解放军医学杂志

基因	引物序列
HCG18	正义：5'-ATCCTGCCAATAGATGCTGCTCAC-3'
反义：5'-AGCCACCTTGGTCTCCAGTCTC-3'
miR-449	正义：5'-ACACTCCAGCTGGGTGGCAGTGTATTGTTA-3'
反义：5'-TGGTGTCGTGGAGTCG-3'
Wnt1	正义：5'-CCCTAACCGGTGCGCCCTGGTGCC-3'
反义：5'-AGCGCCCAGAGCCCCATGGCCTGC-3'
β-actin	正义：5'-GCGAGAAGATGACCCAGGTGAGTGG-3'
反义：5'-GAAAGTGCAAAGAACACGGCTAATT-3'
U6 snRNA	正义：5'-ATTGGAACGATACAGAGAAGATT-3'
反义：5'-GGAACGCTTCACGAATTTG-3'

基因	引物序列
HCG18	正义：5'-ATCCTGCCAATAGATGCTGCTCAC-3'
反义：5'-AGCCACCTTGGTCTCCAGTCTC-3'
miR-449	正义：5'-ACACTCCAGCTGGGTGGCAGTGTATTGTTA-3'
反义：5'-TGGTGTCGTGGAGTCG-3'
Wnt1	正义：5'-CCCTAACCGGTGCGCCCTGGTGCC-3'
反义：5'-AGCGCCCAGAGCCCCATGGCCTGC-3'
β-actin	正义：5'-GCGAGAAGATGACCCAGGTGAGTGG-3'
反义：5'-GAAAGTGCAAAGAACACGGCTAATT-3'
U6 snRNA	正义：5'-ATTGGAACGATACAGAGAAGATT-3'
反义：5'-GGAACGCTTCACGAATTTG-3'

长链非编码RNA HCG18对人卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其机制

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綦春蕾 , 蔡国青 , 徐佳 , 郭倩 ^*

解放军医学杂志 | 基础研究 2022,47(11): 1108-1115

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解放军医学杂志 | 基础研究 2022, 47(11): 1108-1115

长链非编码RNA HCG18对人卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其机制

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綦春蕾, 蔡国青, 徐佳, 郭倩^*

作者信息

空军军医大学第一附属医院妇产科，陕西西安 710032

綦春蕾，医学硕士，主治医师，主要从事妇科肿瘤的临床治疗及基础研究

通讯作者:

郭倩，E-mail：gqian_32@163.com

The effect and mechanism of long non-coding RNA HCG18 on the cisplatin resistance of ovarian cancer cells

Chun-Lei Qi, Guo-Qing Cai, Jia Xu, Qian Guo^*

Affiliations

Department of Gynaecology and Obstetrics, the First Affiliated Hospital of Air Force Medical University, Xi’an, Shaanxi 710032, China

出版时间: 2022-11-28 doi: 10.11855/j.issn.0577-7402.2022.11.1108

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摘要

收起

目的探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(HCG18)对人卵巢癌细胞SKOV3及顺铂耐药细胞SKOV3/DDP耐药性的影响及其作用机制。方法采用RT-PCR检测SKOV3及SKOV3/DDP细胞中HCG18和miR-449的表达水平。采用HCG18 siRNA转染细胞，经12.5 μg/ml顺铂处理48 h后，MTT法检测细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡情况及细胞周期，荧光素酶报告基因实验检测HCG18、miR-449和Wnt1基因之间的靶向作用。结果与人正常卵巢上皮细胞NOEC比较，SKOV3中HCG18表达明显增高(P<0.05)，而miR-449的表达明显降低(P<0.05)。HCG18 siRNA转染后，顺铂处理后的SKOV3和SKOV3/DDP细胞活性均明显低于对照组(P<0.05)，细胞凋亡率和G₂/M期细胞占比均明显高于对照组(P<0.05)。miR-449 inhibitor转染SKOV3及SKOV3/DDP细胞后，HCG18 siRNA对细胞活性、凋亡和细胞周期的不利影响均被部分逆转(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示，HCG18可靶向结合miR-449的3'-UTR区，miR-449可靶向结合Wnt1基因的3'-UTR区。转染HCG18 siRNA 可明显上调miR-449的表达水平(P<0.05)。单独转染HCG18 siRNA或miR-449 mimic均可明显下调Wnt1的mRNA表达水平(P<0.05)。结论下调HCG18可通过miR-449/Wnt1信号通路抑制人卵巢癌细胞活性，促进癌细胞凋亡，诱导细胞周期G₂/M期阻滞，进而提高卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。

