实验室检测

细菌培养法		细菌感染/例	非细菌感染/例	合计 / 例
金标准	细菌感染	48	4	52
非细菌感染	5	29	34
合计		53	33	86
革兰染色法		细菌感染 / 例	非细菌感染/例	合计 / 例
金标准	细菌感染	36	16	52
非细菌感染	12	22	34
合计		48	38	86

细菌培养法

细菌感染/例

非细菌感染/例

合计 / 例

金标准

细菌感染

非细菌感染

合计

革兰染色法

细菌感染 / 例

非细菌感染/例

合计 / 例

金标准

细菌感染

非细菌感染

合计

细菌培养法		细菌感染/例	非细菌感染/例	合计 / 例
金标准	细菌感染	48	4	52
非细菌感染	5	29	34
合计		53	33	86
革兰染色法		细菌感染 / 例	非细菌感染/例	合计 / 例
金标准	细菌感染	36	16	52
非细菌感染	12	22	34
合计		48	38	86

细菌培养法

细菌感染/例

非细菌感染/例

合计 / 例

金标准

细菌感染

非细菌感染

合计

革兰染色法

细菌感染 / 例

非细菌感染/例

合计 / 例

金标准

细菌感染

非细菌感染

合计

方法	准确度例	灵敏度例(%)	特异度例
细菌培养法	77(89.53)	48(92.31)	29(85.29)
革兰染色法	58(67.44)	36(69.23)	22(67.71)
${\chi }^{2}$	12.431	8.914	3.843
$P$	< 0.001	0.003	0.050

方法

准确度例

灵敏度例(%)

特异度例

细菌培养法

77(89.53)

48(92.31)

29(85.29)

革兰染色法

58(67.44)

36(69.23)

22(67.71)

${\chi }^{2}$

12.431

8.914

3.843

$P$

< 0.001

0.003

0.050

方法	准确度例	灵敏度例(%)	特异度例
细菌培养法	77(89.53)	48(92.31)	29(85.29)
革兰染色法	58(67.44)	36(69.23)	22(67.71)
${\chi }^{2}$	12.431	8.914	3.843
$P$	< 0.001	0.003	0.050

方法

准确度例

灵敏度例(%)

特异度例

细菌培养法

77(89.53)

48(92.31)

29(85.29)

革兰染色法

58(67.44)

36(69.23)

22(67.71)

${\chi }^{2}$

12.431

8.914

3.843

$P$

< 0.001

0.003

0.050

方法		棒状杆菌/例(%)	肠球菌/例(%)	加特纳菌 / 例(%)
细菌培养法	52	13(25.00)	19(36.54)	18(34.62)
革兰染色法	52	9(17.31)	10(19.23)	15(28.85)
${\chi }^{2}$		0.922	3.873	0.399
$P$		0.337	0.049	0.527

方法

棒状杆菌/例(%)

肠球菌/例(%)

加特纳菌 / 例(%)

细菌培养法

13(25.00)

19(36.54)

18(34.62)

革兰染色法

9(17.31)

10(19.23)

15(28.85)

${\chi }^{2}$

0.922

3.873

0.399

$P$

0.337

0.049

0.527

方法		棒状杆菌/例(%)	肠球菌/例(%)	加特纳菌 / 例(%)
细菌培养法	52	13(25.00)	19(36.54)	18(34.62)
革兰染色法	52	9(17.31)	10(19.23)	15(28.85)
${\chi }^{2}$		0.922	3.873	0.399
$P$		0.337	0.049	0.527

方法

棒状杆菌/例(%)

肠球菌/例(%)

加特纳菌 / 例(%)

细菌培养法

13(25.00)

19(36.54)

18(34.62)

革兰染色法

9(17.31)

10(19.23)

15(28.85)

${\chi }^{2}$

0.922

3.873

0.399

$P$

0.337

0.049

0.527

方法		诊断检出用时范围/d	平均诊断检出用时/d
细菌培养法	86	3.08~5.45	${4.21} \pm {0.69}$
革兰染色法	86	0.31 ~1.20	${0.49} \pm {0.10}$
$t$			49.480
$P$			$< {0.001}$

方法

诊断检出用时范围/d

平均诊断检出用时/d

细菌培养法

3.08~5.45

${4.21} \pm {0.69}$

革兰染色法

0.31 ~1.20

${0.49} \pm {0.10}$

$t$

49.480

$P$

$< {0.001}$

方法		诊断检出用时范围/d	平均诊断检出用时/d
细菌培养法	86	3.08~5.45	${4.21} \pm {0.69}$
革兰染色法	86	0.31 ~1.20	${0.49} \pm {0.10}$
$t$			49.480
$P$			$< {0.001}$

