白念珠菌是临床真菌感染中最为常见的条件致病真菌, 生物膜的形成是白念珠菌侵袭致病和播散传染的重要因素。形成生物膜的白念珠菌对临床抗真菌药物的敏感性降低, 造成抗真菌治疗病程长、易复发和耐药性的产生, 因此低毒高效的具有生物膜抑制活性的抗真菌药物的研发十分重要。植物来源的天然产物因其多样化的化学结构和生物活性, 一直是药物研发的重要资源。本文总结了近5年报道的具有抗白念珠菌生物膜活性的植物来源的天然产物, 主要包括生物碱、多酚、萜类、醌类、有机酸和精油等, 为新型抗白念珠菌药物的开发提供参考。

焦虑障碍是一种具有高患病率、慢性迁延性和高共病率特征的精神疾病。现有临床治疗药物存在明显的局限性, 如选择性5-羟色胺重摄取抑制剂、5-羟色胺-去甲肾上腺素重摄取抑制剂和苯二氮卓类药物等, 常受到疗效有限、不良反应明显和耐药性等问题的限制。近年来, sigma-1受体作为新型抗焦虑药物靶点备受关注, 其配体已在多种动物模型中展现出明显的缓解焦虑样行为的作用, 为突破当前治疗困境带来了新的希望。然而, 目前尚无以sigma-1受体为靶点的抗焦虑药物进入临床研究阶段。基于此, 本文综述了近年来sigma-1受体在焦虑疾病中的分子作用机制, 并对其配体在动物模型中的药效学研究进展进行总结, 以期为基于sigma-1受体的新型抗焦虑药物研发提供理论依据和研究思路。

目前, 心力衰竭(heart failure, HF) 已成为全球公共卫生领域的重大挑战, 其发病率与死亡率呈不断上升趋势。尽管现代医学采用的临床干预手段取得了一定成效, 但仍存在不良反应增多、病情反复及远期死亡率并未降低的情况。在此背景下, 基于传统中医药理论构建的药对配伍策略, 通过多成分协同与多靶点网络调控机制, 在心衰防治方面发挥重要作用。本文通过梳理近年来中药药对治疗心衰的相关文献, 整理了研究较为深入且具有代表性的药对16对, 它们主要通过减轻炎症反应、抗氧化应激、抗细胞凋亡、抑制心脏纤维化、调节神经内分泌紊乱及心肌微循环, 最终抑制或治疗心衰, 从而为临床制定个体化用药方案及新药开发拓展思路。

中医药数据库为深化中医理论、探索病证关系、揭示配伍机制、开发组分中药提供了重要平台支撑。中医药数据库构建以“证候-方剂-草药-成分-靶点-通路-功能-疾病”的关系网络为核心, 并随着计算机科学和高通量实验技术的发展, 进一步开始呈现与人工智能、多模态多组学技术有机结合的发展趋势。本研究介绍了目前中医药数据库的研究现状, 从数据的收集、分析及可视化三个方面综述了相关中医药数据库的研究进展, 系统地讨论了构建数据库的策略和方法。此外, 还揭示了当前中医药数据库所面临的挑战, 并提出了未来可探索的方向和潜在的发展趋势, 旨在为后续相关数据库的构建提供技术支撑, 并为相关领域的研究提供思路。

代谢功能障碍相关的脂肪性肝炎(metabolic dysfunction-associated steatohepatitis, MASH) 已被确认为导致晚期肝病发病率上升的主要因素之一, 其患病率逐年增加。目前, 主要的治疗策略集中在生活方式的改变, 包括饮食调整和身体锻炼, 其中减轻体重尤为关键。同时, 药物治疗的研发也取得了显著进展, 特别是甲状腺激素受体β (thyroid hormone receptor β, THR-β) 激动剂, 因其在MASH治疗中的潜在疗效而受到广泛关注。本综述旨在深入探讨THR-β激动剂在MASH治疗中的最新研究进展, 以期为临床实践提供新的治疗策略和视角。

本文综述了近五年来报道的具有抗铜绿假单胞菌活性的海洋微生物产生的次级代谢产物, 按照化合物的结构进行分类, 分为大环内酯类、醌类、多肽类、生物碱类、萜类以及其他结构, 主要介绍了这些代谢产物的化学结构和抗菌活性, 为具有抗菌活性的海洋微生物来源的天然产物进一步研究和开发提供参考。