关键词

卵巢癌 / 长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18 / microRNA-449 / 基因，Wnt1

Abstract

收起

Objective To explore the effects and mechanism of long non-coding RNA HLA complex group 18 (HCG18)on human ovarian cancer cell SKOV3 and its cisplatin resistance cell line SKOV3/DDP. Methods RT-PCR was used to detect the expression levels of HCG18 and miR-449 in SKOV3 and SKOV3/DDP cells. Cells were transfected with HCG18 siRNA and treated with DDP (12.5 μg/ml). After 48 h, we evaluated cell viability using the MTT assay, examined cell apoptosis and cell cycle through flow cytometry, and confirmed targeting binding of HCG18, miR-449, and Wnt1 with luciferase reporter assay. Results Compared with the human normal ovarian epithelial cell line NOEC, the HCG18 level was significantly increased (P<0.05), and the miR-449 level was significantly decreased in SKOV3 (P<0.05). Compared with the transfection control group, in the DDP-treated cells (both SKOV3 and SKOV3/DDP), we observed significantly reduced cell viability, enhanced cell apoptosis, and cell cycle G₂/M phase arrest (P<0.05). Transfection of MiR-449 inhibitor partly reversed the effects of HCG18 siRNA on cell viability, cell apoptosis, and cell cycle in both SKOV3 and SKOV3/DDP cells (P<0.05). The luciferase reporter results showed that HCG18 could bind to the 3'-UTR of miR-449, and miR-449 could bind to the 3'-UTR of Wnt1. Transfection of HCG18 siRNA significantly increased the levels of miR-449 (P<0.05). Transfection of HCG18 siRNA or miR-449 mimic significantly decreased the mRNA levels of Wnt1(P<0.05). Conclusions HCG18 knockdown could inhibit cell viability, promote cell apoptosis and cell cycle G₂/M phase arrest through miR-449/Wnt1 signaling pathway, and thus promote cisplatin sensitivity of human ovarian cancer cells.

Key words

ovarian cancer / lncRNA HCG18 / microRNA-449 / genes, Wnt1

引用本文

綦春蕾, 蔡国青, 徐佳, 郭倩. 长链非编码RNA HCG18对人卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其机制. 解放军医学杂志, 2022 , 47 (11) : 1108 -1115 . DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2022.11.1108

Chun-Lei Qi, Guo-Qing Cai, Jia Xu, Qian Guo. The effect and mechanism of long non-coding RNA HCG18 on the cisplatin resistance of ovarian cancer cells[J]. Medical Journal of Chinese People’s Liberation Army, 2022 , 47 (11) : 1108 -1115 . DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2022.11.1108

正文

收起

在常见的妇科恶性肿瘤中，卵巢癌的发病率居第三位，病死率居首位^[1]。化疗耐药是卵巢癌疗效不佳的重要原因^[2-3]。据统计，约75%的卵巢癌患者在化疗过程中会产生耐药性^[4]。因此，逆转耐药、提高药物敏感性是卵巢癌治疗中亟待解决的难题^[5]。长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一段没有固定开放阅读框的RNA序列，长度大于200个核苷酸。lncRNA在核苷酸序列、空间结构、表达水平及蛋白结合力等方面的异常会影响多种肿瘤的发生与发展^[6-7]。lncRNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)是一种免疫相关基因，在间变性胶质瘤中呈高表达并可作为预后标志物^[8]，但其在卵巢癌中的作用报道较少。微小RNA(microRNA，miRNA)可通过与下游靶基因3'-UTR靶向结合而抑制靶基因的表达，参与调控生物功能。异常表达的miRNA与肿瘤的发生、转移和耐药等过程密切相关，有望用于肿瘤的诊断、治疗及预后评估^[9-10]。研究显示，miR-449在卵巢癌中表达下调，并能阻滞卵巢癌的细胞周期^[11-12]。我们通过数据库预测发现，HCG18与miR-449存在靶向关系，因此，本研究旨在观察HCG18与miR-449在卵巢癌化疗耐药中的作用并探讨其机制。

