首创性（first-in-class）药物是使用全新的、独特的作用机制或靶向于某个全新的候选靶标来治疗某种疾病的药物，其研发理念和过程不同于跟随性药物（me too，me better）。2018年，美国食品药品监督管理局（FDA）共批准上市了59个全新药物，打破了1993年批准53个新药的历史记录。获批的新药中，小分子药物以64%占据较大比例。在获批的34个小分子新药中，有9个是首创性的小分子药物，这对后续的药物研发具有里程碑式的重要意义。其中包括全球首个作用于Hedgehog信号通路的Smo小分子抑制剂格拉德吉；首个靶向于突变型IDH1的小分子抑制剂艾伏尼布；首个抗天花病毒的p37蛋白小分子抑制剂替韦立马；首个靶向于cap-依赖型核酸内切酶的抗流感药物玛巴洛沙韦；首个靶向于GnRH-R治疗子宫内膜异位症的小分子药物艾拉戈克钠等。首创性的药物研发往往需要经历非常坎坷的研发过程，而成功的首创性药物多数也都成为重磅炸弹级的明星药物。本文选取2018年批准的具有代表性的首创性小分子药物研究实例，浅析其研发过程，为更多首创药物的研发提供研究借鉴及研发思路。

啮齿类动物双侧嗅球切除（olfactory bulbectomy，OBX）后产生一系列行为学和神经生化改变，这些改变能够模拟抑郁症患者的部分临床表现，慢性给予抗抑郁药能够逆转这些变化，急性给药无效。OBX模型有较好的表观效度、结构效度和预测效度，被广泛应用于抑郁症发病机制的研究和抗抑郁药物的筛选。此外，OBX模型与阿尔茨海默症（Alzheimer's disease，AD）在行为学和病理改变方面有一些共同表现，如学习记忆能力的降低和β-淀粉样蛋白（amyloid-β protein，Aβ）的沉积等。本文对嗅觉与抑郁和AD的关系、OBX模型的建立方法和行为学特点、皮层和海马结构和生化的改变以及该模型在抑郁和AD中的应用进行介绍，为该模型更好地应用于抗抑郁及抗AD药物的研发提供参考。

小胶质细胞作为中枢神经系统中主要的天然免疫细胞，对外界伤害性刺激做出应答的过程中可被活化，并与星形胶质细胞及神经元产生相互作用，诱导神经炎症的发生，易化疼痛信号的传导。该应答机制有助于中枢神经系统适应伤害性刺激介导的内环境改变，导致外周及中枢的痛觉神经传导通路的长时程敏感及慢性疼痛。虽然大量的动物实验证实小胶质细胞活化参与慢性神经性疼痛的发生发展和维持，抑制脊髓或脑内小胶质细胞的活化可产生镇痛的效果，但由于其应答机制尚不明确，难以系统阐述小胶质细胞参与疼痛调控的分子事件，因此，目前尚未发现靶向小胶质细胞活化而设计的治疗慢性神经性疼痛的药物。本文拟通过对小胶质细胞与慢性疼痛相关研究文献进行综述，梳理小胶质细胞与慢性疼痛的关系，为调控小胶质细胞活化途径治疗慢性神经性疼痛的新药研发提供一些启示。

Elabelas/Toddlers是最近从斑马鱼中发现的一组内源性活性肽。研究发现该类肽基因序列与爱帕琳肽（Apelin）有25%的相似性，并且也通过血管紧张素Ⅱ 1型受体相关蛋白（putative receptor protein related to the angiotensin receptor AT1，APJ）调控生物体内相应的生理功能，如早期胚胎发育、血管生成、体液平衡、摄食与饮食行为控制等；同时还参与多种疾病的发生发展过程，如心衰、先兆子痫、急性肾损伤、高血压和糖尿病等。近年来的研究表明，Elabela/APJ信号能促进生物体早期胚胎的正常发育，包括中内胚层、内胚层的分化以及心脏形态及功能的形成；同时该信号还能促进血管生成，从而促进肿瘤细胞的迁移和增殖。本文主要就Elabela/APJ信号的分子结构、生物学特性、功能及其应用前景进行阐述。

