实验室检测

分组	$n$	阳性例数	阴性例数	阳性率
观察组	50	47	3	47(94)
对照组	50	39	11	39(78)
${\chi }^{2}$	-	-	-	6.352
$P$	-	-	-	<0.05

分组	$n$	阳性例数	阴性例数	阳性率
观察组	50	47	3	47(94)
对照组	50	39	11	39(78)
${\chi }^{2}$	-	-	-	6.352
$P$	-	-	-	<0.05

不同流感病毒检验方法的应用效果对比

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杨凯睿 ^*

实验室检测 | 评价与分析 2024,2(10): 113-115

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实验室检测 | 评价与分析 2024, 2(10): 113-115

不同流感病毒检验方法的应用效果对比

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杨凯睿^*

作者信息

四平市疾病预防控制中心四平 136000

杨凯睿,硕士,主管检验师,研究方向:病毒检验。

通讯作者:

*杨凯睿，硕士，主管检验师，研究方向：病毒检验。E-mail: 15104341076@163.com

Comparison of application effects of different influenza virus detection methods

Kai-Rui YANG^*

Affiliations

Disease Prevention and Control Center of Siping City Siping 136000 China

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摘要

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目的对比不同流感病毒检验方法的应用效果。方法选取于 2021 年 1月至 2023 年 6 月某院收治的 100 例流感患者,随机分为观察组(荧光 PCR 检验,Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)和对照组(胶体金免疫层析技术检验)各 50 人。结果相比对照组,观察组检验阳性率较高( $P<{0.05}$ )。结论采用荧光 RT-PCR检验流感病毒能够获得更高的检验效果, 提高检验的阳性率。

关键词

流感病毒 / 检验方法 / 应用效果

Abstract

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Objective To compare the application effects of different influenza virus detection methods. Methods 100 influenza patients admitted to a certain hospital from January 2021 to June 2023 were randomly divided into an observation group (fluorescence RT-PCR test) and a control group (colloidal gold immunochromatographic test), with 50 patients in each group. Results Compared with the control group, the observation group had a higher positive rate of testing (P<0.05). Conclusion Using fluorescence RT-PCR to detect influenza virus can achieve higher detection results and improve the positivity rate of the test.

Key words

influenza virus / inspection method / application effect

引用本文

杨凯睿. 不同流感病毒检验方法的应用效果对比. 实验室检测, 2024 , 2 (10) : 113 -115 .

Kai-Rui YANG. Comparison of application effects of different influenza virus detection methods[J]. Laboratory Testing, 2024 , 2 (10) : 113 -115 .

正文

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0 引言

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流感是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。流感病毒可分为甲、乙、丙三型,其中甲、乙型流感病毒是最常见的两种。流感的主要症状包括突发高热、头痛、肌肉酸痛、咳嗽、喉咙痛、乏力等,严重时可导致并发症甚至死亡。流感在全球范围内广泛传播, 每年都会出现季节性流感流行。流感的传播途径主要包括飞沫传播和接触传播, 特别是在人群密集的场所更容易传播。虽然流感一般是自限性疾病,但对于某些人群, 如老年人、儿童、孕妇和患有慢性疾病的人来说, 流感可能会带来更严重的后果, 对公共卫生和个体健康都具有重要影响 ^{[ 1 ]} 。准确、快速地检测流感病毒的存在和类型, 对于指导流感的预防、控制和治疗具有重要意义。通过及时检测,可以迅速发现流感病毒的感染情况, 为防控措施的制定和实施提供科学依据。这有助于阻止病毒的进一步传播, 降低感染率, 同时,准确的检测结果可以帮助医生了解患者的病情和感染类型, 从而制定针对性的治疗方案,提高治疗效果。

不同的流感病毒检验方法都有其优点和局限性。胶体金法以其操作方法简单、耗时短和费用低。然而, 其漏检率较高, 且无法对流感病毒进行亚型鉴定, 这在一定程度上限制了其应用范围。细胞培养法和鸡胚培养法虽然能够分离到病毒并观察其生物学特性, 但实验耗时长, 对实验人员技术要求较高, 且存在病毒不能长期保存等问题 ^{[ 2 ]} 。荧光 RT-PCR 法通过荧光信号的实时监测, 能够准确判断样品中是否存在流感病毒, 并有效避免假阳性结果的发生。此外, 荧光 RT-PCR 法还具有操作简便、自动化程度高等优点, 使得其在流感病毒检测中得到广泛应用。因此, 对不同流感病毒检验方法的应用效果进行对比研究, 对于及时诊断、追踪病毒传播、制定公共卫生策略等方面都具有重要意义 ^{[ 3 ]} 。本文旨在对比不同流感病毒检验方法的应用效果, 帮助选择最适合的方法, 提高流感病毒的检测准确性和效率。