1 材料与方法

收起

1.1 材料

人正常卵巢上皮细胞株NOEC、人卵巢癌细胞株SKOV3购自中国微生物菌种资源库，对顺铂(DDP)耐药的人卵巢癌细胞株SKOV3/DDP为本实验室前期建立。RPMI 1640培养基、胎牛血清(FBS)购自浙江天杭生物科技公司；脂质体Lipofetamine^TM 2000购自美国Invitrogen公司；MTT 试剂盒购自北京康为世纪公司；Trizol试剂盒购自美国 Sigma公司；RNA提取试剂盒购自德国QIAGEN公司；反转录酶和Taq酶购自美国Promega公司；Annexin V-FITC /PI双染细胞凋亡检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；重组载体质粒HCG18小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)、NC siRNA、mimic NC、miR-449 mimic及miR-449 inhibitor均购自上海吉凯基因化学技术有限公司；兔抗Wnt1多克隆抗体(27935-1-AP)、小鼠抗β-actin单克隆抗体(T0022)、辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG(S0001)均购自Proteintech公司；HRP标记的兔抗小鼠IgG(ab6728)购自Abcam公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及转染

NOEC、SKOV3和SKOV3/DDP细胞分别常规培养于RPMI 1640培养基，内含10% FBS、100 U/ml青霉素及100 U/ml链霉素，置于湿度95%、5% CO₂及37 ℃培养箱中恒温培养。每隔3 d以0.25%胰蛋白酶消化细胞并传代1次。实验采用活力良好的对数生长期细胞。转染前1 d分别将SKOV3和SKOV3/DDP细胞用胰蛋白酶消化成单细胞悬液，接种于6孔板中，密度为3×10⁵个/孔，加入不含抗生素、含体积分数10% FBS的RPMI 1640 培养基培养过夜，待细胞生长至40%融合时，将特异性沉默lncRNA HCG18基因的重组载体质粒HCG18 siRNA和阴性对照NC siRNA分别转染至SKOV3和SKOV3/DDP细胞。采用同样的方法将mimic NC、miR-449 mimic或miR-449 inhibitor转染进细胞。

1.2.2 RT-PCR检测细胞中HCG18、Wnt1、miR-449、β-actin、U6的表达水平

以Trizol试剂盒提取细胞中总RNA。为检测miR-449的表达水平，采用特异性反转录引物5'-CTCAACTGGTGTCGTGGAG TCGGCAATTCAGTTGAGACCAGCTA-3'进行反转录合成cDNA。为检测HCG18、Wnt1、β-actin、U6 snRNA的表达水平，采用Oligo dT Primer反转录合成cDNA。以反转录合成的cDNA为模板，采用RT-PCR试剂盒SYBR@ Premix Ex Taq^TM进行PCR扩增，反应总体系25 μl；反应条件为：95 ℃ 10 min预变性；95 ℃ 15 s变性，56 ℃ 30 s退火，72 ℃ 45 s延伸，进行40个循环。引物均由上海生工生物公司合成(表1)。每个样本检测均重复3次，采用2^–ΔΔCt法计算目的基因mRNA的相对表达量。

