中华中医药学刊

产地	饮片批号	产地	饮片批号
云南寻甸	Fl2112201	云南禄丰	Fl2112231
	Fl2112202		Fl2112232
	Fl2112203		Fl2112233
云南双柏	Fl2112211	云南易门	Fl2112241
	Fl2112212		Fl2112242
	Fl2112213		Fl2112243
云南昆明	Fl2112221
	Fl2112222
	Fl2112223

产地	饮片批号	产地	饮片批号
云南寻甸	Fl2112201	云南禄丰	Fl2112231
	Fl2112202		Fl2112232
	Fl2112203		Fl2112233
云南双柏	Fl2112211	云南易门	Fl2112241
	Fl2112212		Fl2112242
	Fl2112213		Fl2112243
云南昆明	Fl2112221
	Fl2112222
	Fl2112223

编号	相似度	编号	相似度
S1	0.805	0.992	S9	0.996	0.999
S2	0.720	0.992	S10	0.991	0.998
S3	0.719	0.992	S11	0.995	0.997
S4	0.992	0.997	S12	0.995	0.996
S5	0.971	0.996	S13	0.995	0.998
S6	0.983	0.996	S14	0.993	0.999
S7	0.989	0.996	S15	0.996	0.998
S8	0.996	1.000

编号	相似度	编号	相似度
S1	0.805	0.992	S9	0.996	0.999
S2	0.720	0.992	S10	0.991	0.998
S3	0.719	0.992	S11	0.995	0.997
S4	0.992	0.997	S12	0.995	0.996
S5	0.971	0.996	S13	0.995	0.998
S6	0.983	0.996	S14	0.993	0.999
S7	0.989	0.996	S15	0.996	0.998
S8	0.996	1.000

编号	溶剂倍量/（倍）	煎煮时间/（min）	Y	Z
1	14	12	30	20	-1.482	0.349
2	12	8	40	20	2.139	0.826
3	10	10	20	20	2.768	0.909
4	12	10	30	20	-4.130	0.000
5	10	10	30	10	-3.410	0.095
6	10	10	40	20	1.170	0.698
7	12	12	30	10	3.010	0.941
8	12	12	20	20	0.653	0.630
9	12	8	30	10	-0.873	0.429
10	14	10	20	20	0.087	0.556
11	12	10	20	10	0.431	0.601
12	14	8	30	20	2.679	0.897
13	12	10	20	30	1.980	0.805
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15	12	12	40	20	-0.235	0.513
16	12	10	30	20	2.895	0.926
17	12	10	40	30	3.460	1.000
18	12	10	30	20	0.687	0.635
19	12	10	40	10	-0.960	0.418
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21	10	10	30	30	-3.247	0.116
22	14	10	40	20	2.679	0.897
23	10	8	30	20	-1.850	0.300
24	14	10	30	30	-2.341	0.236
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28	12	8	30	30	-0.332	0.500
29	12	10	30	20	0.964	0.671

编号	溶剂倍量/（倍）	煎煮时间/（min）	Y	Z
1	14	12	30	20	-1.482	0.349
2	12	8	40	20	2.139	0.826
3	10	10	20	20	2.768	0.909
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6	10	10	40	20	1.170	0.698
7	12	12	30	10	3.010	0.941
8	12	12	20	20	0.653	0.630
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10	14	10	20	20	0.087	0.556
11	12	10	20	10	0.431	0.601
12	14	8	30	20	2.679	0.897
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24	14	10	30	30	-2.341	0.236
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27	12	12	30	30	2.966	0.935
28	12	8	30	30	-0.332	0.500
29	12	10	30	20	0.964	0.671

方差来源	平方和	自由度	均方	F值	P值
模型	2.2	14	0.157 0	22.20	<0.000 1
A	0.093 8	1	0.093 8	13.26	0.002 7
B	0.162 9	1	0.162 9	23.03	0.000 3
C	0.012 2	1	0.012 2	1.72	0.210 8
D	0.119 4	1	0.119 4	16.88	0.001 1
AB	0.016 7	1	0.016 7	2.36	0.146 4
AC	0.025 1	1	0.025 1	3.55	0.080 8
AD	0.176 3	1	0.176 3	24.92	0.000 2
BC	0.144 5	1	0.144 5	20.43	0.000 5
BD	0.002 8	1	0.002 8	0.397 6	0.538 5
CD	0.005 6	1	0.005 6	0.798 7	0.386 6
A²	0.967 0	1	0.967 0	136.71	<0.000 1
B²	0.682 9	1	0.682 9	96.54	<0.000 1
C²	0.049 2	1	0.049 2	6.96	0.019 5
D²	0.006 6	1	0.006 6	0.931 4	0.350 9
残差	0.099 0	14	0.007 1	5.77	0.052 9
失拟项	0.092 6	10	0.009 3
纯误差	0.006 4	4	0.001 6
总和	2.3	28

方差来源	平方和	自由度	均方	F值	P值
模型	2.2	14	0.157 0	22.20	<0.000 1
A	0.093 8	1	0.093 8	13.26	0.002 7
B	0.162 9	1	0.162 9	23.03	0.000 3
C	0.012 2	1	0.012 2	1.72	0.210 8
D	0.119 4	1	0.119 4	16.88	0.001 1
AB	0.016 7	1	0.016 7	2.36	0.146 4
AC	0.025 1	1	0.025 1	3.55	0.080 8
AD	0.176 3	1	0.176 3	24.92	0.000 2
BC	0.144 5	1	0.144 5	20.43	0.000 5
BD	0.002 8	1	0.002 8	0.397 6	0.538 5
CD	0.005 6	1	0.005 6	0.798 7	0.386 6
A²	0.967 0	1	0.967 0	136.71	<0.000 1
B²	0.682 9	1	0.682 9	96.54	<0.000 1
C²	0.049 2	1	0.049 2	6.96	0.019 5
D²	0.006 6	1	0.006 6	0.931 4	0.350 9
残差	0.099 0	14	0.007 1	5.77	0.052 9
失拟项	0.092 6	10	0.009 3
纯误差	0.006 4	4	0.001 6
总和	2.3	28

