食品安全质量检测学报

时间/min	pH 4.5、90 mmol甲酸铵/%	乙腈/%
0.01	10	90
4.00	30	70
6.00	60	40
9.00	60	40
11.00	10	90

时间/min	pH 4.5、90 mmol甲酸铵/%	乙腈/%
0.01	10	90
4.00	30	70
6.00	60	40
9.00	60	40
11.00	10	90

名称	母离子(m/z)	子离子(m/z)	解簇电压/V	碰撞能量/eV
腐胺	89.1	72.1*/30.0	28	13.5/31
尸胺	103.0	86.1*/69.1	20	8/15
组胺	112.1	95.1*/68.0	20	10/18
酪胺	138.0	121.0*/77.0	20	10/20
色胺	161.2	144.0*/117.0	10	10/20
腐胺-D₈	97.0	80.0	28	14.3
尸胺-D₄	107.0	90.0	20	8
组胺-D₄	116.0	99.0	20	10
酪胺-D₄	142.0	125.0	20	10
色胺-D₄	165.0	148.0	10	10

名称	母离子(m/z)	子离子(m/z)	解簇电压/V	碰撞能量/eV
腐胺	89.1	72.1*/30.0	28	13.5/31
尸胺	103.0	86.1*/69.1	20	8/15
组胺	112.1	95.1*/68.0	20	10/18
酪胺	138.0	121.0*/77.0	20	10/20
色胺	161.2	144.0*/117.0	10	10/20
腐胺-D₈	97.0	80.0	28	14.3
尸胺-D₄	107.0	90.0	20	8
组胺-D₄	116.0	99.0	20	10
酪胺-D₄	142.0	125.0	20	10
色胺-D₄	165.0	148.0	10	10

生物胺	线性范围/(ng/mL)	线性方程	相关系数(r)	LODs /(mg/kg)	LOQs /(mg/kg)
腐胺	5~500	Y=0.00928X+0.0648	0.9997	1.0	3.0
尸胺	5~500	Y=0.0172X-0.0168	0.9990	1.0	3.0
组胺	0.5~50.0	Y=0.149X+0.0537	0.9992	0.1	0.3
酪胺	0.5~50.0	Y=0.0117X-0.000787	0.9996	0.1	0.3
色胺	0.5~50.0	Y=0.261X-0.0307	0.9994	0.1	0.3

生物胺	线性范围/(ng/mL)	线性方程	相关系数(r)	LODs /(mg/kg)	LOQs /(mg/kg)
腐胺	5~500	Y=0.00928X+0.0648	0.9997	1.0	3.0
尸胺	5~500	Y=0.0172X-0.0168	0.9990	1.0	3.0
组胺	0.5~50.0	Y=0.149X+0.0537	0.9992	0.1	0.3
酪胺	0.5~50.0	Y=0.0117X-0.000787	0.9996	0.1	0.3
色胺	0.5~50.0	Y=0.261X-0.0307	0.9994	0.1	0.3

化合物	本底值/(mg/kg)	加标量 /(ng/mL)	平均值 /(ng/mL)	回收率 /%	相对标准偏差/%
腐胺	nd	50	58.42	116.8	4.89
100	117.76	117.8	5.15
200	217.82	108.9	6.77
尸胺	nd	50	46.87	93.7	14.14
100	109.98	109.9	13.24
200	171.52	85.7	12.33
组胺	nd	5	6.17	123.4	6.64
10	10.33	103.3	3.32
20	20.29	101.4	5.05
酪胺	nd	5	5.22	104.4	6.31
10	10.58	105.8	3.31
20	20.79	103.9	5.05
色胺	nd	5	4.57	91.4	2.89
10	9.38	93.8	4.95
20	18.90	94.5	7.03

化合物	本底值/(mg/kg)	加标量 /(ng/mL)	平均值 /(ng/mL)	回收率 /%	相对标准偏差/%
腐胺	nd	50	58.42	116.8	4.89
100	117.76	117.8	5.15
200	217.82	108.9	6.77
尸胺	nd	50	46.87	93.7	14.14
100	109.98	109.9	13.24
200	171.52	85.7	12.33
组胺	nd	5	6.17	123.4	6.64
10	10.33	103.3	3.32
20	20.29	101.4	5.05
酪胺	nd	5	5.22	104.4	6.31
10	10.58	105.8	3.31
20	20.79	103.9	5.05
色胺	nd	5	4.57	91.4	2.89
10	9.38	93.8	4.95
20	18.90	94.5	7.03

