实验室检测

方法	阳性	阴性	检出率	值	值
微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	263	3252	7.48%
庞通运送培养基显色法	248	3267	7.06%	1.103	0.294
微生物直接培养 - 质谱鉴定法	195	3320	5.55%	13.854	0.001

方法	阳性	阴性	检出率	值	值
微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	263	3252	7.48%
庞通运送培养基显色法	248	3267	7.06%	1.103	0.294
微生物直接培养 - 质谱鉴定法	195	3320	5.55%	13.854	0.001

采集部位	阳性	阴性	检出率	值	值
阴道 + 肛拭子	263	3252	7.53%
阴道拭子	202	3313	5.75%	4.7958	0.0286
肛拭子	249	3266	7.07%	0.5397	0.4621

采集部位	阳性	阴性	检出率	值	值
阴道 + 肛拭子	263	3252	7.53%
阴道拭子	202	3313	5.75%	4.7958	0.0286
肛拭子	249	3266	7.07%	0.5397	0.4621

方法	实际情况	微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	假阴性率	假阳性率	Kappa	一致性程度
+	-
庞通运送培养基显色法	-	248 15	6 3246	5.66%	0.18%	0.9	几乎完全一致

方法	实际情况	微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	假阴性率	假阳性率	Kappa	一致性程度
+	-
庞通运送培养基显色法	-	248 15	6 3246	5.66%	0.18%	0.9	几乎完全一致

方法	实际情况	微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	假阴性率	假阳性率	一致性程度
+	-
微生物直接培养 - 质谱鉴定法	+	195	13	25.86%	0.53	基本一致
-	68	3239	0.4%

方法	实际情况	微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	假阴性率	假阳性率	一致性程度
+	-
微生物直接培养 - 质谱鉴定法	+	195	13	25.86%	0.53	基本一致
-	68	3239	0.4%

庞通运送培养基显色法检测B族链球菌的效率评估及其基层适用性研究

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谭理维 ¹ , 周玉刚 ² , 林翠 ¹ , 赵蔚 ¹ , 熊骞 ¹ , 邓洪均 ¹^,^*

实验室检测 | 评价与分析 2025,3(9): 133-135

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实验室检测 | 评价与分析 2025, 3(9): 133-135

庞通运送培养基显色法检测B族链球菌的效率评估及其基层适用性研究

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谭理维¹, 周玉刚², 林翠¹, 赵蔚¹, 熊骞¹, 邓洪均¹^,^*

作者信息

¹ 重庆市渝北区中医院检验科重庆 401120

² 重庆市渝北区仙桃社区卫生服务中心放射科重庆 401120

谭理维, 主管检验技师, 研究方向为临床微生物。

通讯作者:

^*邓洪均，副主任技师，检验科副主任，研究方向为临床医学检验。E-mail: 953934943@qq.com

Affiliations

出版时间: 2025-05-08

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摘要

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目的探究庞通运送培养基显色法检测B族链球菌(GBS)的效率以及基层适用性。方法采集20192024年就诊于我院的3515例围产期孕妇阴道及肛拭子标本,通过微生物直接培养质谱鉴定法、庞通运送培养基显色法和微生物增菌培养质谱鉴定法来检测GBS。以微生物增菌培养质谱鉴定法作为参考方法,计算庞通运送培养基显色法检测 GBS的假阳性率和假阴性率。结果微生物增菌培养质谱鉴定法检出率为7.48%,微生物普通培养质谱鉴定法检出率为5.55%,运送培养基显色法检出率为7.06%,不同方法检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。单检测阴道拭子检出率最低(5.75%),其次是肛拭子(7.07%),阴道+肛拭子检出率(7.53%)明显提高。以微生物增菌培养质谱鉴定法作为参考标准,庞通运送培养基显色法假阳性率(0.18%)、假阴性率(5.66%),与金标准一致性极强(Kappa=0.92)。微生物普通培养法假阳性率(25.86%),假阴性率(0.4%),与金标准一致性较低(Kappa=0.53)。结论庞通运送培养基显色法假阴性率与假阳性率都较低,与标准方法微生物增菌培养质谱鉴定法的一致性几乎完全一致,并且其检测方便,无需特殊仪器,对人员要求不高,非常适用于各级医疗机构,尤其是基层医院GBS的早期筛查。

关键词

B族链球菌检测 / 庞通运送培养基显色法 / 假阳性率 / 假阴性率

引用本文

谭理维, 周玉刚, 林翠, 赵蔚, 熊骞, 邓洪均. 庞通运送培养基显色法检测B族链球菌的效率评估及其基层适用性研究. 实验室检测, 2025 , 3 (9) : 133 -135 .