指纹图谱是指某些成分复杂的物质或组分, 在经过适当的处理和分析后, 得到的能标识其本质特征的色谱图、光谱图或其他可视化的数据。生物样品内效应组分分析具有生物介质组分复杂、理化性质差异大、效应成分代谢反应复杂种类多、原型与代谢产物微量痕量为主等特点, 因此准确快速测定其中效应组分有重要意义。本文综述了近年来各指纹图谱技术在生物样品分析中的应用研究进展, 并分析各种方法的优劣, 展望了今后指纹图谱技术在生物样品中效应组分分析的发展趋势, 为指纹图谱技术在生物样品检测领域的发展和应用提供参考。

本文讨论了疫苗效价测定的体外方法替代传统体内方法的可行性与挑战及相关考量。疫苗效价体内测定方法长期用于疫苗质量控制, 但存在变异性大、实验效率低、涉及动物伦理等问题。随着3R原则和科技进步, 体外方法逐渐成为替代体内方法的趋势。体外测定方法在评估疫苗生产一致性、监测生产过程中变化方面具有优势, 且可更高效地评估疫苗的稳定性和免疫效果。尽管体外和体内方法的机制不同, 二者的质量控制属性也不完全一致, 体外方法仍然能够有效在保证产品质量特别是效价一致的前提下替代体内效价测定, 尤其是在疫苗开发早期进行质量控制时。常见的体外替代方法包括免疫测定、理化分析和分子生物学测定, 选择合适的方法需根据疫苗类型和作用机制。此外, 文章强调应在疫苗开发初期建立体外方法, 并确保其稳定性、重现性和与临床效果的相关性。尽管体外替代方法的推广面临挑战, 但随着技术进步, 未来有望进一步替代动物实验, 提高疫苗质量控制的效率和伦理性。

相较于正常细胞, 肿瘤细胞展现出独特的代谢特征。针对肿瘤能量代谢特点制定的治疗策略, 旨在从根源上阻断肿瘤细胞的能量与物质供给, 重塑免疫抑制微环境, 为免疫细胞浸润并发挥功能创造有利条件。近年来, 源自中草药的天然囊泡凭借其独特的代谢调控能力与靶向特性, 在肿瘤研究领域备受瞩目。这类囊泡不仅能够精准递送多种活性分子成分, 还可通过重新编程肿瘤微环境中细胞的代谢过程, 打破免疫抑制的僵局, 进而增强抗肿瘤免疫应答。本文综述了中草药囊泡在代谢调控方面的作用机制, 及其增效免疫治疗的最新研究进展, 并对其临床转化潜力与未来研究方向进行展望。

雷公藤甲素(triptolide, TP) 是一种来源于雷公藤的活性成分, 具有显著的抗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA) 作用。研究表明, TP通过抑制多种炎症因子(如TNF-α、IL-1β、IL-6等) 的表达, 发挥强效的抗炎和抗氧化作用。在免疫调节方面, TP可以通过调节T细胞和中性粒细胞等免疫细胞的活性, 抑制炎症进展并减少组织损伤。此外, TP还能够通过调节NF-κB、JAK/STAT和MAPK等多条信号通路, 抑制RA中关节滑膜细胞的增殖与侵袭, 减轻关节损伤。然而, 雷公藤甲素也存在水溶性低、有毒性等缺点, 这些问题亟待解决。近年来, 随着纳米技术的发展, TP纳米载药系统的研究逐渐兴起。聚合物纳米粒、外泌体、无机纳米载药系统等新型纳米载体的开发, 大大改善了雷公藤甲素的治疗效果。例如, 对包裹雷公藤甲素的纳米材料表面进行修饰, 可以增强其在RA炎症部位的靶向释放能力, 实现精准递送。同时, 纳米载药系统还能够延长TP的体内循环时间, 减少毒性反应, 有效改善RA的治疗效果。综上所述, TP及其纳米载药系统在RA治疗中的应用前景广阔, 未来研究应继续探索其机制和临床应用, 为类风湿性关节炎的治疗提供新的思路。

