）、N分期（P=0.028）显著相关。CALU敲低可以显著的抑制胃癌细胞的迁移、侵袭能力（P<0.01），而过表达则获得相反的结果。

CALU在胃癌组织中高表达并促进胃癌的迁移、侵袭，进而导致胃癌患者的不良预后。

整合多组学数据解析间质型胃癌（mesenchymal-subtype gastric cancer，Mes-GC）临床特性，探究与间质型胃癌复发风险相关的肿瘤细胞及微环境特征。

收集2022年1月至2023年12月，在陆军特色医学中心消化内科就诊患者的组织样本，包括19例弥漫型胃癌、22例肠型胃癌与23例混合型胃癌患者的组织，用于转录组和基因组测序；整合包括癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，TCGA）、美国国立生物技术信息中心基因表达数据库（Gene Expression Omnibu，GEO）以及国家基因组科学中心（National Genomics Data Center，NGDC）数据库资源，采用生物信息学分析，比较间质型胃癌与非间质型胃癌在临床特性以及肿瘤微环境特征等方面的异同。

相比非间质型胃癌，间质型胃癌临床分期较晚、肿瘤浸润程度深、淋巴结转移率高（P<0.05）；Kaplan-Meier生存分析表明间质型胃癌生存期短、极易复发、临床预后差（P<0.05）；单细胞转录组测序（single-cell RNA sequencing，scRNA-seq）数据分析揭示了间质型胃癌肿瘤细胞高表达干性、转移以及上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关基因，肿瘤微环境中髓系细胞、平滑肌细胞、内皮细胞和成纤维细胞显著升高，其中成纤维细胞含量升高最为明显（P<0.05），且成纤维细胞含量越高患者预后越差。

间质型胃癌肿瘤细胞具有较高的干性和EMT特征，肿瘤微环境中富集髓系细胞、内皮细胞和成纤维细胞等间质细胞，这些特征可能是导致间质型胃癌预后差、易复发的关键因素。

体外构建胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞的共培养模型，利用该模型探究肿瘤相关成纤维细胞对胃癌类器官增殖与化疗耐药的影响。

收集于2023年2月至2024年3月在陆军军医大学第二附属医院普外科接受手术切除的12例胃癌患者的肿瘤组织。采用体外三维构建胃癌类器官；通过HE染色进行形态学分析，采用免疫组织化学染色检测细胞角蛋白CK7、癌胚抗原CEA和增殖相关因子Ki-67的表达。培养同一患者来源的肿瘤相关成纤维细胞，通过光镜观察分析其形态；采用流式细胞染色检测其表型。将胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞按1∶1比例共培养，相差显微镜下观察胃癌类器官的生长情况并分析其数量、平均直径与总面积。将单独培养的类器官设置为对照组，在对照组和共培养组中加入化疗药物5-氟尿嘧啶和奥沙利铂处理48 h，利用CellTiter-Glo^® 3D试剂盒和CellEvent™ Caspase 3/7 分别检测类器官的细胞活力与凋亡情况。

成功构建出10例患者来源的胃癌类器官与肿瘤相关成纤维细胞，胃癌类器官表现出与原发肿瘤一致的形态学特征并在CK7、CEA与Ki-67的表达上具有相似性。肿瘤相关成纤维细胞呈现出典型的梭状及CD326^-、CD45^-、CD31^-、α-SMA⁺、CD73⁺、CD90⁺、CD105⁺表型特征。与单独培养的类器官对照组比较，与肿瘤相关成纤维细胞共培养组的类器官形成数量更多、平均直径更长且总面积更大（P<0.05）。在化疗药物5-氟尿嘧啶和奥沙利铂处理下，对照组的半数抑制浓度分别为10.66和3.26 μmol/L，而共培养组则分别为46.23和91.11 μmol/L；与类器官单独培养的对照组比较，共培养组中类器官的CellEvent™ Caspase 3/7 阳性凋亡细胞明显减少。

与单独培养的类器官比较，肿瘤相关成纤维细胞共培养模型能更好地模拟体内肿瘤微环境的促瘤增殖与耐药效应。

探究近足月及足月新生儿出生后24 h内住院及呼吸支持治疗的危险因素。

采用病例对照研究，选取2023年1月至2024年3月在重庆医科大学附属大学城医院产科娩出34周≤胎龄<42周的1 468例新生儿为研究对象，收集其母亲孕期及新生儿病例资料。根据出生后24 h内是否入住新生儿病房分为住院组和非住院组，并对因感染性疾病住院的新生儿进行亚组分析，根据有无呼吸支持治疗分为呼吸支持治疗组与无呼吸支持治疗组。分别比较各组间围产期危险因素，并寻找引起近足月及足月新生儿出生后24 h内住院及需要呼吸支持治疗的独立危险因素。将单因素分析中P<0.1的指标纳入多因素Logistic回归分析，采用逐步回归方法，拟合多因素Logistic回归模型。

