过刊目录炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD) 是一种难治性肠道炎症性疾病, 包括溃疡性结肠炎和克罗恩病, 具有进行性且不可预测的病程特点。肠道炎症和免疫反应异常与IBD发病机制密切相关。自噬是细胞中重要的分解代谢过程, 已被证明与包括IBD在内的多种炎症性疾病存在联系。本文从自噬功能障碍与IBD的关系出发, 重点阐述了炎症小体抑制剂、肠道微生物群调节剂及其他信号调节剂等作用于肠上皮细胞和巨噬细胞的自噬调节剂在IBD中的研究进展。
胰腺癌是一种恶性程度高、患者总体预后不良的肿瘤。高异质性、复杂的肿瘤微环境、耐药性更是加剧了胰腺癌治疗的困难性。目前, 吉西他滨联合卡培他滨、白蛋白紫杉醇等以及FOLFIRINOX是可切除或晚期转移性胰腺癌的标准化学疗法。鉴于化疗疗效有限且伴随毒副作用, 近来靶向药物及免疫治疗药物逐渐引起重视并取得一定进展。本文将对胰腺癌的化疗药物、靶点及靶向药物、免疫治疗药物进行系统综述。
人参皂苷Rg1是人参中最主要的皂苷成分之一, 具有广泛的药理活性, 被认为是一种强大的神经保护剂, 具有抗神经炎症、抗氧化应激、抗神经凋亡和增强记忆力等神经保护作用。Rg1在防治阿尔茨海默症、帕金森病、脑卒中等神经退行性疾病及抑郁症等精神类疾病中展现出了良好的应用前景。本文就近些年国内外对Rg1的神经保护作用机制研究进行综述, 旨在为临床上治疗神经系统性疾病提供新的研究思路。
白细胞介素-1受体相关激酶4 (interleukin-1 receptor associated kinase 4, IRAK-4) 作为一种丝氨酸-苏氨酸激酶, 是转导IL-1R家族和TLRs信号通路的关键信号节点。研究发现IRAK-4介导的炎症通路可以引起人体的关节、肠道、肝脏和神经系统的炎症反应及其他自身免疫疾病, 也是一些癌症细胞的耐药性原因。因此, IRAK-4可以作为炎症疾病和癌症的有效治疗靶点。研发结构新颖的IRAK-4小分子抑制剂, 考察其安全性和有效性, 丰富对炎症和癌症疾病的临床治疗用药, 是该通路药物发展的方向。本文按不同结构分类概述了关于IRAK-4信号通路小分子抑制剂的最新研究进展, 旨在为相关药物的研发工作提供参考。
自2019年末SARS-CoV-2病毒引起的新冠疫情COVID-19 (也称为2019-nCoV) 暴发以来, 快速传播, 席卷全球。除了研发有效疫苗, 迫切需要寻找安全有效的抗新冠病毒药物来对抗这种疾病。FDA紧急授权的paxlovid、molnupiravir、sotrovimab和bebtelovimab被证明对Omicron有效。本文综述了3年来全球对该病毒有效的抑制剂, 包含受体抑制剂、抗体、天然产物抑制剂、合成抑制剂及临床上对其他RNA病毒有效的广谱抗病毒药物的研发进展。
胆汁酸(bile acids, BAs) 是一类调节脂质、葡萄糖和能量代谢的内源性甾体物质。其作为宿主和肠道微生物代谢的关键信号分子, 在维持机体稳态和生理功能中发挥着重要的作用。生物体内BAs的准确定性定量在基础及临床研究中具有重要意义。过去几十年间, 酶法分析、酶联免疫分析法、核磁共振、色谱法等相关技术均相继应用于BAs的检测。由于BAs结构多样、存在同分异构体, 且生物样本基质复杂, 给内源性BAs检测带来巨大挑战。超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS) 是一种稳健性分析技术, 其结合了UPLC快速的分离能力及MS/MS强大的结构鉴定功能, 使得生物样品中目标分析物的快速分离、准确定性及定量检测更加便利。UPLC-MS/MS因具有高选择性、高灵敏度、高准确性等优势, 近年来被广泛用于BAs的分析。本文主要对BAs的生物合成途径、样品前处理方法、常见分析检测技术进行总结, 并重点介绍了近五年来UPLC-MS/MS技术在内源性BAs分析中的应用现状, 旨在为内源性BAs准确检测及进一步研究和应用提供参考。