超高效液相色谱-串联质谱法测定预制菜中5种生物胺

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杨文婉 ¹ , 张婷 ¹ , 李虹霖 ²^,^* , 雍莉 ² , 邹晓莉 ³^,^*

食品安全质量检测学报 | 食品分析与检测 2025,16(16): 254-260

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超高效液相色谱-串联质谱法测定预制菜中5种生物胺

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杨文婉¹, 张婷¹, 李虹霖²^,^*, 雍莉², 邹晓莉³^,^*

作者信息

¹ 绵阳市疾病预防控制中心, 绵阳 621000

² 四川省疾病预防控制中心, 成都 610041

³ 四川大学华西公共卫生学院, 四川大学华西第四医院, 成都 610041

杨文婉(1991—), 女, 主管技师, 主要研究方向为食品理化检验。E-mail: mzwenwan@qq.com

通讯作者:

* 李虹霖(1992—), 女, 硕士, 主管技师, 主要研究方向为卫生理化检验。E-mail: 842819278@qq.com;

邹晓莉(1971—), 女, 博士, 副教授, 主要研究方向为卫生理化检验。E-mail: zouxl_1113@163.com

Determination of 5 kinds of biogenic amines in prefabricated food by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry

Wen-Wan YANG¹, Ting ZHANG¹, Hong-Lin LI²^,^*, Li YONG², Xiao-Li ZOU³^,^*

Affiliations

¹ Mianyang Center for Disease Control and Prevention, Mianyang 621000, China

² Sichuan Center for Disease Control and Provention, Chengdu 610041, China

³ West China School of Public Health, West China Fourth Hospital, Sichuan University, Chengdu 610041, China

出版时间: 2025-08-25 doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250430003

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摘要

收起

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定预制菜中生物胺含量的方法。方法样品经5%三氯乙酸提取, 正己烷除脂, 阳离子交换固相萃取柱净化后上机分析。采用ACQUITY UPLC BEH Amide柱分离, pH 4.5、90 mmol甲酸铵水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱; 采用电喷雾-正离子多重反应监测模式检测, 同位素内标法定量。结果该方法的标准曲线线性良好(r≥0.9990); 组胺、酪胺、色胺的检出限为0.1 mg/kg, 腐胺、尸胺的检出限为1.0 mg/kg; 平均回收率为85.7%~123.4%, 相对标准偏差值为2.89%~14.14%。201份样品中5种生物胺检出率为90.5%, 检出尸胺、组胺、腐胺、酪胺和色胺平均含量分别为2.39、3.69、17.86、9.45和0.23 mg/kg。结论该方法简便快速, 灵敏准确, 适宜于预制菜中生物胺的定性定量检测。

关键词

超高效液相色谱-串联质谱法 / 预制菜 / 生物胺

Abstract

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Objective To establish a method for the determination of biogenic amines in prefabricated food by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Methods The samples were extracted with 5% trichloroacetic acid, defatted with n-hexane, and purified using a cation exchange solid-phase extraction cartridge prior to instrumental analysis. The separation was carried out on an ACQUITY UPLC BEH Amide column with gradient elution using a mobile phase made up of pH 4.5, 90 mmol ammonium formate and acetonitrile. Detection was carried out in electrospray ionization-positive ion multiple reaction monitoring mode, and isotope internal standard method was used for quantitation. Results The method demonstrated a good linear standard curve (r≥0.9990); the limits of detection of histamine, tyramine and tryptamine were 0.1 mg/kg, and the limits of detection of putrescine and cadaverine were 1.0 mg/kg; the average recoveries of the 5 kinds of target compounds ranged from 85.7% to 123.4% with relative standard deviations of 2.89%-14.14%. In 201 samples, the detection rates of 5 kinds of biogenic amines were 90.5%. Cadaverine, histamine, putrescine, tyramine and tryptamine were detected, with average content of 2.39, 3.69, 17.86, 9.45 and 0.23 mg/kg. Conclusion This method is rapid, simple, sensitive and accurate, and is sutiable for qualitative and quantitative detection of biogenic amines in prefabricated food.

