随着社会老龄化的到来, 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD) 等衰老相关疾病已经成为我国面临的重要公共卫生和社会问题, 但目前所有的临床药物均未能成功逆转AD的病理进程。经过多年的研究, 我国传统中药在认知功能改善方面积累了大量的临床实践经验, 相较于针对单分子靶点的西药, 中药可通过多条分子通路改善AD的认知障碍, 在防治AD药物的研发中体现出了巨大潜力。本综述基于AD发病的中西医机制认识, 总结了经典中药方及其有效成分在改善AD相关认知功能障碍方面的效应, 并阐述了典方及疗效化合物改善认知的作用靶点和相关分子机制。深入探索中药及有效成分发挥作用的多条分子通路, 采用多靶点的干预对于AD防治具有重要意义。

新冠肺炎的大暴发再次引起了人们对于病毒感染性疾病的关注, 研发抗病毒药物对于已知的和可能新出现的病毒都具有重要意义。近年来, 多肽和蛋白质类药物正成为抗病毒药物研发领域的热点, 噬菌体展示技术作为筛选发现多肽和蛋白类药物的有力工具也日益被学术界和工业界所关注。本文介绍了噬菌体展示技术的基本原理, 对常用于抗病毒药物发现的噬菌体展示文库进行了总结, 对目前噬菌体文库来源的抗病毒药物的不足及其相关改进策略进行了讨论, 并对噬菌体展示技术在抗病毒药物开发中的应用前景进行了展望。

细胞衰老的显著特征是永久的细胞周期停滞, 同时伴随细胞代谢、表观遗传调控等变化。阿尔茨海默症(AD) 是一种常见的神经退行性疾病, 主要症状为记忆力减退和认知功能障碍。大量研究表明, 星形胶质细胞和小胶质细胞等中枢神经系统细胞的衰老与AD的发生密切相关, 抑制脑细胞衰老有望为AD的防治提供新思路和治疗策略。本文综述了脑细胞衰老在AD发病中的潜在作用及机制、脑细胞之间的相互影响, 从而为AD病理机制研究及抗AD药物研发提供新的方向。

随着我国人口老龄化进程的加快, 老年性疾病阿尔茨海默症(Alzheimer's disease, AD) 对社会和家庭的影响日益突出。AD是由多种机制共同影响所致, 且发病机制仍未完全阐明, 临床的治疗手段大多数采用单一治疗方法, 主要以改善症状为主, 难以逆转疾病的进程。所以开发出既能改善症状又能逆转疾病进程的药物成为极其迫切的临床需求。越来越多的研究发现中医药在防治AD中具有重要作用。天然产物具有结构新颖、多靶点和活性多样的优势, 可作为治疗AD的先导化合物的重要来源。本文对目前临床上正在进行的主要治疗方法和中药中天然成分治疗的研究进展进行概述, 结合传统中医药治疗的优势为后续对AD的临床治疗提供参考。

积雪草酸是来自天然植物的乌苏烷型五环三萜, 具有多种药理活性, 例如抗肿瘤、降糖、抗炎、抗菌等。由于溶解性差、生物利用度低等限制了积雪草酸在临床上的广泛应用。为了克服这些缺点, 学者们对其进行了大量的结构修饰与改造, 发现了大量结构新颖、活性优良的积雪草酸衍生物。本文综述了积雪草酸近20年来的结构修饰、生物活性、构效关系及作用机制的相关研究进展, 以期为积雪草酸类药物开发提供参考。

冠状病毒(coronavirus, CoVs) 是一类广泛存在、可感染人畜并引起严重急慢性呼吸道系统疾病的病原体。其中危害较为严重的是2003年暴发的SARS-CoV、2012年发现并广泛传播的MERS-CoV和2019年底暴发并持续至今的SARS-CoV-2, 这些都属于β冠状病毒属。以冠状病毒主蛋白酶(M^pro, 3CL^pro) 为靶点的拟肽类抑制剂因其具有广谱和抗病毒效力强等优点而备受关注。本文针对拟肽类冠状病毒主蛋白酶抑制剂进行综述, 根据设计策略中“warheads” (弹头) 的不同进行分类, 对抑制剂的分子结构、活性及其设计思路进行分析和总结, 对冠状病毒抑制剂的进一步设计与开发具有重要的参考价值。

病毒作为一种主要的感染源能够感染从细菌、植物、动物到人类的所有生物体。由病毒引起的传染性疾病对人类健康及经济活动造成了巨大的威胁和损害。衔接子相关蛋白激酶1 (AAK1) 是丝氨酸/苏氨酸激酶的Ark1/Prk1家族的成员, 也是调控AP-2蛋白μ2亚基T156磷酸化的特异性关键激酶。过去, 人们一直把对AAK1的调控作为治疗神经疼痛的可行性生物靶点。近期科学家们发现抑制AAK1可以调控胞吞作用, 进而抑制病毒入侵细胞。因此, AAK1可能是抗病毒的一个潜在靶点。本文综述了小分子AAK1抑制剂在抗病毒领域的研究进展, 剖析未来的研究方向和挑战, 为开发靶向AAK1的抗病毒药物提供新思路。