基质辅助激光解吸电离质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging, MALDI-MSI) 是一种新型的无标记、快速、高通量的成像技术, 具有非靶向全分析型的数据通量及靶向分析的高准确性, 在组织表面的药物、代谢产物、多肽及蛋白质等多种生物分子空间分布分析方面发展迅速。适当的样品制备方法是获取高灵敏度、高空间分辨率、稳定性好的MSI响应的核心前提, 灵活多样的数据处理手段则有助于挖掘非靶向数据, 实现可视化示踪、空间分布、多指标应用等需求, 利于揭示数据下的科学规律。本文简要总结了MALDI-MSI中的样品制备流程、数据处理和可视化中的关键技术研究进展, 详细阐述了关键技术特征、难点及可能的解决方案。
肺易受外界侵扰, 造成多种急性和慢性肺部疾病。采用功能化纳米粒作为载体可携带药物穿透多重肺生理屏障进入肺病变部位, 但存在靶向性差、治疗效率低等问题。细胞膜涂层仿生纳米粒作为药物载体, 由于保留其源细胞特性, 具有免疫系统逃逸、主动靶向、炎症趋化、穿过生理屏障等特点, 近年来被大量应用于肺部疾病的治疗研究。本综述总结了近年来多种细胞膜仿生纳米粒在肺部疾病治疗中的应用, 并进行了分类论述, 其中细胞膜来源包括红细胞膜、血小板膜、巨噬细胞膜、中性粒细胞膜、肺上皮细胞膜、肺表面活性剂、内皮细胞膜、癌细胞膜、细菌膜和混合膜等。本综述旨在为细胞膜涂层仿生纳米粒治疗肺部疾病提供新思路。
聚合物自愈合主要依据聚合物的分子结构及其相互作用, 部分需给予外部刺激, 如光、热、pH等。近年来诸多研究发现聚合物的自愈合特性可延长材料的寿命, 同时在愈合后仍保持着聚合物的机械性能。根据聚合物材料的作用方式不同, 分为自主自愈合和非自主自愈合。其中自主自愈合主要通过可逆的共价键(席夫碱键、狄尔斯-阿尔德反应、酰肼键)、可逆非共价键(氢键、金属-配体配位键、静电相互作用、π-π堆积、疏水相互作用) 或二者结合发挥作用。具有独特的自愈合特性的药物载体在生物大分子的封装和稳定释放方面起着重要作用。本综述根据聚合物的自愈合机制及其在生物医药领域中的应用进行了简要的总结讨论。
皮肤附属器毛囊作为药物输送的新靶点和新途径受到诸多关注, 经皮渗透毛囊靶向递药系统的设计与开发对毛囊源性皮肤病如痤疮、脱发及毛囊炎等发挥直接高效的作用。本综述围绕毛囊的结构和生理功能、毛囊微环境、影响毛囊渗透的因素、纳米制剂促进经毛囊渗透的现状及表征毛囊靶向渗透的技术进行归纳, 并系统总结了毛囊靶向递药系统治疗痤疮和脱发的最新研究进展。最后, 探讨了毛囊靶向给药系统设计当前所面临的挑战。本综述可为毛囊源性皮肤病毛囊靶向给药系统设计提供思路与参考。
细菌感染治疗是全球关注的医学问题, 抗菌药物的误用和过度使用, 病原体新耐药机制的出现, 导致抗菌药物的耐药性问题日益严峻, 持续威胁抗感染治疗效果, 并增加疾病传播、严重疾病的死亡风险。随着生物材料和纳米技术广泛应用于生物医药, 围绕抗细菌感染展开了广泛研究。纳米无机材料特殊的光电磁和高穿透性等物理化学性质可产生天然抗菌作用。纳米药物递送系统可实现药物缓控释, 靶向输送从而提高抗菌疗效。本综述对抗菌药物的耐药机制进行阐述, 并对围绕纳米材料、纳米药物系统包括脂质体、聚合物纳米粒、树枝状聚合物、仿生纳米载体等开展的抗细菌感染研究进行总结。纳米材料和纳米技术为提高抗细菌感染疗效, 并可能克服耐药性的新型制剂的研发提供了有希望的策略。