中药汤剂在煎煮过程中其成分不仅发生化学键的相互结合还产生非共价键间的相互作用。近年来, 研究发现在中药汤剂中存在由非共价键连接的聚集体, 统称为中药超分子(supramolecules of traditional Chinese medicine, STCM)。本文对STCM相关文献进行梳理, 从单体成分、单味药、药对、复方4个维度, 围绕STCM的研究方法、形成机制和研究价值3个方面进行综述, 以期为后续STCM的研究提供参考和借鉴。由于中药成分复杂多样, 复方、药对和单味药煎煮液中的STCM形成机制研究尚不完善, 这也是未来STCM研究的一个重点和难点。自组装超分子化学的视角为研究中药药效物质基础提供了新的思路, 将中药领域研究推向了一个新的高度。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL) 因其能选择性诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞影响较小, 在癌症治疗领域展现出巨大潜力。目前, 以TRAIL为主开发的癌症疗法在临床前试验中显示出较好的治疗效果, 但由于其具有稳定性差、靶向性不足、体内半衰期短、生物利用度低等缺陷, 在临床应用中治疗效果较差。近年来, 以脂质体(liposomes, LPs)、纳米颗粒(nanoparticles, NPs)、胶束(micelles, Mcs) 等为代表的纳米载体, 在药物递送领域被广泛应用。将纳米载体与TRAIL结合, 能够在一定程度上克服以上问题并增强其抗肿瘤作用。本文综述了TRAIL与LPs、NPs、Mcs在联合治疗癌症领域的最新研究进展, 探讨了这3种纳米载体在提高TRAIL的稳定性、靶向性和生物利用度等方面的作用机制, 以及该联合疗法在动物水平和临床水平的治疗进展, 旨在为TRAIL的癌症疗法开发和临床应用提供一定的参考。

随着精准医学医疗理念的提出, 医药治疗正在从“一刀切”转向个性化。3D打印作为一种新兴制剂技术, 可极大提升制剂的复杂度与灵活性, 解决传统工艺的诸多问题, 实现个性化的药物治疗。近年来, 随着3D打印技术的快速发展, 已有多种3D打印技术用于口服固体制剂的开发。鉴于3D打印技术种类及特性的区别, 需要根据打印技术的应用特点选择合适的打印材料, 材料的选择对于口服固体制剂的个性化成型与精准释放均可产生重要影响。本文综述了适用于口服固体制剂3D打印的熔融沉积成型技术、半固体挤出技术、热熔挤出沉积技术, 以及黏结剂喷射技术的原理与特点, 并详细探讨了常用3D打印制剂技术对打印材料的选择与应用, 旨在为制备不同原理3D打印口服固体制剂的材料选择提供指导。

机理模型通过数学方程描述细胞代谢行为, 是优化和预测生物过程的重要理论工具, 本研究基于Monod生长代谢模型, 构建了曲妥珠单抗生物类似药的细胞培养机理模型。针对微分方程参数拟合复杂度高且容易陷入局部最优的问题, 通过引入粒子群优化算法(particle swarm optimization, PSO)、灰狼优化算法(grey wolf optimizer, GWO) 和差分进化算法(differential evolution, DE) 对模型参数拟合。结果表明, GWO在全局搜索能力和拟合精度方面表现最佳, 在处理多参数拟合问题时具有更高的稳定性和适应性。进一步对GWO算法的位置更新与速度更新方法进行改进, 改进的灰狼算法(improved grey wolf optimizer, IGWO) 显著提升了模型的预测能力, 能够精准预测细胞密度、代谢物浓度及抗体滴度。本研究为提高生物药物生产效率、降低开发成本及优化细胞培养工艺提供了重要理论支持。