1 资料与方法

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1.1 一般资料

选取于 2021 年 1 月至 2023 年 6 月某院收治的 100 例流感患者,随机分为观察组男 26 例、女 24 例,平均年龄(35.26±6.13) 岁；对照组男 27 例、女 23 例,平均年龄(35.87±6.19)岁。一般资料无差异, $P >{0.05}$ 。纳入标准: 所有研究对象 (家属) 均签订知情同意书,流感患者或有流感症状的个体。排除标准:(1)其他呼吸道感染:存在其他已知呼吸道病原体感染,如呼吸道合胞病毒、冠状病毒等；(2) 其他慢性疾病:存在其他严重慢性疾病或免疫缺陷状态；(3) 孕妇: 怀孕的女性,因为流感病毒检验方法可能对胎儿产生潜在风险；(4) 未满足样本要求: 如样本量不足、采样不规范或样本质量不佳等。本研究已获得伦理委员会的同意及批准。

1.2 方法

荧光 RT-PCR 技术是一种在常规 PCR 基础上发展起来的定量 PCR 技术。通过在 PCR 反应体系中加入荧光基团, 利用荧光信号累积, 实时监测整个 PCR 进程, 最后根据 CT 值和标准曲线, 对未知模板进行定量分析。这种技术特别适用于 RNA 病毒的检测, 如流感病毒。荧光 RT-PCR 检验流感病毒的原理为: 首先, 从疑似流感患者的样本 (如鼻咽拭子) 中提取流感病毒的 RNA。使用逆转录酶将提取的流感病毒 RNA 反转录成 cDNA。使用特异性引物和探针, 通过 PCR 扩增 cDNA。在 PCR 反应体系中加入荧光基团, 实时监测 PCR 进程。根据荧光信号的强弱,判断样本中是否存在流感病毒。同时,通过 CT 值和标准曲线, 对流感病毒进行定量分析。胶体金免疫层析技术在检验流感病毒方面也具有一定的应用。胶体金免疫层析技术利用胶体金作为显色媒介,结合免疫学中抗原抗体特异性结合的原理。在层析过程中, 样品中的流感病毒与胶体金标记的特异性抗体结合,抑制抗体和检测线(T 线)上偶联抗原的免疫反应,从而导致检测线颜色深浅的变化。通过比较检测线与控制线 (C 线) 的颜色深浅,可以对样品中的流感病毒进行定性检测 ^{[ 4 ]} 。

对照组应用胶体金免疫层析技术检验: 采集患者咽拭子、鼻拭子或其他相应的标本, 根据临床需要选择合适的样本类型。将胶体金试剂、稀释液和其他必要试剂按照说明书中的要求准备好, 确保试剂在规定的温度下保存。将采集的样本加到提取缓冲液中, 混匀后待用。根据具体试剂盒的要求, 可能需要对样本进行离心等处理。取出测试条, 使用吸管或移液器将处理后的样本滴在样本加载口处。根据说明书上的要求, 滴加适量的样本。等待一定时间 (通常几分钟), 让样本在测试条上进行反应。观察测试窗口中是否出现线条 (阳性结果) 或无线条 (阴性结果)。线条的颜色强度可能表示病毒量的多少。根据试剂盒使用说明书中的标准, 判断结果为阳性、阴性或无效。阳性结果可能需要进行确认检测或其他进一步的检查。

观察组应用荧光 RT-PCR 检验: 采集患者咽拭子、鼻拭子或其他相应的标本, 确保标本采集过程符合无菌操作规范。使用相应的核酸提取试剂盒, 提取样本中的核酸。按照试剂盒说明书的要求进行核酸提取步骤。准备 RT-PCR 反应液, 包括逆转录试剂、PCR 酶、引物、探针等。根据实验方案和试剂盒说明书准备反应液。将提取的核酸与逆转录试剂混合, 在适当的温度条件下进行逆转录反应, 将病毒 RNA 转录成相应的 DNA。将逆转录反应产生的 cDNA 用作 PCR 反应的模板, 引物和探针将目标基因扩增并检测。设定合适的 PCR 程序和温度梯度。在 PCR 反应过程中,使用荧光探针或染料监测 PCR 产物的累积情况。荧光信号的变化反映了靶基因的扩增情况。通过荧光信号的强度和特定的阈值判断样本是否为阳性或阴性。通常会比较样本的荧光信号与阳性对照的信号来确定结果。根据实验数据和结果, 判断样本是否为流感病毒阳性, 以及可能的亚型信息。最后,对比上述两种检验方法的检验阳性率。