分子动力学模拟技术是一种依靠牛顿力学模拟分子体系的运动来研究现实系统的计算机模拟方法, 近年来逐渐被用于自组装纳米递药系统的自组装过程揭示及宏观性能预测, 有助于高效率、精准化设计制剂。本综述从分子动力学模拟技术的定义、类型及操作流程出发, 总结了其在自组装纳米递药体系研究中的应用, 包括自组装过程微观信息(尺寸形貌、微区组成、分子分布) 的获取与分析、宏观性能(稳定性、载药能力、释药性及跨膜性能) 的预测, 并对其在递药系统处方预测中的应用进行了归纳, 同时展望了未来实现制剂处方预测的策略, 旨在为制剂研究人员选择适宜的路径研究纳米体系提供理论依据, 为分子动力学模拟技术在制剂领域更广阔的应用提供参考。
利用斑马鱼幼鱼筛选枸杞子改善骨质疏松的活性部位, 并通过斑马鱼成鱼骨质疏松模型验证筛选结果。以泼尼松龙为诱导剂构建斑马鱼幼鱼及成鱼骨质疏松模型, 给予枸杞子不同提取物及化学部位共9组样品, 通过茜素红染色后统计第一椎骨面积及光密度值, 椎骨骨节数量以筛选枸杞子抗骨质疏松的活性部位。采用茜素红染色观察斑马鱼成鱼鳞片基质矿化及骨吸收情况; 采用碱性磷酸酶(ALP) 和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP/TRACP) 染色检测鳞片中成骨细胞和破骨细胞活性; 采用qRT-PCR法测定鳞片中骨代谢相关基因alp、骨桥蛋白(opn)、成骨细胞特异性转录因子(sp7)、组织蛋白酶K (ctsk)、tracp、Runx家族转录因子2b (runx2b) 的表达情况。结果显示, 枸杞子各样品组均能够不同程度地改善斑马鱼幼鱼第一椎骨形成面积、染色光密度值和椎骨骨节数量, 其中以枸杞子多糖部位效果最优。枸杞多糖能够显著抑制斑马鱼鳞片中骨吸收陷窝的形成, 增强鳞片中ALP活性, 降低TRAP活性, 上调alp、sp7、opn基因, 下调ctsk、tracp基因的表达。研究结果表明, 枸杞多糖能够调节成骨细胞与破骨细胞活性, 减少骨吸收, 促进骨形成, 增强骨密度, 为枸杞子抗骨质疏松的主要活性部位。本研究为中药枸杞子“坚筋骨”传统功效提供了科学证据, 为基于斑马鱼成鱼模型评价中药抗骨质疏松活性的研究提供了借鉴, 也为老龄化社会人群骨健康需求提供了有益的启示。
本文研究冠心宁片对氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL) 诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs) 损伤的干预作用, 为冠心宁片治疗动脉粥样硬化提供实验依据。在ox-LDL对HUVECs细胞的损伤下, 采用CCK-8 (cell counting kit-8) 法检测细胞的活力; 采用相应的试剂盒检测细胞培养上清中的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) 含量; 用普通相差显微镜观察不同组别的细胞形态; 采用DCFH-DA和DAF-FM DA探针分别检测细胞中的活性氧(reactive oxygen species, ROS) 和NO水平; 单核细胞黏附实验检测HUVECs对THP-1的招募情况; 用TMRM染料检测线粒体膜电位水平; ELISA法检测细胞的白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)、细胞间黏附因子-1 (intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1) 和单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1) 分泌情况。结果显示, 冠心宁片对HUVECs具有浓度依赖性促增殖作用, 在100 μg·mL-1 ox-LDL刺激下, 内皮细胞形态发生明显改变, 此时NO水平显著下降, ROS水平显著上升并伴随着线粒体膜电位下降, 内皮细胞对THP-1细胞的招募增加, IL-6、ICAM-1和MCP-1也显著升高, 产生了氧化应激和炎性损伤。