质粒介导的黏菌素耐药基因mcr-1广泛传播, 导致黏菌素耐药性在全世界蔓延, 严重威胁全球抗感染治疗的最后防线。本研究通过评价芳樟醇联合黏菌素对mcr-1阳性大肠杆菌(Escherichia coli, E. coli) 耐药性的逆转效果及相关机制, 以期提出应对黏菌素耐药性的用药组合。研究采用微量棋盘稀释法、时间-杀菌曲线、生物被膜检测等方法评价了芳樟醇和黏菌素的体外联合抗菌效果; 进一步通过检测细菌内外膜通透性、膜电位(ΔΨ)、呼吸链脱氢酶活性(dehydrogenase, DHA)、质子梯度(ΔpH)、ATP、mcr-1的表达量揭示其协同抗菌的作用机制; 最后采用大蜡螟幼虫感染模型和小鼠急性腹膜炎感染模型评价芳樟醇与黏菌素在体内联合治疗的效果。结果显示, 芳樟醇联合黏菌素对mcr-1阳性E. coli在体内外均具协同抗菌效果。机制研究表明, 芳樟醇可直接损伤细菌外膜结构, 降低ΔΨ并增加内膜通透性; 同时芳樟醇通过抑制DHA活性, 干扰ΔpH的建立, 导致ATP合成受阻; 此外芳樟醇还能下调mcr-1基因表达, 抑制耐药菌外膜脂质A的修饰。这些效应增强了黏菌素的穿透能力, 引发膜结构崩解与能量代谢崩溃, 最终实现协同抗菌作用。在体内感染模型中, 芳樟醇与黏菌素联合治疗可显著提高动物感染模型的存活率。综上, 芳樟醇与黏菌素联用可恢复mcr-1阳性E. coli对黏菌素的敏感性, 发挥协同抗菌功效, 为临床应对黏菌素耐药难题提供理论依据和潜在治疗策略。本研究所涉及的动物实验操作流程均经湘南学院实验动物福利伦理审查委员会的审查与批准(批准号: 2023DWLL029)。

神经性疾病、心血管疾病与肺部疾病一直是人类健康的主要威胁, 如何直观、高效、快速地筛选出具有治疗效果的药物是当下生物医学领域亟需攻克的关键科学问题。本研究针对3类疾病的病理特征, 克隆了神经生长因子、血管再生修复相关因子与肺炎相关因子等关键基因启动子并连接用于定量的报告基因。最终构建了基于干细胞分化体系的分子靶向药物筛选模型, 通过应用已知的通路激活剂对该模型进行功能验证。此模型不仅具备化合物药效预测的普适性特征, 且可针对中药及复方成分复杂的特性, 实现时效关系与量效关系的动态解析, 有效揭示其药效物质基础, 为后续临床用药的质量控制提供重要技术支撑。在保持传统筛选方法优势的同时, 突破了现有技术的局限性。最后, 本研究讨论了此药物筛选模型的技术特点, 并对其在药物研发领域的应用前景进行了前瞻性探讨。本研究所有动物福利和实验过程获得西南交通大学医学伦理委员会批准[批准编号: SWJTU-2403-NSFC(026)]。

探讨隔药饼灸预处理是否能减轻阿司匹林对胃黏膜的损伤, 并揭示其潜在机制。Sprague-Dawley大鼠(雌雄各半) 随机分为空白对照组、模型组、预处理穴位组和预处理对照点组, 每组20只。本实验获得湖南斯莱克景达实验动物有限公司实验动物福利伦理委员会批准(批准号: IACUC-SJA18038)。实验第1~8天, 空白对照组和模型组大鼠每天捆绑处理30 min, 预处理穴位组和预处理对照点组大鼠每天捆绑后施隔药饼灸30 min。分别于第2、4、6、8天捆绑结束后, 各组大鼠禁食不禁水24 h, 然后按150 mg·kg^-1阿司匹林灌胃, 灌胃容积为每100 g体重1 mL注入模型组、预处理穴位组和预处理对照点组大鼠胃内, 按每100 g体重1 mL的剂量用灌胃针将生理盐水注入空白对照组大鼠胃内。观察胃黏膜损伤指数; 苏木精-伊红染色法观察胃黏膜组织形态学; 酶联免疫吸附实验检测血清、胃黏膜组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD) 和丙二醛(malondialdehyde, MDA) 含量; 定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, RT-qPCR) 和蛋白质印迹(Western blot) 检测胃黏膜组织中凯尔希样ECH相关蛋白1 (Kelch-like ECH-associated protein 1, Keap1)、核因子E2相关因子2 (nuclear factor-erythroid 2-related factor 2, Nrf2)、血红素氧合酶1 (heme oxygenase-1, HO-1)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase, GST)、NAD(P)H醌氧化还原酶1 [NAD(P)H: quinone oxidoreductase 1, NQO1] 的水平。结果显示, 与空白对照组比较, 模型组大鼠的行为状态、情绪反应、皮肤毛发、饮食状态和大便状态评分都增加(P < 0.05), 胃黏膜损伤指数显著升高(P < 0.05), SOD显著降低(P < 0.05), 而MDA显著升高(P < 0.05), 胃黏膜组织中Keap1的表达显著上调(P < 0.05), 而Nrf2、HO-1、CAT、GST、NQO1的表达显著下调(P < 0.05); 与模型组相比, 预处理穴位组大鼠的情绪反应评分减少(P < 0.05), 胃黏膜损伤指数显著降低(P < 0.05), 预处理对照点组胃黏膜损伤有减轻趋势, 但无统计学差异(P > 0.05), 预处理穴位组和预处理对照点组SOD显著升高(P < 0.05), 而MDA显著降低(P < 0.05), Keap1的水平显著下降(P < 0.05), 而Nrf2、HO-1、CAT、GST、NQO1的表达显著上调(P < 0.05); 与预处理对照点组比较, 预处理穴位组胃黏膜损伤指数明显降低(P < 0.05), SOD显著升高(P < 0.05), 而MDA显著降低(P < 0.05), Keap1明显下降(P < 0.05) 和Nrf2、HO-1、CAT、GST、NQO1显著上升(P < 0.05)。以上结果表明, 隔药饼灸预处理能激活Nrf2/抗氧化反应元件/HO-1信号通路, 增强胃黏膜细胞的抗氧化应激能力, 减轻阿司匹林对胃黏膜的损伤。

