中国临床药理学杂志

苦豆碱抑制膀胱癌253J细胞增殖的作用及机制研究

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高义胜 ^1a^,² , 李敬东 ^1b , 何相飞 ^1a , 高磊 ^1a , 徐纪元 ^1a , 左世帅 ^1a

中国临床药理学杂志 | 临床与基础桥接研究 2025,41(5): 676-680

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中国临床药理学杂志 |临床与基础桥接研究 2025 , 41 (5) : 676 -680

苦豆碱抑制膀胱癌253J细胞增殖的作用及机制研究

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高义胜^1a^,², 李敬东^1b, 何相飞^1a, 高磊^1a, 徐纪元^1a, 左世帅^1a

作者信息

^1a.临沂市人民医院，泌尿外科，山东临沂 276000

^1b.临沂市人民医院，肿瘤内科，山东临沂 276000

^2.广州中医药大学临沂市人民医院研究生培养基地，山东临沂 276000

通讯作者:

高磊，副主任医师 MP: 15953939769 E-mail: westprince@163.com

作者简介:

高义胜（1986-），男，副主任医师，主要从事中西医结合防治泌尿系肿瘤的研究

Inhibitory effect and mechanism of aloperin on proliferation of bladder carcinoma 253J cells

Yi-sheng GAO^1a^,², Jing-dong LI^1b, Xiang-fei HE^1a, Lei GAO^1a, Ji-yuan XU^1a, Shi-shuai ZUO^1a

Affiliations

^1a.Department of Urology, Linyi People’s Hospital, Linyi 276000, Shandong Province, China

^1b.Department of Oncology, Linyi People’s Hospital, Linyi 276000, Shandong Province, China

^2.Graduate Training Base, Linyi People’s Hospital of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine, Linyi 276000, Shandong Province, China

出版时间: 2025-03-17 doi: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2025.05.015

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摘要

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目的

探究苦豆碱对膀胱癌细胞生长及内质网应激依赖线粒体途径的调控作用。

方法

将253J细胞随机分为对照组、低剂量实验组（25.0 μmoL·L^-1苦豆碱）、中剂量实验组（50.0 μmoL·L^-1苦豆碱）、高剂量实验组（100.0 μmoL·L^-1苦豆碱）、4-PBA组[100.0 μmoL·L^-1苦豆碱+20 μmoL·L^-1 4-苯基丁酸（4-PBA）]、si-NC组（转染si-NC+100.0 μmoL·L^-1苦豆碱）、si-CHOP组[转染si- C/EBP同源蛋白（CHOP）+100.0 μmoL·L^-1苦豆碱]。用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（EdU）实验检测细胞增殖，用蛋白质印迹法检测相关蛋白表达，用流式细胞术检测细胞凋亡，用JC-1法检测线粒体膜电位（MMP）水平。

结果

对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组EdU阳性细胞率分别为（37.51±2.98）%、（29.52±2.19）%、（23.10±2.58）%和（12.94±2.52）%，CHOP蛋白相对表达水平分别为0.29±0.04、0.53±0.05、0.71±0.08和0.90±0.12；对照组、高剂量实验组、4-PBA组细胞凋亡率分别为（4.79±0.62）%、（23.01±2.03）%和（13.75±1.14）%；对照组、高剂量实验组、si-NC、si-CHOP组细胞CHOP蛋白表达分别为0.30±0.03、0.92±0.08、0.91±0.11和0.20±0.02，细胞凋亡率分别为（4.39±0.30）%、（22.11±1.82）%、（22.65±2.40）%和（15.32±1.19）%，线粒体细胞色素C（Cyto-C）蛋白相对表达水平为0.78±0.07、0.43±0.05、0.42±0.05和0.65±0.06，细胞质Cyto-C蛋白相对表达水平为0.51±0.06、0.91±0.10、0.88±0.05和0.61±0.04，MMP水平分别为（100.00±2.79）%、（57.49±3.34）%、（54.09±4.32）%和（69.91±6.81）%；低、中、高剂量组的上述指标分别与对照组比较，4-PBA组的上述指标与高剂量实验组比较，si-CHOP组的上述指标与si-NC组比较，在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.01）。

结论

苦豆碱可通过上调CHOP介导内质网应激依赖的线粒体凋亡途径抑制253J细胞增殖。

关键词

苦豆碱 / 膀胱癌 / 内质网应激 / 线粒体凋亡 / 增殖

Abstract

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Objective

To investigate the regulatory effects of aloperin on bladder cancer cell growth and endoplasmic reticulum stress-dependent mitochondrial pathway.