基质辅助激光解吸/电离（matrix-assisted laser desorption/ionization，MALDI）质谱成像（mass spectrometry imaging，MSI）技术是一种新型分子成像技术，具有免标记、高覆盖、高灵敏度等优势，被广泛应用于蛋白质、多肽、小分子代谢物的组织分布研究。随着MALDI-MSI技术的不断发展，该技术在研究药用植物化学成分组织分布方面展现出了极大的应用价值。本文首先介绍了MALDI-MSI技术的基本原理、样品制备方法以及基质的选择和喷涂。然后重点综述了MALDI-MSI在药用植物次生代谢产物的组织空间分布和累积规律研究中的应用。MALDI-MSI技术作为新兴的分子成像技术，能够可视化分析药用植物中多种次生代谢产物组织分布，为阐明药用植物活性物质的合成途径、转运过程以及累积部位提供了科学、直观的判断依据。

黄酮是中药中的一类重要活性成分，但因其水溶性差、生物利用度低等缺点，制剂研发难度较大。药物晶体学研究作为制剂学新型技术手段，可以改善难溶性药物存在的诸多问题。本文从多晶型、共晶、无定形与共无定形和纳米晶体等四个方面综述了黄酮类药物的晶型研究进展，并对其规律进行总结，为药物晶体研究在中药难溶性成分中的应用提供参考。

探讨下调miR-205-5p增强鼻咽癌耐药细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制。qRT-PCR检测HNE1、HNE1/DDP细胞中miR-205-5p的表达差异及HNE1/DDP细胞转染miR-205-5p抑制剂后miR-205-5p的变化；MTT法检测顺铂（DDP）和miR-205-5p抑制剂对HNE1/DDP或HNE1细胞的增殖抑制作用；PI单染流式技术检测细胞凋亡情况；DAPI染色观察细胞核的形态；Western blot检测Bax、Bak、Mcl-1、Bcl-2蛋白的表达水平。结果显示，相比于HNE1细胞，HNE1/DDP高表达miR-205-5p，转染miR-205-5p抑制剂后其表达明显下降。下调miR-205-5p可显著提高HNE1/DDP细胞对顺铂的敏感性（P < 0.05）。PI单染结果显示，转染miR-205-5p抑制剂可增强HNE1/DDP细胞对顺铂的诱导凋亡作用。miR-205-5p抑制剂联合DDP（8 μmol·L^-1）作用HNE1/DDP细胞24 h的凋亡率为（28.93 ±2.50）%，相比单用miR-205-5p抑制剂（9.83 ±1.31）%或DDP的凋亡率（10.83 ±1.70）%显著升高（P < 0.05）。联合作用组细胞表现为细胞核明显皱缩浓集呈碎片状。miR-205-5p抑制剂与DDP合用能上调Bax的表达和下调Bcl-2的表达。提示下调miR-205-5p可增强HNE1/DDP细胞对DDP的敏感性，其作用机制可能是促凋亡蛋白Bax的升高和抗凋亡蛋白Bcl-2的下降。

初步研究怀菊花总提物对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的急性肺损伤小鼠模型的影响，并进一步探究从怀菊花中分离得到的3种咖啡酰基奎宁酸类化合物对血管内皮细胞损伤模型的干预作用及其机制。本文所有动物实验饲养及操作严格遵守国家动物福利伦理与保护相关规定。采用鼻腔滴注LPS的方法建立急性肺损伤小鼠模型，经菊花总提物灌胃给药6天后，检测小鼠肺湿重/干重比及小鼠肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）；使用人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）饥饿处理12 h后，以2.5 μg·mL^-1 LPS诱导24 h建立血管内皮细胞损伤模型，经菊花中提取到的3种咖啡酰基奎宁酸类化合物处理24 h后，采用ELISA法测定细胞培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1）、内皮素-1（endothelin-1，ET-1）水平，TBA法检测丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平，羟胺法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）水平，一步法检测一氧化氮（nitric oxide，NO）水平，Western blot法检测细胞内丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-P38、P38蛋白表达。结果显示，怀菊花总提物可显著降低小鼠肺湿重/干重比，降低肺泡灌洗液TNF-α、IL-6、IL-1β水平；怀菊花中咖啡酰基奎宁酸类化合物可显著升高SOD、NO水平，降低TNF-α、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1、MDA水平，并显著下调p-MEK1/2、p-ERK1/2的表达。综上，怀菊花总提物对急性肺损伤小鼠具有一定的保护作用，怀菊花中咖啡酰基奎宁酸类化合物可能是通过调节ERK/MAPK信号通路，抑制炎症因子、调节氧化应激水平，以及调节细胞间黏附分子和血管舒缩因子，从而改善LPS诱导的血管内皮细胞损伤。

阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）是一种严重威胁老年人健康的神经系统退行性疾病，目前尚未发现能够根治或者延缓疾病进程的药物。寻找可以同时作用于多个AD相关靶点的多靶点定向配体（MTDL）是当前抗AD新药发现的重要策略。为了从上市药物中寻找潜在的多靶点抗AD药物，本文利用实验室前期基于机器学习算法建立的抗AD多靶点药物预测平台，对全球上市药物数据库进行了预测和挖掘，从中挑选出13个至少作用于1个抗AD药物靶点，且可以通过多种作用对抗AD的上市药物，利用Cytoscape构建化合物——靶点网络；并针对上市药物阿戈美拉汀及其预测的多靶点蛋白进行分子对接以验证预测结果，蛋白靶点包括ADORA2A、ACHE、BACE1、PTGS2、MAOB、SIGMAR1、ESR1，阿戈美拉汀均能与以上靶点产生相互作用。本文应用机器学习算法、网络药理学方法及分子对接方法，初步揭示了上市药物数据库中抗AD作用的潜在药物，为上市药物抗AD作用重定位提供了重要信息。

桑枝总生物碱（Sangzhi alkaloids，SZ-A）是来源于中药桑枝的具有α葡萄糖苷酶抑制活性的有效组分。本研究在酶学和整体动物水平，考察SZ-A对几种糖苷酶的抑制特点和抗糖尿病作用。基于酶活性评价体系，分别考察了SZ-A对蔗糖酶、麦芽糖酶及淀粉酶的抑制作用，计算半数抑制浓度（IC₅₀）值；在正常小鼠和四氧嘧啶（alloxan）高血糖小鼠中，考察单次灌胃SZ-A对多糖和葡萄糖负荷后血糖升高的影响；在链脲霉素（STZ）糖尿病大鼠和高脂喂养的肥胖C57小鼠（HFC57）中，考察长期给予SZ-A对糖脂代谢紊乱的改善作用。动物实验操作过程依照中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所实验动物管理与动物福利委员会的要求执行。结果显示，SZ-A对蔗糖酶和麦芽糖酶活性抑制的IC₅₀分别为21.9和40.4 ng·mL^-1，对淀粉酶几乎无抑制作用。SZ-A能显著降低正常和高血糖小鼠蔗糖和淀粉负荷后的血糖峰值和血糖时间曲线下面积，抑制餐后血糖的升高；但对葡萄糖负荷后的血糖升高无影响。在STZ糖尿病大鼠中，SZ-A给药3周后，可显著降低其随机及空腹血糖、血甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）、糖化血清蛋白及尿糖水平。在糖尿病前期动物模型HFC57小鼠中，SZ-A给药6周后，可显著降低随机和空腹血糖、血TC及基础胰岛素水平，改善糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗状态，改善葡萄糖刺激的胰岛素分泌功能。综上，SZ-A是一种高选择性的双糖酶抑制剂；单次给药可显著抑制正常及糖尿病小鼠多糖负荷后的血糖升高，长期给药可改善糖尿病前期及糖尿病动物的糖脂代谢紊乱。SZ-A通过抑制α葡萄糖苷酶活性控制糖尿病状态下的餐后血糖的波动，长期应用可能有益于减缓糖尿病及其并发症的发生和发展。