住院组213例（14.5%），非住院组1 255例（85.5%）；因感染性疾病住院的新生儿共150例，呼吸支持治疗组48例（32.0%），无呼吸支持治疗组102例（68.0%）。多因素Logistic回归分析显示，母亲未正规产检（OR=2.687，95%CI：1.175~6.141，P=0.019）、胎儿宫内发育迟缓（OR=2.711，95%CI：1.106~6.646，P=0.029）、胎膜早破（OR=1.667，95%CI：1.139~2.438，P=0.008）、绒毛膜羊膜炎（OR=4.852，95%CI：2.114~11.135，P<0.001）、产前1周患感染性疾病（OR=1.531，95%CI：1.015~2.310，P=0.042）、羊水浑浊（OR=3.170，95%CI：2.099~4.787，P<0.001）、胎盘异常（OR=2.335，95%CI：1.202~4.534，P=0.012）、妊娠期其他并发症（OR=2.367，95%CI：1.360~4.118，P=0.002）、产前应用糖皮质激素（OR=2.744，95%CI：1.219~5.528，P=0.009）与近足月及足月新生儿出生后24 h内住院呈正相关，胎龄（OR=0.693，95%CI：0.602~0.797，P<0.001）、Apgar 5分钟评分（OR=0.026，95%CI：0.003~0.212，P=0.001）、脐血pH（OR=0.044，95%CI：0.002~0.793，P=0.034）、脐血BE（OR=0.885，95%CI：0.823~0.823，P=0.001）与其呈负相关。胎膜早破（OR=0.207，95%CI：0.070~0.618，P=0.005）、产前1周患感染性疾病（OR=0.245，95%CI：0.070~0.854，P=0.027）、Apgar 5分钟评分（OR=0.063，95%CI：0.008~0.526，P=0.011）、新生儿C反应蛋白异常（OR=0.145，95%CI：0.046~0.460，P=0.001）与因感染性疾病住院新生儿需呼吸支持治疗呈负相关。

母亲未正规产检、胎儿宫内发育迟缓、胎膜早破等是近足月及足月新生儿出生后24 h内住院的危险因素；胎膜早破、产前1周患感染性疾病、Apgar 5分钟评分等是因感染性疾病住院新生儿需呼吸支持治疗的保护因素。

探讨目标管理训练对注意缺陷型注意缺陷多动障碍（attention deficit hyperactivity disorder，ADHD）大学生核心症状和心理健康水平的改善效果。

采用德尔菲法，构建注意缺陷型ADHD大学生目标管理训练方案。在2024年3-6月，通过陆军军医大学第二附属医院及重庆市3所大学发布广告，招募注意缺陷型ADHD大学生共68人，采用计算机随机化法将研究对象分为试验组（34人）和对照组（34人）。试验组接受连续7周，每周1次，每次2 h的目标管理训练，对照组暂不接受训练。使用成人多动症症状自评问卷（Adult ADHD Self-Report Scale，ASRS）、情绪调节困难问卷（Dysregulation of Emotions Rating Scale，DERS）、七项广泛性焦虑障碍量表 （Generalized Anxiety Disorde-7，GAD-7）、抑郁症筛查量表（Patient Health Questionnaire-9，PHQ-9）、自我关怀问卷（Self-Compassion Scale，SCS）、生活满意度量表（Satisfaction with Life Scale，SWLS），在训练前1周内（前测）、训练后1周内（后测）对2组被试进行评估。

① 2轮专家咨询的专家权威系数（Cr）为0.83，问卷回收率分别为100%和95%，肯德尔协调系数分别为0.081（P<0.01）、0.226（P<0.001），变异系数均<0.3，专家咨询结果可靠。目标管理训练包含1个一级指标、7个二级指标、20个三级指标。②7周目标管理训练后组别和时间交互作用显示，试验组在注意缺陷症状（Wald χ² =28.35，P<0.001）、情绪调节困难（Wald χ² =23.81，P<0.001）、焦虑（Wald χ² =22.79，P<0.001）、抑郁（Wald χ²=20.52，P<0.001）、自我关怀（Wald χ² =9.36，P<0.01）和生活满意度（Wald χ² =3.97，P<0.05）等指标的改善程度与对照组相比均具有统计学差异。

目标管理训练能显著改善注意缺陷型ADHD大学生的核心症状，降低焦虑、抑郁水平，增强情绪调节、自我关怀能力，提高生活满意度。