中华中医药学刊

优化溃结方通过抑制PI3K/AKT信号通路治疗溃疡性结肠炎作用及机制研究

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舒郁平 ¹^,² , 余丹琪 ¹ , 荣越 ¹ , 唐丽利 ¹ , 孟凡艳 ³ , 陶弘武 ⁴ , 李娜 ⁵ , 柳越冬 ⁶

中华中医药学刊 | 国家项目点击 2025,43(7): 98-103

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中华中医药学刊 |国家项目点击 2025 , 43 (7) : 98 -103

优化溃结方通过抑制PI3K/AKT信号通路治疗溃疡性结肠炎作用及机制研究

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舒郁平¹^,², 余丹琪¹, 荣越¹, 唐丽利¹, 孟凡艳³, 陶弘武⁴, 李娜⁵, 柳越冬⁶

作者信息

^1.辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110847

^2.福建中医药大学附属人民医院，福建福州 350000

^3.中国医科大学附属第一医院，辽宁沈阳 110001

^4.辽宁中医药大学附属第二医院，辽宁沈阳 110034

^5.咸阳市中心医院，陕西咸阳 712000

^6.辽宁中医药大学附属第三医院，辽宁沈阳 110003

通讯作者:

柳越冬（1970-），女，辽宁沈阳人，教授、主任医师，博士研究生导师，博士，研究方向：中医药防治炎症性肠病、肛肠、胃肠疾病。E-mail：13998359002@126.com。

李娜（1978-），女，河北秦皇岛人，副主任医师，硕士研究生导师，博士，研究方向：中医防治炎症性肠病等肛肠科疾病。E-mail：newlife0517@qq.com。

作者简介:

舒郁平（1990-），男，湖南怀化人，主治医师，博士在读，研究方向：中医药防治炎症性肠病、肛肠、胃肠疾病。

Effect and Mechanism of Youhua Kuijie Formula（优化溃结方）on Ulcerative Colitis by PI3K/AKt Signaling Pathway

Yuping SHU¹^,², Danqi YU¹, Yue RONG¹, Lili TANG¹, Fanyan MENG³, Hongwu TAO⁴, Na LI⁵, Yuedong LIU⁶

Affiliations

^1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110847，Liaoning，China

^2.The Affiliated People's Hospital of Fujian University of Chinese Medicine，Fuzhou 350000，Fujian，China

^3.The First Affiliated Hospital of China Medical University，Shenyang 110001，Liaoning，China

^4.The Second Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Shenyang110034，Liaoning，China

^5.Xianyang Central Hospital，Xianyang 712000，Shaanxi，China

^6.The Third Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Shenyang 110003，Liaoning，China

出版时间: 2025-07-10 doi: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.07.022

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摘要

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目的

观察优化溃结方对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）大鼠结肠组织磷酸磷脂酰肌醇-3羟基激酶和丝苏氨酸蛋白激酶（phosphatidylinositol 3-kinase and serthreonine protein kinase，PI3K/AKT）信号通路的影响。

方法

应用三硝基苯磺酸（2，4，6-trinitrobenzene sulfonic acid，TNBS）构建大鼠UC模型，随机分为空白组、模型组、优化溃结方组、柳氮磺吡啶（salicylazosulfapyridine，SASP）组、优化溃结方＋柳氮磺胺砒啶组，优化溃结方给药浓度为0.738 g/mL，SASP给药浓度为0.024 g/mL。空白组和模型组每日以蒸馏水3 mL/次，每日2次灌胃，其余各组均以相应药物灌胃早晚各1次。造模成功后连续给药21 d，采用苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）染色切片观察各组大鼠结肠组织形态，酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）方法检测各组大鼠结肠血清中白细胞介素（Interleukin，IL）-1β、IL-10的表达水平，免疫组化法检测结肠组织中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平。蛋白质印迹（Western blot，WB）检测结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。

结果

与空白组相比，模型组结肠HE染色切片中结肠黏膜结构严重受损，排列紊乱，隐窝细胞丢失，黏膜肌层遍布炎症细胞，PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达增加（P<0.05），血清IL-1β含量增加（P<0.05），IL-10含量减少（P<0.05）。与模型组相比，优化溃结方组、SASP组、优化溃结方＋SASP组干预后结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白（P<0.05），血清IL-1β含量减少（P<0.05），IL-10含量增加（P<0.05），其中优化溃结方＋SASP组效果最佳。