而冠心宁片及其组成的丹参、川芎提取物能够明显改善细胞形态、提高NO水平、降低ROS的产生, 并且还能减少炎症相关蛋白IL-6和MCP-1的分泌。在NO这个内皮基础功能的指标上, 丹参和川芎具有显著的协同作用。其中丹酚酸B和丹参素发挥主要的药效作用, 丹参素和阿魏酸联合药效优于单给药药效。以上结果表明, 冠心宁片及其药效物质具有改善内皮基础功能、抵抗氧化应激、缓解炎性损伤的作用, 并且丹参和川芎协同增效, 可能与其调控氧化应激和炎症有关, 在动脉粥样硬化的防治中具有应用前景。
银屑病是一种非传染性的慢性皮肤炎症疾病, 其发展主要受白细胞介素(interleukin, IL)-17信号路径调控。近年来, 神经-免疫轴在银屑病发展中的作用得到广泛关注。利多卡因作为局部麻醉药能够阻断神经冲动的传导, 然而其对银屑病的疗效有待确证。本研究考察皮肤局部涂抹复方利多卡因乳膏(compound lidocaine cream, LIDO) 对咪喹莫特(imiquimod, IMQ) 诱导的小鼠银屑病的治疗效果。动物福利和实验过程均遵循中国药科大学伦理委员会的规定。通过银屑病面积与严重性指数(psoriasis area and severity index, PASI) 评价银屑病样症状的严重程度; 通过苏木精-伊红染色考察皮肤组织病理学变化并测量表皮厚度; Ki67免疫荧光染色用于考察角质形成细胞增殖; 实时荧光定量PCR用于考察皮肤中炎症因子(Il17、Il22、Il23和Il36) mRNA的表达水平。结果显示, 局部涂抹LIDO显著降低IMQ引起的PASI评分增加、表皮增厚、Ki67+细胞数目增加及炎症因子mRNA水平上调, 而且其效果优于阳性药卡泊三醇, 说明LIDO可能用于治疗银屑病。
半乳糖凝集素-3 (galectin-3, Gal-3) 属于β半乳糖苷酶结合凝集素家族, 具有特异性结合半乳糖的特性。通过C端糖蛋白结合区(carbohydrate recognition domain, CRD), Gal-3可结合糖基化胰岛素受体(insulin receptor, IR) 的半乳糖苷链, 从而抑制IR信号通路, 导致胰岛素抵抗, 被视为治疗胰岛素抵抗和2型糖尿病的潜在药物作用靶点。本研究根据Gal-3结合糖基化蛋白半乳糖苷链的特性, 设计了一种简便的Gal-3抑制剂筛选模型。在大肠杆菌表达Gal-3蛋白, 经纯化后, 用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC) 修饰, 获得Gal-3-FITC。Gal-3-FITC自发绿色荧光, 与表面表达有大量糖蛋白的人胰腺癌细胞(PANC-1) 孵育后, PANC-1细胞带有荧光信号。若待测化合物有Gal-3抑制活性, 则该化合物可降低Gal-3-FITC与细胞的结合, 从而降低PANC-1细胞荧光信号。通过荧光信号变化可评价Gal-3抑制剂的抑制强度。进一步研究表明, 该筛选模型简易稳定, 具有良好重复性, Z'因子在0.7和0.85之间。本研究采用FITC标记Gal-3的方式在PANC-1细胞上用荧光强度反映Gal-3和糖蛋白的结合水平, 构建了Gal-3抑制剂的高通量筛选模型。