Key words

ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry / prefabricated food / biogenic amines

引用本文

杨文婉, 张婷, 李虹霖, 雍莉, 邹晓莉. 超高效液相色谱-串联质谱法测定预制菜中5种生物胺. 食品安全质量检测学报, 2025 , 16 (16) : 254 -260 . DOI: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250430003

Wen-Wan YANG, Ting ZHANG, Hong-Lin LI, Li YONG, Xiao-Li ZOU. Determination of 5 kinds of biogenic amines in prefabricated food by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2025 , 16 (16) : 254 -260 . DOI: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250430003

正文

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0 引言

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生物胺是一类具有生物活性的低分子量含氨基有机化合物, 广泛分布于食品及动植物体内。作为荷尔蒙、生物碱、核酸、蛋白质和芳香族化合物等生物活性物的合成前体物质^[1-2], 生物胺按结构可分为脂肪族胺(如腐胺、尸胺); 包含酪胺、苯乙胺的芳香族胺; 以及组胺、色胺等杂环胺^[3]。适量摄入生物胺对人体健康有益^[4], 但过量摄入则会引发头痛、血压异常、呼吸功能障碍、心律失常、呕吐等严重反应^[5-6]。肉类中天然存在精胺和亚精胺, 其他非天然生物胺主要是由相关前体氨基酸在微生物分泌的氨基酸脱羧酶作用下脱羧产生, 与肉类的腐败变质紧密相关^[7]。美国食品药物管理局规定人体摄入组胺和酪胺的含量不超过50 mg/kg, 酪胺安全阈值的参考上限为100~800 mg/kg, 欧盟规定水产品中组胺含量不得超过100 mg/kg^[8]。

随着人们生产生活节奏加快, 预制菜作为一种新选择走上更多家庭的餐桌。预制菜中生物胺的含量问题也越来越受到关注。生物胺的检测方法有薄层层析法^[9]、离子色谱法^[10]、毛细管电泳法^[11]、气相色谱法^[12]、液相色谱法^[13-18]、生物传感器法^[19-20]、高效液相色谱-三重四极杆/复合线性离子阱质谱法^[21]、离子色谱-串联质谱法^[22]、气相色谱-质谱法^[23-24]和超高效液相色谱-串联质谱法^[25-30]。薄层层析法结果准确度、精密度、重复性较差; 离子色谱法灵敏度较低, 容易受基质干扰; 毛细管电泳法灵敏度低, 稳定性较差; 气相色谱法适合检测挥发性生物胺; 高效液相色谱-三重四极杆/复合线性离子阱质谱法灵敏度与选择性高, 但仪器成本高且方法开发复杂; 离子色谱-串联质谱法分离能力强, 不需要衍生, 受流动相限制, 色谱柱选择有限; 气相色谱-质谱法需要复杂衍生, 对实验人员要求较高。生物传感器缺乏稳定性, 成本高。现行GB 5009.208—2016《食品安全国家标准食品中生物胺的测定》方法为液相色谱法和分光光度法, 样品前处理过程需要衍生或显色反应后上机检测。衍生和显色反应通常存在操作烦琐、反应条件苛刻、衍生或显色产物稳定性差、方法重现性不佳等问题。此外, 国家标准方法检测用时长、效率低。超高效液相色谱-串联质谱法分析速度快、分离度好、灵敏度高^[30]。为解决上述问题, 本研究拟建立预制菜中生物胺检测的超高效液相色谱-串联质谱法, 为快速检测和监管预制菜中生物胺含量提供技术保障和参考。

1 材料与方法

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1.1 材料与试剂

市售预制菜: 按照《2024年国家食品污染物和有害因素风险监测方案》要求采自成都、自贡、绵阳, 共3个城市的食品批发市场、超市、网店等场所, 共计201份预制菜样品。