结论

优化溃结方可能通过抑制PI3K/AKT信号通路，减少IL-1β分泌，增加IL-10表达，从而改善溃疡性结肠炎大鼠结肠损伤，重塑结肠结构，减轻炎症反应而发挥保护作用。

关键词

优化溃结方 / 溃疡性结肠炎 / PI3K/AKT信号通路 / IL-1β / IL-10

Abstract

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Objective

To observe the effect of Youhua Kuijie Formula（优化溃结方）on phosphatidylinositol 3-kinase and serthreonine protein kinase（PI3K/AKT）signaling pathway in colon tissues of rats with ulcerative colitis（UC）.

Method

A rat UC model was constructed by applying trinitrobenzene sulfonic acid（2，4，6-trinitrobenzene sulfonic acid，TNBS），and was randomly divided into a blank group，a model group，an Youhua Kuijie Formula group，a salicylazosulfapyridine（SASP）group，and an Youhua Kuijie Formula＋SASP group. The concentration of the Youhua Kuijie Formula was 0.738 g/mL，and the concentration of SASPwas 0.024 g/mL. Except for the blank group and the model group，which were gavaged twice daily with 3 mL of distilled water，the other groups were gavaged with the corresponding drugs once in the morning and once in the evening. After successful modeling，the drugs were administered continuously for 21 days，and the morphology of the colon tissue of rats in each group was observed by hematoxylin-eosin staining（HE），the expression levels of IL-1βand IL-10 in the colon serum of rats in each group were detected by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay（ELISA），and the protein expression levels of PI3K，p-PI3K，AKT and p-AKT were detected by immunohistochemistry，and the expression levels of PI3K，p-PI3K，p-PI3K，AKT and p-PI3KT were detected by western blot（WB）in the colon.

Result

Compared with those in the blank group，the colonic HE stained sections in the model group showed severe damage to the colonic mucosal structure，disordered arrangement，loss of crypt cells，inflammatory cells all over the mucosal muscularis layer，increased protein expressions of PI3K，p-PI3K，AKT and p-AKT（P<0.05），increased serum IL-1βcontent（P<0.05），and decreased IL-10 content（P<0.05）. Compared with those in the model group，PI3K，p-PI3K，AKT and p-AKT proteins and serum IL-1βcontents decreased（P<0.05）and IL-10 contents increased（P<0.05）in the Youhua Kuijie Formula group，the SASP group and Youhua Kuijie Formula＋SASP group，with the best effect in the Youhua Kuijie Formula＋SASPgroup.

Conclusion

Youhua Kuijie Formula may play a protective role by inhibiting PI3K/AKT signaling pathway，decreasing IL-1βsecretion and increasing IL-10 expression，which may improve the colonic injury，remodel the colonic structure and attenuate the inflammatory response in rats with ulcerative colitis.

Key words

Youhua Kuijie Formula（优化溃结方） / ulcerative colitis / PI3K/AKT signaling pathway / IL-1β / IL-10

引用本文

舒郁平, 余丹琪, 荣越, 唐丽利, 孟凡艳, 陶弘武, 李娜, 柳越冬. 优化溃结方通过抑制PI3K/AKT信号通路治疗溃疡性结肠炎作用及机制研究. 中华中医药学刊, 2025 , 43 (7) : 98 -103 . DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.07.022

Yuping SHU, Danqi YU, Yue RONG, Lili TANG, Fanyan MENG, Hongwu TAO, Na LI, Yuedong LIU. Effect and Mechanism of Youhua Kuijie Formula（优化溃结方）on Ulcerative Colitis by PI3K/AKt Signaling Pathway[J]. Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine, 2025 , 43 (7) : 98 -103 . DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.07.022

正文

收起

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）属于炎症性肠病中的一种，是以腹泻、便血、腹痛及里急后重感等为临床表现的肠道疾病，病变范围可蔓延至整个结肠，病理特征是肠道黏膜及黏膜下层的持续性炎症，具有较高的癌变率，与结肠癌的发生关系密切^[1-4]。欧美发达国家的发病率较亚洲地区高，而亚洲国家的青壮年发病率呈现增高趋势，发病率为7.6/10万～14.3/10万^[5]。目前临床治疗主要以抗炎和生物免疫制剂治疗，长期使用不良反应大，费用昂贵，停药后易复发成为治疗的难点^[6-7]。因此，对于经济、高效、安全的治疗药物的探索具有重要意义。