1.3 统计学分析

运用 SPSS22.0 统计学软件,用 “ $\left({\bar{x}\pm s}\right)$ ”、 $\left\lbrack {n\left(\%\right)}\right\rbrack$ 表示,“ $t$ 检验”、“ ${\chi }^{2}$ 检验”, $P <{0.05}$ 为差异有统计学意义。

2 结果与分析

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检验阳性率: 观察组高于对照组, 差异具有统计学意义 $\left({P <{0.05}}\right)$ ,见表 1 。主要原因在于荧光 RT-PCR 检验流感病毒能够检测到极微量的流感病毒 RNA,通过特异性引物和探针的设计,确保检测结果的准确性。

3 讨论与结论

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流感病毒是一种 RNA 病毒,属于正粘病毒科。这种病毒会引起流感, 这是一种高度传染性的呼吸道疾病。流感病毒主要

通过空气中的飞沫、人与人的接触或接触被污染物品进行传播。病毒侵入人体后,会引起一系列症状,包括发热、咳嗽、喉咙痛、鼻塞、肌肉疼痛、疲劳等 ^{[ 5 ]} 。流感病毒有多种不同的亚型,其中最常见的是 $\mathrm{A}$ 、 $\mathrm{B}$ 和 $\mathrm{C}$ 型。 $\mathrm{A}$ 型流感病毒在人和多种动物中都有发现, 如禽类、猪、马、海豹等, 其变异性较强, 常常导致流感的大流行。 $\mathrm{B}$ 型主要感染人类,而 $\mathrm{C}$ 型则引起较轻微的疾病。病毒的基因组由 8 段 RNA 分子组成, 这种结构使得病毒有机会在宿主细胞中发生突变和重组, 进而增强免疫逃避性, 使人们更容易被新型流感病毒感染。国内外研究显示 ^{[ 6 - 7 ]} ,对于某些人群, 特别是年老或患有慢性疾病的人, 流感病毒可能会导致严重的并发症,如肺炎和心脏问题,流感对人类健康和社会稳定构成严重威胁。随着科学技术的不断发展,多种流感病毒检验方法应运而生, 包括胶体金法、细胞培养法、鸡胚培养法以及荧光 RT-PCR 法 ^{[ 8 ]} 。这些方法各具特色,但在实际应用中, 其效果差异显著 ^{[ 9 ]} 。

本文通过对比不同流感病毒检验方法的应用效果, 结果显示,观察组检验阳性率高于对照组 $\left({P <{0.05}}\right)$ 。原因为: 首先, 荧光 RT-PCR 检验可以在极低的病毒载量下检测出流感病毒的存在, 甚至能够在病毒感染初期或患者处于无症状期时, 就能准确诊断。这对于及时控制疫情传播、防止疾病恶化具有重要意义。相比之下, 胶体金免疫层析技术的灵敏度相对较低, 可能在病毒载量较低时无法准确检测。其次, 荧光 RT-PCR 检验能够精确识别流感病毒的核酸序列, 有效区分不同亚型的流感病毒,甚至能够检测出病毒的变异情况。这为疫情溯源、病毒监测和疫苗研发提供了重要的科学依据。而胶体金免疫层析技术虽然操作简便, 但可能在区分不同病毒或亚型方面存在局限性。此外, 荧光 RT-PCR 检验还具有高通量的特点。它可以在短时间内处理大量样本, 满足大规模筛查和监测的需求。而胶体金免疫层析技术虽然操作简便, 但在处理大量样本时可能效率较低。最后,荧光 RT-PCR 检验的结果更加准确可靠。它采用实时荧光信号监测, 可以直观反映病毒核酸的扩增情况, 有效避免假阳性或假阴性结果的出现。同时, 荧光 RT-PCR 技术已经广泛应用于临床实验室, 技术成熟, 结果稳定可靠。因此, 荧光 RT-PCR 检验在流感病毒检测中具有显著的优势特点, 适用于临床实验室和科研机构的流感病毒检测和监测工作。然而, 荧光 RT-PCR 对实验室环境和仪器要求较高, 且操作相对复杂, 需要专业人员操作, 所以在实际应用中需要根据实际情况进行选择 ^{[ 10 ]} 。

相比胶体金免疫层析技术检验, 采用荧光 RT-PCR 检验流感病毒能够获得更高的检验效果。

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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2024年第2卷第10期

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首发时间：2025-07-29

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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