腐胺、尸胺、组胺、酪胺、色胺标准溶液(纯度>98%, 北京坛墨质检科技有限公司); 腐胺-D₈、尸胺-D₄、组胺-D₄、酪胺-D₄、色胺-D₄内标溶液(纯度>96%, 天津阿尔塔科技有限公司); 甲醇、乙腈、甲酸铵、甲酸(色谱纯)、氨水、氢氧化钠(NaOH)、三氯乙酸(分析纯)(天津科密欧化学试剂有限公司); 正己烷(色谱纯, 北京百灵威科技有限公司); 无水硫酸钠(Na₂SO₄)(优级纯, 成都科隆化学品有限公司); 实验室用水为Milli-Q超纯水。

1.2 仪器与设备

Nexare UHPLC LC-30A超高效液相色谱仪、QTRAP 5500三重四极杆液质联用仪(美国Sciex公司); ME200万分之一分析天平(德国梅特勒公司); TGL-21M台式高速冷冻离心机(中国卢湘仪公司); ACQUITY UPLC BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)、Oasis MCX (60 mg/3 mL)阳离子固相萃取柱(沃特世科技有限公司)。

1.3 实验方法

1.3.1 溶液配制

分别精密称取适量的5种生物胺标准品于容量瓶中, 用0.1%甲酸水溶解混匀并定容至10 mL, 配制成质量浓度为1 mg/mL的单种标准储备溶液。分别准确吸取上述标准储备液, 用40%甲醇(含0.1%甲酸)逐级稀释为组胺、酪胺、色胺质量浓度为0.5 μg/mL, 腐胺、尸胺质量浓度5 μg/mL的混合标准中间液。5种内标用0.1%甲酸水配制成质量浓度为100 μg/mL内标储备液。使用时用40%甲醇(含0.1%甲酸)配制成组胺-D₄、色胺-D₄质量浓度为0.5 μg/mL, 腐胺-D₈、尸胺-D₄、酪胺-D₄质量浓度为5 μg/mL混合内标使用液。用40%甲醇(含0.1%甲酸)逐级稀释为组胺-D₄、色胺-D₄质量浓度为5 ng/mL, 腐胺-D₈、尸胺-D₄、酪胺-D₄质量浓度为50 ng/mL, 腐胺、尸胺质量浓度分别为5、10、20、50、100、200、500 ng/mL, 组胺、酪胺、色胺质量浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0 ng/mL的标准系列。以目标组分峰面积与相应内标峰面积的比值为纵坐标(Y), 以标准工作液的质量浓度为横坐标(X, ng/mL), 绘制标准曲线。

流动相配制: 称取甲酸铵5.7 g, 加入900 mL水溶解, 用甲酸调节pH至4.5, 定容至1000 mL。

洗脱液配制: 第一次洗脱液: 5%氨水甲醇溶液, 取5 mL氨水于100 mL甲醇中, 混匀。第二次洗脱液: pH 13 5%氨水甲醇洗脱液, 用5 mol/L NaOH调节5%氨水甲醇pH至13。

1.3.2 样品前处理

样品低温打碎混合均匀后, 准确称取1.0 g均质样品于50 mL离心管中, 加入5%三氯乙酸水溶液20 mL, 涡旋混匀提取10 min。8000 r/min 离心5 min(温度低于4 ℃), 取全部上清液, 加入5 mL正己烷, 振荡混匀5 min, 8000 r/min离心5 min(温度低于4 ℃), 去除正己烷层, 下层试样液层再加入5 mL正己烷重复除脂一次。取下层样品溶液0.2 mL, 加入混合内标使用液20 μL, 用5%三氯乙酸定容至5 mL, 混匀, 作为待净化液。

Oasis MCX (60 mg/3 mL)阳离子固相萃取柱依次用3 mL甲醇、3 mL水活化后, 加入5 mL待净化液, 依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗。抽干小柱后, 用2 mL 5%氨水甲醇洗脱, 收集洗脱液; 用2 mL pH 13的5%氨水甲醇再洗脱一次, 合并洗脱液。加入4 g Na₂SO₄混匀除水, 8000 r/min离心5 min, 取上清液2 mL在微弱的氮气流下吹干, 用1 mL 40%甲醇(含0.1%甲酸)复溶, 混匀1 min。0.22 μm微孔滤膜过滤, 上机测定。