Methods

253J cells were randomly divided into control group, experimental-L group (25.0 μmoL·L^-1 aloperin), experimental-M group (50.0 μmoL·L^-1 aloperin), experimental-H group (100.0 μmoL·L^-1 aloperin), 4-PBA group [100.0 μmoL·L^-1 aloperin+20 μmoL·L^-1 4-phenylbutyric acid (4-PBA)], si-NC (transfected with si-NC+100.0 μmoL·L^-1 aloperin), si-CHOP group [transfected with si-CCAAT-enhancer-binding protein homologous protein (CHOP)+100.0 μmoL·L^-1 aloperin]. Cell proliferation was detected by 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU) assay; protein expression was detected by Western blot assay; apoptosis was detected by flow cytometry; mitochondrial membrane potential (MMP) was detected by JC-1 assay.

Results

The EdU positive cell rates in control group, experimental-L group, experimental-M group and experimental-H group were (37.51±2.98)%, (29.52±2.19)%, (23.10±2.58)% and (12.94±2.52)%, respectively; the expression levels of C/EBP homologous protein (CHOP) were 0.29±0.04, 0.53±0.05, 0.71±0.08, 0.90±0.12, respectively. The apoptosis rates in control group, experimental-H group and 4-PBA group were (4.79±0.62)%, (23.01±2.03)% and (13.75±1.14)%, respectively. The expressions of CHOP protein in control group, experimental-H, si-NC and si-CHOP groups were 0.30±0.03, 0.92±0.08, 0.91±0.11 and 0.20±0.02, respectively; the apoptosis rates were (4.39±0.30)%, (22.11±1.82)%, (22.65±2.40)% and (15.32±1.19)%, respectively; mitochondrial cytochrome C (Cyto-C) protein levels were 0.78±0.07, 0.43±0.05, 0.42±0.05 and 0.65±0.06; cytoplasmic Cyto-C protein levels were 0.51±0.06, 0.91±0.10, 0.88±0.05 and 0.61±0.04; MMP levels were (100.00±2.79)%, (57.49±3.34)%, (54.09±4.32)% and (69.91±6.81)%, respectively. The above indexes in the experimental-L, -M, -H groups were compared with the control group, the above indexes in the 4-PBA group were compared with the experimental-H group, and the above indexes in the si-CHOP group were compared with the si-NC group, the differences were statistically significant (all P<0.01).

Conclusion

Aloperin can inhibit the proliferation of 253J cells by up-regulating the endoplasmic reticulum stress-dependent mitochondrial apoptosis pathway mediated by CHOP.

Key words

aloperin / bladder cancer / endoplasmic reticulum stress / mitochondrial apoptosis / proliferation

引用本文

高义胜, 李敬东, 何相飞, 高磊, 徐纪元, 左世帅. 苦豆碱抑制膀胱癌253J细胞增殖的作用及机制研究. 中国临床药理学杂志, 2025 , 41 (5) : 676 -680 . DOI: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2025.05.015

Yi-sheng GAO, Jing-dong LI, Xiang-fei HE, Lei GAO, Ji-yuan XU, Shi-shuai ZUO. Inhibitory effect and mechanism of aloperin on proliferation of bladder carcinoma 253J cells[J]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology, 2025 , 41 (5) : 676 -680 . DOI: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2025.05.015

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山东省中医药科技发展计划基金资助项目(M-2022106)

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2025年第41卷第5期

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doi: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2025.05.015

接收时间：2024-09-06
首发时间：2026-08-04
出版时间：2025-03-17

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收稿日期：2024-09-06

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山东省中医药科技发展计划基金资助项目(M-2022106)

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^1a.临沂市人民医院，泌尿外科，山东临沂 276000

^1b.临沂市人民医院，肿瘤内科，山东临沂 276000

^2.广州中医药大学临沂市人民医院研究生培养基地，山东临沂 276000

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高磊，副主任医师 MP: 15953939769 E-mail: westprince@163.com

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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