1.2.3 MTT法检测细胞活性

将转染后的各组SKOV3及SKOV3/DDP细胞分别以1×10⁵个/孔接种于96孔板，每孔终体积为200 μl。待细胞贴壁后，每孔加入12.5 μg/ml 顺铂，各组细胞均设置3个复孔；48 h后，每孔加入10 μl MTT溶液(5 mg/ml)，于37 ℃避光孵育4 h；每孔继续加入10 μl二甲基亚砜(DMSO)，避光震荡10 min。应用酶标仪于570 nm波长下读取吸光度值(A值)。细胞活性(%)=实验组A值/对照组A值×100%。

1.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡情况及细胞周期

(1)检测细胞凋亡：将转染后的各组SKOV3和SKOV3/DDP细胞分别以4×10⁵个/孔接种于6孔板，待细胞贴壁后，分别加入终浓度为12.5 μg/ml的顺铂；药物处理48 h后，收集并重悬细胞，按照Annexin V-FITC /PI双染细胞凋亡检测试剂盒说明加入Annexin V-FITC和PI，避光孵育后于流式细胞仪中进行双色荧光细胞流式计数，计算凋亡细胞百分比。(2)检测细胞周期：将转染后的各组细胞分别以4×10⁵个/孔接种于6孔板，待细胞贴壁后，分别以12.5 μg/ml 顺铂处理48 h；收集细胞，按照细胞周期检测试剂盒说明处理待测细胞，采用流式细胞仪检测细胞周期的变化并分析结果。

1.2.5 荧光素酶报告基因实验

分别构建HCG18和Wnt1野生型质粒及突变型质粒(HCG18 3'-UTR wt/mut，Wnt1 3'-UTR wt/mut)；分别以mimic NC/miR-449 mimic与HCG18 3'-UTR wt/mut或Wnt1 3'-UTR wt/mut共转染SKOV3和SKOV3/DDP细胞。转染48 h后，采用双荧光素酶报告基因检测试剂盒检测荧光素酶活性。各组独立实验均重复3次。

1.2.6 Western blotting检测细胞中Wnt1蛋白的表达水平

收集细胞，弃掉培养液后每孔加入1 ml RIPA裂解液，充分混悬，冰上裂解0.5 h，离心，取上清，采用BCA试剂盒检测蛋白浓度。每孔上样20 μg蛋白，进行10% SDS-PAGE凝胶电泳，结束后电转至PVDF膜上，随后用5%脱脂奶粉室温封闭1 h。TBST清洗，加入一抗Wnt1(1:1000)或β-actin(1:10 000)，4 ℃过夜孵育。TBST清洗4次，加入HRP标记的二抗(1:10 000)，室温孵育2 h，洗膜，显影。用ImageJ软件进行灰度分析。以目的条带和β-actin条带的灰度值比值作为蛋白相对表达量。实验重复3次。

1.3 统计学处理

采用SPSS 19.0软件进行统计分析。所有实验均重复进行3次，符合正态分布的计量资料以$\bar{x}±s$表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

收起

2.1 lncRNA HCG18和miR-449在人卵巢癌细胞中的表达情况

RT-PCR检测结果显示，与正常细胞NOEC比较，卵巢癌SKOV3细胞中lncRNA HCG18相对表达水平明显增高(P<0.05，图1A)，而miR-449相对表达水平明显降低(P<0.05，图1B)。

2.2 HCG18 siRNA转染对顺铂处理的人卵巢癌细胞存活的抑制作用

经12.5 μg/ml 顺铂处理48 h后，对HCG18 siRNA转染的SKOV3和SKOV3/DDP细胞进行RT-PCR检测显示，与对照组比较，HCG18的表达水平均明显降低(P<0.05，图2A)；MTT法检测结果显示，与对照组比较，SKOV3和SKOV3/DDP细胞活性均明显降低(P<0.05，图2B)。

2.3 HCG18 siRNA转染对顺铂处理的人卵巢癌细胞凋亡的促进作用

经12.5 μg/ml 顺铂处理48 h后，采用流式细胞术检测各组HCG18 siRNA转染后细胞凋亡情况，结果显示，与对照组比较，SKOV3和SKOV3/DDP细胞凋亡率均明显增高(P<0.05，图3)。