运用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等方法对两粤黄檀Dalbergia benthamii Prain根茎的乙醇提取物进行分离纯化, 得到13个异黄酮类化合物, 通过理化性质和MS、1D/2D NMR等波谱数据确定化合物的结构, 分别鉴定为两粤黄檀素(1)、butesuperin A (2)、xanthocercin A (3)、butesuperin B (4)、di-O-methylalpinum isoflavone (5)、2′-deoxgisoaunculutin (6)、robustone (7)、4′-hydroxy-5, 7-dimethoxy-6-(3-methyl-2-butenyl)-isoflavone (8)、芒柄花素(9)、6″-O-rhamnosyldaidzin (10)、3′, 4′-di-O-methylene-5-hydroxy-7-methoxy-6-isopentenyl isoflavone (11)、derrubone dimethyl enter (12) 和derrubone (13)。其中化合物1为一对新的异黄酮对映异构体, 化合物12为新的天然产物, 化合物1~7、10~13为首次从该植物中分离得到。采用MTS测试了化合物2~13对5种细胞株(人急性白血病细胞株HL-60、人非小细胞肺癌细胞株A-549、人肝癌细胞株SMMC-7721、人乳腺癌细胞株MCF-7、人结肠癌细胞株SW480) 的体外细胞毒活性, 结果表明, 化合物8对人非小细胞肺癌细胞株A-549和人结肠癌细胞株SW480显示出较强的生长抑制活性, IC50值分别为16.68 ± 0.19和15.21 ± 0.60 μmol·L-1。
应用大孔树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC对三脉马钱茎枝95%乙醇提取物的正丁醇部位进行分离纯化, 分离得到14个化合物, 通过高分辨质谱、核磁共振波谱和文献数据分析, 分别鉴定为: 4-O-β-D-吡喃阿洛糖基香草酸乙酯(1)、4-O-β-D-吡喃阿洛糖基香草酸正丁酯(2)、4-O-(6′-O-丁香酰基)-β-D-吡喃阿洛糖基香草酸正丁酯(3)、4-O-(6′-O-香草酰基)-β-D-吡喃阿洛糖基香草酸正丁酯(4)、4-O-(6′-O-丁香酰基)-β-D-吡喃葡萄糖基香草酸正丁酯(5)、4-O-α-L-吡喃鼠李糖基丁香酸正丁酯(6)、3-甲氧基-4-β-D-吡喃阿洛糖氧基苯甲酸甲酯(7)、金钱松苷B (8)、丁香酸丁酯(9)、丁香酸葡萄糖苷(10)、丁香酸甲酯(11)、香草酸甲酯(12)、威灵仙苷C (13) 和小木通苷A (14), 其中化合物1~6为酚酸乙酯或正丁酯的人工产物。需要指出的是, 化合物3和4的生源前体4-O-(6′-O-丁香酰基)-β-D-吡喃阿洛糖基香草酸和4-O-(6′-O-香草酰基)-β-D-吡喃阿洛糖基香草酸均为新化合物。化合物1~13的体外活性评价表明, 在10 μmol·L-1的浓度下, 化合物1、2和6~10均具有潜在的肝细胞保护活性, 细胞存活率由扑热息痛模型组的45.4%提高到53.6%~55.5%; 化合物4具有一定的抗炎作用, 其一氧化氮生成抑制率为74.6%; 化合物3和5具有潜在抗氧化活性, 在10 μmol·L-1的浓度下, 丙二醛生成抑制率分别为53.2%和56.1%。
利用现代柱色谱技术,如大孔吸附树脂、硅胶、ODS、Sephadex LH-20和HW-40C柱色谱及半制备液相等对箭叶淫羊藿正丁醇部位化学成分进行分离纯化,得到14个黄酮类化合物。根据化合物的理化性质和波谱特征,确定其结构分别为3'-羟基宝藿苷-Ⅱ(1)、huazhongilexone-7-O-β-D-glucopyranoside(2)、kaempferol-3-O-α-L-rhamnoside(3)、宝藿苷-Ⅱ(4)、淫羊藿次苷-Ⅱ(5)、kaempferol 3,7-di-O-α-L-rhamnopyranoside(6)、(+)-aromadendrin(7)、kaempferol 3-O-(2-O-β-D-apiofuranosyl)-α-L-rhamnopyranoside(8)、箭藿苷A(9)、2″-O-rhamnosyl icariside-Ⅱ(10)、apigenin-7-O-β-D-glucoside(11)、quercetin 3-O-β-D-apiofuranoyl-(1→2)-α-L-rhamnopyranoside(12)、山柰酚(13)、淫羊藿苷(14)。其中化合物1为新化合物,化合物2、6~8、11和12为首次从箭叶淫羊藿中分离得到。