编号	标准汤剂出膏率/（%）	毛两面针素含量/（%）	指标成分转移率/（%）	编号	标准汤剂出膏率/（%）	毛两面针素含量/（%）	指标成分转移率/（%）
S1	11.76	0.75	3.46	54.19	S11	9.35	0.64	4.18	60.87
S2	11.54	0.84	3.21	44.30	S12	9.41	0.63	4.18	62.86
S3	11.29	0.87	3.30	43.08	S13	8.94	0.66	6.05	82.56
S4	7.40	0.49	2.15	32.32	S14	9.00	0.67	5.57	75.20
S5	8.74	0.43	2.70	54.39	S15	8.96	0.63	4.50	63.93
S6	7.85	0.44	2.42	43.64	最大值	11.76	0.87	6.05	82.58
S7	9.11	0.44	3.95	82.58	最小值	7.40	0.43	2.15	32.32
S8	8.59	0.52	4.39	71.85	均值	9.29	0.61	3.85	58.98
S9	9.00	0.60	3.88	57.81	SD值	1.28	0.14	1.06	14.78
S10	8.40	0.61	3.98	55.15	均值±30%	6.05~12.08	0.43~0.80	2.70~5.02	41.29~76.68
					均值±3×SD	5.46~13.12	0.21~1.02	0.67~7.06	14.63~103.33

编号	标准汤剂出膏率/（%）	毛两面针素含量/（%）	指标成分转移率/（%）	编号	标准汤剂出膏率/（%）	毛两面针素含量/（%）	指标成分转移率/（%）
S1	11.76	0.75	3.46	54.19	S11	9.35	0.64	4.18	60.87
S2	11.54	0.84	3.21	44.30	S12	9.41	0.63	4.18	62.86
S3	11.29	0.87	3.30	43.08	S13	8.94	0.66	6.05	82.56
S4	7.40	0.49	2.15	32.32	S14	9.00	0.67	5.57	75.20
S5	8.74	0.43	2.70	54.39	S15	8.96	0.63	4.50	63.93
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S9	9.00	0.60	3.88	57.81	SD值	1.28	0.14	1.06	14.78
S10	8.40	0.61	3.98	55.15	均值±30%	6.05~12.08	0.43~0.80	2.70~5.02	41.29~76.68
					均值±3×SD	5.46~13.12	0.21~1.02	0.67~7.06	14.63~103.33

主成分	初始特征值	方差贡献率/（%）	累计贡献率/（%）
PC1	7.964	72.403	72.403
PC2	2.480	94.944	94.944

主成分	初始特征值	方差贡献率/（%）	累计贡献率/（%）
PC1	7.964	72.403	72.403
PC2	2.480	94.944	94.944

峰号	成分	峰号	成分
1	0.932	-0.201	7	0.991	-0.020
2	0.885	0.326	8	-0.528	0.836
3	0.962	0.113	9	0.932	0.301
4	-0.626	0.686	10	0.973	0.145
5	0.977	0.158	11	0.980	0.173
6	-0.068	0.992

峰号	成分	峰号	成分
1	0.932	-0.201	7	0.991	-0.020
2	0.885	0.326	8	-0.528	0.836
3	0.962	0.113	9	0.932	0.301
4	-0.626	0.686	10	0.973	0.145
5	0.977	0.158	11	0.980	0.173
6	-0.068	0.992

飞龙掌血茎饮片、标准汤剂量值传递规律研究

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许松 ¹^,²^,³^,⁴ , 朱志坤 ⁵ , 金文彬 ¹ , 余金兰 ¹ , 朱屹韬 ¹ , 赵琼 ¹ , 邓皙 ¹ , 李军山 ⁶ , 马云淑 ¹^,³^,⁴ , 柯瑾 ¹^,²^,³^,⁴

中华中医药学刊 | 国家项目点击 2025,43(10): 148-154

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中华中医药学刊 |国家项目点击 2025 , 43 (10) : 148 -154

飞龙掌血茎饮片、标准汤剂量值传递规律研究

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许松¹^,²^,³^,⁴, 朱志坤⁵, 金文彬¹, 余金兰¹, 朱屹韬¹, 赵琼¹, 邓皙¹, 李军山⁶, 马云淑¹^,³^,⁴, 柯瑾¹^,²^,³^,⁴

作者信息

^1.云南中医药大学中药学院，云南昆明 650500

^2.云南省高校外用给药系统与制剂技术研究重点实验室，云南昆明 650500

^3.云南省南药可持续利用研究重点实验室，云南昆明 650500

^4.云南省傣医药与彝医药重点实验室，云南昆明 650500

^5.濮阳市中医医院，河南濮阳 457000

^6.云南神威施普瑞药业有限公司，云南楚雄 675000

通讯作者:

柯瑾（1980-），女，云南昆明人，副教授，硕士研究生导师，硕士，研究方向：中药药剂。E-mail：63918441@qq.com。

作者简介:

许松（1997-），男（彝族），云南建水人，硕士在读，研究方向：药剂学。

Study on Transmission Law of Quantity Value Transfer of Stem of Feilongzhangxue［Toddalia asiatica（Linn）Lam］Decoction Pieces and Standard Decoction

Song XU¹^,²^,³^,⁴, Zhikun ZHU⁵, Wenbin JIN¹, Jinlan YU¹, Yitao ZHU¹, Qiong ZHAO¹, Xi DENG¹, Junshan LI⁶, Yunshu MA¹^,³^,⁴, Jin KE¹^,²^,³^,⁴

Affiliations

^1.School of Traditional Chinese Medicine，Yunnan University of Chinese Medicine，Kunming 650500，Yunnan，China

^2.The Key Laboratory for External Drug Delivery System and Preparation Technology in University of Yunnan Provincial，Kunming 650500，Yunnan，China

^3.Yunnan Provincial Key Laboratory of Sustainable Utilization of Southern Medicine，Kunming 650500，Yunnan，China