2.4 HCG18 siRNA转染对顺铂处理的人卵巢癌细胞G₂/M期阻滞的促进作用

经12.5 μg/ml 顺铂处理48 h后，以流式细胞术检测HCG18 siRNA转染的各组细胞周期，结果显示，与对照组比较，SKOV3和SKOV3/DDP的G₂/M期细胞占比均明显增多(28.7%vs. 19.8 %，23.4% vs. 10.6 %，P<0.05，图4)。

2.5 HCG18靶向miR-449对Wnt1表达的调节作用

Starbase2.0预测结果显示，HCG18上存在miR-449的潜在结合位点(图5A)；而TargetScan预测显示，Wnt1基因的3'-UTR也存在miR-449的潜在结合位点(图5B)。荧光素酶报告基因实验结果显示，miR-449 mimic与HCG18或Wnt1 3'-UTR的野生型质粒共转染后荧光强度均明显降低(P<0.05，图5C－D)。RT-PCR结果显示，HCG18 siRNA转染后miR-449表达水平明显增高(P<0.05，图5E)；miR-449 mimic转染后miR-449表达水平明显增高(P<0.05)，miR-449 inhibitor转染后miR-449表达水平明显降低(P<0.05，图5F)。RT-PCR和Western Blotting结果显示，HCG18 siRNA或miR-449 mimic单独转染均可显著下调Wnt1的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05，图5G)。

2.6 下调miR-449可逆转HCG18 siRNA对顺铂处理的卵巢癌细胞的影响

与HCG18 siRNA单独转染比较，miR-449 inhibitor与HCG18 siRNA同时转染后，顺铂处理48 h后的SKOV3和SKOV3/DDP细胞中miR-449表达水平下降，细胞活性增高，细胞凋亡率下降，G₂/M期细胞占比增高，差异均有统计学意义(P<0.05，图6)。

3 讨论

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顺铂是目前治疗卵巢癌的一线化疗药物，其主要作用机制为抑制DNA复制和转录，阻滞细胞停滞于G₂期，但其耐药性可影响治疗效果。这可能与抗肿瘤药物引起的细胞凋亡程序缺陷有关^[13]。越来越多的研究显示，lncRNA-miRNA轴与卵巢癌耐药性相关^[14-15]。有研究报道，lncRNA DANCR在卵巢癌中能够通过靶向调节miR-145促进肿瘤增长和血管生成^[16]；上调lncRNA ANRIL水平可以促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭^[17]。然而，许多异常表达的lncRNA在卵巢癌中的作用还不清楚^[18]。

lncRNA HCG18与多种疾病的病理过程相关，例如，在腰椎间盘退变中参与炎症反应和细胞增生过程，而在胃癌、肝癌中高表达，并与患者的不良预后显著相关^[19-20]。另外，在结直肠癌中HCG18可通过靶向miR-1271增强MTDH/Wnt/β-catenin信号通路的作用，从而促进结直肠癌的发生发展^[21]；在胃癌细胞中敲除HCG18，胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭均受到抑制^[22]。

本研究结果显示，lncRNA HCG18在卵巢癌细胞中的表达水平明显高于正常卵巢上皮细胞；下调HCG18在卵巢癌细胞及其耐药细胞中的表达水平，可明显降低两组细胞顺铂处理后的细胞活性，并可促进细胞凋亡和G₂/M期阻滞。应用公共数据库Starbase2.0分析结果显示，HCG18下游靶向调控的miRNA中，miR-449在卵巢癌细胞中的表达水平降低；miR-449具有阻滞肿瘤细胞周期的作用。双荧光素酶报告基因实验结果显示，HCG18与miR-449存在靶向结合。以往研究显示，Wnt/β-catenin信号通路在细胞增殖和肿瘤发生过程中发挥重要作用，提示HCG18可能通过miR-449调控Wnt1，也提示miR-449与HCG18和Wnt1之间可能均存在靶向调控关系。有研究显示，miR-449可通过靶向调节Wnt/β-catenin通路抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖^[23]。本研究经TargetScan网站预测miR-449可以靶向调节Wnt1，随后通过双荧光素酶报告基因实验、RT-PCR及Western blotting检测发现，miR-449可靶向抑制Wnt1的表达。由此推测，HCG18可能通过调控miR-449/Wnt1轴调节卵巢癌细胞的耐药性。为了验证这一推测，将miR-449 inhibitor转染入HCG18敲除的卵巢癌耐药细胞内，结果显示，miR-449 inhibitor可逆转HCG18敲除对顺铂处理后卵巢癌细胞活性、细胞凋亡和细胞周期的影响，降低卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。