逍遥丸源自《太平惠民和剂局方》,是治疗肝郁脾虚证的经典方,但是其成分复杂,为更好地进行逍遥丸的质量控制,本研究采用LC-IT-TOF/MS方法对逍遥丸中的芍药苷、芍药内酯苷、甘草酸、柴胡皂苷A和柴胡皂苷B2等5种有效成分进行了定性研究,采用LC-MS/MS方法对上述5种有效成分进行了定量研究,并进行了方法学验证。结果表明,通过高分辨质谱可以得到5种有效成分的质谱裂解规律。测定逍遥丸中5种有效成分含量的分析方法,线性关系良好、重复性的RSD均小于5%、回收率范围在90%~115%之间、样品溶液放置24 h测定各物质RSD小于10%。对3批逍遥丸(浓缩丸)和2批逍遥丸(水丸)样品进行测定,表明3批浓缩丸中含有的芍药苷含量大于4 mg·g-1,2批水丸中含有的芍药苷含量大于2.5 mg·g-1,符合2020年版中国药典规定,但是不同批次其他成分的含量存在差异。该方法灵敏度高,测定结果可靠,为逍遥丸的质量控制研究提供依据,为深入研究逍遥丸的药效物质基础提供了有价值的科学依据。
本研究建立同时测定广陈皮中3种黄酮类化合物橙皮苷(hesperidin,HES)、川陈皮素(nobiletin,NOB)及橘皮素(tangeretin,TAN)含量的高效液相色谱法,对3种黄酮类成分进行体外肝脏和肠道菌群代谢转化研究,并对孵育后菌群进行16S rRNA测序。采用Alltima C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为水(A)-甲醇(B)梯度洗脱,柱温25℃,检测波长283、330 nm,流速1.0 mL·min-1。结果显示,橙皮苷、川陈皮素和橘皮素的保留时间在12.313~34.271 min之间,10批广陈皮中橙皮苷的含量在26.81~39.80 mg·g-1,川陈皮素和橘皮素的含量分别在4.06~7.90 mg·g-1、1.81~3.93 mg·g-1。不同批次、不同产地的广陈皮黄酮类主成分含量存在差异。3种黄酮成分在大鼠和人肝S9、胞质溶胶、微粒体以及体外肠道菌群孵育中,均有不同程度的代谢,以橙皮苷尤为明显。16S rRNA基因分析结果表明,广陈皮黄酮类主成分可通过调节与能量代谢相关的肠道菌属达到调节脂质代谢的效果。本研究建立的广陈皮黄酮类主成分的含量测定方法快速、简便,具有良好的重复性和稳定性,可用于不同年限、不同产区广陈皮的黄酮类成分含量分析与评价;而肠道菌可不同程度代谢转化广陈皮的黄酮类成分,这从代谢角度为后续广陈皮药效物质基础的研究提供有价值的科学依据。本研究中实验动物的使用已获得广东江门中医药职业学院医学伦理委员会批准(批准号:20190419)。
基于液质联用(UHPLC-MS/MS)技术,建立快速同时定量金线兰[Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.]中7种不同极性成分(金线莲苷、水仙苷、槲皮素、芦丁、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷)的方法。采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18(2.1 mm×100 mm;1.7 μm)色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%甲酸-水溶液为流动相B,0.2 mL·min-1的流速进行梯度洗脱,柱温为30℃,进样量为2 μL,分析时间为8 min。