中国新药与临床杂志

影像诊断阿尔茨海默病的PET显影剂研究进展

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龙睿玲 ¹^,² , 王力 ¹

中国新药与临床杂志 | 综述 2024,43(7): 494-503

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中国新药与临床杂志 | 综述 2024, 43(7): 494-503

影像诊断阿尔茨海默病的PET显影剂研究进展

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龙睿玲¹^,², 王力¹

作者信息

^1.西南医科大学附属医院核医学科/核医学与分子影像四川省重点实验室/四川省院士（专家）工作站，四川泸州　646000

^2.西南医科大学药学院，四川泸州　646000

龙睿玲，女，硕士，主要从事正电子核素放射性显影剂的研究，E-mail：m734722120@163.com

王力，女，教授，博士，主要从事医用放射性药物的研究，E-mail：liwang_512@163.com

通讯作者:

王力

Progress of PET imaging tracers for Alzheimer’s disease diagnosis

Rui-ling LONG¹^,², Li WANG¹

Affiliations

^1.Department of Nuclear Medicine / Nuclear Medicine and Molecular Imaging Key Laboratory of Sichuan Province /Academician (Expert) Workstation of Sichuan Province, Affiliated Hospital of Southwest Medical University, Luzhou SICHUAN 646000, China

^2.School of Pharmacy, Southwest Medical University, Luzhou SICHUAN 646000, China

出版时间: 2024-07-25 doi: 10.14109/j.cnki.xyylc.2024.07.03

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摘要

收起

阿尔茨海默病（AD）是不可逆性痴呆症中最常见的形式。除了评估AD患者记忆能力，正电子发射断层扫描（PET）作为一种灵敏度较高的非侵入性诊断方式，还可以对靶点进行定性或定量的影像诊断，定性及定量评价β淀粉样蛋白（Aβ）、tau蛋白、突触蛋白等相关生物标志物，对AD诊断具有重要意义。硫代黄素-T衍生物[¹⁸F]氟替莫尔和苯乙烯吡啶及二苯乙烯衍生物[¹⁸F]氟倍他滨、[¹⁸F]氟倍他平能与Aβ高度特异性地结合，作为PET显影剂被FDA批准上市。⁶⁸Ga、⁶⁴Cu标记的放射性显影剂同样表现出高度的Aβ斑块亲和力。喹啉衍生物[¹⁸F]-THK5351和[¹⁸F]-PPQ8、吡啶吲哚衍生物[¹⁸F]-T807、兰索拉唑衍生物[¹¹C]-NML均可量化tau蛋白错误折叠导致的神经纤维缠结程度。左乙拉西坦结构衍生物[¹¹C]-UCB-J、[¹⁸F]-SDM-8可以测量突触密度，3-氟-4-乙炔基苄腈衍生物[¹⁸F]-FPEB则通过与代谢型谷氨酸受体第5亚型（mGluR5）的结合用于AD的辅助诊断，酮色林类衍生物[¹⁸F]-altanserin则通过作用于5-羟色胺用于研究早期AD的分子变化。

关键词

阿尔茨海默病 / 正电子发射断层扫描 / 淀粉样蛋白 / tau蛋白质类 / 放射性药物

Abstract

收起

Alzheimer’s disease (AD) is the most common form of irreversible dementia. In addition to assessing of patients’ memory abilities, positron emission tomography (PET), as a non-invasive diagnostic modality with high sensitivity and qualitative or quantitative imaging of the target sites, can qualitatively and quantitatively evaluate β-amyloid (Aβ), tau proteins, synaptic proteins, and other related biomarkers, which is of great significance in the diagnosis of AD. As PET imaging approved by FDA, [¹⁸F]-flutemetamol, a derivative of ¹⁸F labelled thioflavin-T, and [¹⁸F]-florbetaben, [¹⁸F]-florbetapir, which are phenylpyridine derivates, have high specificity in their affinity for Aβ plaque binding. Other radionuclides such as ⁶⁸Ga and ⁶⁴Cu labeled radiotracers also showed high affinity with Aβ plaques. Quinoline derivatives [¹⁸F]-THK5351, [¹⁸F]-PPQ8, benzimidazolopyrimidine and pyridine-indole derivatives [¹⁸F]-T807, and lansoprazole derivatives [¹¹C]-NML as PET imaging agents, can quantify tau protein tangles. And the structural derivatives of levetiracetam [¹¹C]-UCB-J and [¹⁸F]-SDM-8 can measure synaptic density, while the structural derivatives [¹⁸F]-FPEB of 3-fluoro-4-acetylidene-benzylnitrile can assist in the diagnosis of AD by binding with mGluR5. The fluorobenzoyl derivative [¹⁸F]-altanserin, with ketoserin as its structural parent, acts on 5-hydroxytryptamine to study the molecular changes of early AD.