钩藤玄参颗粒作为山东中医药大学附属医院院内制剂在降血压方面疗效显著但作用机制尚不十分明确。研究采用高效液相色谱质谱联用(high performance liquid chromatography-mass spectrometry, HPLC-MS) 技术对受试者的血清样本进行非靶向代谢组学分析并通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP) 筛选钩藤玄参颗粒活性成分, Gene Cards、OMIM等数据库对正常高值血压相关的潜在靶点进行预测分析以探讨钩藤玄参颗粒对正常高值血压(prehypertension, PHT) 的降压作用。临床招募符合诊断标准的正常高值血压患者20例为正常高值血压组(P组), 另招募20例健康志愿者为正常组(C组)。正常高值血压组服用钩藤玄参颗粒, 为钩藤玄参颗粒给药组(GT组)。本实验获得山东中医药大学附属医院伦理委员会批准, 并得到所有参与者的知情同意。伦理审查批件号: (2022) 伦审No. (036)-KY。对所有受试者进行血脂四项检测及血压测量。正常高值血压组分别在给药钩藤玄参颗粒前后采血一次, 正常组入组时采血一次。采用HPLC/MS对所有受试者血清样本进行分析, 实验结果发现, 钩藤玄参颗粒给药后, 正常高值血压患者血压明显下降, 血脂四项发生改变; 代谢组学结果显示嘌呤代谢、精氨酸生物合成和鞘脂代谢在钩藤玄参颗粒给药后发生了显著改变; 网络药理学结果提示钩藤玄参颗粒主要通过作用于SIRT1、STAT3、AKT1等靶点发挥降压作用。研究初步分析了健康人群、正常高值血压患者与钩藤玄参颗粒治疗组人群的代谢差异, 为正常高值血压的未病防治提供了参考价值。

本研究以FDA批准药物卡托普利为基本结构, 以反式阿魏酸为原料, 以全合成的方式合成了全新未经报道的17个吡咯烷衍生物5a~5p、6a, 并与临床分离携带新德里金属-β-内酰胺酶(New Delhi metal beta lactamase, NDM-1) 基因的肺炎克雷伯菌及携带肺炎克雷伯菌碳青酶烯酶-2 (Klebsiella pneumoniae carbacyticase-2, KPC-2) 基因的革兰阴性大肠杆菌测试了体外抗菌活性。结果显示, 5j可使美罗培南(meropenem, MEM) 对含临床分离携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC) 降低至32 μg·mL^-1, 优于阳性药卡托普利; 5l、5m和5o可使MEM对含KPC-2的革兰阴性大肠杆菌的MIC降低至2 μg·mL^-1, 优于阳性药卡托普利; 部分吡咯烷衍生物分子对接结果提示了吡咯烷衍生物与NDM-1及KPC-2可能的结合方式。