基于网络药理学及大鼠（本实验所用动物经皖南医学院医学伦理委员会批准同意）心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia-reperfusion injury，MIRI）模型验证的方法分析瓜蒌抗MIRI的作用机制。依据口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥ 30%、类药性（drug like，DL）≥ 0.18，通过TCMSP、TCM Database@Taiwan数据库筛选化合物。利用DRAR-CPI数据库获取化合物的PDB ID值（Z'-score < -0.5），并由UniProt数据库转换成靶点蛋白。通过CooLGeN数据库，以"myocardial ischemia reperfusion injury"为关键词，收集人类基因靶点蛋白。利用DAVID数据库进行与MIRI相关靶点蛋白的GOTERM_BP_DIRECT富集分析和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）_PATHWAY通路注释分析，使用Gephi0.9.2软件构建成分-靶点蛋白-信号通路网络。以复方丹参滴丸（85.05 mg·kg^-1）为阳性对照，瓜蒌滴丸（0.2、1.0和2.0 g·kg^-1）预处理MIRI大鼠，采用蛋白质免疫印迹（Western blot）法对丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路相关蛋白表达进行分析。网络药理学发现，瓜蒌中schottenol等12个化合物通过多靶点、多生物途径及多通路方式协同发挥抗MIRI作用，涉及ERK2（extracellular regulated protein kinase 2，ERK2）、JNK1（c-jun-N-terminal kinase-1，JNK1）、p38MAPK等靶点蛋白及MAPK等信号通路。Western blot结果显示，瓜蒌滴丸预处理MIRI大鼠后，MAPK信号通路相关蛋白p-ERK1/2表达呈剂量依赖性上调，p-p38MAPK、p-JNK1表达呈剂量依赖性下调，与模型组比较，中、高剂量组（1.0、2.0 g·kg^-1）的ERK1/2、JNK1及p38MAPK蛋白磷酸化表达均有显著性差异（P < 0.01），瓜蒌滴丸可通过调控MAPK信号通路的ERK1/2、JNK1、p38MAPK靶点蛋白及其磷酸化发挥抗大鼠MIRI作用。本文运用网络药理学阐释了瓜蒌抗MIRI的作用靶点和通路并进行了验证，为深入探讨瓜蒌抗MIRI的作用机制提供了依据。

对比研究黄芩汤、四神丸、痛泻要方3种止泻名方对大鼠溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）细胞因子表达与肠道菌群变化的影响。经中国中医科学院中药研究所伦理委员会审议同意并批准后，以2，4，6-三硝基苯磺酸（2，4，6-trinitrobenzenesulfonic，TNBS）复合造模法制备UC大鼠模型，按体重随机分为正常组、模型组、阳性药柳氮磺胺吡啶组（sulfasalazine，SASP，0.5g·kg^-1）、黄芩汤组（HQT，20g·kg^-1）、四神丸组（SSW，26g·kg^-1）和痛泻要方组（TXYF，22g·kg^-1）。连续给药7天后，取大鼠粪便并眼眶取血后处死，再取结肠，HE染色法检测大鼠结肠组织病变损伤程度，酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素8（interleukin-8，IL-8）和前列腺素E₂（prostaglandin E₂，PGE₂）含量，提取粪便样品总DNA，于16SMiseqPE300V3-4区段进行高通量测序并分析。细胞因子结果表明，与模型组相比，阳性药SASP组的IL-6、PGE₂、TNF-α含量均降低（P < 0.05），IL-8水平降低最为显著（P < 0.01）；HQT组IL-6、IL-8、TNF-α含量均降低（P < 0.05），PGE₂含量显著降低（P < 0.01）；SSW组4种炎性因子含量均降低，但无统计学差异；TXYF组IL-6、TNF-α含量降低，IL-8、PGE₂含量明显降低（P < 0.05）。对肠道菌群测序后的结果显示，在样本微生物信息数据量足够充分的情况下，物种丰度：SSW组> HQT组> TXYF组；样本间相似性：TXYF组> SSW组> HQT组；与模型组相比，HQT组和TXYF组菌群种类差异较大，肠内有益菌含量：HQT组> SSW组> TXYF组。3种名方对大鼠溃疡性结肠炎均有一定治疗作用，可有效改善UC大鼠的体征及精神状况，但在抑制炎性因子IL-6、IL-8、PGE₂、TNF-α及调节肠道微生态方面，HQT的治疗作用优于SSW和TXYF。