综上所述，本研究结果显示，下调HCG18可通过miR-449/Wnt1信号通路抑制卵巢癌细胞顺铂处理后的细胞活性并促进其凋亡，诱导细胞周期G₂/M期阻滞，进而提高卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。

基金

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陕西省重点研发计划(2019SF-165)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

[1]

Webb

, Jordan

. Epidemiology of epithelial ovarian cancer[J]. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol, 2017, 41: 3-14.

[2]

Holmes

. Ovarian cancer: beyond resistance[J]. Nature, 2015, 527(7579): S217.

[3]

Ren

, Zhao

. Effect of proteasome inhibitor Oprozomib on ovarian cancer cells to cis-platinum[J]. Med J Chin PLA, 2020, 45(4): 405-410.

[任方芳, 赵太强. 蛋白酶体抑制剂Oprozomib对顺铂耐药卵巢癌细胞的作用及机制研究[J]. 解放军医学杂志, 2020, 45(4): 405-410.]

[4]

Norouzi-Barough

, Sarookhani

, Sharifi

, et al. Molecular mechanisms of drug resistance in ovarian cancer[J]. J Cell Physiol, 2018, 233(6): 4546-4562.

[5]

Ren

, Zhang

, Zhou

. Inhibitory effects of centromere protein U knockdown on self-renewal, cisplatin resistance and Wnt/β-catenin signaling activity in cisplatin resistant ovarian cancer cells[J]. J Jilin Univ (Med Ed), 2021, 47(3): 608-614.

[任英俊, 张慧, 周颖. 敲低着丝粒蛋白U对顺铂耐药卵巢癌细胞自我更新、顺铂耐药和Wnt/β-catenin信号活性的抑制作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2021, 47(3): 608-614.]

[6]

Tang

, Tian

, Wang

, et al. Advances in long non-coding RNA in chemotherapeutic resistance of hepatocellular carcinoma[J]. Med J Chin PLA, 2020, 45(5): 547-553.

[唐贵菊, 田塬, 王继婷, 等. 长链非编码RNA在肝癌化疗耐药中的研究进展[J]. 解放军医学杂志, 2020, 45(5): 547-553.]

[7]

Wang

, Wang

. Research progress of the action mechanism of lncRNA UCA1 and miRNAs in digestive system tumors[J]. Med J Chin PLA, 2021, 46(12): 1232-1238.

[王思宇, 王宇. lncRNA UCA1和miRNAs在消化系统肿瘤中的作用机制研究进展[J]. 解放军医学杂志, 2021, 46(12): 1232-1238.]

[8]

Wang

, Zhao

, Yang

, et al. An immune-related lncRNA signature for patients with anaplastic gliomas[J]. J Neurooncol, 2018, 136(2): 263-271.

[9]

, Gao

, Yu

, et al. Effect of microRNA hsa-mir-301b on proliferation of breast cancer cells[J]. Chin J Pract Intern Med, 2021, 41(2): 141-145.

[卢达新, 高艳霞, 于丽凤, 等. 微小RNA hsa-mir-301b对乳腺癌细胞增殖能力的影响研究[J]. 中国实用内科杂志, 2021, 41(2): 141-145.]

[10]

Khan

, Ayub

, Khan

, et al. MicroRNA biogenesis, gene silencing mechanisms and role in breast, ovarian and prostate cancer[J]. Biochimie, 2019, 167: 12-24.