冠心病是全球第一的死亡原因, 其主要特征是冠状动脉粥样硬化使管腔狭窄或闭塞导致心肌缺血、缺氧或坏死而引发的心脏病, 冠心病与脂质调节异常、慢性炎症、内皮功能障碍等密切相关。目前用于诊断冠心病的心肌酶和高、低密度脂蛋白等只能部分解释冠心病的风险。尚不能有效地检测冠心病患者早期的高危因素, 迫切需要新的技术发现与冠心病密切相关的疾病标志物。脂质分子是心肌细胞结构重要组成部分, 在心脏功能方面扮演重要角色。脂质组学是高通量研究脂质组成的一门新兴学科。近年脂质组学研究显示, 特定种类的脂类, 如神经酰胺、鞘氨醇、溶血磷脂酸、氧化脂质等, 与冠心病的临床分型及特征相关。此外动物模型中心脏、脂肪、肝脏等相关组织样本脂质组学研究成果也为脂质生物标志物提供了新的信息, 脂质组学技术正越来越多地被用于评估冠心病的风险等相关研究。本文对利用脂质组学技术探究冠心病脂质小分子标志物以及相关治疗靶点、药物研发策略进行综述。

肽类药物因其高特异性、高效性及低毒性的特点, 对多种疾病的治疗具有显著优势。目前已有80余种肽类药物进入市场, 2019年全球销售额超500亿美元。然而, 肽类药物通常分子质量较大、亲水性较强, 消化道稳定性差, 加之诸多生理屏障, 导致其口服生物利用度极低, 大多只能通过注射给药。但相较于患者依从性强的口服制剂, 注射剂使用不便, 注射后易出现不良反应, 故而近年大量研究集中于提高肽类药物的口服生物利用度, 部分递送技术如Eligen™、Axcess™等已成功应用于治疗性肽的口服制剂, 并推动相关口服制剂实现上市及临床使用。本综述围绕肽类药物的口服递送, 总结归纳近年来最新研究进展以及相关专利技术应用, 促进口服肽类制剂的研发和临床转化。

囊性纤维化(cystic fibrosis, CF) 是一种慢性、可致命的、多发于高加索人种的常染色体隐性遗传病, 是由囊性纤维化跨膜电导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR) 基因突变导致CFTR蛋白功能缺陷或缺失所致。囊性纤维化在临床通常伴随多种并发症, 患者主要表现为呼吸系统异常, 如肺部反复感染, 最终导致肺功能衰竭而死亡。近年来, 随着对囊性纤维化发病机制研究的不断深入, 其有效治疗方法有了迅速发展。本文就囊性纤维化的致病原因、给药方法、药物作用机制及新型囊性纤维化治疗药物的研究进行综述, 为囊性纤维化的治疗提供参考。

鼻喷剂可治疗鼻炎等局部疾病, 在包括疫苗免疫在内的全身疾病治疗中也发挥了重要作用。鼻喷剂作为药械组合产品, 为确保质量, 常使用喷雾模式作为鼻喷剂的质量表征指标。羽流几何不仅可与喷雾模式相结合评估鼻喷剂性能, 同时也可预测鼻喷剂的鼻腔沉积。本文对鼻喷剂的喷雾模式与羽流几何的定义、测量方法及其与鼻腔沉积的相关性进行了系统综述。对喷雾模式与羽流几何的测量参数进行了界定。明确了处方、装置与触发参数等因素对于喷雾模式与羽流几何的影响, 并分析了各项参数与鼻腔沉积的相关性。同时, 根据喷雾羽流的尺度与形状对测量参数进行了分类。羽流角度与药物在鼻腔内的沉积相关性较大。羽流角度较小的射流状羽流可增加鼻喷剂在鼻腔弯曲解剖结构中的导航能力, 有利于鼻腔沉积。这使得通过适当增加鼻喷剂黏度与触变性以增加鼻喷剂在鼻腔中的沉积成为可能。本综述旨在为我国高质量鼻喷剂的研发提供理论基础。

随着对肠道微生物研究的深入, 肠道菌群对人类健康的影响受到关注, 已成为当前生命科学和医学的研究热点, 也被认为是疾病治疗的重要靶点。益生元可调节肠道菌群的组成和功能从而改善宿主健康。碳水化合物是最基本的益生元, 其独特的理化性质及肠道菌调节能力可在实现药物靶向递送的同时又能促进肠道健康, 从而对疾病的治疗发挥积极作用。本文对不同种类的益生元及其肠道菌调节机制进行了阐述, 介绍了碳水化合物类益生元在药物递送系统中的研究进展, 并对其应用前景进行展望, 以期为相关研究提供参考。

肥胖已成为糖尿病和内分泌紊乱等疾病的重要诱导因素, 抗肥胖治疗也成为研究热点。抑制脂肪合成并促进脂肪分解是药物抗肥胖治疗的重要方式, 随着对机体脂肪组织分布、形态和功能的深入研究, 含有多腔室脂滴和丰富线粒体的棕色脂肪组织引起了人们关注。此外, 一种与棕色脂肪细胞形态和功能相似的米色脂肪细胞也引起了人们极大的兴趣, 该类细胞可在外界刺激或褐变剂诱导下由白色脂肪细胞转化而来, 称为“白色脂肪棕色化”。在此过程中, 细胞内促能量消耗的蛋白表达增加, 使脂肪细胞功能由储能转为耗能, 从而增加体内过多能量消耗, 减少脂质堆积, 因此, 诱导白色脂肪组织棕色化为治疗肥胖带来了新思路。但褐变剂的系统给药存在对非靶组织如心脏、中枢神经系统等产生不良反应的风险, 限制了其在诱导白色脂肪棕色化中的应用。通过构建靶向白色脂肪组织的药物递送系统实现褐变剂靶向给药可降低其不良反应, 提高生物利用度。本文将从白色脂肪棕色化的机制、常用褐变剂及诱导白色脂肪组织棕色化的靶向递送载体等方面进行全面综述。