Foxo-1（Forkhead box O1）在肌肉萎缩疾病的发生发展中起到了重要作用，有可能成为肌肉萎缩疾病治疗中潜在的治疗靶点。本研究设计了特异性靶向Foxo-1的2'-O-甲基和3'-丁醇基联合修饰的新型反义RNA寡核苷酸（oligos），并评价其在小鼠体内的药效学、药动学行为及安全性。所有实验方案均通过中国疾病预防控制中心营养与健康所动物伦理委员会批准。结果表明，不同剂量的RNA寡核苷酸通过静脉注射和口服给药均能降低小鼠骨骼肌Foxo-1的表达，有助于增加小鼠骨骼肌质量。药动学行为评价结果显示，新型修饰的Foxo-1 RNA寡核苷酸单次静脉注射给药后在小鼠体内的动力学过程符合二室模型。安全性评价结果显示，静脉注射或口服给药最高剂量为30 mg·kg^-1的RNA寡核苷酸，小鼠的肝功能和肾功能以及血液学各项指标正常，未对小鼠产生明显的不良反应；并且未导致小鼠明显的组织病理变化。总之新型修饰的Foxo-1反义RNA寡核苷酸作用在小鼠体内是安全且有效的，为其临床应用提供了实验基础与指导意义。

通过各种色谱分离方法从贵州道地药材金钗石斛茎的醇提物非生物碱部分分离得到1个新的卡达烯型倍半萜葡萄糖苷，其结构经质谱和核磁共振等波谱技术鉴定，命名为卡达烯-12-O-β-D-葡萄糖苷。该类化合物骨架生源上由杜松烷型倍半萜高度去氢形成萘环得到卡达烯型倍半萜，此类化合物的糖苷在天然产物中较少见。

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等色谱方法，对台东荚蒾乙酸乙酯部位进行分离，从中分离纯化得到7个三萜类化合物，根据其波谱数据和理化性质鉴定为3β，6β-二羟基齐墩果-11，13（18）-二烯-28-酸（1）、3β-羟基齐墩果-11，13（18）-二烯-28-酸（2）、12-烯-齐墩果-28-酸-3β-棕榈酸酯（3）、3β-乙酰古柯二醇（4）、科索酸（5）、熊果醇（6）和熊果酸（7）。其中，化合物1为新化合物，其绝对构型通过单晶衍射得以证实。化合物2~5为首次从荚蒾属中分离得到。采用LPS诱导的RAW264.7释放NO的细胞模型，评价了化合物1~7的体外抗炎活性，结果显示，与阳性对照槲皮素（IC₅₀值为25.46 ±0.62 μmol·L^-1）相比，化合物5显示出较强的NO抑制活性，其IC₅₀值为25.52 ±0.56 μmol·L^-1。

通过激光显微切割对5个不同发育时期牛蒡子胚薄壁细胞和内果皮石细胞进行精确收集。采用超快速液相色谱-质谱联用（UFLC-MS/MS）技术对样品中咖啡酸、牛蒡苷、牛蒡苷元进行定量分析。结果发现，胚薄壁细胞在花末期至成熟期产生和积累大量牛蒡苷，内果皮石细胞在成熟期也积累一定量的牛蒡苷，但其含量远小于胚薄壁细胞中的牛蒡苷含量，结果表明牛蒡子胚薄壁细胞和内果皮石细胞中的牛蒡苷的生物合成途径可能存在不同；而且发现牛蒡苷元在花末期胚薄壁细胞和内果皮石细胞中均有产生并且积累到成熟期，但是在内果皮石细胞中积累到花末期达到最高值，然后缓慢下降。实验建立了牛蒡子取材-冰冻制片-显微切割-液质联用分析的新方法，研究牛蒡子中主要化学成分牛蒡苷的动态积累规律。

采用直接电离技术和木尖喷雾电离技术检测中药材制附子，建立快速、简便分析其中乌头碱类生物碱的方法。将制附子用水浸湿的滤纸包裹过夜，剪成三角形，滴加不同溶剂，分别用于直接电离质谱和木尖喷雾质谱系统检测。结果表明，这两种质谱分析方法不经过复杂的前处理过程，均能快速检测制附子中的生物碱，效果好于传统的毛细管电喷雾质谱分析方法。两种分析方法对比，除了以二氯甲烷为溶剂时，直接电离质谱分析的效果都好于木尖喷雾质谱。在不同极性的溶剂条件下，能选择性地检测出不同种类的生物碱。本实验为制附子成分分析提供了一种快速的质谱方法，从而为其种植、储存、炮制、配伍、品质的研究提供方法。