正文

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0 引言

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B 族链球菌 (Group B Streptococcus, GBS) 是一种革兰氏阳性球菌, 显微镜下呈链状排列, 广泛定植于人体胃肠道和泌尿生殖道。作为条件致病菌,其在健康人群中的携带率可高达 35%^[1],与宿主维持共生状态,特定条件下可引发严重临床后果。围产期是 GBS 相关风险的高发阶段, 该菌可穿透胎膜屏障, 导致绒毛膜羊膜炎、胎膜早破、早产及产褥感染等并发症,严重时甚至引发流产^[2]。 GBS 通过垂直传播可引发新生儿早发型感染,表现为败血症、肺炎及脑膜炎,病死率达 5%~10%,及迟发型感染, 以脑膜炎为主,可遗留神经系统后遗症^[3]。目前 GBS 检测的方法包括细菌培养法、免疫学法、PCR 法等, 其中培养法是 GBS 感染确诊的“金标准”,但耗时长,操作复杂, 需要专业的仪器设备; 免疫学方法准确率低; PCR 法检测快速, 但仪器昂贵, 成本较高, 易被污染, 检测人员需要经过专业培训^[4]。本研究使用的庞通运送培养基显色法是集采集、运送、增菌和检测为一体, 操作简单, 肉眼判读结果, 仅需要一台培养箱即能完成检测。由于其存在假阴性和假阳性, 且具体的假阳性率及假阴性率无相关文献明确指出, 目前未被广泛使用。本研究以微生物增菌培养 - 质谱鉴定法作为参考标准, 与庞通运送培养基显色法的检测结果进行比较, 得出假阳性率与假阴性率, 评价检测性能, 以此为各级医疗机构尤其是条件有限的基层医院开展 GBS 早期筛查做出推荐。

1 材料与方法

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1.1 临床资料

选取 2019 年 3 月至 2024 年 12 月间于重庆市渝北区中医院进行产检的 3515 例 (2019 年 320 例, 2020 年 924 例, 2021 年 575 例, 2022 年 556 例, 2023 年 523 例, 2024 年 617 例) 20~38 周岁围产期孕妇。纳入标准:自然受孕单胎妊娠；无系统性慢性疾病及恶性肿瘤病史；检测前$7\mathrm{\;d}$ 无抗生素使用史; 具备规律作息且无吸烟酗酒等行为干预; 心理健康。排除合并其他感染或近期病毒暴露、严重心/肺/肝/肾器质性疾病、胎儿结构异常、精神障碍等。本研究经医院伦理委员会审核批准(批准文号: 20180411), 所有参与者均签署知情同意书。

1.2 标本采集

围产期孕妇清洁外阴后, 用庞通运送培养基配的专用无菌棉拭子,取阴道侧壁 1/3 及肛门分泌物,分别放入培养基中,标注 “阴道” 和 “肛周” 后立刻送检。

1.3 仪器与试剂

VITEK MS 质谱仪 (法国梅里埃)、二氧化碳培养箱 (上海跃进)。培养基:哥伦比亚血琼脂平板(重庆庞通)、运送培养基(重庆庞通)；质控菌株:大肠埃希菌(ATCC 8739)、无乳链球菌(ATCC12386)；质谱试剂:梅里埃质谱基质液。

1.4 方法

1.4.1 微生物培养 - 质谱鉴定法

采用无菌技术取出运送培养基中的拭子样本, 并使用三区划线法将样本接种至血琼脂平板。接种后, 将平板置于含有$5\% \sim {10}\% {\mathrm{{CO}}}_{2}$的培养箱中,在${35}^{ \circ }\mathrm{C}$的环境下孵育${18} \sim {24}\mathrm{h}$。此温度和${\mathrm{{CO}}}_{2}$浓度能够模拟一些细菌在体内的生长环境, 促进其最佳生长。在孵育结束后, 研究人员需仔细观察培养基上的可疑菌落, 选择形态特征明显的菌落进行进一步分析。随后,利用质谱技术进行细菌的鉴定。