质谱以电喷雾电离源(electron spray ionization,ESI),正、负离子模式同时检测,优化各成分最佳质谱条件。结果发现,7种成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均≥ 0.998 0,稳定性、精密度和重复性良好,平均加样回收率为97.71%~103.33%。经聚类热图和RDA(redundancy analysis)分析,发现金线莲苷主要分布在茎中,叶中次之,根中最少。生长6个月的金线兰茎中金线莲苷含量增长显著,而根与叶中增长较少。黄酮及黄酮苷类成分主要分布在叶。本文所建立的液质联用方法准确且灵敏,稳定性与重复性好,可用于金线兰的质量控制,并为建立更全面的金线莲药材质量检测方法提供参考。
将药物纳米晶自稳定Pickering乳液(NSSPE)应用于中药复方,研究NSSPE对复方中不同溶解性和渗透性成分口服吸收的影响,很有意义。本研究以通脉方主要药效成分葛根素、阿魏酸、丹酚酸B和丹参酮ⅡA组合物的纳米晶为固体微粒稳定剂,以川芎油∶Labrafil M 1944 CS为油相,采用高压均质法制备中药复方NSSPE。体外表征结果显示,NSSPE中药效组分纳米晶吸附于川芎油的油滴表面,较纳米晶混悬液和空白乳均具有更好的物理稳定性;NSSPE中葛根素、阿魏酸、丹酚酸B和丹参酮ⅡA在乳滴表面的吸附率分别15.40%±3.19%、15.39%±5.07%、10.97%±3.70%和31.51%±1.60%。Caco-2细胞模型研究显示,固体药效成分制备成纳米晶混悬液后,葛根素和丹参酮ⅡA的细胞摄取与转运都显著提高;纳米晶混悬液与川芎油制备成NSSPE后,阿魏酸、藁本内酯和丹参酮ⅡA的Caco-2细胞摄取量较纳米晶混悬液/油的物理混合物又进一步提高,藁本内酯和丹参酮ⅡA的跨膜转运也极显著提高。细胞转运机制主要是被动扩散和小窝蛋白介导的内吞,NSSPE的微观结构是影响其吸收机制的主要因素。本研究表明,NSSPE可应用于成分复杂、性质差异大的中药复方,药物纳米晶吸附于微米粒径的油滴表面形成“微”“纳”协同的微观结构,不仅能提高乳液的物理稳定性,还能促进各成分的细胞摄取和转运,有希望成为有潜力的中药复方口服新剂型。
百两金Ardisia crispa(Thunb.)A.DC.为传统苗药药材,在治疗咽喉痛、扁桃腺炎、肾炎水肿及跌打风湿等方面具有显著疗效。大叶百两金Ardisia crispa var.amplifolia和细柄百两金Ardisia crispa var.dielsii是百两金的变种,两者在物种进化关系及分类鉴定方面存在争议。本研究利用Illumina平台测序获取两者叶绿体全基因组序列,对其进行组装、注释和特征分析,采用生物信息学方法比较叶绿体基因组间的结构特征与变异程度,同时下载报春花科Primulaceae和紫金牛科Myrsinaceae植物叶绿体全基因组序列信息构建系统发育树解析其系统发育关系。结果表明大叶百两金和细柄百两金完整叶绿体基因组序列全长156 749 bp、156 748 bp,均注释到基因132个,其中蛋白质编码基因87个;密码子偏好性A/U大于G/C;基因组比较分析中两者在rps15和rpoB基因编码区存在差异,为两者分子鉴定提供新的位点;与同属物种相比较叶绿体基因组中ycf1、ycf2、rpoC1、ycf3、petD及rpl16等基因编码区存在差异,可作该属植物的鉴别位点;系统发育结果中,大叶百两金和细柄百两金聚为一束,支持率为100%,表明两者亲缘关系较近。本研究对大叶百两金与细柄百两金叶绿体基因组结构和系统发育关系进行解析,为两者分子鉴别、遗传变异、育种以及系统发育分析等提供重要的理论依据。