^4.Yunnan Provincial Key Laboratory of Dai Medicine and Yi Medicine，Kunming 650500，Yunnan，China

^5.Puyang Hospital of Traditional Chinese Medicine，Puyang 457000，Henan，China

^6.Yunnan Shenwei Sprey Pharmaceutical Co.，Ltd.，Chuxiong 675000，Yunnan，China

出版时间: 2025-10-10 doi: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.10.028

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摘要

收起

目的

建立飞龙掌血茎标准汤剂的制备工艺、高效液相色谱法指纹图谱及其指标成分的含量测定方法，并结合化学模式识别方法对饮片质量进行分析与评价，为其质量控制提供参考；研究飞龙掌血茎饮片-标准汤剂指纹图谱的变化，并分析指标成分毛两面针素在饮片-标准汤剂的量值传递规律。

方法

建立饮片高效液相色谱法指纹图谱，并进行聚类分析、主成分分析。采用响应面法结合主成分分析法，以8个共有峰的相对峰面积、转移率作为评价指标，优选出最佳煎煮工艺。高效液相色谱法测定饮片、标准汤剂中毛两面针素含量，计算转移率。

结果

飞龙掌血茎饮片、标准汤剂与各自的对照指纹图谱相似度分别为0.719～0.996、0.992～1.000。饮片中的11个共有峰转移8个至标准汤剂，其中5个共有峰采用对照品比对确认，分别为绿原酸（峰1）、木兰花碱（峰2）、橙皮苷（峰4）、毛两面针素（峰6）、飞龙掌血素（峰11）。15批标准汤剂的平均出膏率为9.29%，毛两面针素从饮片-标准汤剂的平均转移率为58.98%。

结论

建立的指纹图谱及含量测定方法稳定可靠，毛两面针素从饮片-标准汤剂的量值传递结果表明，其制备工艺科学可行，可为其质量控制提供参考。

关键词

飞龙掌血茎 / 标准汤剂 / 指纹图谱 / 量值传递

Abstract

收起

Objective

To establish the preparation process，high performance liquid chromatography（HPLC）fingerprint and content determination method of the standard decoction of the stem of Feilongzhangxue［Toddalia asiatica（Linn）Lam］，and to analyze and evaluate the quality of decoction pieces by chemical pattern recognition method，so as to provide a reference for its quality control.To study the changes of the fingerprint of the stem of Feilongzhangxue［Toddalia asiatica（Linn）Lam］decoction piece and standard decoction，and to analyze the transmission law of the Toddalolactone in the decoction pieces-standard decoction.

Methods

HPLCfingerprints were established，and cluster analysis and principal component analysis were performed.The response surface method combined with principal component analysis（PCA）was used to evaluate the relative peak area and transfer rate of the eight common peaks，and the optimal decoction process was selected.The content of Toddalolactone in decoction pieces and standard decoction was determined by HPLC，and the transfer rate was calculated.

Results

The similarity of the fingerprints of the stem of Feilongzhangxue［Toddalia asiatica（Linn）Lam］decoction pieces and the standard decoction was 0.719-0.996 and 0.992-1.000，respectively.Eight of the eleven common peaks in the decoction pieces were transferred to the standard decoction，and five of the common peaks were confirmed by comparison with the control substance，which were chlorogenic acid（peak 1），magnolidine（peak 2），hesperidin（peak 4），toddalolactone（peak 6）and toddaculin（peak 11）.The average ointment yield of 15 batches of standard decoction was9.29%，and the average transfer rate of Toddalolactone from decoction piece to standard decoction was 58.98%.

Conclusion

The fingerprint and content determination methods are stable and reliable，and the results of the transmission of the amount of Toddalolactone from decoction pieces to standard decoction indicate that the preparation process is scientific and feasible，which can provide a reference for its quality control.

Key words

stem of Feilongzhangxue［Toddalia asiatica（Linn）Lam］ / standard decoction / fingerprinting / quantitative transmitting

引用本文

许松, 朱志坤, 金文彬, 余金兰, 朱屹韬, 赵琼, 邓皙, 李军山, 马云淑, 柯瑾. 飞龙掌血茎饮片、标准汤剂量值传递规律研究. 中华中医药学刊, 2025 , 43 (10) : 148 -154 . DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.10.028

Song XU, Zhikun ZHU, Wenbin JIN, Jinlan YU, Yitao ZHU, Qiong ZHAO, Xi DENG, Junshan LI, Yunshu MA, Jin KE. Study on Transmission Law of Quantity Value Transfer of Stem of Feilongzhangxue［Toddalia asiatica（Linn）Lam］Decoction Pieces and Standard Decoction[J]. Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine, 2025 , 43 (10) : 148 -154 . DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.10.028

正文

收起

飞龙掌血茎是芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica（L.）Lam.的干燥茎，辣、微苦、涩，温。归肺、肝、胃经。有祛风止痛、散瘀止血功效^[1]，常作为我国西南地区的传统民间药材。主要化学成分为香豆素、生物碱、萜类、黄酮、酚酸等^[2-7]。药理研究表明^[8-10]，飞龙掌血茎具有抗炎镇痛、抗菌、抗氧化和止血凝血等作用，其活性成分主要是香豆素类和生物碱类^[11-12]。

目前尚未有飞龙掌血茎配方颗粒的研究报道，根据《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术指导》中相关要求^[13-14]：中药配方颗粒应以标准汤剂为物质基准，并明确与临床汤剂是否一致，以出膏率、含量及转移率、特征图谱/指纹图谱等指标为表征，对原料、中间体及成品制备过程中的量质传递和物料平衡进行全面研究。

本研究先建立了饮片的指纹图谱和含量测定方法，并以单因素实验为基础，运用响应面法并结合主成分分析，以多指标对飞龙掌血茎标准汤剂煎煮工艺参数进行优选，通过制备15批飞龙掌血茎物质基准，测定其指纹图谱、出膏率范围、指标性成分含量，分析饮片与物质基准间的量值传递及整体质量研究，为飞龙掌血茎配方颗粒的质量标准制定奠定基础，以加强对该颗粒的质量管理，并探讨其代替传统汤剂的可行性。