1.4.2 运送培养基显色法

样本采集后, 直接将运送培养基直立放置于含有$5\% \sim {10}\% {\mathrm{{CO}}}_{2}$的培养箱中,温度设置为${35}^{ \circ }\mathrm{C}$,并进行 24~72 h 的孵育。培养过程中,如果培养基发生显著的颜色变化 (例如显色变为橙色), 通常表示样本中存在活跃的细菌生长,结果为阳性。反之,如果培养基未发生颜色变化,则可判断为阴性,表明样本中可能并不存在活菌。

1.4.3 微生物增菌培养一质谱鉴定法

将运送培养基的拭子增菌培养${18} \sim {24}\mathrm{\;h}$后,取出采用三区划线将标本接种于血平板平板中,置于$5\% \sim {10}\% {\mathrm{{CO}}}_{2}$培养箱运送培养基中的拭子进行增菌培养,在${35}^{ \circ }\mathrm{C}$下孵育 18~24 h,以促进微生物的生长和繁殖。增菌后,取出培养基并采用三区划线法将标本接种于血平板上, 接种完成后,将平板放置于含有$5\% \sim {10}\% {\mathrm{{CO}}}_{2}$的培养箱中继续孵育 18~24 h,以促进细菌的生长。孵育结束后,仔细观察平板上的可疑菌落, 选择形态特征明显的菌落, 使用 MALDI-TOF 质谱技术分析细菌产生的质谱图谱。

1.5 统计分析

用 SPSS 22.0 分析, 计数资料用例数与百分比表示、率比较用${\chi }^{2}$ 检验。以微生物增菌培养 - 质谱鉴定法为金标准, Kappa 检验一致性:$> {0.8}$ 近乎全一致,${0.4} \sim {0.79}$ 基本一致,$< {0.4}$ 不一致。

2 结果与分析

收起

2.1 三种方法检出率比较

本研究检测 3515 份样本, 直接培养法 (5.55%) 低于运送培养基显色法(7.06%)与增菌培养法(7.48%),差异有统计学意义$\left( {P < {0.05}}\right)$ ,见表 1。

2.2 不同采集部位检出率对比

分别采集阴道拭子、肛拭子和阴道+肛拭子的检出率比较, 本研究共检测 3515 份标本, 其中阴道拭子检出率最低 (5.75%),其次是肛拭子 (7.07%),阴道 + 肛拭子检出率最高 (7.53%)。阴道 + 肛拭子检出率高于阴道拭子, 差异有统计学意义$\left( {P < {0.05}}\right)$ ,而阴道 + 肛拭子检出率与肛拭子对比差异无统计学意义$\left( {P > {0.05}}\right)$ ,见表 2。

2.3 两种方法结果一致性对比

以微生物增菌培养 - 质谱鉴定法的结果为金标准, 庞通运送培养基显色法假阴性率为${5.66}\% \left( {{15}/{263}}\right)$ ,假阳性率为 0.18%(6/3252),一致性几乎完全一致(Kappa 值为 0.9 ); 直接培养法的假阴性率较高, 一致性中等一致, 见表 3。

续表

3 讨论与结论

收起

1996 年至今, 美疾控中心已出 3 版 GBS 筛查指南, 以普通细菌培养法为确诊金标准,能做药敏、为医院多用,然而研究显示其检测时间久、灵敏度低、易漏诊^[5]。本研究中, 庞通运送培养基显色法检出率为 7.06%, 与标准方法检出率差异较小。

对不同部位采集标本进行庞通运送培养基显色法$\mathrm{B}$族链球菌筛查的检出率有所不同, 单采集阴道进行检测, 其检出率为 5.75%；单采集肛周进行检测,其检出率为 7.07%；采集阴道和肛周两个部位进行检测,其检出率为 7.53%,明显高于单部位采集。

庞通运送培养基显色法在$\mathrm{B}$族链球菌检测中,假阳性率约为 0.18%,其数值相对较低,这表明该检测方法在判读阳性结果时准确性较高。低假阳性率可减少不必要的后续检查和治疗, 降低患者的经济负担和心理压力, 也避免了医疗资源的浪费。但即便假阳性率低,仍不可忽视^[6]。可能的原因是样本采集、运输或实验操作过程、培养基污染等,就可能导致结果误判为阳性。此外, 样本中存在某些与$\mathrm{B}$族链球菌在显色反应上相似的其他微生物,也会干扰检测结果,使检测呈现假阳性^[7]。