金线兰(Anoectochilus roxburghii) 是兰科开唇兰属药用物种, 其全草的鲜品或干品可作为“金线莲”药材使用, 具有降血糖、降血脂、抗炎镇痛等功效。在广东、福建等地区的食药用历史悠久, 延续至今。随着“药食同源”概念的广泛认同、市场需求激增, 野生金线兰资源已远不能满足供应, 处于濒危状态, 市场价格逐年推高。建立人工繁育体系, 是缓解野生资源紧缺的重要手段。明确金线兰资源特征, 则是优选种质资源、优化繁育体系、建立有效评价标准的关键依据。因此, 本文从本草考证、资源分布、资源鉴定、化学成分特征与药理活性、繁育技术进行综述, 旨在为我国金线兰资源可持续利用和后续深入研究提供参考。

本研究在明确姜黄素有效治疗肥胖小鼠溃疡性结肠炎的基础上, 评价其对结肠炎肥胖小鼠记忆性滤泡性T细胞(memory follicular T cells, mTf) 的调控作用。经江西中医药大学实验动物伦理委员会审议同意并批准后, 将40只瘦素突变型(ob/ob) 雄性小鼠随机分为对照组、对照+ 姜黄素组、模型组和模型+ 姜黄素组, 每组10只。采用葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS) 诱导模型组和模型+ 姜黄素组小鼠建立慢性溃疡性结肠炎模型后, 对照+ 姜黄素组和模型+ 姜黄素组小鼠灌胃给予姜黄素(200 mg·kg^-1·d^-1)。麻醉处死小鼠, 观察各组小鼠结肠质量、结肠质量指数、结肠长度等情况; HE染色后进行病理损伤评分; 流式细胞术检测小鼠脾脏记忆性滤泡性辅助性T细胞(memory follicular helper T cells, mTfh) 和记忆性滤泡性调节性T细胞(memory follicular regulatory T cells, mTfr) 细胞亚群水平; 酶联免疫吸附法检测结肠组织中白介素-10 (interleukin-10, IL-10) 和白介素-17A (interleukin-17A, IL-17A) 的表达量。结果表明, 姜黄素可明显增加结肠炎肥胖小鼠的体重和结肠长度, 降低结肠重量、结肠质量指数和病理评分(P < 0.05); 并且姜黄素可显著降低中枢型记忆性滤泡性T细胞(central memory follicular T cells, cmTf)、mTfh1、mTfh17细胞水平和促炎细胞因子IL-17A含量(P < 0.01), 升高效应型记忆性滤泡性T细胞(effector memory follicular T cells, emTf)、mTfr细胞水平及抑炎细胞因子IL-10含量(P < 0.05, P < 0.01)。因此, 姜黄素治疗肥胖小鼠结肠炎, 可能是通过调控mTf细胞亚群平衡来实现的。

本文通过网络药理学和实验验证结合, 探讨血栓通主要皂苷成分改善脑微循环障碍的作用机制。从网络药理数据库获取血栓通主要三七皂苷成分结构式, 预测药物潜在作用靶点和脑微循环障碍疾病靶点, 将药物与疾病的交集靶点导入STRING在线分析平台和Cytoscape软件构建蛋白质互作分析图及拓扑图, 获得作用核心靶点, 并进行GO和KEGG富集分析; 通过免疫组织染色检测大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R) 模型大鼠大脑缺血侧皮层血小板内皮细胞黏附分子-1 (PECAM-1/CD31) 的表达, RT-qPCR、Western blot检测MCAO/R模型大鼠缺血侧大脑皮层微血管药物作用潜在靶点基因的mRNA及蛋白表达水平。基于网络药理学, 获取242个血栓通潜在作用靶点, 425个脑微循环障碍疾病靶点, 得到35个交集靶点, 并筛选出蛋白激酶B (AKT1)、血管内皮生长因子A (VEGFA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (CASP3)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α (PIK3CA)、信号传导及转录激活蛋白-3 (STAT3) 等关键靶点。在MCAO/R大鼠中实验验证发现, 血栓通在48 mg·kg^-1剂量下, 可显著改善模型大鼠的神经行为损伤和脑微血管密度和形态; 并在脑微血管中下调AKT1、MMP-9的mRNA水平, 上调血管内皮细胞标志物CD31及磷酸化AKT、磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K) 蛋白表达水平和B淋巴细胞瘤-2/ Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2/Bax) 比值, 下调磷酸化STAT3、MMP-9、cleaved caspase-3的蛋白表达水平。结果表明血栓通可能通过调节脑微血管PI3K、AKT、MMP-9、STAT3、caspase-3相关信号通路改善缺血再灌注大鼠脑微循环障碍, 减轻神经功能损伤。本研究严格遵守实验动物在医学研究过程中应该遵守的所有伦理原则。