1.3.3 仪器条件

(1)色谱条件

色谱柱: ACQUITY UPLC BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm); 流动相A: pH 4.5、90 mmol甲酸铵; 流动相B: 乙腈; 流速: 0.4 mL/min; 进样量: 1 μL, 腐胺5 μL; 柱温: 40 ℃。液相色谱梯度洗脱程序见表1。

(2)质谱条件

离子源: 正离子电喷雾电离源(electrospray ionization positive ion mode, ESI+); 检测方式: 多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM); 离子化电压: 5500 V; 气帘气: 32 psi; 温度: 500 ℃; 喷雾气: 50 psi; 辅助加热气: 50 psi。质谱采集参数见表2。

1.4 数据处理

SIEX OS软件处理生物胺的检测结果, 使用Excel 2016对实验数据进行整理和统计分析, 使用Origin 8.0软件生成谱图。

2 结果与分析

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2.1 质谱条件的优化

将质量浓度为50 ng/mL的生物胺和生物胺内标标准溶液以针泵直接进样分别进行正负离子模式下的一级全扫描, 通过对比正负离子模式下的母离子响应, 确定实验在ESI+下进行。对选定的母离子加碰撞能量击碎, 同时进行子离子扫描, 取离子丰度相对较强的一对碎片离子作为定量离子, 次强的一对碎片离子作为定性离子, 最后在MRM模式下分别对锥孔电压、碰撞能量进行优化。优化后的质谱条件见表2,5种生物胺标准图谱见图1。

2.2 色谱柱的选择

根据参考文献[25 -30], 本研究考察了4种色谱柱: WATERS ACQUITY UPLC BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)、WATERS ACQUITY UPLC HSS T3液相色谱柱(50 mm× 2.1 mm, 1.7 μm)、WATERS ACQUITY UPLC C₁₈柱(2.1 mm× 100 mm, 1.7 µm)、WATERS XBridge HILIC色谱柱(2.1 mm× 150 mm, 3.5 µm)。结果表明, 使用WATERS ACQUITY UPLC BEH Amide柱时, 5种生物胺及其内标分离度高, 响应好且峰形尖锐对称, 见图2。故选用WATERS ACQUITY UPLC BEH Amide柱作为分析柱。

2.3 流动相的选择

分别考察了乙腈-甲酸铵水溶液、甲酸乙腈-甲酸水溶液、乙酸乙腈-乙酸铵水溶液3种流动相体系, 组胺、色胺、酪胺能进行良好分离, 但腐胺、尸胺的分离受酸度影响较大, 调节流动相pH可改善待测物峰形。当使用甲酸乙腈-甲酸水溶液、乙酸乙腈-乙酸铵水溶液体系时, 腐胺和尸胺的响应不高, 且峰形不对称出现肩峰。最终选择峰形和分离度较好的乙腈-90 mmol/L甲酸铵(pH 4.5)溶液作为流动相体系。

2.4 线性范围、检出限和定量限

本研究使用3倍(S/N=3)和10倍(S/N=10)信噪比分别计算方法的检出限(limit of detection, LOD)和定量限(limit of quantitation, LOQ)。由表3可知, 腐胺、尸胺的LODs为1.0 mg/kg, LOQs为3.0 mg/kg; 组胺、酪胺和色胺的LODs为0.1 mg/kg, LOQs为0.3 mg/kg; 5种生物胺的标准曲线的相关系数均大于等于0.9990, 体现出较好的相关性。

2.5 准确度与精密度

取预制菜样品, 在优化后的实验条件下, 分别添加3个浓度水平的5种生物胺混合标准溶液, 按1.3.2方法平行处理样品, 在1.3.3仪器工作条件下上机测定, 每个加标浓度平行测定6次, 计算平均加标回收率和相对标准偏差, 结果见表4。5种生物胺的加标回收率为85.7%~123.4%, 测定结果的相对标准偏差为2.89%~14.14%, 表明该方法准确度和精密度均较好, 满足预制菜复杂基质的检测要求。