1　仪器与试药

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1.1　仪器

1220　高效液相色谱仪（美国Agilent Technology公司）；SCIENTZ-10N/A冷冻干燥机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；万分之一天平（常州奥豪斯仪器有限公司）；AB265-S分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；SK2200HP超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。

1.2　试药

橙皮苷、飞龙掌血素、木兰花碱（成都德思特生物技术有限公司，批号：DSTDM004501、DSTDF008901、DSTDM000402）。毛两面针素、绿原酸（中国食品药品检定研究所，批号：111531-201603、110753-200413）。水为娃哈哈纯净水，乙腈、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

飞龙掌血茎饮片（云南神威施普瑞药业有限公司）经云南中医药大学陈凌云教授鉴定为芸香科植物飞龙掌血的干燥茎。饮片具体信息见表1。

2　方法与结果

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2.1　飞龙掌血茎指纹图谱的建立及分析

2.1.1　色谱条件

Agilent ZORBAX，C₁₈（4.6 mm×250 mm，5.0μm）色谱柱，以0.1%甲酸（A）-乙腈（B）为流动相（0～10 min，10%→15%A；10～15 min，15%→25%A；15～30 min，25%→60%A；30～65 min，60%→90%A）。流速1 mL·min^-1，柱温30℃，进样量10μL，检测波长320 nm^[15]。

2.1.2　对照品溶液的制备

精密称取橙皮苷、飞龙掌血素、木兰花碱、绿原酸、毛两面针素对照品适量，置于棕色量瓶中，加甲醇制成每1 mL含0.17、0.21、0.14、0.18、67.0μg的混合溶液，作为对照品溶液。

2.1.3　供试品溶液的制备

1）飞龙掌血茎饮片供试品溶液的制备：精密称取飞龙掌血茎饮片粉末（过2号筛）0.2 g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30 mL，称重，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）20 min，放冷，称重，甲醇补足损失重量，摇匀，滤过，即得。

2）飞龙掌血茎标准汤剂供试品溶液的制备：精密称取标准汤剂干膏粉10 mg，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇5 mL，称重，超声处理（功率240 W，频率40 kHz）5 min，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

2.1.4　方法学考察

1）精密度试验：取飞龙掌血茎样品，按照“2.1.3”项方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项色谱条件重复进样6次，以取毛两面针素为参照峰，计算各共有峰相对保留时间及相对峰面积的RSD均<2%，表明仪器精密度良好。

2）重复性试验：取飞龙掌血茎样品，按照“2.1.3”项方法平行制备6份供试品溶液，按“2.1.1”项色谱条件进样，以取毛两面针素为参照峰，计算各共有峰相对保留时间及相对峰面积的RSD均<2%，表明方法重复性良好。

3）稳定性试验：取飞龙掌血茎样品，按照“2.1.3”项方法制备供试品溶液，分别在0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1”项色谱条件进样，以取毛两面针素为参照峰，计算各共有峰相对保留时间及相对峰面积的RSD均<2%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.1.5　飞龙掌血茎指纹图谱的建立及相似度评价

取15批飞龙掌血茎饮片、标准汤剂，按照“2.1.3”项方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项色谱条件进样测定并记录色谱图，将其导入“国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）”软件^[16-19]，以S1号样品色谱图为参照图谱，采用中位数法生成共有模式，对样品进行多点校正和Mark峰匹配得到指纹图谱，并生成对照指纹图谱（R），计算相似度。结果见表2、图1、插页ⅩⅪ图2-图3。经相似度评价结果分析，15批飞龙掌血茎饮片与对照指纹图谱的相似度在0.719～0.996；标准汤剂的相似度在0.992～1.000；表明除云南寻甸外，其他产地的飞龙掌血茎饮片整体质量稳定；而15批标准汤剂具有较好的一致性。

2.1.6　饮片、标准汤剂共有峰的标定及对比分析

将15批饮片、标准汤剂数据导入“国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012版）”，设置S1色谱图为参照图谱，采用中位数法生成共有模式，对样品进行多点校正和Mark峰（标记峰）匹配分别得到15批飞龙掌血茎饮片、标准汤剂指纹图谱共有峰的匹配数据，从而计算相对峰面积。以分离度高、峰形好、峰面积稳定为筛选条件确定共有峰。因此，饮片确定了11个共有峰，通过与对照品比对，指认其中5个共有峰，其中峰1为绿原酸、峰2为木兰花碱、峰4为橙皮苷、峰6为毛两面针素、峰11为飞龙掌血素^[20]。

2.2　飞龙掌血茎标准汤剂煎煮工艺

2.2.1　基于响应面法优化飞龙掌血茎标准汤煎煮

称取飞龙掌血茎饮片100 g，煎煮两次，第1次加饮片量10倍的水，浸泡30 min，煎煮30 min，过滤，滤液备用；第2次加饮片量8倍的水，煎煮20 min，过滤，合并两次提取液，混匀；减压浓缩至相对密度为1.02～1.04（65℃）的浸膏，冷冻干燥。

2.2.2　浸泡

称取飞龙掌血茎饮片100 g，加水浸没，隔规定时间取出，沥干水分，称定重量，待重量增加趋于平衡后，以时间对药材吸水量作图。飞龙掌血茎吸水率为90%，220 min吸水基本达到平衡。结果见图4。

2.2.3　响应面试验设计

在单因素实验的基础上，以8个特征峰的相对峰面积及毛两面针素转移率为评价指标，以头煎溶剂倍量（A）、二煎溶剂倍量（B）、头煎煎煮时间（C）、二煎煎煮时间（D）为影响因素，以-1、0、1编码各因素的低、中、高水平^[21]。采用Design-Expert 8.0.6软件设计4因素3水平的Box-Behnken响应面法进行实验。Box-Behnken响应面法实验方案见表3。