基于计算机辅助药物设计结合复杂网络分析的研究体系, 分析敦煌大补脾汤防治胃癌的潜在作用机制, 并通过功效分组探讨其组方规律的科学内涵。通过细胞实验研究大补脾汤冻干粉溶液对胃癌细胞增殖活性的影响; 利用TCMSP、TCMID数据库收集大补脾汤化合物成分, Swiss Target Prediction预测化合物潜在作用靶标, DrugBank、GeneCards、TTD、DisGeNET收集胃癌的潜在作用靶标, 通过STRING数据库分析潜在作用靶点的蛋白互作。DAVID数据库进行KEGG富集分析; 根据功效特点将大补脾汤分为温中组(干姜)、益气组(人参、甘草、白术)、养阴组(麦冬、五味子) 和降逆组(旋覆花) 4个功效配伍组, 利用Cytoscape分别构建“药味-潜在活性成分-关键靶点”网络, 分析功效分组配伍规律的科学内涵; 采用Schrödinger软件进行核心成分和核心靶点的分子对接验证, 并通过结合模式分析和结合自由能计算挖掘大补脾汤发挥防治胃癌作用的物质基础, 通过分子动力学模拟从动力学角度分析核心成药性靶点与代表潜在化合物的相互结合模式。细胞实验证实大补脾汤冻干粉溶液能够下调AGS胃癌细胞线粒体膜电位, 使细胞周期被阻滞在G₀/G₁期(P < 0.05), 抑制其增殖(P < 0.05)。大补脾汤所含4个功效组富集的通路主要分布于机体能量代谢、炎症-免疫系统调节和周期-凋亡功能3个模块, 各模块间通过共有靶标基因联结又各有侧重。分子对接结果显示, 化合物甘草素、槲皮素、山柰酚、异鼠李素、麦冬高异黄酮A等可能是大补脾汤起效的多靶点成分; 雌激素受体1、雄激素受体、ATP结合盒转运蛋白亚家族G2、表皮生长因子受体、糖原合酶激酶3β等靶点与各个潜在活性化合物之间的亲和力较好, 可能是大补脾汤防治胃癌的潜在作用靶点, 其中山柰酚与成药性靶点EGFR有较好结合能力, 具有较好的结合稳定性。本研究基于计算机辅助药物设计结合复杂网络分析策略初步揭示了大补脾汤辅助防治胃癌的物质基础和分子机制, 并探讨了大补脾汤不同功效组协同防治胃癌的科学内涵, 为其临床应用提供化学生物信息学依据。

本文旨在探讨酯蟾毒配基对人肝癌细胞增殖和迁移侵袭的影响及其相关机制。采用MTT比色法测定酯蟾毒配基对4种肝癌细胞的体外生长抑制作用, 划痕实验和Transwell实验用来评估酯蟾毒配基对MHCC-97H细胞的迁移和侵袭能力, 采用Western blot实验检测经不同浓度酯蟾毒配基处理后, MHCC-97H细胞内迁移侵袭相关蛋白的表达。结果表明, 酯蟾毒配基能明显抑制肝癌细胞的体外增殖能力, 其对MHCC-97H、HepG2、SK-Hep-1、Huh-7细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC₅₀) 值分别为0.55 ± 0.06、2.83 ± 0.24、5.25 ± 0.49、14.89 ± 2.28 μmol·L^-1; 酯蟾毒配基还能显著抑制MHCC-97H细胞的迁移和侵袭能力, 且具有显著的浓度依赖性。MHCC-97H细胞中的整合素α2 (integrin α2)、整合素α6 (integrin α6)、整合素β1 (integrin β1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinase 2, MMP2)、转录因子Twist的蛋白表达随着酯蟾毒配基的浓度增加而明显降低, 而E-钙黏蛋白(E-cadherin) 蛋白表达升高。此外, 研究发现酯蟾毒配基作用细胞后p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著降低。综上所述, 酯蟾毒配基明显抑制肝癌MHCC-97H细胞的体外增殖和迁移侵袭能力, 与调控细胞内迁移侵袭蛋白表达及PI3K/AKT信号通路相关。

探讨补肾养阴方药左归丸联合促性腺激素释放激素拮抗剂西曲瑞克调节SIRT1/P53/P21对卵巢储备功能下降(decreasing ovarian reserve，DOR)小鼠卵巢局部氧化应激反应的影响。所有动物实验均在暨南大学实验动物管理委员会的指导和标准下进行。以环磷酰胺(cyclophosphamide，CTX)诱导的DOR小鼠为实验对象，分别灌胃给予左归丸、西曲瑞克及两药联合治疗。治疗结束后，观察小鼠动情周期变化、血清性激素水平、氧化应激相关指标、生长生化因子水平及SIRT1/P53/P21的表达情况。结果显示，与模型组比较，左归丸和联合用药组可明显延长动情期、缩短动情间期，联合用药组更可明显缩短周期长度; 与模型组比较，各治疗组性激素相关指标检测均出现卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone，FSH)下降、雌二醇(estradiol，E₂)增高，氧化应激指标一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)、一氧化氮(nitric oxide，NO)及活性氧(reactive oxygen species，ROS)下降，生长生化因子指标脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor，BDNF)及生长分化因子9(growth differentiaction factor 9，GDF-9)浓度均明显上升，白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor，LIF)在各治疗组与模型组差异不显著; SIRT1/P53/P21免疫组化结果显示，与模型组相比，各治疗组SIRT1表达增加，P53和P21蛋白表达减少，其中联合用药组各项指标差异显著，效果最优。综上所述，西曲瑞克联合补肾养阴方药左归丸可通过调控SIRT1/P53/P21通路改善卵泡内的氧化应激反应，减少过氧化产物的产生，保护卵巢功能，从而调节卵巢激素的分泌，其疗效优于单用西曲瑞克或左归丸。