中医学并无UC的病名，多将其归属于“肠澼”“痢疾”等范畴，认为发病多与肝脾肾等脏器功能失调相关，气血瘀滞、肠道失司，《景岳全书》《杂病源流犀烛·诸血源流》《医林改错》等也指出UC的发生与“虚、湿、热、瘀”等病理因素相关，现代医学认为与免疫失调、肠道菌群紊乱、炎症反应、遗传等因素相关^[8]。磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/汇丝氨酸/苏氨酸激酶（serthreonine protein kinase，AKT），又名蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）信号通路是一条与炎症、肿瘤进展关系密切的生物学通路，参与了细胞凋亡、存活、炎症等生物进程，大量研究表明PI3K/AKT信号通路与UC的病程进展有着重大关系^[9-11]。优化溃结方是辽宁中医药大学附属第三医院柳越冬教授团队依据多年临床经验基于健脾益气、清热解毒、化瘀通络的治法思路化裁而来，且课题组前期研究显示优化溃结方能够降低UC患者炎症水平，参与细胞免疫调控，调节肠道菌群达到治疗UC的作用^[12-15]，本研究进一步探究优化溃结方调控PI3K/AKT信号通路治疗UC的生物机制。

1　材料与仪器

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1.1　动物

购买自辽宁长生生物技术有限公司雄性健康SD大鼠60只，体质量200～240 g，实验动物许可证号：SYXK（辽）2019-0004，动物实验中心温度、湿度适宜条件下分笼饲养，自由饮食普通饲料和水，定期更换垫料，实验经辽宁中医药大学实验动物伦理委员会批准，审查编号21000042022101。

1.2　药物

优化溃结方（药物组成：黄芪20 g，当归15 g，炒白术15 g，苍术15 g，青黛3 g，败酱草20 g，白头翁15 g，胡黄连10 g，红花10 g），由四川新绿色药业科技发展有限公司生产，辽宁中医药大学附属第三医院药房提供；柳氮磺吡啶肠溶片购自上海信谊天平药业有限公司，国药准字H31020557。

1.3　主要试剂

TNBS（北京偶合科技有限公司，批号：20220705）；白细胞介素（interleukin，IL）-1βELISA试剂盒（上海酶联生物公司，ML037361-Z）；IL-10 ELISA试剂盒（上海酶联生物公司，ML002813-Z）；辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG（北京索莱宝科技有限公司，SE134）；一抗稀释液（北京索莱宝科技有限公司，A1810）；BCA蛋白浓度测定试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司，P0012）；超敏显影液（ECL-WB显影液）（上海天能科技有限公司，180-501）；电泳转移缓冲液（索莱宝，D1060）；通用SP检测试剂盒（北京索莱宝科技有限公司，SP0041）；增强型DAB显色试剂盒（北京索莱宝科技有限公司，DA1016）；β-actin抗体（弗德生物，FD0060）；PI3K（ab191606）、p-PI3K（ab182651）、AKT（10176-1-AP）、p-AKT（ab38449）抗体购自英国abcam公司等。

1.4　主要仪器

石蜡包埋机（德国Leica公司）；恒温水浴箱（常州国华电器公司）；可调微量移液枪（美国Eppendorf公司）；光学显微镜（德国Leica公司）；医用低温离心机（安徽嘉文仪器公司）；恒温干燥箱（力辰科技公司）；WB电泳仪（美国BIO-RAD公司）；WB发光分析仪（上海天能科技公司）；多功能酶标仪（美谷分子仪器公司）等。

2　方法

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2.1　实验动物分组

适应性喂养1周后，采用随机数字表法将健康雄性60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、优化溃结方组、柳氮磺砒啶（salicylazosulfapyridine，SASP）组、优化溃结方＋SASP组共5组，每组12只。

