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目的 探讨卡式微柱凝胶法、凝聚胺法在输血前患者血型鉴定及红细胞不规则抗体筛查中的临床应用价值。方法 选取2022年8月—2024年7月某三甲医院申请输血治疗的125例患者为研究对象,均予以卡式微柱凝胶法、凝聚胺法检测血型及红细胞不规则抗体,比较两种检测方式的配血时间、血型鉴定准确率和红细胞不规则抗体检出率。结果 卡式微柱凝胶法配血时间短于凝聚胺法(P<0.05);卡式微柱凝胶法 ABO血型、RhO血型一次性准确率高于凝聚胺法(P<0.05);卡式微柱凝胶法红细胞不规则抗体检出率高于凝聚胺法(P<0.05)。结论 与凝聚胺法相比,卡式微柱凝胶法在输血前血型及不规则抗体检测中具有显著优势,能提高检测可靠性、准确性,并节省配血时间,为临床输血安全提供更有力的保障。

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*林沛贤,研究方向为医学检验技术。E-mail:
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Rh血型系统5种分型抗原同型输血在血液病患者精准化输血治疗中的价值研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2023. 33(14): 1706-1709., articleTitle=Rh血型系统5种分型抗原同型输血在血液病患者精准化输血治疗中的价值研究, refAbstract=null), Reference(id=1156979678352335271, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2022, volume=19, issue=10, pageStart=1397, pageEnd=1400, url=null, language=null, rfNumber=[14], rfOrder=13, authorNames=刘学军, 刘金莲, 马婷婷, journalName=检验医学与临床, refType=null, unstructuredReference=刘学军, 刘金莲, 马婷婷, 等 . 电子交叉配血技术在红细胞不规则抗体阳性患者交叉配血中的应用研究[J]. 检验医学与临床, 2022. 19(10): 1397-1400., articleTitle=电子交叉配血技术在红细胞不规则抗体阳性患者交叉配血中的应用研究, refAbstract=null), Reference(id=1156979678415249834, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2024, volume=37, issue=03, pageStart=352, pageEnd=356, url=null, language=null, rfNumber=[15], rfOrder=14, authorNames=姚文娟, 高珺, 穆启明, journalName=中国输血杂志, refType=null, unstructuredReference=姚文娟, 高珺, 穆启明, 等 . 亚洲型DEL母亲产生抗-c致新生儿溶血病的母子输血救治[J]. 中国输血杂志, 2024. 37(03): 352-356., articleTitle=亚洲型DEL母亲产生抗-c致新生儿溶血病的母子输血救治, refAbstract=null), Reference(id=1156979678612382127, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2023, volume=31, issue=05, pageStart=1475, pageEnd=1480, url=null, language=null, rfNumber=[16], rfOrder=15, authorNames=马婷婷, 刘学军, 黄宝甲, journalName=中国实验血液学杂志, refType=null, unstructuredReference=马婷婷, 刘学军, 黄宝甲, 等 . 抗–c,抗-E,抗-Jka和抗–Fya复杂联合抗体的鉴定[J]. 中国实验血液学杂志, 2023. 31(05): 1475-1480., articleTitle=抗–c,抗-E,抗-Jka和抗–Fya复杂联合抗体的鉴定, refAbstract=null), Reference(id=1156979678775959986, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2022, volume=41, issue=06, pageStart=610, pageEnd=612, url=null, language=null, rfNumber=[17], rfOrder=16, authorNames=韩冬梅, 黄义春, 李宜文, journalName=皖南医学院学报, refType=null, unstructuredReference=韩冬梅, 黄义春, 李宜文, 等 . 1例抗筛阳性患者不规则抗体的鉴定与分析[J]. 皖南医学院学报, 2022. 41(06): 610-612., articleTitle=1例抗筛阳性患者不规则抗体的鉴定与分析, refAbstract=null), Reference(id=1156979678956315061, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2022, volume=46, issue=06, pageStart=902, pageEnd=903, url=null, language=null, rfNumber=[18], rfOrder=17, authorNames=张亚军, 左林霞, 王妮, journalName=贵州医药, refType=null, unstructuredReference=张亚军, 左林霞, 王妮. 卡式微柱凝胶试验在临床输血检验中的应用效果研究[J]. 贵州医药, 2022. 46(06): 902-903., articleTitle=卡式微柱凝胶试验在临床输血检验中的应用效果研究, refAbstract=null), Reference(id=1156979679061172664, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2022, volume=38, issue=02, pageStart=165, pageEnd=170, url=null, language=null, rfNumber=[19], rfOrder=18, authorNames=崔颖, 张勇萍, 杨世明, journalName=细胞与分子免疫学杂志, refType=null, unstructuredReference=崔颖, 张勇萍, 杨世明, 等 . 