2.6 预制菜中生物胺的检测

本次检测中, 201份样品中5种生物胺检出率为90.5%, 5种生物胺的平均值范围在0.23~17.86 mg/kg。

本次检测的201份预制菜中, 尸胺检出22份, 检出率为10.9%, 含量范围nd~143.14 mg/kg (nd, 即not detect, 表示小于LOD, 在参与计算时按1/2 LOD计算), 平均含量为2.39 mg/kg, 见图3。按照主要肉质种类不同, 将预制菜分为畜肉类、禽肉类和水产动物类。139份畜肉类中有10份检出尸胺, 检出率7.2%, 平均含量为1.83 mg/kg。43份禽肉类中有10份检测出尸胺, 检出率为23.2%, 平均含量为4.35 mg/kg。19份水产动物类中有2份检出尸胺, 检出率为10.5%, 平均含量为1.73 mg/kg。

检测的201份预制菜中, 161份样品检出组胺, 检出率为80.1%, 浓度范围nd~93.22 mg/kg, 平均含量为3.69 mg/kg, 见图4。其中畜肉类139份中有108份检出组胺, 检出率为77.7%; 43份禽肉类中有38份检出组胺, 检出率为88.4%; 19份水产动物类中有15份检出组胺, 检出率为78.9%。畜肉类检出含量范围nd~51.65 mg/kg, 平均值为3.46 mg/kg。禽肉类检出含量范围nd~93.22 mg/kg, 平均值为4.53 mg/kg。水产动物类检出含量范围nd~26.69 mg/kg, 平均值为3.52 mg/kg。

在201份预制菜中, 检出酪胺166份, 检出率为82.6%, 浓度范围nd~422.92 mg/kg, 平均含量为9.45 mg/kg, 见图5。其中110份畜肉类检出酪胺, 检出率为79.1%, 检出含量范围nd~117.46 mg/kg, 平均含量为6.73 mg/kg。37份禽肉类检出酪胺, 检出率为86.0%, 检出含量范围nd~422.92 mg/kg, 平均值为19.71 mg/kg。19份水产动物类检出酪胺, 检出率为100%, 检出含量范围0.18~33.78 mg/kg, 平均值为6.13 mg/kg。

在201份预制菜中, 检出色胺34份, 检出率为16.9%, 浓度范围nd~14.67 mg/kg, 平均含量为0.23 mg/kg, 见图6。其中23份畜肉类检出色胺, 检出率为16.5%, 检出含量范围nd~14.67 mg/kg, 平均含量为0.24 mg/kg。7份禽肉类检出色胺, 检出率为16.3%, 检出含量范围nd~2.05 mg/kg, 平均含量为0.21 mg/kg。4份水产动物类检出色胺, 检出率为21.0%, 检出含量范围nd~1.69 mg/kg, 平均含量为0.21 mg/kg。

在201份预制菜中, 检出腐胺93份, 检出率为46.3%, 浓度范围nd~226.18 mg/kg, 平均含量为17.86 mg/kg, 见图7。其中55份畜肉类检出腐胺, 检出率为39.6%, 检出含量范围nd~226.18 mg/kg, 平均含量为14.38 mg/kg。23份禽肉类检出腐胺, 检出率为53.5%, 检出含量范围nd~177.00 mg/kg, 平均含量为22.23 mg/kg。15份水产动物类检出腐胺, 检出率为78.9%, 检出含量范围nd~183.54 mg/kg, 平均含量为33.50 mg/kg。

目前对于食品中生物胺的研究多集中于发酵食品和水产品, 对预制菜中生物胺的研究较少。对于各类预制菜中生物胺检出率的不同可考虑原料肉、生产工艺以及保存条件如温度、保存时间和pH等影响因素。现有GB 10136—2015《食品安全国家标准动物性水产制品》中盐渍鱼(高组胺鱼类)和盐渍鱼(不含高组胺鱼类)有组胺40 mg/100 g、20 mg/100 g的限值。本研究初步筛查了预制菜中的生物胺含量, 为制定限量标准提供了基础数据。