本研究设计合成了一系列含丙烯酰胺共价弹头等基团的全新双芳基酰胺类衍生物, 采用CCK-8法评价了目标物对抗人类β-冠状病毒HCoV-OC43的活性。其中, 含2-氟丙烯酰胺共价弹头的化合物6b具有良好活性, EC₅₀值为2.52 μmol·L^-1, 治疗指数(selectivity index, SI) 值为29。分子对接结果显示, 6b可通过共价键合作用抑制宿主跨膜丝氨酸蛋白酶2 (transmembrane serine protease 2, TMPRSS2) 和病毒3-胰凝乳蛋白酶样蛋白酶(3-chymotrypsin like protease, 3CL^pro) 活性而发挥抗冠状病毒作用。研究结果拓展了此类化合物的结构类型及其抗冠状病毒用途, 为发展一类全新抗冠状病毒共价药物提供了理想先导物。

运用硅胶、MCI、ODS和Sephadex LH-20等柱色谱以及制备型HPLC等各种现代分离技术, 从黑风藤(Fissistigma polyanthum) 中分离纯化得到12个化合物。利用波谱学方法确定化合物结构, 分别为fissistigmaoid A (1)、(10S)-11-hydroxy-β-cyperone (2)、11-hydroxy-8-oxo-β-cyperone (3)、(4S, 5E, 10R)-7-oxo-tri-nor-eudesm-5-en-4β-ol (4)、oxyphyllanene B (5)、teuhetone (6)、teuhetenone A (7)、trans-4, 5-dihydroxycorocalane (8)、4-hydroxy-4, 7-dimethyl-1-tetralone (9)、epicatechin (10)、dihydroquercetin (11)、piperolactam C (12)。其中化合物1是一个新的降桉叶烷型倍半萜, 化合物1~9为首次从黑风藤中分离得到。化合物8和12在LPS诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞炎症模型上显示NO抑制活性, 其IC₅₀值分别为30.5 ± 1.5、10.5 ± 1.0 μmol·L^-1。

本研究旨在从虻虫中筛选并鉴定具有潜在生物活性的肽类分子, 解析其结构特征与功能属性, 为新型天然肽类药物的研发提供理论基础。首先使用磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline, PBS) 提取虻虫中生物活性肽, 采用冷乙醇沉淀蛋白质并进行固相萃取纯化(solid-phase extraction, SPE)。经LC-MS/MS获得原始质谱数据后, 利用PEAKS Studio软件进行肽段识别和序列分析。随后使用Peptide Ranker预测肽段活性潜力, 进一步结合多种生物信息学工具, 对肽段功能特性进行分析, 包括活性位点、水溶性、稳定性、毒性及肠道吸收能力等指标。最终, 结合肽段结构信息开展分子对接分析。本研究共鉴定出10 378条虻虫肽段, 长度集中于6~26个氨基酸, 大部分肽段相对分子质量在1 500 Da以下, 低于2 500 Da的肽段占97.49%。通过Peptide Ranker筛选出95条评分≥ 0.80的候选活性肽段, 进一步借助BIOPEP-UWM确定了59条具有神经调节作用关键残基的肽段。生物信息学预测显示, 这59条肽段中29条水溶性良好、22条稳定性较高、43条具备较好的肠道吸收潜力, 且均无毒, 为后续功能验证及活性肽开发提供了理论依据。在此基础上, Peptide Ranker评分最高的多肽FPPRDF与二肽基肽酶Ⅲ (dipeptidyl peptidase Ⅲ, DPP Ⅲ) 进行分子对接时稳定结合, 提示其可能具有神经调节与抗肿瘤作用。本研究构建了一套系统、高效的活性肽筛选与功能预测流程, 能够从天然资源中快速识别具有药用潜力的生物活性肽。该策略为后续的功能验证、作用机制解析及新型肽类药物开发提供了技术支撑。