运用硅胶柱、凝胶柱和半制备高效液相色谱等方法对一株蒲公英内生真菌Epicoccum sorghinum 1-2发酵产物中的次级代谢产物进行分离纯化，通过核磁共振谱(NMR)及质谱(MS)等现代波谱分析方法进行化合物的结构解析，并采用滤纸片法测定化合物的抗菌活性。最终从E.sorghinum 1-2的发酵产物中分离鉴定了7个化合物，分别为(4R*，5R*，6S*)-4，5-二羟基-6-(6'-甲基水杨酸氧基)-2-甲氧基甲基-2-环己烯-1-酮(1)、(4R*，5R*，6S*)-4，5-二羟基-6-(6'-甲基水杨酸氧基)-2-甲基-2-环己烯-1-酮(2)、(4R，5R，6S)-4，5-二羟基-6-(6'-甲基水杨酸氧基)-2-羟基甲基-2-环己烯-1-酮(3)、(-)-gabosine E (4)、theobroxide (5)、3-氯代龙胆醇(6)和3-羟基苯甲醇(7)。其中化合物1~5是顶环氧菌素类化合物，化合物6和7是苯酚类化合物。化合物1和2为首次报道的新化合物，化合物6对金葡菌具有显著的抑菌作用。

利用硅胶柱色谱、凝胶柱、反向柱色谱和高效液相等手段对海绵共附生真菌Alternaria sp.F49在PDB培养基中的代谢产物进行分离纯化，从中分离得到了7个化合物。通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照，鉴定了化合物的结构分别为: (8R)-5-O-methyl-orcinotriol (1)、orcinotriol (2)、α-acetylorcinol (3)、3'-hydroxyalternariol 5-O-methyl ether (4)、altenusiol (5)、altenusin (6)和5'-methoxy-6-methyl-biphenyl-3，4，3'-triol (7)，其中(8R)-5-O-methyl-orcinotriol (1)是一个未见报道的新苯酚类化合物。体外抗氧化活性测定结果表明，化合物4~7具有强的DPPH自由基清除活性; 化合物1~7具有强的ABTS自由基清除活性。

基于多靶点药物设计思想，以对氨基水杨酸(PAS)为母核，选用不同的连接子将PAS、异烟酸和氟喹诺酮三种结构单元缀合，设计了未见文献报道的目标分子TM1和TM2; 经多步反应合成了16个目标分子，测试了目标分子抗结核及抗人致病菌的活性。测试结果表明，TM2a抗结核活性强于所测试的氟喹诺酮，TM1a与阳性对照药物氟喹诺酮中活性最强的克林沙星相当; TM1a对所测试菌株都显示最强抑制活性，TM1b与TM2a对多数菌株显示很强抑制活性，TM1h/2h对部分菌株具有强抑制活性; TM1a/1h对金葡菌ATCC14125的抑制活性远强于所测试的氟喹诺酮，值得进一步研究。溶血性实验结果表明，高活性分子TM1a和TM2a分别在8及32μg·mL^-1浓度下表现出相对安全性。本研究首次合成了PAS为母核的三分子药效团拼接的新型分子，部分分子具有非常强的抑菌活性，为抗菌药物的研发提供了新的思路。

采用大孔吸附树脂、反相硅胶、葡聚糖凝胶及微孔树脂等多种色谱技术，从谷精草水提取中分离得到10个化合物。通过NMR、ESI-MS、HR-ESI-MS、UV、IR等波谱技术并结合化学方法对其进行了结构鉴定，分别为6-methoxyquercetin-3-O-(2'''-vanilloyl)-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside (1)、丁香脂素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(2)、芦丁(3)、1-O-feruloylglycerol (4)、邻苯二酚(5)、吐叶醇(6)、β-D-(6-O-trans-feruloyl) fructofuranosyl-α-D-O-glucopyranosied (7)、二氢阿魏酸(8)、鸟嘌呤核苷(9)和槲皮素-3-O-β-D-龙胆二糖苷(10)，化合物1为新化合物，化合物2、4~10为首次从谷精草属植物中分离得到，化合物3为首次从该植物中分离得到。分子对接结果显示化合物1具有潜在的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)转换酶抑制活性。体外抗炎活性实验证实，化合物1在1、10和100 μmol·L^-1能显著抑制脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞中TNF-α的升高，具有较好的体外抗炎活性。

建立HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定及化学模式识别的荆芥穗药材质量控制评价方法，为药材的质量控制提供依据。采用高效液相色谱法对收集得到的25批次荆芥穗药材进行化学成分分析，建立指纹图谱共有模式，共标定22个共有色谱峰，其相似度均在0.9以上。通过聚类分析将样品按不同产地分为3类; 主成分分析与聚类分析结果一致; 最后采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出了不同批次荆芥穗药材的5个差异标志物，通过对照品指认，确定了9号峰为橙皮苷、10号峰为迷迭香酸、13号峰为金合欢素-7-O-葡萄糖、14号峰为槲皮素、20号峰为胡薄荷酮。本研究建立的质量评价方法稳定可靠，适用于荆芥穗药材的质量控制。