[11]

Wang

, Li

, Zhu

, Expression and clinical significance of miR-449a and PLAGL2 in ovarian cancer[J]. J Med Res, 2019, 48(3): 105-110.

[王秋宇, 李晓翔, 朱军义. MiR-449a和PLAGL2在卵巢癌中的表达关系及临床意义[J]. 医学研究杂志, 2019, 48(3): 105-110.]

[12]

Jang

, Yoo

, Park

, et al. Low expression of miR-449 in gynecologic clear cell carcinoma[J]. Int J Gynecol Cancer, 2014, 24(9): 1558-1563.

[13]

Lund

, Huhtinen

, Salmi

, et al. DNA methylation and transcriptome changes associated with cisplatin resistance in ovarian cancer[J]. Sci Rep, 2017, 7(1): 1469.

[14]

Wang

, Fang

, Jiang

, et al. The cisplatin-induced lncRNA PANDAR dictates the chemoresistance of ovarian cancer via regulating SFRS2-mediated p53 phosphorylation[J]. Cell Death Dis, 2018, 9(11): 1103.

[15]

Zhou

, Zheng

, Xu

, et al. The identification and analysis of mRNA-lncRNA-miRNA cliques from the integrative network of ovarian cancer[J]. Front Genet, 2019, 10: 751.

[16]

Lin

, Yang

, Qi

, et al. LncRNA DANCR promotes tumor growth and angiogenesis in ovarian cancer through direct targeting of miR-145[J]. Mol Carcinog, 2019, 58(12): 2286-2296.

[17]

Qiu

, Lin

, Ding

, et al. Long non-coding RNA ANRIL predicts poor prognosis and promotes invasion/metastasis in serous ovarian cancer[J]. Int J Oncol, 2015, 46(6): 2497-2505.

[18]

Mitra

, Chen

, Greenawalt

, et al. Decoding critical long non-coding RNA in ovarian cancer epithelial-to-mesenchymal transition[J]. Nat Commun, 2017, 8(1): 1604.

[19]

, Li

, Liu

, et al. HNF1A-induced lncRNA HCG18 facilitates gastric cancer progression by upregulating DNAJB12 via miR-152-3p[J]. Onco Targets Ther, 2020, 13: 7641-7652.

[20]

Zou

, Sun

. LncRNA HCG18 contributes to the progression of hepatocellular carcinoma via miR-214-3p/CENPM axis[J]. J Biochem, 2020, 168(5): 535-546.

[21]

, Wu

, Zhang

, et al. The long non-coding RNA HCG18 promotes the growth and invasion of colorectal cancer cells through sponging miR-1271 and upregulating MTDH/Wnt/beta-catenin[J]. Clin Exp Pharmacol Physiol, 2020, 47(4): 703-712.

[22]

, An

, Li

. Silencing of long non-coding RNA-HCG18 inhibits the tumorigenesis of gastric cancer through blocking PI3K/Akt pathway[J]. Onco Targets Ther, 2020, 13: 2225-2234.

[23]

, Huang

, Xu

, et al. miR-449 overexpression inhibits papillary thyroid carcinoma cell growth by targeting RET kinase-beta-catenin signaling pathway[J]. Int J Oncol, 2016, 49(4):1629-1637.

2022年第47卷第11期

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doi: 10.11855/j.issn.0577-7402.2022.11.1108

接收时间：2021-06-21
首发时间：2025-12-14
出版时间：2022-11-28

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收稿日期：2021-06-21
录用日期：2021-07-28

基金

Key Research and Development Plan of Shaanxi Province(2019SF-165)

陕西省重点研发计划(2019SF-165)

作者信息

空军军医大学第一附属医院妇产科，陕西西安 710032

通讯作者:

郭倩，E-mail：gqian_32@163.com

参考文献

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https://castjournals.cast.org.cn/joweb/jfjyxzz/CN/10.11855/j.issn.0577-7402.2022.11.1108

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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