建立高效液相串联电雾式检测器法(HPLC-CAD) 测定川楝子中川楝素含量的方法。利用C18固相萃取小柱对样本进行除杂和净化制备供试品溶液: 将川楝子甲醇提取物溶解于5 mL 30%甲醇上柱, 6 mL 30%甲醇、6 mL甲醇分别洗脱, 收集甲醇洗脱液制备供试品溶液; 供试品溶液采用Agilent ZOBAX SB C₁₈ (4.6 mm × 250 mm, 5 μm) 色谱柱进行分离, 流动相为乙腈-水(33∶67), 柱温30 ℃。以CAD为检测器, 雾化气为氮气, 雾化气压力为55 psi, 雾化室温度35 ℃。结果显示, HPLC-CAD法测定川楝子中川楝素, 其色谱表征清晰、干扰较小、色谱峰分离度好; 方法学考察结果表明, 该方法灵敏、准确、稳定可靠, 定量限为24.0 ng, 精密度、重复性、稳定性RSD均小于5.0%, 高、中、低三个浓度的回收率为95.9%~99.7%; 利用该方法测定10批次川楝子中川楝素的含量并利用Pearson相关性分析, 将该结果与LC-MS法测定结果比较, 表明两种检测方法结果相近且总体呈强正相关(相关系数为0.995 0, P < 0.001)。本研究建立了HPLC-CAD结合固相萃取测定川楝子中川楝素含量的方法, 该方法简便、可靠, 为川楝子质量控制与质量评价提供测定方法和参考依据。

本研究旨在初探大黄-黄连配方颗粒不同冲泡方式, 常温冲泡(formula granule-cold mixing, FG-CM) 与加热冲泡(formula granule-hot mix and reheating, FG-HMR) 对“苦寒”偏性的影响。通过表征两种冲泡方式下汤液的形貌学、分子热力学、谱学等差异及其与小鼠腹泻表型的关系, 以分析不同冲泡方式对大黄-黄连配方颗粒临床疗效的潜在影响。研究发现, 在宏观观察下FG-CM体系中存在大量絮状物, 而FG-HMR体系则呈均一浑浊态。通过浊度测定和扫描电子显微镜, 发现FG-HMR的粒度更均一且尺度更小。等温滴定量热(isothermal titration calorimetry, ITC) 实验发现大黄-黄连配方颗粒间相互作用明显, 紫外可见光谱(ultraviolet-visible spectrum, UV-vis)、红外光谱(infrared spectrum, IR) 与高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC) 表征结果提示FG-CM与FG-HMR的成分种类与含量基本保持一致, 表明冲泡方式并未改变化学成分组成但存在分子互作。通过小鼠腹泻模型发现, 相比于FG-CM组, FG-HMR组的“苦寒”偏性更为缓和, 可更好地维持小鼠的正常肠道稳态与肠道组织结构, 降低小鼠的软便率, 减轻小鼠的腹泻不良反应。本研究从中药配方颗粒冲泡方式对药效分子互作影响物质基础与腹泻表型的角度出发, 以期为含大黄-黄连配方颗粒的临床服用提供参考。动物实验经北京中医药大学伦理委员会批准(批准号: BUCM2024-093-M)。

病程相关蛋白1 (pathogenesis-related proteins 1, PR1) 在植物抵御胁迫及生长发育中有着重要的作用。本研究通过生物信息学手段系统分析鉴定了8个白木香AsPR1基因, 预测其编码蛋白的分子质量在12.95~43.41 kD之间。蛋白的二维结构及保守基序分析表明, 8个AsPR1蛋白序列的相似度为51.38%, 都具有保守的CAP-PR1 (cysteine-rich secretory proteins, CAP) 结构域。顺式作用元件分析表明, AsPR1基因家族具有响应植物激素、非生物胁迫和生物进程相关的顺式作用元件。染色体定位显示AsPR1基因分布在1、3、4、8号染色体上。根据转录组分析数据本研究从白木香中克隆得到AsPR1-4序列, 全长为516 bp, 编码171个氨基酸; 成功进行AsPR1-4-GST融合蛋白表达。亚细胞定位实验结果表明AsPR1-4定位于细胞质和叶绿体中。实时荧光定量PCR结果表明, AsPR1-4在茎中表达量最高, 其次是根, 叶中最少; 茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA) 和水杨酸(salicylic acid, SA) 诱导下AsPR1-4表达量均有不同程度的增加; 而AsPR1-4在盐、低温、重金属和干旱四种非生物胁迫下表达量均显著下降。本研究为进一步揭示PR1蛋白在白木香防御反应中的功能及其在沉香生产中的应用奠定基础。