通过建立黄芪多糖和单糖糖谱，结合技术成熟的细胞免疫活性实验，建立以多糖为质控指标的黄芪品质评价方法。本研究采用高效液相色谱仪（HPLC）建立黄芪总多糖和单糖特征图谱，利用SIMCA软件和SPSS软件对数据分别进行多元统计分析和聚类分析以区分不同产地及不同种植方式的蒙古黄芪，并通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验进行活性评价。结果表明山西浑源仿野生黄芪多糖含量和增强巨噬细胞吞噬活性的能力较高于移栽芪。山西浑源、山西五寨和甘肃陇西的黄芪多糖具有相似的分子量分布，但每个部分的峰面积占总峰面积的百分比具有明显差异，山西黄芪多糖中分子量为10 kDa左右的部分高于甘肃黄芪，PCA显示可以将山西黄芪和甘肃黄芪区分开。三者都是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和半乳糖醛酸5种单糖组成的。但3个产地的黄芪多糖（APS）具有不同的单糖物质的量比。PCA显示可以将3种不同的蒙古黄芪区分开。本研究采用了将糖谱技术与APS对细胞免疫功能的影响相结合的方法为不同产地及不同种植方式黄芪的品质评价及质量控制提供了依据。

CY-1-4是一种色胺酮类化合物，其抗肿瘤作用已被证实，但其水溶性差，且抗肿瘤作用机制尚未阐明。针对这些问题，本研究首先以聚己内酯[poly（caprolactone），PCL]和聚乙二醇-聚ε-己内酯[poly（ethylene glycol）-co-poly（ε-caprolactone），PEG-PCL]为载体材料，通过纳米沉淀法制备了包载CY-1-4的纳米粒（CY-1-4 NPs）以改进其溶解性，测定CY-1-4 NPs对B16-F10细胞活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平的影响、脂质活性氧抑制剂ferrostatin-1和铁螯合剂去铁胺（deferoxamine，DFO）对CY-1-4 NPs诱导B16-F10细胞死亡的修复作用及原卟啉（protoporphyrin Ⅸ，PPIX）对CY-1-4 NPs诱导B16-F10细胞死亡的促进作用，研究了CY-1-4 NPs诱导B16-F10的细胞毒是否存在铁死亡途径。结果表明，纳米化策略可明显改善CY-1-4的水溶性，所得纳米粒粒径约为116 nm，包封率约为83%，载药量约为4.80%。铁死亡机制验证结果表明，CY-1-4 NPs可以明显提高B16-F10细胞内ROS水平，ferrostatin-1和DFO可以一定程度抑制CY-1-4 NPs对B16-F10细胞的细胞毒作用，而PPIX可以促进CY-1-4 NPs对B16-F10细胞的细胞毒。上述结果均证明铁死亡是纳米化色胺酮类化合物CY-1-4诱导细胞死亡的机制之一。