本研究基于生理药代动力学理论, 建立和验证盐酸莫西沙星的体内药代模型, 计算不同剂型在体内包括静脉血及肺、脾等不同器官的药物浓度-时间曲线, 通过相应药代动力学参数结果与相关病原菌的最小抑菌浓度的比较, 量化评价本品种及其制剂的有效性水平。结果表明, 盐酸莫西沙星制剂在相应器官的抗感染有效性水平基本一致, 品种制剂的生理药代动力学模型可以更为准确地描述抗感染药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程, 适用于这类药物的有效性评价工作, 为相应科研与科学监管工作提供有力的研判依据。

本文采用共焦显微拉曼光谱技术, 以注射用培美曲塞二钠为模型药物, 首次探究冻干制剂药物空间分布均匀性的评价方法。对冻干物一定区域进行拉曼光谱扫描, 先采用经典方法(夹峰法) 以药物和辅料的特征拉曼光谱峰进行成像, 由于冻干制剂中药物在辅料中高度分散, 经典方法无法对二者的分布进行区分, 难以评价均匀性。随后采用“特征峰强度比值法”, 以药物-辅料特征拉曼光谱峰的相对强度进行成像, 利用药物-辅料相对含量评价药物分布均匀性。方法学验证结果表明, 药物-辅料拉曼峰相对强度与相对含量线性关系良好(r² > 0.99), 方法精密度和回收率可以满足拉曼成像均匀性分析要求。以该方法对5个厂家注射用培美曲塞二钠进行拉曼成像, 结合拉曼峰相对强度频次分布直方图对药物分布均匀性进行评价, 结果表明不同产品均匀性分布特征存在明显差异, 原研产品药物分布均匀性相对较好。本研究为冻干制剂药物分布均匀性提供了可靠的方法, 有助于产品的质量评价和工艺优化。

采用随机、开放、空腹、单剂量、两序列、两周期、双交叉给药试验设计, 单次口服依非韦伦试验制剂或参比制剂200 mg, 用液相-二级质谱联用法(LC-MS/MS法) 测定健康受试者血浆中依非韦伦的药物浓度。使用WinNonLin8.1软件计算依非韦伦主要药动学参数, 并评价生物等效性。试验制剂和参比制剂72 h内主要药动学参数: t_max分别为2.574 ± 0.871和2.808 ± 0.912 h; C_max分别为1 586.732 ± 424.538和1 549.518 ± 366.086 ng·mL^-1; AUC_{0-72 h}分别为28 464.672 ± 5 682.518和27 828.826 ± 5 082.487 h·ng·mL^-1; t_1/2分别为63.524 ± 26.037和58.748 ± 20.950 h; λ_z分别为0.013 ± 0.006和0.013 ± 0.005 h^-1。主要生物等效性指标: C_max的90%置信区间为95.62%~107.15%, 几何均值比为101.22%; AUC_{0-72 h}的90%置信区间为100.43%~104.38%, 几何均值比为102.38%。结果表明, 受试药物和参比药物的主要药代动力学参数相近, 且两种制剂具有生物等效性。本次人体生物等效性临床研究经安徽医科大学第二附属医院药物临床试验伦理委员会核准(伦理批件号: YW2021-110)。

吡罗昔康具有多晶型现象。不同的晶型可呈现不同的理化性质与生物活性, 深入探讨分子间相互作用对于揭示多晶型的形成机制及性质差异至关重要。本论文利用Hirshfeld表面分析和半经验方法计算分析了7种吡罗昔康的多晶型中分子间相互作用, 结果显示, Hirshfeld表面分析方法能清晰直观地揭示各分子间相互作用, 其中H…H, O…H/H…O和N…H/H…N相互作用占据总能量的95%, 不同晶型的作用力的比例和分布存在差异。原子间库伦-伦敦-泡利(AA-CLP) 能量计算表明, 水合物的晶格能明显低于无水晶型的晶格能, 在具体的能量分布中, 色散力的贡献最为突出。进一步的相互作用能分析发现: 在以吡罗昔康分子为中心3.8 Å距离范围内, 不同晶型的吡罗昔康分子与周围分子存在不同的相互作用能。

为了对TSD-1原料药中有关物质进行定量分析, 本文采用核磁共振波谱仪和超高效液相-质谱联用仪对制备的杂质进行结构确证, 并建立一种高效液相色谱法测定TSD-1中有关物质。采用Agilent ZORBAX Eclipe XDB-C8 (250 mm × 4.6 mm, 5 µm) 色谱柱, 以50 mmol·L^-1乙酸铵溶液(乙酸调节至pH 5.8) 为流动相A, 乙腈为流动相B, 梯度洗脱, 流速1.0 mL·min^-1, 检测波长240 nm, 柱温30 ℃。结果表明, TSD-1与杂质A、杂质B、TSD-D和TSD-F的色谱峰均能良好分离, 并分别在0.242~48.4 µg·mL^-1 (r = 1.000 0)、0.244~9.75 µg·mL^-1 (r = 0.999 9)、0.244~4.80 µg·mL^-1 (r = 0.999 9)、0.254~1.02 µg·mL^-1 (r = 0.999 9)、0.247~0.987 µg·mL^-1 (r = 0.999 9) 范围内线性关系良好(n = 7)。杂质A、杂质B、TSD-D和TSD-F的定量下限分别为0.244、0.244、0.254、0.247 μg·mL^-1; 各杂质的平均回收率在99.08%~103.00%之间, 准确度高。3批TSD-1原料药中TSD-D、TSD-F均未检出, 杂质A、杂质B检出量均未超限。建立的HPLC方法简便、准确, 适合TSD-1的有关物质测定, 可为TSD-1的后续研究与开发提供有价值的参考。