不规则抗体筛选与特异性鉴定的影响因素及其对策分析[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2022. 38(02): 165-170., articleTitle=不规则抗体筛选与特异性鉴定的影响因素及其对策分析, refAbstract=null), Reference(id=1156979679178613178, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, doi=null, pmid=null, pmcid=null, year=2023, volume=36, issue=04, pageStart=245, pageEnd=248, url=null, language=null, rfNumber=[20], rfOrder=19, authorNames=何飞, 欧贵勇, 陶慧, journalName=临床血液学杂志, refType=null, unstructuredReference=何飞, 欧贵勇, 陶慧, 等 . 不同效价抗-E因剂量效应导致配血结果假阴性情况分析[J]. 临床血液学杂志, 2023. 36(04): 245-248., articleTitle=不同效价抗-E因剂量效应导致配血结果假阴性情况分析, refAbstract=null)], funds=null, companyList=[AuthorCompany(id=1156979672815853852, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, xref=null, ext=[AuthorCompanyExt(id=1156979672820048157, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, companyId=1156979672815853852, language=CN, country=null, province=null, city=null, postcode=null, companyName=null, departmentName=null, remark=广州南方学院 广州 510000)])], figs=[ArticleFig(id=1156979676464898410, tenantId=1146029695717560320, journalId=1146119944283992078, articleId=1154069361951236591, language=EN, label=null, caption=null, figureFileSmall=null, figureFileBig=null, tableContent=
组别 例数 样本处理 时间 实验操作 时间 结果判读 时间 总用时
卡式微柱凝 胶法 125 ${5.12} \pm {0.75}$ ${8.45} \pm {1.21}$ ${1.35} \pm {0.22}$ ${14.92} \pm {1.55}$
凝聚胺法 125 ${6.85} \pm {0.91}$ ${12.25} \pm {1.57}$ ${3.18} \pm {0.45}$ ${22.15} \pm {2.07}$
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组别 例数 样本处理 时间 实验操作 时间 结果判读 时间 总用时
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组别 例数 抗-c 抗-C 抗 -e 抗-E 抗-D 总检出率
卡式微柱 凝胶法 125 1(0.80) 1(0.80) 2(1.60) 3(2.40) 2(1.60) 9(7.20)
凝聚胺法 125 1(0.80) 0(0.00) 0(0.00) 1(0.80) 0(0.00) 2(1.60)
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组别 例数 抗-c 抗-C 抗 -e 抗-E 抗-D 总检出率
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血型及红细胞不规则抗体检测中卡式微柱凝胶法与凝聚胺法临床应用价值分析
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林沛贤 *
实验室检测 | 评价与分析 2025,3(4): 113-115
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血型及红细胞不规则抗体检测中卡式微柱凝胶法与凝聚胺法临床应用价值分析
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林沛贤*
作者信息
  • 广州南方学院 广州 510000

通讯作者:

*林沛贤,研究方向为医学检验技术。E-mail:
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出版时间: 2025-02-23
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目的 探讨卡式微柱凝胶法、凝聚胺法在输血前患者血型鉴定及红细胞不规则抗体筛查中的临床应用价值。方法 选取2022年8月—2024年7月某三甲医院申请输血治疗的125例患者为研究对象,均予以卡式微柱凝胶法、凝聚胺法检测血型及红细胞不规则抗体,比较两种检测方式的配血时间、血型鉴定准确率和红细胞不规则抗体检出率。结果 卡式微柱凝胶法配血时间短于凝聚胺法(P<0.05);卡式微柱凝胶法 ABO血型、RhO血型一次性准确率高于凝聚胺法(P<0.05);卡式微柱凝胶法红细胞不规则抗体检出率高于凝聚胺法(P<0.05)。结论 与凝聚胺法相比,卡式微柱凝胶法在输血前血型及不规则抗体检测中具有显著优势,能提高检测可靠性、准确性,并节省配血时间,为临床输血安全提供更有力的保障。

血型及红细胞不规则抗体检测  /  卡式微柱凝胶法  /  凝聚胺法
林沛贤. 血型及红细胞不规则抗体检测中卡式微柱凝胶法与凝聚胺法临床应用价值分析. 实验室检测, 2025 , 3 (4) : 113 -115 .