方法

诊断检出用时范围/d

平均诊断检出用时/d

细菌培养法

3.08~5.45

${4.21} \pm {0.69}$

革兰染色法

0.31 ~1.20

${0.49} \pm {0.10}$

$t$

49.480

$P$

$< {0.001}$

细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用分析

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孙靖 ^*

实验室检测 | 评价与分析 2025,3(5): 125-127

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实验室检测 |评价与分析 2025 , 3 (5) : 125 -127

细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用分析

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孙靖^*

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白山市人民医院检验科白山 134300

通讯作者:

^*孙靖，中级检验师，研究方向为医学检验（细菌生化）。E-mail: 40069070@qq.com

Affiliations

出版时间: 2025-03-08

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摘要

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目的探究细菌培养法、革兰染色法在阴道细菌检验中的应用价值。方法 86例疑似细菌性阴道炎患者,采集其阴道分泌物,分别应用细菌培养鉴定、革兰染色法镜检诊断,以指南标准为金标准,分析细菌培养、革兰染色法对其诊断价值。结果金标准诊断,86例患者中细菌感染52例、非细菌感染 34例;革兰染色法诊断准确度、灵敏度分别为67.44%、69.23%,均较细菌培养法89.53%、92.31%低(P<0.05);革兰染色法诊断特异度 67.71%,与细菌培养法85.29%相近(P>0.05);肠球菌阳性检出率比较,革兰染色法均小于细菌培养法(P<0.05);棒状杆菌、加特纳菌阳性检出率比较,革兰染色法、细菌培养法结果相近(P>0.05);检出时间对比,革兰染色法<细菌培养法(P<0.05)。结论阴道细菌检验中,细菌培养法可提升诊断效能及各细菌阳性检出率,但革兰染色法可缩短结果检出时间。

关键词

阴道细菌 / 细菌培养法 / 革兰染色法

引用本文

孙靖. 细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用分析. 实验室检测, 2025 , 3 (5) : 125 -127 .

正文

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0 引言

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细菌性阴道炎临床常见,临床表现为分泌物增加、异味、外阴烧灼感等,影响免疫功能,增加宫颈癌发生风险^[1]。针对性使用抗生素治疗,可降低阴道内细菌浓度, 控制病症进展,因此对该病诊断准确性要求较高。Amsel 为该病诊断金标准,通过检测阴道分泌物$\mathrm{{pH}}$、线索细胞数量等进行综合诊断。但该方法检测内容较多,检测方法相对复杂^[2]。细菌培养为细菌感染性疾病常用诊断方案, 通过细菌体外培养、分离鉴定,可满足临床诊断需求,并结合药敏试验结果针对性用药, 为临床治疗提供精准用药方案。但细菌培养耗时长, 难以满足临床快速诊断检出需求。革兰染色法, 为基于不同性质细菌染色反应的诊断方案,主要优势为诊断检出用时短,但可能存在一定诊断误差,影响诊断效能。有学者^[3-6]研究发现,与革兰染色法相比,细菌培养法可显著细菌性阴道炎诊断检出率,并提升对不同细菌类型阳性检出率。但相关研究较少, 两种诊断方案何种更具优势仍需进一步研究证实。为此, 本文研究了革兰染色法、细菌培养法对细菌性阴道炎的诊断价值, 旨在为该病临床诊断提供参考。

1 资料与方法

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1.1 一般资料

86 例疑似细菌性阴道炎患者。入组时间:2023 年 1 月 -2024 年 6 月。一般资料:年龄 23~59 岁,平均 (41.05±4.12)岁。纳入标准:①存在阴道分泌物增加、外阴瘙痒、灼热等症状；②年龄≥18 岁；③均接受阴道分泌物检查；④资料完整。排除标准:①合并恶性肿瘤； ②心脏、肝脏等器官严重功能障碍；③精神、认知异常, 无法配合检查。

1.2 方法

采集阴道分泌物: 患者检查床上膀胱截石位, 简单清洁外阴后, 窥阴器扩张阴道口, 以无菌棉签采集患者宫颈口、阴道深处、穹隆处分泌物。采集后的棉签样本放置在生理盐水中保存待检。将样本均分为 2 等份, 分别用于细菌培养、革兰染色。

细菌培养法: 无菌环境下, 应用接种环在无菌肉汤琼脂培养基中划线接种。接种完成后将培养基置于二氧化碳培养箱$\left( {{35}^{ \circ }\mathrm{C}}\right) {48}\mathrm{\;h}$后观察培养基菌落生长情况。应用法国梅里埃细菌鉴定分析仪 (VITEK2 Compact) 及配套试剂进行菌株种类鉴定。