2.2　溃疡性结肠炎模型建立

实验动物适应性喂养1周后，禁食不禁水过夜，腹腔注射异戊巴比妥麻醉大鼠后，截取长约12 cm的静脉输液管石蜡润滑后，自大鼠肛门插入6～8 cm，其中模型组、优化溃结方组、SASP组、优化溃结方＋SASP组将TNBS∶乙醇按1∶2以60 mg/kg缓慢灌入大鼠肠道内，将大鼠斜放45°并轻揉腹部1～2 min，使药液充分混合吸收，待大鼠苏醒后置入鼠笼，自由饮食饮水。空白组上述同样操作，给予等量的生理盐水灌肠^[16]。

2.3　给药并观察

造模成功后，药物干预于造模后第3天开始，各组大鼠灌胃给药21 d。实验所需药物均按照人与大鼠间等效剂量换算^[17]，优化溃结方组灌胃浓度为0.738 g/mL，SASP组灌胃浓度为0.024 g/mL，优化溃结方＋SASP组灌胃浓度优化溃结方为1.476 g/mL，SASP浓度为0.048 g/mL。空白组和模型组每日以蒸馏水3 mL/次，每日2次灌胃，其余各组均以相应药物灌胃早晚各1次，每组灌胃量3 mL。

2.4　标本采集

灌胃过程中每日观察大鼠的一般情况，包括大鼠的精神状态、毛发色泽、饮食及体质量变化、大便性状等。在实验最后一天，于异戊巴比妥麻醉后，沿腹中线剪开大鼠腹部，腹主动脉采血，并分离血清，取上清于-80℃保存备用。颈椎脱臼法处死大鼠取出结肠组织，在流动清水下冲洗干净，截取少段组织至于4%多聚甲醛进行固定，备苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色用，剩余部分放于-80℃冰箱保存。

2.5　免疫组化法检测结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达

将白片备好后进行烤片，脱蜡复水，清洗后进行抗原修复，内源性过氧化物酶阻断，山羊血清封闭，加一抗、二抗，DAB染色达到微黄后终止染色，苏木素复染，脱水封片等步骤后置于显微镜下进行结果判读，DAB显出的阳性表达为棕黄色。

2.6　免疫印迹（Western blot）法检测结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达

采用免疫印迹法测定结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT表达。从-80℃冰箱取出结肠组织，在液氮作用下粉碎匀浆结肠组织，离心抽取上清液，使用BCA测定标准品浓度并绘制标准曲线，计算出样本浓度后，煮蛋白后分装样品备用；跑胶时按照说明书上层胶电压80 V，下层胶电压150 V，电泳以彩虹Marker跑至胶底结束，转膜时先将PVDF膜浸入甲醇中醒膜激活，电转按照目标蛋白分子量大小控制转膜时间，转膜结束后实验用BSA封闭1 h，TBST摇床洗膜5次，5 min/次，目的蛋白（PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT）及内参蛋白（β-actin）一抗按照说明书比例稀释后将PVDF膜置于孵育盒中4℃孵育过夜，次日TBST洗膜后，二抗以1∶10 000稀释后室温孵育2 h，再次洗膜后显影，用Image J 1.8.0分析条带灰度值，计算PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT相对表达量（PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT/β-actin灰度值×100%）。

2.7　酶联免疫（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法测定血清IL-1β/IL-10水平

从-80℃冰箱取出大鼠血清，置入1.5 mL EP管中，严格按照试剂盒所示步骤，做5个重复，测定大鼠血清IL-1β、IL-10水平，酶标仪在450 nm波长处测定各孔的OD值，绘制标准曲线后，计算最后的各样品浓度。

2.8　统计学方法

采用SPSS 23.0、Adobe Illustrator 2021、ImageJ 1.8.0、GraphPad Prism 8.0.2等软件对数据进行整理与分析。定量资料以均数±标准差表示，多组间比较方差齐采用方差分析，方差不齐采用秩和检验。P<0.05为差异有统计学意义。

3　结果

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3.1　一般情况

实验期间，大鼠因造模、灌胃、病情严重等导致死亡，最终空白组剩余12只、模型组剩余8只、优化溃结方组和SASP组9只，优化溃结方＋SASP组剩余10只。模型组出现体质量减轻，食欲减退，大便稀溏、便血，皮毛枯槁污浊，精神萎靡，反应迟钝等现象，给药组大鼠精神逐渐好转，活动及饮食增加，大便成形，便血好转或无便血，优化溃结方＋SASP组改善最明显。