越来越多的研究表明, 间歇性禁食(intermittent fasting, IF) 可以改善与肥胖和糖尿病相关的风险因素, 并且可以成为健康生活方式的一部分。本研究以代谢组学技术为基础, 通过检测小鼠粪便代谢物探讨在正常生理情况下, 间歇性禁食对小鼠粪便代谢的影响。实验方案经上海中医药大学实验动物中心福利与伦理委员会审查, 符合实验动物福利与伦理相关规范。实验采用24 h隔日禁食法, 对小鼠进行持续10周的间歇性禁食, 并收集5周和10周时小鼠的粪便。结果表明, IF没有显著改变小鼠的体重和饮食饮水量, 但可降低小鼠的空腹血糖水平; 通过代谢组学分析, 发现在IF第5周时就开始影响粪便代谢物水平, 至第10周时影响更为显著; 通过对数据的分析与鉴定, 在5周和10周中分别筛选出17种和108种差异代谢物, 这些差异代谢物主要富集在亚油酸代谢和胆汁酸生物合成等通路; 进一步筛选发现10种代谢物在两个时间点具有相同的变化趋势, 表明其可能与IF之间存在密切的相关性。本研究表明IF可显著改变小鼠的代谢水平, 为其治疗相关疾病的代谢机制提供理论依据。

本研究建立了高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS), 测定Beagle犬体内黄体酮的血药浓度, 并进行黄体酮缓释微球在Beagle犬体内药代动力学的研究。以醋酸甲地孕酮为内标, 蛋白沉淀法处理血样。采用电喷雾离子化源(ESI) 以多反应监测(MRM) 方式进行正离子检测, 监测离子对分别为黄体酮m/z 315.2→97.0, 内标醋酸甲地孕酮m/z 385.2→267.1。雄性Beagle犬肌注黄体酮缓释微球, 于给药后不同时间点采集静脉血, 结合WinNonlin 8.1软件计算相关药代动力学参数。在0.1~500.0 ng·mL^-1内, 黄体酮的线性关系良好(r² = 0.998 9); 验证样品的批内、批间精密度(RSD) 小于13.25%, 准确度(RE) 在8.92%以内; 样品在室温放置12 h、-20 ℃反复冻融3次、-20 ℃放置60 d条件下均稳定; 提取回收率为71.43%~77.97%。Beagle犬肌肉注射黄体酮缓释微球后, t_max为19.00 ± 25.36 h, C_max为137.72 ± 11.59 ng·mL^-1, t_1/2为83.83 ± 26.43 h。药物在体内持续释放, 且呈多次连续吸收过程, 具有良好的缓释效果。本研究所建立的LC-MS/MS测定方法灵敏、快速、稳定, 适用于Beagle犬中黄体酮血药浓度的测定, 可应用于黄体酮相关制剂的临床前药代动力学的研究。动物实验方案已获得军事医学研究院动物伦理委员会的批准。

局部药物递送成为防止癌症术后复发的新策略, 温敏凝胶是一种典型的局部给药制剂。本研究拟制备一种新型紫杉醇温敏凝胶以用于癌症术后化疗防止复发, 并考察凝胶中药物粒径对体外释放和体内吸收速率的影响。分别采用介质研磨法、高压均质、气流粉碎和筛分法制备不同粒径紫杉醇混悬液; 以泊洛沙姆为凝胶基质, 卡波姆为生物黏附剂, 通过Box-Behnen Design优化设计紫杉醇温敏凝胶处方。对温敏凝胶的形貌、黏度、流变学性质及黏附性进行表征, 重量损失法考察温敏凝胶溶蚀与释放之间存在的关系, 并在大鼠体内进行药代动力学研究。获得了粒径为350 nm、800 nm、3 μm、9 μm的紫杉醇混悬液, 并以19%泊洛沙姆407、4%泊洛沙姆188、0.1%卡波姆制备紫杉醇温敏凝胶, 其相变温度为30~35 ℃, 体外释放和凝胶溶蚀之间存在良好线性关系。药代动力学研究中, 药-时曲线下面积(AUC_0-t) 随粒径减小呈增大趋势。本研究制备的紫杉醇温敏凝胶在人体温度下可迅速转变为凝胶, 具有良好黏附性, 体外释放速率与粒径大小密切相关, 随粒径减小呈增大趋势, 将为用于防止癌症术后复发提供数据支持。动物福利和实验过程均遵循军事医学研究院动物伦理委员会的规定。