癌症的免疫治疗是近年来兴起的一种治疗癌症的方法，通过人为地激活免疫系统来产生持久地杀伤肿瘤细胞的免疫反应，肿瘤疫苗是其最发达的部分之一。虽然目前肿瘤疫苗已经取得了很多突破，但仍然面临着巨大的挑战。在本研究中，采用癌细胞膜囊泡（cancer cell membrane nanovesicle，CCNVs）包裹黑磷量子点（black phosphorus quantum dots，BPQDs）制备得到负载黑磷量子点的癌细胞膜囊泡（BPQD-CCNVs），并将从小鼠骨髓中分离得到的树突状细胞与BPQD-CCNVs共同孵育，然后用808 nm近红外光对培养基照射10 min，最后用流式细胞分析仪检测树突状细胞表面分子CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达情况。所有动物实验均经过清华大学动物伦理委员会批准。结果表明，基于黑磷量子点的光热效应能使培养基的温度升高，刺激树突状细胞成熟，使树突状细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ的表达上调。本研究证明光热作用可以刺激树突状细胞的成熟。因此，可将光热作用引入到肿瘤疫苗中，增强肿瘤疫苗激活免疫系统的能力。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物（polylactic acid-glycolic acid，PLGA）微球体系在肺部缓控释递药系统中具有独特优势。然而，肺巨噬细胞的吞噬清除极大地限制了药物在肺深部的长期滞留。为规避肺巨噬细胞清除作用，本文设计了一种经聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺（polyethylene glycol-distearoyl-glycero-phosphoethanolamine，PEG-DSPE）包裹的PLGA微球，并探究了PEG-DSPE链长及比例对巨噬细胞摄取的影响。以香豆素-6为荧光探针，经膜乳化联合溶剂挥发法制备了各PLGA微球制剂，粒径控制为3~5 μm、包封产率大于90%。在细胞液中孵育48 h后，荧光素体外泄漏量低于1.5%，排除了游离荧光素对细胞摄取的干扰。选用鼠源性巨噬细胞RAW264.7进行体外细胞实验。细胞毒性实验表明各制剂对细胞均无毒性。细胞摄取实验结果显示，与未包裹制剂相比，高低比例（PEG-DSPE/PLGA 1：1、0.25：1）PEG₅₀₀₀-DSPE、PEG₁₀₀₀₀-DSPE包裹均可显著减弱巨噬细胞对粒子的吞噬作用。对于PEG₂₀₀₀-DSPE包裹微球，可通过增加PEG在粒子表面的比例达到逃逸巨噬细胞吞噬的效果。综上，PEG-DSPE链长及比例是影响巨噬细胞摄取的关键因素，在肺部缓控释递药系统中，可通过选用高分子量PEG-DSPE（PEG₅₀₀₀-DSPE、PEG₁₀₀₀₀-DSPE）或高比例（PEG-DSPE/PLGA 1：1）的PEG₂₀₀₀-DSPE包裹微球，达到逃逸肺巨噬细胞吞噬、延长药物肺内滞留的效果。

CODM是可待因和吗啡生物合成过程中的关键酶，本实验以NCBI数据库中的可待因-O-脱甲基酶基因（codeine-O-demethylase，CODM）序列为参考，克隆得到了罂粟和虞美人的CODM核苷酸序列，并对二者进行序列比对及生物信息学分析。结果发现，罂粟CODM有3种基因型，而虞美人CODM有5种基因型；生物信息学分析显示所有CODM蛋白无信号肽序列，预测这些蛋白都为非分泌性蛋白，属于Pcbc superfamily超基因家族。罂粟CODM氨基酸序列相同，但在不同罂粟资源中的表达量有明显差异，推测CODM基因转录水平变异可能与其非编码区序列有关，这为进一步开展罂粟生物碱类成分的合成与调控机制研究奠定基础。

截至2018年12月，世界范围内有900余个间充质干细胞（mesenchymal stem/stromal cell，MSC）研究项目正在开展或完成了临床研究，其数量一直占据各类干细胞疗法临床试验数量的第1位。近年来国内多个间充质干细胞产品开展了非注册临床研究，并开始按照药品申报临床试验。科学界对间充质干细胞的生物学功能及临床治疗效果在不断认知积累中，其体外培养观测到的功能受到体内实际生存环境的限制未能充分显现。不同组织来源间充质干细胞的培养方法、传代代次、细胞表型和功能均有差异，且制剂工艺、临床给药方式和剂量也显著影响临床疗效。间充质干细胞的体外培养条件、诱导方式与回输人体后微环境的差异性，使产品中的细胞难以保持分离前的原始状态。因此，间充质干细胞的来源、制备工艺和复杂性、多样性、变异性等特点，及其存在争议的定义和功能，也给按照药品审评审批带来了挑战。本文综述了国内外间充质干细胞的药物研发进展和临床研究现状，讨论了间充质干细胞的生产原材料、生产工艺、质量研究等药学评价要点，以期为国内间充质干细胞产品的药学评价提供参考。

用于重组蛋白药物生产的细胞库应来源于单个克隆，以保持重组蛋白药物在整个生命周期中质量的一致性。多种技术可用于转染后细胞群的单克隆化分离及确认。本文以CHO细胞为例，综述了工业界和监管机构对于生产用细胞库单克隆性的认知和了解，提出了基于目前技术水平对申报临床及申报上市阶段单克隆性的一般要求，并对非单克隆性来源细胞库的质量控制策略及审评要求提出建议，希望能够为研发机构成功建立重组蛋白药物生产用细胞库提供参考。