庞通运送培养基显色法在$\mathrm{B}$族链球菌检测中,假阴性率约为 5.66%,此比例不容忽视,假阴性结果意味着部分实际感染$\mathrm{B}$族链球菌的患者未被检测出来,可能延误治疗,进而导致严重的母婴并发症,如新生儿败血症、肺炎等。导致假阴性的因素可能与样本采集有关, 若采集部位不准确,采集量不足,未能获取足够的$\mathrm{B}$族链球菌,就比较容易出现假阴性^[8]。其次样本在运送过程中保存条件不当,如温度、时间控制不佳, 也可能使 B 族链球菌活性降低甚至死亡,影响检测结果。最后培养基的质量也至关重要,培养基成分的微小差异、生产工艺不稳定等,都可能影响 B 族链球菌的生长和显色反应。

庞通显色法检出率(7.06%)与增菌法(7.48%)无显著差异$\left( {P = {0.294}}\right)$,验证了其作为快速筛查工具的可靠性。单独采集阴道或肛周进行检测的检出率较低, 主要可以归因于几个因素。首先, 阴道和肛周的微生物群落是不同的, 某些病原体更倾向于在某一特定区域生存和繁殖。其次, 早期筛查时同时采集阴道和肛周样本, 能够更全面地覆盖潜在感染源^[9]。这种方法提高检测的敏感性,因为某些感染可能仅在其中一个部位表现出阳性反应, 而另一个部位则可能呈阴性。另外, 收集样本的技术和方法也对检出率产生影响, 单一采集常导致样本量不足, 无法充分反映病原体的真实情况, 而同时采集则有助于确保样本量的充分性和代表性^[10]。庞通运送培养基显色法的假阳性率与假阴性率均不高, 与标准方法比较 Kappa 值 (0.9), 其一致性几乎完全一致, 该结果具有重要的临床意义与研究价值。

综上所述,庞通运送培养基显色法检测 B 族链球菌是一种阳性检出率高、准确率较高, 并且操作简单, 不需要特殊设备, 对人员要求较低的一种检测方法, 特别适合于一些基层医院对围产期孕妇 GBS 早期筛查,大大降低孕产妇的产褥感染及新生儿感染。

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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赵晶, 刘静娴, 刘瑛. 无乳链球菌分子流行病学研究进展[J]. 中国感染与化疗杂志, 2021,21(4): 489-494.

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2025年第3卷第9期

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首发时间：2025-07-09
出版时间：2025-05-08

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¹ 重庆市渝北区中医院检验科重庆 401120

² 重庆市渝北区仙桃社区卫生服务中心放射科重庆 401120

通讯作者:

^*邓洪均，副主任技师，检验科副主任，研究方向为临床医学检验。E-mail: 953934943@qq.com

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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TxT

方法	阳性	阴性	检出率	值	值
微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	263	3252	7.48%
庞通运送培养基显色法	248	3267	7.06%	1.103	0.294
微生物直接培养 - 质谱鉴定法	195	3320	5.55%	13.854	0.001

方法

阳性

阴性

检出率

值

微生物增菌培养 - 质谱鉴定法

263

3252

7.48%

庞通运送培养基显色法

248

3267

7.06%

1.103

0.294

微生物直接培养 - 质谱鉴定法

195

3320

5.55%

13.854

0.001

采集部位	阳性	阴性	检出率	值	值
阴道 + 肛拭子	263	3252	7.53%
阴道拭子	202	3313	5.75%	4.7958	0.0286
肛拭子	249	3266	7.07%	0.5397	0.4621

采集部位

阳性

阴性

检出率

值

阴道 + 肛拭子

263

3252

7.53%

阴道拭子

202

3313

5.75%

4.7958

0.0286

肛拭子

249

3266

7.07%

0.5397

0.4621

方法	实际情况	微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	假阴性率	假阳性率	Kappa	一致性程度
+	-
庞通运送培养基显色法	-	248 15	6 3246	5.66%	0.18%	0.9	几乎完全一致

方法

实际情况

微生物增菌培养 - 质谱鉴定法

假阴性率

假阳性率

Kappa

一致性程度

庞通运送培养基显色法

248 15

6 3246

5.66%

0.18%

0.9

几乎完全一致

方法	实际情况	微生物增菌培养 - 质谱鉴定法	假阴性率	假阳性率	一致性程度
+	-
微生物直接培养 - 质谱鉴定法	+	195	13	25.86%	0.53	基本一致
-	68	3239	0.4%

方法

实际情况

微生物增菌培养 - 质谱鉴定法

假阴性率

假阳性率

Kappa

一致性程度

微生物直接培养 - 质谱鉴定法

195

25.86%

0.53

基本一致

3239

0.4%