革兰染色法: 阴道分泌物样本均匀涂抹于载玻片上, 覆盖盖玻片后加热黏附固定。草酸铵结晶紫染色 1 min、流水冲洗多余染色液。碘一碘化钾溶液染色 1 min、流水冲洗多余染色液。95%乙醇处理 30 s 脱色处理。1000 倍油镜下观察细菌染色情况、细菌形态。革兰阳氏性菌紫色,革兰阴性菌无染色。番红复染 30 s,革兰阴性菌为红色。镜下观察细菌形态,进行细菌分类。

1.3 观察指标

(1)以指南^[4]中标准为金标准:① 线索细胞数量大于 20% 阴道上皮细胞数量(必要条件)；②阴道分泌物$\mathrm{{pH}} >$4.5; ③胺试验阳性; ④阴道分泌物灰白色、稀薄、均质；统计对比革兰染色法、细菌培养法对细菌性阴道炎诊断效能；(2)对比两种方法对不同细菌检出率；(3)对比两种方法检出用时。

1.4 统计学

数据均录入 Excel,导入 SPSS 27.0 软件处理。$\bar{x} \pm s$表示服从正态分布的计量资料,$t$检验；$\%$表示计数资料,${\chi }^{2}$检验。$P < {0.05}$表示差异有统计学意义。

2 结果与分析

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2.1 两种方法诊断效能

金标准诊断,86 例患者中细菌感染 52 例、非细菌感染 34 例；革兰染色法诊断准确度、灵敏度分别为 67.44%、69.23%,均较细菌培养法 89.53%、92.31% 低$\left( {P < {0.05}}\right)$; 革兰染色法诊断特异度 67.71%,与细菌培养法 85.29% 相近$\left( {P > {0.05}}\right)$,说明革兰染色法对细菌性阴道炎的诊断准确度、灵敏度偏低于细菌培养法, 但诊断特异度与细菌培养法相近, 见表 1、表 2。

2.2 两种方法对阴道细菌种类阳性检出率

肠球菌阳性检出率比较, 革兰染色法均小于细菌培养法$\left( {P < {0.05}}\right)$; 棒状杆菌、加特纳菌阳性检出率比较,革兰染色法、细菌培养法结果相近$\left( {P > {0.05}}\right)$,说明革兰染色法的肠球菌检出率偏低于细菌培养法, 但与棒状杆菌、

加特纳菌诊断检出率与细菌培养法相近,见表 3。

2.3 两种方法诊断检出用时

检出时间对比,革兰染色法<细菌培养法$\left( {P < {0.05}}\right)$,说明革兰染色法诊断检出用时更短,见表 4。

3 讨论与结论

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本次研究结果显示, 金标准诊断, 86 例患者中细菌感染 52 例、非细菌感染 34 例；革兰染色法诊断准确度、灵敏度均较细菌培养法低$\left( {P < {0.05}}\right)$; 革兰染色法诊断特异度与细菌培养法相近$\left( {P > {0.05}}\right)$,提示在对细菌性阴道炎诊断中,细菌培养法诊断效能更高,考虑原因为,应用革兰染色法诊断中,其诊断结果依赖于细菌数量,若细菌数量相对较少, 可能会影响诊断质量, 出现误诊、漏诊情况。且在革兰染色法诊断中,诊断结果易受操作、细菌污染、染色质量影响诊断质量。操作因素中,若涂片过厚, 可能会影响细菌与染色液结合充分性, 并影响脱色充分性, 使阴性菌表面出现结晶紫附着、阳性菌表面未形成结晶紫情况,增加假阳性、假阴性发生率^[7]。在加热固定操作中, 温度会改变染料对细胞壁通透性、维持细胞形态, 但若加热时间过长可能会破坏细胞壁结构, 影响诊断结果准确性。碘液配制后放置时间过长, 或发生氧化反应, 会降低其酶染能力, 影响细菌在染色液下反应性, 增加假阴性检出率^[8]。高浓度结晶紫会增加乙醇脱色难度,使革兰阴性菌在脱色后仍表现为紫色,出现假阳性结果。应用细菌培养中,利用培养基功能使细菌增殖分裂,形成肉眼可见的菌落, 减少因样本量较少对结果诊断误差, 满足诊断需求。但本次研究中, 细菌培养法准确度、灵敏度等均未达到 100%,提示该方法同样存在误诊、漏诊情况,可能与培养基污染、人为操作不当、培养条件不适宜等有关。