3.2　优化溃结方对UC大鼠结肠组织炎症反应的影响

HE染色示空白组大鼠结肠黏膜形态、隐窝结构正常，无水肿表现。模型组结肠黏膜结构严重受损，排列紊乱，隐窝细胞丢失，黏膜肌层遍布炎症细胞，黏膜下层水肿严重，呈现典型的炎症样改变。优化溃结方组以及SASP组病理损伤较模型组减轻，而优化溃结方＋SASP合并干预后，对于TNBS诱导的溃疡性结肠炎结肠黏膜的损伤显著降低，炎性细胞的浸润显著减少。如插页ⅩⅩⅩⅥ图1。

3.3　免疫组化法检测优化溃结方对UC大鼠PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响

图片经Image J分析处理后得到相应蛋白染色的平均光密度值（average optical density，AOD），经数据分析后发现，与空白组相比，模型组PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白平均光密度值显著升高（P<0.05）。与模型组相比，PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白平均光密度值在优化溃结方组、SASP组、优化溃结方＋SASP组均有不同程度下降，差异有统计学意义（P<0.05）。与优化溃结方＋SASP组比较，优化溃结方组、SASP组的PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白平均光密度值显著高于优化溃结方＋SASP组，差异有统计学意义（P<0.05），优化溃结方组的PI3K、p-PI3K、AKT蛋白平均光密度值高于SASP组，但差异无统计学意义（P>0.05）。优化溃结方组p-AKT蛋白平均光密度值低于SASP组，但差异无统计学意义（P>0.05）。如插页ⅩⅩⅩⅦ图2、图3。

3.4　Western blot检测优化溃结方对UC大鼠PI3K、p-PPI3K、AKT、PAKT蛋白表达的影响

与空白组比较，模型组大鼠结肠PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达升高。与模型组比较，PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平在优化溃结方组、SASP组、优化溃结方＋SASP组均有不同程度下降，差异有统计学意义（P<0.05）。与优化溃结方＋SASP组比较，优化溃结方组、SASP组的PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达水平显著高于优化溃结方＋SASP组，差异有统计学意义（P<0.05）。优化溃结方组的PI3K、p-PI3K蛋白表达水平低于SASP组，但无显著差异。优化溃结方组的AKT、p-AKT蛋白表达水平高于SASP组，AKT蛋白表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05），p-AKT表达水平差异有统计学意义（P<0.05）。如图4、图5。

3.5　ELISA法测定优化溃结方对血清IL-1β、IL-10水平的影响

与空白组比较，模型组大鼠血清IL-1β明显升高（P<0.05）；与模型组比较，优化溃结方组、SASP组、优化溃结方＋SASP组均有不同程度下降（P<0.05）。与优化溃结方＋SASP组比较，优化溃结方组、SASP组的IL-1β水平显著高于优化溃结方＋SASP组，差异有统计学意义（P<0.05），优化溃结方组的IL-1β水平高于SASP组，但差异无统计学意义（P>0.05）。与正常组比较，模型组大鼠血清IL-10明显降低（P<0.05）；与模型组比较，优化溃结方组、SASP组、优化溃结方＋SASP组均有不同程度升高，差异有统计学意义（P<0.05）。与优化溃结方＋SASP组比较，优化溃结方组、SASP组的IL-10水平显著低于优化溃结方＋SASP组，差异有统计学意义（P<0.05），优化溃结方组的IL-10水平低于SASP组，但差异无统计学意义（P>0.05）。如图6。

4　讨论

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中医学中虽无“溃疡性结肠炎”病名，但对其相关症状的认知历来已久，可依据临床表现将本病归属于“肠澼”“痢疾”等范畴。《素问·太阴阳明论篇》曰：“下为飧泄，久为肠澼。”《证治汇补·下窍门》中记载：“肠澼者，谓湿热积于肠中。”“起居不时……闭塞滞下，为飧泻……谓气食滞于下焦，即今之痢疾也，……湿热食积三者蕴结成痢。”张锡纯在《医学衷中参西录》中指出“肠中脂膜腐败，由腐败而至于溃烂，是以纯下血水杂以脂膜，即西人所谓肠溃疡也”，提倡“不可但以痢治，宜半从疮治”。中医认为本病病位在肝脾肾大肠，脾胃虚弱是发病的根本，湿热瘀邪是病理因素。本病病情缠绵难愈责之病理过程之复杂。脾阳不足，清阳不升则生内湿，肠道传导失司则见大便稀溏；湿性黏滞，重浊趋下，湿邪困阻日久易伤脾肾；脾肾阳虚者易受外邪，邪郁久成热，湿热食积蕴结肠道，气血运行受阻瘀滞，腐肉成脓，可见黏液血便或脓血；瘀血停滞不去，又成为新的病理因素，新血不生，周而复始。正气足则邪不可干，正气不足则邪实病胜，故本病在临床上多见急性期与缓解期交替发生。