2.2.4　主成分分析

使用SPSS 26.0软件^[21]，将原始数据进行标准化（Z-Score）处理，然后通过KOM检验法和Bartlett球体检验法进行适用性检验，KOM＝0.767>0.6，Bartlett球形度检验结果为68.349，Sig＝0.000<0.01，说明各个指标之间具有关联性，适用主成分分析。将特征值>1的因子作为提取标准，2个主成分解释了全部方差的88.3%（特征值分别为6.751、1.37，比例分别为74.1%、14.2%），进一步计算主成分的分数及规范化综合得分，以规范化综合得分值为响应面值做响应面分析，综合得分（Y）和规范化得分（Z）见表3。

(1)

(2)

(3)

公式1表示主成分得分（F）的计算：FAC表示主成分SPSS生成值，X表示主成分对应的特征值，W表示主成分对应的百分比；公式2表示综合评分值（Y）的计算；公式3表示综合评分规范化值（Z）的计算。

2.2.5　回归方程方差分析

将Z值录入Design-Expert 13软件^[21]，根据fifth模型进行分析，以Z为效应值，对各因素编码值进行拟合。

根据回归模型方差分析得出，方差模型F值＝22.2，P<0.01，具有统计学意义，失拟项不明显，表明该回归模型与实际试验具有较高的拟合度，因此可用该回归方程预测飞龙掌血茎的煎煮工艺最佳工艺参数。该回归模型决定系数R²＝0.956 9>0.9，调整决定系数R²_Adj＝0.913 8>0.9，说明该模型可以解释91%响应值的变化，回归模型较为可靠，可用于飞龙掌血茎煎煮工艺优化的理论推测。在该模型中，一次项B具有明显影响，A、C、D不明显；二次项A²、B²、均呈明显影响，C²、D²不明显；交互项中，AD、BC具有明显差异，BD、CD无明显差异。各因素的影响大小为二煎溶剂倍量（B）>二煎煎煮时间（D）>头煎溶剂倍量（A）>头煎煎煮时间（C）。见表4。

2.2.6　两因素间交互分析

两因素间的交互作用见插页ⅩⅫ图5，AD、BC、BD的响应面图最陡峭，且其等高线集呈椭圆形，这表明头煎溶剂倍量与头煎煎煮时间、二煎煎煮时间的交互作用显著（P<0.01），而AB、AC、CD的响应面较陡峭，且其等高线呈椭圆形，则表明上述因素之间交互作用明显（P<0.05）。根据模拟拟合结果，飞龙掌血茎的预测最佳煎煮工艺是头煎及二煎溶剂倍量为11.990及10.418 1倍，头煎及二煎煎煮时间为30.842及13.424 min。

2.2.7　煎煮工艺的验证

根据以上结果，选择以头煎倍量及二煎倍量为12倍及10倍，头煎及二煎煎煮时间为30 min及15 min，平行煎煮3批实验样品。结果显示，3批水煎液的8个特征峰相对峰面积的相对标准偏差（RSD）在1.5%～4.3%，出膏率RSD为2.3%，表明选择的工艺稳定性较好。

最终确定飞龙掌血茎最优煎煮工艺是头煎及二煎的溶剂倍量分别为12倍和10倍，头煎及二煎的煎煮时间分别为30 min和15 min。

2.3　毛两面针素含量测定研究

2.3.1　线性关系考察

取对照品溶液，依次稀释得到200、120、72、36、18、9μg·mL^-1的对照品溶液，按照“2.1.1”项下色谱条件进样分析，以进样量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行标准曲线的绘制，并计算回归方程，结果为Y＝26.388X-3.866 3（r＝0.999 9）^[22]。线性范围9～200 μg·mL^-1。线性关系图见图6。

2.3.2　精密度试验

取飞龙掌血茎样品，按照“2.1.3”项方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项色谱条件重复进样6次，测得饮片、标准汤剂毛两面针素含量RSD分别为1.27%、0.18%，表明仪器精密度良好。

2.3.3　重复性试验

取飞龙掌血茎样品，按照“2.1.3”项方法平行制备6份供试品溶液，按“2.1.1”项色谱条件进样，测得饮片、标准汤剂毛两面针素含量RSD分别为1.03%、0.36%，表明方法重复性良好。

2.3.4　稳定性试验

取飞龙掌血茎样品，按照“2.1.3”项方法制备供试品溶液，分别在0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1”项色谱条件进样，测得饮片、标准汤剂毛两面针素含量RSD分别为1.25%、0.97%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.3.5　加样回收率试验

取已测定指标成分的6份，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别按样品含量100%加入毛两面针素对照品，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，在“2.1.2”项色谱条件下进样测定，计算回收率。结果示饮片、标准汤剂毛两面针素的加样回收率分别为96.31%～97.92%、98.50%～101.45%，RSD分别为0.61%、1.14%。

2.3.6　含量测定及转移率计算

取15批飞龙掌血茎饮片和标准汤剂供试品溶液，根据已建立的含量测定方法进行定量测定，并按公式计算饮片到标准汤剂的转移率，结果见表5。

可知飞龙掌血茎标准汤剂中毛两面针素含量的实测值在2.15%～6.05%，虽然其实测值不在均值±30%范围内，但所有结果仍在均值±3×SD范围内；表明该制备方法较合理准确。

2.4　化学模式识别分析

2.4.1　聚类分析

对15批飞龙掌血茎饮片中共有峰峰面积进行量化处理，运用SPSS软件^[23]，采用系统聚类法，对15批飞龙掌血茎饮片进行聚类分析，当分类距离5时，显示15批样品可共聚为两类，其中前7个产地饮片聚为一类，其余产地可聚为一类。结果见图7。

2.4.2　主成分分析（principal component analysis，PCA）

运用SPSS软件^[24]对15批飞龙掌血茎饮片中共有峰峰面积进行量化处理。首先，进行降维因子分析，结果显示KMO值为0.714，大于0.5，表明各变量相关性较好。以特征值大于1提取主成分，得到2个主要成分，累积方差贡献率为94.944%，结果见表6。结果显示特征值较高的2个主成分因子的斜率更大，说明所提取的2个主成分可以最大程度地代表飞龙掌血茎饮片的整体质量特征。其次，用碎石图转折点检验保留主成分个数，进一步说明可提取前2个主成分，得分矩阵图见图8。