3 讨论与结论

收起

现行GB 5009.208—2016检测预制菜中生物胺, 前处理需要丹磺酰氯衍生或偶氮显色。衍生条件要求严格, 衍生产物不稳定, 方法重现性较差。前处理过程操作步骤烦琐、耗费时间长, 液相色谱法上机需要37 min, 检测时间较长。本研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定预制菜中生物胺的检测方法, 样品不需衍生化处理, 前处理简单快捷, 分析时间短, 11 min完成一次检测, 提高了大批量样品检测前处理的效率。本方法采用内标法, 抗基质干扰能力强, 适用基质复杂的预制菜的检测。本次检测中, 201份样品中5种生物胺检出率为90.5%, 5种生物胺的平均值范围在0.23~17.86 mg/kg, 均低于国家标准方法LOD。本方法组胺、酪胺、色胺的LODs为0.1 mg/kg, 腐胺、尸胺的LODs为1.0 mg/kg, 均能满足检测要求。为完善预制菜质量监测标准以及相关企业和监管部门开展科学有效的监控工作, 建立准确可靠的检测方法, 提供了一定的技术支持。

基金

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参考文献

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2025年第16卷第16期

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doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20250430003

接收时间：2025-04-30
首发时间：2026-01-13
出版时间：2025-08-25

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收稿日期：2025-04-30

基金

成都市科技局创新技术项目(2024-YF05-00705-SN)

作者信息

¹ 绵阳市疾病预防控制中心, 绵阳 621000

² 四川省疾病预防控制中心, 成都 610041

³ 四川大学华西公共卫生学院, 四川大学华西第四医院, 成都 610041

通讯作者:

* 李虹霖(1992—), 女, 硕士, 主管技师, 主要研究方向为卫生理化检验。E-mail: 842819278@qq.com;

邹晓莉(1971—), 女, 博士, 副教授, 主要研究方向为卫生理化检验。E-mail: zouxl_1113@163.com

参考文献

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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TxT

时间/min	pH 4.5、90 mmol甲酸铵/%	乙腈/%
0.01	10	90
4.00	30	70
6.00	60	40
9.00	60	40
11.00	10	90

时间/min

pH 4.5、90 mmol甲酸铵/%

乙腈/%

0.01

4.00

6.00

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11.00

名称	母离子(m/z)	子离子(m/z)	解簇电压/V	碰撞能量/eV
腐胺	89.1	72.1*/30.0	28	13.5/31
尸胺	103.0	86.1*/69.1	20	8/15
组胺	112.1	95.1*/68.0	20	10/18
酪胺	138.0	121.0*/77.0	20	10/20
色胺	161.2	144.0*/117.0	10	10/20
腐胺-D₈	97.0	80.0	28	14.3
尸胺-D₄	107.0	90.0	20	8
组胺-D₄	116.0	99.0	20	10
酪胺-D₄	142.0	125.0	20	10
色胺-D₄	165.0	148.0	10	10

名称

母离子(m/z)

子离子(m/z)

解簇
电压/V

碰撞能量/eV

腐胺

89.1

72.1*/30.0

13.5/31

尸胺

103.0

86.1*/69.1

8/15

组胺

112.1

95.1*/68.0

10/18

酪胺

138.0

121.0*/77.0

10/20

色胺

161.2

144.0*/117.0

10/20

腐胺-D₈

97.0

80.0

14.3

尸胺-D₄

107.0

90.0

组胺-D₄

116.0

99.0

酪胺-D₄

142.0

125.0

色胺-D₄

165.0

148.0

生物胺	线性范围/(ng/mL)	线性方程	相关系数(r)	LODs /(mg/kg)	LOQs /(mg/kg)
腐胺	5~500	Y=0.00928X+0.0648	0.9997	1.0	3.0
尸胺	5~500	Y=0.0172X-0.0168	0.9990	1.0	3.0
组胺	0.5~50.0	Y=0.149X+0.0537	0.9992	0.1	0.3
酪胺	0.5~50.0	Y=0.0117X-0.000787	0.9996	0.1	0.3
色胺	0.5~50.0	Y=0.261X-0.0307	0.9994	0.1	0.3

生物胺

线性范围/(ng/mL)

线性方程