0 引言
输血作为临床治疗中重要手段,在急危重症救治、重大手术保障、血液系统疾病治疗中发挥着不可替代的作用[1]。李茜等[2]的研究表明,输血安全性始终是临床关注的核心问题,其中$\mathrm{{ABO}}$血型、$\mathrm{{Rh}}$血型分型准确性、红细胞不规则抗体检测灵敏性是保障输血安全关键环节。安宁等[3]的研究指出,血型鉴定、不规则抗体筛查误差可能导致溶血性输血反应等严重输血相关并发症, 危及患者生命安全。凝聚胺法为一种传统血型检测方法, 操作步骤相对简单, 便于医务人员快速掌握, 适合于培训水平有限或技术人员短缺的医疗机构[4],但依赖手工操作, 结果判读受操作者主观经验影响显著, 可能因技术水平差异导致检测结果重复性、一致性较差[5]。近年来,卡式微柱凝胶法作为一种新型血型检测技术, 在检测红细胞不规则抗体、 弱抗体、低滴度抗体时具有显著灵敏性, 能有效减少漏检风险,且对抗原抗体反应检测特异性高,能显著降低误检率,确保结果准确性[6]。已有研究表明[7],卡式微柱凝胶法在血型分型、不规则抗体检测中的应用具有较高可靠性、重复性,但针对其在临床实际应用中全面比较研究仍较为有限。基于此, 本研究通过对输血前患者血型及红细胞不规则抗体检测中卡式微柱凝胶法、凝聚胺法进行直接对比分析, 评价卡式微柱凝胶法和凝聚胺法在临床输血检测中的应用价值, 为临床输血检测技术选择提供可靠的循证依据。
选取 2022 年 8 月 -2024 年 7 月某三甲医院申请输血治疗的 125 例患者为研究对象, 男 67 例, 女 58 例; 年龄 18~73 岁,平均$\left({{45.57}\pm {12.45}}\right)$岁; 体质量指数${18.1}\sim {25.3}\mathrm{\;{kg}}/{\mathrm{m}}^{2}$,平均$\left({{21.29}\pm {2.15}}\right)\mathrm{{kg}}/{\mathrm{m}}^{2}$。纳入标准:(1)年龄≥18岁;(2)临床诊断明确且需进行输血治疗者;(3)病历资料完整;(4)实验室检查指标符合要求, 包括明确的 ABO 血型、Rh 血型分型记录;(5) 签署知情同意书。排除标准:(1)血液标本存在溶血、脂血、污染情况, 导致检测结果可能偏离实际;(2)近期有大剂量免疫球蛋白治疗、移植术后免疫抑制剂治疗等可能干扰血型及不规则抗体检测结果的药物应用史;(3)妊娠或哺乳期女性;(4)患有自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征等与血型检测存在直接干扰的血液系统疾病者;(5)既往存在不规则抗体强阳性反应, 导致标准化检测方法难以有效识别弱抗体者。此研究项目已通过医院伦理委员会审查与许可。
输血前患者均在空腹状态下抽取外周静脉血$3\mathrm{\;{mL}}$,放入乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝真空无菌采血管内。(1)卡式微柱凝胶法: 采用江苏力博医药生物科技股份有限公司微柱凝胶卡实施标记,用低离子溶液将 3 种谱红细胞配成 0.5%~0.8% 浓度,分别加入标记好的微管中,各${50\mu }\mathrm{L}$; 分离血浆,分别在$\mathrm{I}$、$\mathrm{{II}}$、$\mathrm{{III}}$内加入${50\mu }\mathrm{L}$血浆,再对应加入${50\mu }\mathrm{L}\mathrm{I}$、$\mathrm{{II}}$、 III 号不规则抗体筛查谱细胞,放在${37}^{\circ }\mathrm{C}$孵育器中孵育${15}\mathrm{\;{min}}$; 以离心半径$8\mathrm{\;{cm}}$、${900}\mathrm{\;r}/\mathrm{{min}}$离心处理$2\mathrm{\;{min}}$,离心半径$8\mathrm{\;{cm}}$、${1500}\mathrm{r}/\mathrm{{min}}$离心处理$3\mathrm{\;{min}}$,取出;依据谱红细胞反应格局判定结果, 红细胞完全沉降在凝胶管底部为阴性, 红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中端为阳性。