初始因子载荷矩阵见表7，第一主成分主要反映峰1、峰2、峰3、峰5、峰7、峰9～峰11的信息，第二主成分主要反映峰4、峰6、峰8的信息。其中峰1为绿原酸、峰2为木兰花碱、峰4为橙皮苷、峰6为毛两面针素、峰11为飞龙掌血素。

用SIMAC 14.1软件对15批飞龙掌血茎饮片进行主成分分析^[25-26]，以指纹图谱中的11个共有峰峰面积为变量，绘制15批不同产地飞龙掌血茎样品的PCA得分图，见插页ⅩⅩⅢ图9，结果显示2个主成分能反映不同产地飞龙掌血茎的主要特征，说明不同产地飞龙掌血茎在化学成分含量上存在一定差异。

2.4.3　正交偏最小二乘-判别分析（Orthogonal Partial Least Squares Discriminant Analysis，OPLS-DA）

为了进一步区分不同产地的飞龙掌血茎组内质量差异，将15批样品11个共有峰峰面积导入SIMAC 14.1软件进行OPLS-DA方法分析^[27]，建立OPLS-DA模型，见插页ⅩⅩⅢ图10，结果显示15批飞龙掌血茎样品被分为2类，与聚类分析和主成分分析结果一致，结合OPLS-DA模型中变量重要性投影值（Variable Importance Projection，VIP）（图11）进行分析，以VIP>1为条件筛选出差异标志物，筛选出5个差异标志物，对飞龙掌血茎样品的影响程度依次为4号峰（橙皮苷）>6号峰（毛两面针素）>8号峰（未知）>1号峰（绿原酸）>2号峰（木兰花碱）。说明橙皮苷、毛两面针素、绿原酸、木兰花碱可作为不同产地的飞龙掌血茎饮片的差异标志物。

3　结论与讨论

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3.1　结论

飞龙掌血茎饮片中的11个共有峰有8个在标准汤剂指纹图谱中得到了有效转移，表明本研究建立的高效液相色谱法指纹图谱能准确地反映饮片-标准汤剂之间的真实性、优良性、稳定性和主要化学成分的可追溯性。建立的指标成分含量测定方法可同时用于饮片、标准汤剂的分析测定，量值传递结果表明飞龙掌血茎标准汤剂的质量得到了较好的控制，其制备工艺科学可行。标准汤剂作为配方颗粒系列研究的参考，与饮片、中间体、配方颗粒既有区别又有联系，本研究建立了飞龙掌血茎标准汤剂质量标准，可全面反映其质量，为相关质量控制和临床应用提供依据。

3.2　讨论

飞龙掌血茎含量及指纹图谱研究以毛两面针素含量为评价指标，对提取方式（加热回流提取、超声提取）、提取溶剂（甲醇、70%甲醇、50%甲醇）、提取时间（10、20、30 min）、溶剂用量（10、20、30 mL）进行考察，确定飞龙掌血茎饮片的供试品溶液制备方法；对提取时间（5、10、15 min）、溶剂用量（5、10、15 mL）进行考察，确定飞龙掌血茎标准汤剂的供试品溶液制备方法。以对称因子及分离度为评价指标对流动相系统（甲醇-水溶液、乙腈-水溶液、乙腈-0.1%甲酸溶液、乙腈-0.1%醋酸溶液、乙腈-0.1%磷酸溶液、乙腈-0.05%磷酸溶液、乙腈-0.2%磷酸溶液）、柱温（25、30、35℃）、流速（0.9、1.0、1.1 mL·min^-1）进行考察，确定测定色谱条件。经研究结果分析，标准汤剂仅有取样量、提取时间和溶剂用量较饮片稍有改动，其余条件与饮片相同。

在响应面考察中，飞龙掌血茎标准汤剂影响因素的主次顺序为：二煎溶剂倍量（B）>二煎煎煮时间（D）>头煎溶剂倍量（A）>头煎煎煮时间（C）。二煎影响因素大于头煎，其原因可能是头煎过程中，成分已达到最大溶出水平，饮片内外的成分含量在水中达到动态平衡，滤除头煎溶液，重新加水后，由于浓度差，大部分成分都能转移到水中，而且随着煎煮时间的延长，成分更容易分解。因此，二煎影响因素较大。

云南省中药材标准中并没有飞龙掌血茎含量测定相关标准^[1]，本课题组前期运用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱联用技术，对飞龙掌血茎饮片进行了化学成分鉴定，多为生物碱类和香豆素类。各文献也报道了飞龙掌血中主要含有香豆素、生物碱、萜类、黄酮、酚酸等^[2]，其中香豆素和生物碱是飞龙掌血中含量最多的化学物质，同时也是其发挥药理作用的重要部分。飞龙掌血中的香豆素类成分毛两面针素对骨关节炎有很好的抗炎作用，其能够改善Ranklin诱导的破骨细胞生成，延缓关节软骨的侵蚀，能预防和改善骨关节炎^[28-29]。毛两面针素在飞龙掌血中含量较高，水溶性较好^[30]；且性质稳定，故本研究选择毛两面针素评价和反映饮片-标准汤剂的量值传递情况以及相关工艺的优化。

飞龙掌血茎饮片指纹图谱中应呈现11个共有峰，标准汤剂指纹图谱中应呈现8个共有峰，通过对照品指认了饮片、标准汤剂中的峰1、2、4、6、11。饮片中的8个共有峰在标准汤剂指纹图谱中得到了有效的转移，其余3个峰可能是含量较低或在煎煮过程中高温分解或水解未转移到标准汤剂中。

15批标准煎液出膏率的范围为7.40%～11.76%，均值为9.29%，以均值加减3倍SD来规定出膏率的范围为5.46%～13.12%；以均值上下浮动30%来规定出膏率的范围为6.05%～12.08%。无论取均值±3×SD范围还是均值±30%范围，实验结果均在范围内；标准汤剂中毛两面针素含量的实测值在2.15%～6.05%，虽然其最大值不在均值±30%范围内，但所有结果仍在均值±3×SD范围内；毛两面针素实测转移率在32.32%～82.58%，虽然其最大值超过了均值±30%上限，但所有结果仍在均值±3×SD范围内，转移率较为稳定。标准汤剂定量测定和转移率结果揭示，毛两面针素从饮片-标准汤剂得到了有效的转移。

基金

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国家自然科学基金项目(82104067)
云南省重大科技专项计划项目(202102AA310027)
云南省高等学校重点实验室建设计划项目(2019YGZ03)
云南省南药可持续利用研究重点实验室开放课题项目(202105AG070012XS23024)

参考文献

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文献

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李宗民，朱浩东，于丹，等. 基于多元统计学分析葛根指纹图谱研究［J］. 辽宁中医药大学学报，2020，22（11）：50-53.