优化溃结方是柳越冬教授临床经验总结，对于UC的治疗重在调气和血、化瘀通络、荡涤积滞，清解蕴留肠腑间的湿热积滞之邪，才能使肠腑运输传导功能正常，清阳得升，腑气得降，饮食水谷正常吸收，湿邪得化，依附湿邪而生的热、瘀等才能消除，病邪去除，则腹痛、便下脓血等症状可除；调气和血重在顾护脾胃后天之本，升脾阳，行气血，得以活血通络。柳越冬教授组方中黄芪与白术、苍术共用，能够燥湿健脾，并补益脾气，顾护后天之本；青黛咸寒，有清热解毒、凉血泻火之功；败酱草味辛、苦、微寒，亦有清热解毒之功，是治疗腹痛肠痈、湿热泻痢、热毒血痢之妙药；白头翁苦寒，别名野丈人、胡王使者等，能清热解毒，止痢，历来是治疗痢疾的良药；当归补血活血，胡黄连凉血燥湿，红花活血祛瘀，气为血之帅，在健脾益气的前提下，气血充盛则运行通畅，热毒血瘀积滞能除。现代药理研究也表明^[18-19]黄芪有效成分为黄芪甲苷、黄芪多糖、黄酮类、酚酸、氨基酸、微量元素等，能够抗菌、加强毛细血管抵抗力、调节免疫力，抗炎，促进白细胞生长，调节肠道菌群，对UC的治疗具有很好的作用；白术的有效成分是挥发油、多糖、氨基酸、内酯等，能够调节免疫力，抗炎抗菌，调节激素水平，抗氧化作用^[20-21]；苍术有效成分包括挥发油类和非挥发油类，主要是倍半萜类、聚乙烯炔类、黄酮类、有机酸类等，能够抗炎抗菌、抗过敏、调节免疫、改善胃肠功能^[22-23]。青黛的主要成分是靛红玉和靛蓝，本课题组前期研究证实青黛可通过抑制PI3K/AKT通路的激活而发挥抗炎作用^[24-25]。方中其余诸药现代药理也证实具有抗炎抗菌、调节免疫的功效^[26-27]。九药合用，共奏调气和血，化瘀通络，荡涤积滞，清热解毒之功，既能顾护脾胃后天之本，解决本病本虚的根本问题，又能清解湿热瘀滞之邪，对于本病的治疗贯穿始终。

本研究采用TNBS造模形成的UC大鼠模型，模型组大鼠结肠组织结构严重受损，排列紊乱，隐窝细胞丢失，黏膜肌层遍布炎症细胞，血清IL-1β升高，IL-10水平降低，说明模型组建立成功。柳氮磺胺砒啶经口服吸收后，在肠道内分解，能够减少大肠埃希菌和梭状芽孢杆菌，并减少炎症介质的产生，发挥抗炎抗菌，调节免疫的作用，主要用于炎症性肠病的治疗及预防UC的复发，临床应用广泛，不良反应相对较少，本次研究作为西药对照组用药^[28]。本研究结果显示，优化溃结方＋柳氮磺胺砒啶组显著降低了UC大鼠结肠黏膜结构受损程度，排列较整齐，黏膜肌层炎症细胞浸润明显减少，黏膜下层水肿情况改善明显。