研究欧地笋Lycopus europaeus Linn.叶绿体基因组的结构特征, 比较与欧地笋具有相近药理作用和临床功效的唇形科物种的系统进化关系。利用Illumina Hiseq 4000测序平台对欧地笋全基因组DNA进行测序、使用NOVOplasty组装了完整的叶绿体基因组, 然后用CPGAVAS2软件对叶绿体基因组进行注释和特征分析。以瑞香狼毒(Stellera chamaejasme) 和委陵菜(Potentilla chinensis) 为外类群, 构建系统进化树, 分析唇形科中与欧地笋具有相近功效的物种之间的系统发育关系。结果表明, 欧地笋叶绿体基因组全长152 085 bp, 注释得到132个基因, 包括88个蛋白编码基因、8个rRNA基因和36个tRNA基因, 其中8个蛋白质编码基因(ndhB、rps7、rps12、rps19、rpl2、rpl23、ycf2、ycf15)、7种tRNA编码基因(trnM-CAU、trnL-CAA、trnN-GUU、trnE-UUC、trnV-GAC、trnA-UGC、trnR-ACG)、4个rRNA编码基因(rrn16S、rrn23S、rrn4.5S、rrn5S) 位于IR区。其中13个蛋白质编码基因[rps16、rps19 (×2)、atpF、rpoC1、rpl2 (×2)、petB、petD、rpl16、ndhB (×2)、ndhA] 各含有1个内含子(intron), 2个蛋白质编码基因(ycf3、clpP) 各含有2个内含子, 8个tRNA编码基因各含有1个内含子; 共检测到34个SSR序列, 其中A/T、AT/AT为重复单元的占91.18%, 说明SSR偏好使用A和T碱基。系统发育分析显示欧地笋与硬毛地笋、青兰属的四个物种、活血丹、薄荷属的两个物种、夏枯草共计10个植物的亲缘关系最近。由此, 研究中获得并分析了完整欧地笋叶绿体基因组的序列特征, 明确了欧地笋与唇形科物种间的系统发育亲缘关系。

潞党参为山西道地药材, 其药效成分党参多糖等含量显著高于其他产地党参[Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf.]。糖基转移酶是党参主要药效成分党参多糖和党参苷I等合成的关键酶, 本研究基于不同产地党参转录组数据, 对糖基转移酶基因进行GO及KEGG功能注释、保守结构域分析、进化树分析及表达模式分析, 为探索潞党参道地性形成机制提供理论依据。本研究共筛选鉴定出98个糖基转移酶基因, 分属于GT family 1、GT family 2、GT family 90等家族。GO功能注释发现多属于分子功能中的催化活性条目。KEGG功能注释发现党参糖基转移酶主要参与聚糖生物以及萜类和聚酮类化合物代谢。其中, GT family 1的42个糖基转移酶基因保守结构域为: [X]-W-[2X]-Q-[3X]-[LH]-[5X]-[FLTHCGWNS]-[2X]-E-[4X]-[GVP]-[4X]-P-[4X]-Q-[2X]-[NAK]。通过与拟南芥的糖基转移酶序列比对分析, 党参糖基转移酶主要位于拟南芥UGT73、72、85分支中。基因表达模式分析发现党参CpUGT73AH2在潞党参植株中高表达, 并可响应干旱、低温胁迫诱导。最终, 本研究自党参糖基转移酶家族1中筛选得到一个参与萜类和聚酮类化合物代谢的可以响应环境胁迫的糖基转移酶基因CpUGT73AH2, 为进一步研究党参糖基转移酶在潞党参道地性形成中的作用奠定了理论基础。

葵花大蓟(Cirsium souliei) 是菊科(Compositae)、蓟属(Cirsium) 的一种多年生药用草本植物, 具有重要的药用和生态价值。基于高通量测序技术, 本研究通过对葵花大蓟的叶绿体基因组测序、组装、注释和特征分析, 结果发现葵花大蓟叶绿体基因组全长152 470 bp, 为典型的环状四分体结构, GC含量为37.7%; 叶绿体基因组共编码134个基因, 其中蛋白编码基因89个, tRNA基因37个, rRNA基因8个; 叶绿体基因组共检测到188个简单重复序列(simple sequence repeats, SSR) 位点, 以单核苷酸重复为主; 同时, 密码子偏好性分析显示, 亮氨酸(Leu) 是使用频率最高的氨基酸(10.51%), 同义密码子相对使用频率(relative synonymous codon usage, RSCU) 值大于1的密码子有30个且以A/U结尾为主。此外, 基于叶绿体基因组构建系统发育树, 结果显示管状花亚科(Carduoideae) 46种植物中, 葵花大蓟与蓟属的翼蓟(C. vulgare) 的亲缘关系最近, 支持率高达100%, 旨在为葵花大蓟遗传多样性、群体遗传结构、系统进化及物种形成机制提供理论依据。

病原链球菌为逃避宿主的免疫反应, 分泌一种可特异地裂解免疫球蛋白G的降解酶(immunoglobulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS)。IdeS既可作为工具酶用于IgG的指纹分析, 又可用于治疗与自身免疫反应相关的疾病。本研究基于质粒pCold构建了两种重组IdeS的表达载体, 并在大肠杆菌Shuffle T7中进行异源表达, 经亲和色谱纯化后检测其蛋白活性。结果表明N-端含有His6-标签的重组IdeS产量为4 mg·L^-1, 其与抗体IgG1以1∶200 (m/m) 在37 ℃反应30 min即可完全酶解。而N-端含有His6-标签且C-端含有硅胶亲和标签(SiBP) 的重组IdeS产量为1.5 mg·L^-1, 其与抗体IgG1以1∶20 (m/m) 在37 ℃反应30 min才可反应完全。C-端融合肽对于IdeS产量与活性都有较大的影响, 使其活性降低, 不利于后续应用于药物研发。上述结果表明, 本系统所表达的N-端含有His6-标签的IdeS重组蛋白具有较高的活性, 完全能满足抗体类药物研发和作为工具酶用于IgG指纹分析的需求。