［28］

XU Y，XUE S，ZHANG T，et al. Toddalolactone protects against osteoarthritis by ameliorating chondrocyte inflammation and suppressing osteoclastogenesis［J］. Chin Med，2022，17（1）：18.

［29］

NI J，ZHAO Y，SU J，et al. Toddalolactone protects lipopolysaccharide-induced sepsis and attenuates lipopolysaccharide-induced inflammatory response by modulating HMGB1-NF-κB translocation［J］. Front Pharmacol，2020，11：109.

［30］

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2025年第43卷第10期

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doi: 10.13193/j.issn.1673-7717.2025.10.028

首发时间：2026-10-30
出版时间：2025-10-10

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国家自然科学基金项目(82104067)

云南省重大科技专项计划项目(202102AA310027)

云南省高等学校重点实验室建设计划项目(2019YGZ03)

云南省南药可持续利用研究重点实验室开放课题项目(202105AG070012XS23024)

作者信息

^1.云南中医药大学中药学院，云南昆明 650500

^2.云南省高校外用给药系统与制剂技术研究重点实验室，云南昆明 650500

^3.云南省南药可持续利用研究重点实验室，云南昆明 650500

^4.云南省傣医药与彝医药重点实验室，云南昆明 650500

^5.濮阳市中医医院，河南濮阳 457000

^6.云南神威施普瑞药业有限公司，云南楚雄 675000

通讯作者:

柯瑾（1980-），女，云南昆明人，副教授，硕士研究生导师，硕士，研究方向：中药药剂。E-mail：63918441@qq.com。

参考文献

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https://castjournals.cast.org.cn/joweb/zhzyyxk/CN/10.13193/j.issn.1673-7717.2025.10.028

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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TxT

产地	饮片批号	产地	饮片批号
云南寻甸	Fl2112201	云南禄丰	Fl2112231
	Fl2112202		Fl2112232
	Fl2112203		Fl2112233
云南双柏	Fl2112211	云南易门	Fl2112241
	Fl2112212		Fl2112242
	Fl2112213		Fl2112243
云南昆明	Fl2112221
	Fl2112222
	Fl2112223

产地

饮片批号

产地

饮片批号

云南寻甸

Fl2112201

云南禄丰

Fl2112231

Fl2112202

Fl2112232

Fl2112203

Fl2112233

云南双柏

Fl2112211

云南易门

Fl2112241

Fl2112212

Fl2112242

Fl2112213

Fl2112243

云南昆明

Fl2112221

Fl2112222

Fl2112223

编号	相似度	编号	相似度
S1	0.805	0.992	S9	0.996	0.999
S2	0.720	0.992	S10	0.991	0.998
S3	0.719	0.992	S11	0.995	0.997
S4	0.992	0.997	S12	0.995	0.996
S5	0.971	0.996	S13	0.995	0.998
S6	0.983	0.996	S14	0.993	0.999
S7	0.989	0.996	S15	0.996	0.998
S8	0.996	1.000

编号

相似度

编号

相似度

饮片

标准汤剂

饮片

标准汤剂

0.805

0.992

0.996

0.999

0.720

0.992

S10

0.991

0.998

0.719

0.992

S11

0.995

0.997

0.992

0.997

S12

0.995

0.996

0.971

0.996

S13

0.995

0.998

0.983

0.996

S14

0.993

0.999

0.989

0.996

S15

0.996

0.998

0.996

1.000

编号	溶剂倍量/（倍）	煎煮时间/（min）	Y	Z
1	14	12	30	20	-1.482	0.349
2	12	8	40	20	2.139	0.826
3	10	10	20	20	2.768	0.909
4	12	10	30	20	-4.130	0.000
5	10	10	30	10	-3.410	0.095
6	10	10	40	20	1.170	0.698
7	12	12	30	10	3.010	0.941
8	12	12	20	20	0.653	0.630
9	12	8	30	10	-0.873	0.429
10	14	10	20	20	0.087	0.556
11	12	10	20	10	0.431	0.601
12	14	8	30	20	2.679	0.897
13	12	10	20	30	1.980	0.805
14	12	10	30	20	1.783	0.779
15	12	12	40	20	-0.235	0.513
16	12	10	30	20	2.895	0.926
17	12	10	40	30	3.460	1.000
18	12	10	30	20	0.687	0.635
19	12	10	40	10	-0.960	0.418
20	14	10	30	10	-2.132	0.263
21	10	10	30	30	-3.247	0.116
22	14	10	40	20	2.679	0.897
23	10	8	30	20	-1.850	0.300
24	14	10	30	30	-2.341	0.236
25	12	8	20	20	-0.970	0.416
26	10	12	30	20	1.710	0.769
27	12	12	30	30	2.966	0.935
28	12	8	30	30	-0.332	0.500
29	12	10	30	20	0.964	0.671