PI3K/AKT细胞通路在炎症和细胞凋亡中发挥重要作用。PI3K分为3种类型，Ⅰ型、Ⅱ型以及Ⅲ型，Ⅰ型又具有两种亚型；AKT分为3种亚型，以AKT1最为广泛。生理情况下，PI3K可被激素、细胞因子等细胞外信号刺激激活磷酸化，通过生物学作用与AKT的PH（pleckstrin homology）结构域结合促进其磷酸化从而激活AKT，AKT激活以后，促进Caspase-3、mTOR、Bcl-2等下游底物磷酸化发挥与凋亡、炎症、氧化应激等生物学效应的作用^[29-31]。研究表明UC结肠组织中PI3K/AKT蛋白表达增加，进而影响促凋亡蛋白Bcl-2升高、抗凋亡蛋白Caspase-3降低^[32]。柳荣等^[33]发现UC模型鼠结肠黏膜中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR基因及其蛋白表达上调，IL-1β水平升高，IL-10水平降低，证明PI3K/AKT/mTOR信号通路过度活化在UC中起重要作用。此外，实验还发现通过抑制PI3K/AKT通路，抑制促炎因子IL-6、IL-17、IL-1β和INF-γ的释放，减轻UC的肠道炎症反应^[34-35]。WANG B Y等^[36]发现UC小鼠PI3K/AKT/mTOR通路激活，炎性因子分泌增加，肠上皮屏障功能障碍。研究也表明通过抑制PI3K/AKT信号通路活性，可以改善UC大鼠结肠黏膜结构及肠道菌群^[37]。IL-1β主要由活化的单核巨噬细胞与淋巴细胞等合成，属于生物体先天免疫系统的监督者，能及时发现生物体非正常代谢活动，是常见的细胞因子，可通过自分泌、内分泌、旁分泌等多种方式发挥效应，在炎症反应、免疫、组织修复、发热等生理学活动中起重要作用，对于UC的发生能够起到直接介导作用^[38-39]。UC患者中，IL-1β与IL-10表达水平会出现失衡。IL-10在体内最重要的来源是单核巨噬细胞和T辅助细胞，是机体免疫应答中重要的细胞因子，在IL-10相对或绝对缺乏的疾病，如慢性炎性肠病，银屑病，类风湿关节炎等，会存在持续的免疫激活。IL-10还可以激活PI3K及其下游底物，尽管IL-10的抗炎作用不是通过PI3K介导的，但IL-10发挥作用取决于PI3K的激活^[40-41]。

溃疡性结肠炎发生时，伴有不同程度的肠道炎症和结肠黏膜损害，PI3K/AKT信号通路的激活，引起结肠组织黏膜下层水肿，炎症细胞浸润明显，导致结肠组织黏膜结构紊乱，发生溃疡，提示该通路的激活加速了结肠细胞凋亡、加重了炎症程度。本研究结果显示，UC模型组大鼠结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达显著升高，大鼠血清中炎性因子IL-1β表达增加，IL-10水平降低，应用优化溃结方联合柳氮磺胺砒啶干预，较仅应用优化溃结方、柳氮磺胺砒啶后的大鼠结肠组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达显著降低，IL-10水平增高，IL-1β水平降低，其机制见插页ⅩⅩⅩⅧ图7。

综上所述，优化溃结方通过抑制PI3K/AKT信号通路激活，减少肠道中的炎性因子IL-1β分泌，并能促进IL-10的分泌，减轻了结肠黏膜结构的损伤，减轻炎症水平，抑制结肠上皮细胞凋亡，维持肠道的正常功能，从而发挥保护TNBS诱导的肠道炎症的作用。中医药治疗溃疡性结肠炎的具体应用和相关机制和通路等仍在探索阶段，未来持续的进一步研究证实有助于丰富中医现代化的内涵，亦有益于从中医药角度精准化防治UC。

基金

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国家自然科学基金面上项目(82074449)
陕西省中医药管理局秦创原中药创新研发项目(2022-QCYZH-015)
陕西省自然科学基础研究计划项目(2022JM-489)
咸阳市创新服务能力支撑计划-科技创新人才项目(L2023-CXNL-CXRC-018)

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2025年第43卷第7期

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doi: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.07.022

首发时间：2026-10-30
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^1.辽宁中医药大学，辽宁沈阳 110847

^2.福建中医药大学附属人民医院，福建福州 350000

^3.中国医科大学附属第一医院，辽宁沈阳 110001

^4.辽宁中医药大学附属第二医院，辽宁沈阳 110034

^5.咸阳市中心医院，陕西咸阳 712000

^6.辽宁中医药大学附属第三医院，辽宁沈阳 110003

通讯作者:

李娜（1978-），女，河北秦皇岛人，副主任医师，硕士研究生导师，博士，研究方向：中医防治炎症性肠病等肛肠科疾病。E-mail：newlife0517@qq.com。

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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