(2)凝聚胺法: 用全自动血型分析仪(烟台澳斯邦生物工程有限公司;AusBG STAR8216 型)检测,吸取试管内${50\mu }\mathrm{L}$血浆与${25\mu }\mathrm{L}$筛选细胞分配至微孔内, 将微板置于${22}^{\circ }\mathrm{C}$孵育器中孵育$5\mathrm{\;{min}}$,各微孔中加${100\mu }\mathrm{L}$低离子溶液与${50\mu }\mathrm{L}$凝聚胺溶液,再将微板置于离心机,以离心半径$8\mathrm{\;{cm}}$、${500}\mathrm{\;r}/\mathrm{{min}}$离心处理$2\mathrm{\;{min}}$,吸取上清后加入${50\mu }\mathrm{L}$重悬液后,以离心半径$8\mathrm{\;{cm}}\text{、}{1200}\mathrm{r}/\mathrm{{min}}$离心处理${20}\mathrm{\;s}$,倒在玻璃片上, 依据血型判读仪读取结果, 显微镜或肉眼观察有无凝集,凝集表示血液不合,无凝集表示血液适合。
(1)配血时间:记录从血样接收开始至完成配血检测时间, 包含样本处理时间、实验操作时间、结果判读时间。
(2)血型鉴定准确率:以实验室内部及外部质控标准化数据为参考,分别计算两种检测方式在$\mathrm{{ABO}}$血型、$\mathrm{{Rh}}$血型分型检测中准确率。
(3)红细胞不规则抗体检出率:观察两种检测方式对抗$-\mathrm{c}$、 抗 -C、抗 -e、抗 -E、抗 -D 不规则抗体检出率。
采用 SPSS 25.0 统计软件, 计数资料用例数 (%) 代表, 结果用${\chi }^{2}$检验; 计量资料用均数$\pm$标准差$\left({\bar{x}\pm s}\right)$代表,结果用$t$检验,$P <{0.05}$说明差异有统计学意义。
卡式微柱凝胶法配血时间短于凝聚胺法, 差异有统计学意义$\left({P <{0.05}}\right)$,见 表 1
卡式微柱凝胶法$\mathrm{{ABO}}$血型、$\mathrm{{RhO}}$血型一次性准确率分别为${99.20}\%\left({{124}/{125}}\right)\text{、}{98.40}\%\left({{123}/{125}}\right)$,显著高于凝聚胺法的 94.40%(118/125)、92.00%(115/125),差异有统计学意义$\left({{\chi }^{2}= {4.648}\text{、}{5.602}, P ={0.031}\text{、}{0.018}}\right)$。
卡式微柱凝胶法红细胞不规则抗体检出率高于凝聚胺法, 差异有统计学意义$\left({P <{0.05}}\right)$,见 表 2
输血为临床医学中重要治疗手段,主要适用于急性失血性休克、严重贫血、恶性肿瘤化疗后骨髓抑制、血液系统疾病、 围术期大出血等多种病理生理状态[8-10]。邓卫宁等[11]指出,输血前血型检查在输血安全保障中具有核心地位, 其准确性直接关系到患者输血后疗效、不良反应发生率。ABO 血型鉴定错误可引起急性溶血性输血反应,表现为发热、寒战、黄疸甚至急性肾衰竭,严重时危及生命安全[12]。Rh 血型分型不准确可能导致受者体内产生针对供者红细胞抗原的不规则抗体, 导致输血后迟发性溶血性反应,影响后续输血效果[13]。红细胞不规则抗体筛查错误可能遗漏低滴度或弱反应抗体, 增加抗体相关并发症发生风险,特别是在多次输血患者中,可能对输血敏感性造成不良影响[14]。因此,临床需加强输血前血型检测、红细胞不规则抗体筛查。