本次研究结果显示, 肠球菌阳性检出率比较, 革兰染色法均小于细菌培养法$\left( {P < {0.05}}\right)$; 棒状杆菌、加特纳菌阳性检出率比较, 革兰染色法、细菌培养法结果相近$\left( {P > {0.05}}\right)$。在应用革兰染色法诊断中,肠球菌、棒状杆菌、加特纳菌均属于革兰阳氏性菌,正常情况下染色结果为紫色。但若在革兰染色操作中出现人为操作误差, 使细菌染色不完全,可能会造成假阴性情况,因此诊断检出率相对较低。且在细菌类型鉴别诊断中,其诊断结果可能受主观因素影响出现误诊、漏诊情况,影响细菌诊断检出率。应用细菌培养法诊断中,可利用细菌鉴定分析仪进行菌种,减少人为因素引发的主观诊断误差^[9]。同时在细菌培养过程中, 通过细菌不断增殖分裂可增加检测样本量, 提升诊断质量。但在应用细菌培养法鉴定中,若培养基污染,在培养基内可能会出现其他菌株,干扰仪器对菌株种类鉴别诊断效能,降低对不同菌株的诊断检出率,可能为本次研究结果中两组棒状杆菌、加特纳菌阳性检出率差异无统计学意义影响因素之一。

本次研究结果显示, 在诊断用时中, 革兰染色法诊断用时显著少于细菌培养法, 提示在临床诊断中, 与细菌培养法相比,应用革兰染色法能够满足患者疾病快速诊断需求。应用革兰染色法诊断, 通过样本处理基本可在患者提供样本当天完成诊断,诊断检出时间较短,可帮助医生及时掌握患者病情变化,并尽早指导应用抗生素治疗,可控制病症进展。因此在对疑似细菌性阴道炎患者临床诊断中, 可首先应用革兰染色法诊断, 对诊断结果为阳性患者积极治疗, 对诊断结果为阴性, 但临床综合评估结果高度疑似细菌感染患者进行细菌培养法检查, 并持续随访, 以便为该病临床治疗提供更精准参考依据。

综上所述, 阴道细菌检验中, 细菌培养法可提升诊断效能及各细菌阳性检出率, 但革兰染色法可缩短结果检出时间。在临床实际诊断中可将革兰染色法作为初步筛查方案,必要时联合细菌培养法进一步诊断,以满足临床诊断需求。但本次研究结果显示,应用细菌培养法同样存在误诊、漏诊情况,因此建议临床诊断中可联合应用其他方法共同诊断,提升诊断质量。

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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2025年第3卷第5期

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首发时间：2025-07-09
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白山市人民医院检验科白山 134300

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^*孙靖，中级检验师，研究方向为医学检验（细菌生化）。E-mail: 40069070@qq.com

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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细菌培养法		细菌感染/例	非细菌感染/例	合计 / 例
金标准	细菌感染	48	4	52
非细菌感染	5	29	34
合计		53	33	86
革兰染色法		细菌感染 / 例	非细菌感染/例	合计 / 例
金标准	细菌感染	36	16	52
非细菌感染	12	22	34
合计		48	38	86

细菌培养法

细菌感染/例

非细菌感染/例

合计 / 例

金标准

细菌感染

非细菌感染

合计

革兰染色法

细菌感染 / 例

非细菌感染/例

合计 / 例

金标准

细菌感染

非细菌感染

合计

方法	准确度例	灵敏度例(%)	特异度例
细菌培养法	77(89.53)	48(92.31)	29(85.29)
革兰染色法	58(67.44)	36(69.23)	22(67.71)
${\chi }^{2}$	12.431	8.914	3.843
$P$	< 0.001	0.003	0.050

方法

准确度例

灵敏度例(%)

特异度例

细菌培养法

77(89.53)

48(92.31)

29(85.29)

革兰染色法

58(67.44)

36(69.23)

22(67.71)

${\chi }^{2}$

12.431

8.914

3.843

$P$

< 0.001

0.003

0.050

方法		棒状杆菌/例(%)	肠球菌/例(%)	加特纳菌 / 例(%)
细菌培养法	52	13(25.00)	19(36.54)	18(34.62)
革兰染色法	52	9(17.31)	10(19.23)	15(28.85)
${\chi }^{2}$		0.922	3.873	0.399
$P$		0.337	0.049	0.527

方法

棒状杆菌/例(%)

肠球菌/例(%)

加特纳菌 / 例(%)

细菌培养法

13(25.00)

19(36.54)

18(34.62)

革兰染色法

9(17.31)

10(19.23)

15(28.85)

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0.922

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0.399

$P$

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0.049

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方法		诊断检出用时范围/d	平均诊断检出用时/d
细菌培养法	86	3.08~5.45	${4.21} \pm {0.69}$
革兰染色法	86	0.31 ~1.20	${0.49} \pm {0.10}$
$t$			49.480
$P$			$< {0.001}$

方法

诊断检出用时范围/d

平均诊断检出用时/d

细菌培养法

3.08~5.45

${4.21} \pm {0.69}$

革兰染色法

0.31 ~1.20

${0.49} \pm {0.10}$

$t$

49.480

$P$

$< {0.001}$