编号

溶剂倍量/（倍）

煎煮时间/（min）

头煎

二煎

头煎

二煎

-1.482

0.349

2.139

0.826

2.768

0.909

-4.130

0.000

-3.410

0.095

1.170

0.698

3.010

0.941

0.653

0.630

-0.873

0.429

0.087

0.556

0.431

0.601

2.679

0.897

1.980

0.805

1.783

0.779

-0.235

0.513

2.895

0.926

3.460

1.000

0.687

0.635

-0.960

0.418

-2.132

0.263

-3.247

0.116

2.679

0.897

-1.850

0.300

-2.341

0.236

-0.970

0.416

1.710

0.769

2.966

0.935

-0.332

0.500

0.964

0.671

方差来源	平方和	自由度	均方	F值	P值
模型	2.2	14	0.157 0	22.20	<0.000 1
A	0.093 8	1	0.093 8	13.26	0.002 7
B	0.162 9	1	0.162 9	23.03	0.000 3
C	0.012 2	1	0.012 2	1.72	0.210 8
D	0.119 4	1	0.119 4	16.88	0.001 1
AB	0.016 7	1	0.016 7	2.36	0.146 4
AC	0.025 1	1	0.025 1	3.55	0.080 8
AD	0.176 3	1	0.176 3	24.92	0.000 2
BC	0.144 5	1	0.144 5	20.43	0.000 5
BD	0.002 8	1	0.002 8	0.397 6	0.538 5
CD	0.005 6	1	0.005 6	0.798 7	0.386 6
A²	0.967 0	1	0.967 0	136.71	<0.000 1
B²	0.682 9	1	0.682 9	96.54	<0.000 1
C²	0.049 2	1	0.049 2	6.96	0.019 5
D²	0.006 6	1	0.006 6	0.931 4	0.350 9
残差	0.099 0	14	0.007 1	5.77	0.052 9
失拟项	0.092 6	10	0.009 3
纯误差	0.006 4	4	0.001 6
总和	2.3	28

方差来源

平方和

自由度

均方

F值

P值

模型

2.2

0.157 0

22.20

<0.000 1

0.093 8

13.26

0.002 7

0.162 9

23.03

0.000 3

0.012 2

1.72

0.210 8

0.119 4

16.88

0.001 1

0.016 7

2.36

0.146 4

0.025 1

3.55

0.080 8

0.176 3

24.92

0.000 2

0.144 5

20.43

0.000 5

0.002 8

0.397 6

0.538 5

0.005 6

0.798 7

0.386 6

A²

0.967 0

136.71

<0.000 1

B²

0.682 9

96.54

<0.000 1

C²

0.049 2

6.96

0.019 5

D²

0.006 6

0.931 4

0.350 9

残差

0.099 0

0.007 1

5.77

0.052 9

失拟项

0.092 6

0.009 3

纯误差

0.006 4

0.001 6

总和

2.3

编号	标准汤剂出膏率/（%）	毛两面针素含量/（%）	指标成分转移率/（%）	编号	标准汤剂出膏率/（%）	毛两面针素含量/（%）	指标成分转移率/（%）
S1	11.76	0.75	3.46	54.19	S11	9.35	0.64	4.18	60.87
S2	11.54	0.84	3.21	44.30	S12	9.41	0.63	4.18	62.86
S3	11.29	0.87	3.30	43.08	S13	8.94	0.66	6.05	82.56
S4	7.40	0.49	2.15	32.32	S14	9.00	0.67	5.57	75.20
S5	8.74	0.43	2.70	54.39	S15	8.96	0.63	4.50	63.93
S6	7.85	0.44	2.42	43.64	最大值	11.76	0.87	6.05	82.58
S7	9.11	0.44	3.95	82.58	最小值	7.40	0.43	2.15	32.32
S8	8.59	0.52	4.39	71.85	均值	9.29	0.61	3.85	58.98
S9	9.00	0.60	3.88	57.81	SD值	1.28	0.14	1.06	14.78
S10	8.40	0.61	3.98	55.15	均值±30%	6.05~12.08	0.43~0.80	2.70~5.02	41.29~76.68
					均值±3×SD	5.46~13.12	0.21~1.02	0.67~7.06	14.63~103.33

编号

标准汤剂出
膏率/（%）

毛两面针素含量/（%）

指标成分转
移率/（%）

编号

标准汤剂出
膏率/（%）

毛两面针素含量/（%）

指标成分转
移率/（%）

饮片

标准汤剂

饮片

标准汤剂

11.76

0.75

3.46

54.19

S11

9.35

0.64

4.18

60.87

11.54

0.84

3.21

44.30

S12

9.41

0.63

4.18

62.86

11.29

0.87

3.30

43.08

S13

8.94

0.66

6.05

82.56

7.40

0.49

2.15

32.32

S14

9.00

0.67

5.57

75.20

8.74

0.43

2.70

54.39

S15

8.96

0.63

4.50

63.93

7.85

0.44

2.42

43.64

最大值

11.76

0.87

6.05

82.58

9.11

0.44

3.95

82.58

最小值

7.40

0.43

2.15

32.32

8.59

0.52

4.39

71.85

均值

9.29

0.61

3.85

58.98

9.00

0.60

3.88

57.81

SD值

1.28

0.14

1.06

14.78

S10

8.40

0.61

3.98

55.15

均值±30%

6.05~12.08

0.43~0.80

2.70~5.02

41.29~76.68

均值±3×SD

5.46~13.12

0.21~1.02

0.67~7.06

14.63~103.33

主成分	初始特征值	方差贡献率/（%）	累计贡献率/（%）
PC1	7.964	72.403	72.403
PC2	2.480	94.944	94.944

主成分

初始特征值

方差贡献率/（%）

累计贡献率/（%）

PC1

7.964

72.403

PC2

2.480

94.944

峰号	成分	峰号	成分
1	0.932	-0.201	7	0.991	-0.020
2	0.885	0.326	8	-0.528	0.836
3	0.962	0.113	9	0.932	0.301
4	-0.626	0.686	10	0.973	0.145
5	0.977	0.158	11	0.980	0.173
6	-0.068	0.992

峰号

成分

峰号

成分

0.932

-0.201

0.991

-0.020

0.885

0.326

-0.528

0.836

0.962

0.113

0.932

0.301

-0.626

0.686

0.973

0.145

0.977

0.158

0.980

0.173

-0.068

0.992