凝聚胺法通过在低离子强度环境下使用凝聚胺试剂增强抗原抗体之间反应效率,从而提高检测阳性率[15],但该方式操作流程中对手工技能依赖较强, 实验结果易受操作人员经验、主观判断影响,判读一致性较差[16]。卡式微柱凝胶法通过微柱凝胶介质将红细胞、试剂充分混合反应,显著提高检测灵敏度、 特异性[17-18]。本研究结果显示,卡式微柱凝胶法配血时间短于凝聚胺法$\left({P <{0.05}}\right)$,与崔颖等[19]研究结果相似,提示卡式微柱凝胶法在输血前检测中时间效率具有明显优势。分析原因: 卡式微柱凝胶法采用预装试剂微柱凝胶卡作为反应载体, 通过将反应体系固定于凝胶介质中, 实现抗原抗体高效结合与快速反应, 这种封闭式系统使实验步骤高度整合, 无需像传统凝聚胺法那样进行繁琐试剂配制、多次手工分注, 减少实验前准备时间,并避免试剂配制中人为误差,提高操作效率;凝胶介质提供稳定的物理支撑环境, 使抗体与抗原在离心力作用下能快速聚集, 显著加快反应进程, 而无需传统方法中通过延长反应时间达到肉眼可观察的凝集效果, 且卡式微柱凝胶法离心步骤利用离心作用将未结合的红细胞移出反应区域, 结合后的红细胞被捕获在凝胶层中形成清晰的凝集带, 这种高效分离机制不仅能缩短判读所需时间,还能提高结果直观性、稳定性。
此外,本研究结果显示,卡式微柱凝胶法$\mathrm{{ABO}}$血型、$\mathrm{{RhO}}$血型一次性准确率、红细胞不规则抗体检出率高于凝聚胺法$\left({P <{0.05}}\right)$,与何飞等[20]研究结果相似,卡式微柱凝胶法在输血前血型鉴定、红细胞不规则抗体检测中具有更高的可靠性、 稳定性。分析认为: 卡式微柱凝胶法采用凝胶介质作为反应载体, 将红细胞、抗体反应体系固定在微柱内, 这种固定结构提供一个高度稳定的反应环境, 避免传统方法中因试剂混合不充分或离心操作不规范导致的抗原抗体结合不完全问题, 凝胶物理特性能有效减少外界环境条件(如温度、湿度)对反应过程的干扰, 从而确保检测灵敏性、特异性; 卡式微柱凝胶法利用离心力加速抗原抗体结合过程,通过凝胶介质分离作用将未结合的红细胞移出反应区, 而结合后的红细胞在凝胶中被捕获, 形成清晰的凝集图像, 相比传统凝聚胺法依赖手工观察反应结果, 这种结果呈现方式更加直观且稳定, 显著降低因操作者主观判断带来的误差风险,且凝胶介质能阻止非特异性反应扩散, 减少背景噪声对检测结果干扰, 从而进一步提高血型鉴定准确性。
综上所述, 与凝聚胺法相比, 卡式微柱凝胶法在输血前血型及不规则抗体检测中具有显著优势, 不仅能提高检测可靠性、准确性, 还能减少假阴性、假阳性率, 并节省配血时间, 为临床输血安全提供更有力的保障。本研究的局限性在于样本量较少,且样本来源较为单一,可能影响结果客观性,故后续需开展多中心及加大样本量以证实凝聚胺法、卡式微柱凝胶法在输血前检测中的应用价值, 为输血医学发展、临床实践提供更为坚实的证据支持。
参考文献 引证文献
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Genus
种数
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species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae 2 11 5.26 鹅膏菌属 Amanita 10 4.78
小菇科 Mycenaceae 2 12 5.74 丝盖伞属 Inocybe 5 2.39
多孔菌科 Polyporaceae 8 14 6.70 蜡蘑属 Laccaria 5 2.39
红菇科 Russulaceae 3 23 11.00 小皮伞属 Marasmius 6 2.87
小菇属 Mycena 11 5.26
光柄菇属 Pluteus 5 2.39
红菇属 Russula 17 8.13
栓菌属 Trametes 5 2.39
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