Key words

Alzheimer’s disease / positron emission tomography / amyloid / tau proteins / radiopharmaceuticals

引用本文

龙睿玲, 王力. 影像诊断阿尔茨海默病的PET显影剂研究进展. 中国新药与临床杂志, 2024 , 43 (7) : 494 -503 . DOI: 10.14109/j.cnki.xyylc.2024.07.03

Rui-ling LONG, Li WANG. Progress of PET imaging tracers for Alzheimer’s disease diagnosis[J]. Chinese Journal of New Drugs and Clinical Remedies, 2024 , 43 (7) : 494 -503 . DOI: 10.14109/j.cnki.xyylc.2024.07.03

正文

收起

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是痴呆症最常见的类型，其特征是认知功能的进行性丧失，约占所有痴呆病例的60%~80%^[1]。目前认为，大脑中由过磷酸化tau蛋白形成的神经原纤维缠结（NFT）和β淀粉样蛋白（Aβ）沉积形成的老年斑是AD主要的病理特征。Aβ级联假说认为，Aβ的沉积是AD期间脑部的第一个变化，随后是NFT和神经元细胞死亡^[2]。神经元中高度磷酸化的tau蛋白积累常表现为中枢神经系统中微管相关蛋白表达的异常升高，这是AD发病机制中的另一个关键因素。要获得在组织病理学上明确的诊断，需要有脑组织中Aβ斑块和NFT等病理特征的证据支持，但侵入性的诊断方式具有很大局限性^[3]。正电子发射断层扫描（PET）作为一种灵敏度较高的非侵入性诊断方式，可以定性及定量评价Aβ斑块或NFT相关生物标志物，对AD诊断具有重要意义^[4]。此外，神经病理学研究发现，突触密度和认知能力之间存在显著关联，可以通过PET显影检测突触密度来评估AD的认知功能^[5]。本文对近年来不同靶点的AD诊断PET显影剂研究进行总结。

Aβ显影剂

收起

Aβ斑块沉积通常伴随AD病程发展的整个过程，是AD患者的特异性表现^[3,4]，在其他形式的痴呆症如血管性痴呆（VaD）或额颞叶痴呆（FTD）中，并未发现Aβ斑块。因此神经影像学技术探测Aβ斑块是AD鉴别诊断有效手段^[6-8]。目前，正电子核素标记的小分子Aβ显影剂主要包括硫代黄素-T衍生物、苯乙烯吡啶及二苯乙烯两大类。

1　硫代黄素-T衍生物

正电子放射性核素的选择需要考虑核素的化学性质及半衰期，目前常用的两种核素为¹¹C（t_1/2=20.4 min）和¹⁸F（t_1/2=110 min）。以Pittsburgh compound B（PiB）^[9]母核为基础开发的［¹¹C］-PiB（图1A），是第一个被广泛研究的Aβ-PET显影剂。［¹¹C］-PiB结构中亲脂性的硫代黄素-T分子能穿过血脑屏障，以高亲和力且特异性地结合在由Aβ组成的老年斑上，同时在非靶组织中迅速清除，可以在较长扫描检测窗口期内获得高对比度影像。与健康对照组相比，［¹¹C］-PiB在AD受试者皮质中的摄取增加^[10,11]。5-（6- ［（叔丁基（二甲基）甲硅烷基）氧基］-1,3-苯并噻唑-2基）吡啶-2-胺（［¹¹C］-AZD2184（图1B），也是一种可用于Aβ成像的¹¹C标记显影剂，对淀粉样蛋白原纤维具有高度亲和力［K_d=（8.4±1.0）nmol·L^-1］，能与其在AD患者的大脑皮质区域结合^[12]。但由于¹¹C半衰期太短（t_1/2=20.3 min），限制了该类显影剂的广泛应用。

¹⁸F标记的放射性显影剂半衰期更为适中（t_1/2=109.8 min），因此被临床广泛应用。2013年，［¹⁸F］氟替莫尔（［¹⁸F］-flutemetamol/［¹⁸F］-GE067，图1C）^[13]获得美国食品和药物管理局（FDA）批准。大鼠和小鼠的在体实验表明，它具有与［¹¹C］-PiB相似的药动学特征，且两者都容易进入大脑，但是［¹⁸F］氟替莫尔亲脂性更高，从大脑的白质中洗脱速度比［¹¹C］-PiB要慢大约1.4倍^[13]。一项Ⅲ期临床试验证明，［¹⁸F］氟替莫尔在体内检测脑Aβ密度方面具有很高的特异性和敏感性^[14,15]。此外，有研究比较了［¹⁸F］氟替莫尔和［¹¹C］-PiB在AD患者和对照受试者中的表现，［¹⁸F］氟替莫尔区分AD患者和老年健康对照者的灵敏度为97.2%，特异度为85.3%，在区分AD患者和健康对照者方面，［¹¹C］PIB与［¹⁸F］氟替莫尔有相似的分辨能力^[16]。与［¹⁸F］氟替莫尔相同，［¹⁸F］-FC119S也是以苯并噻吩为母环的新型Aβ-PET显影剂（图1D），该分子能与皮质和海马中的Aβ高特异性结合。与健康对照组相比，使用［¹⁸F］-FC119S的AD患者在额叶、颞叶等多个皮质脑区标准摄取值（SUV）更高。利用［¹¹C］-PiB与［¹⁸F］-FC119S两种显影剂的PET/CT的联合诊断可有效鉴别轻度认知功能障碍（MCI）和AD^[17]。

2　苯乙烯吡啶及二苯乙烯衍生物

苯乙烯吡啶是具有高度共轭、相对平面结构的芳香环分子。有研究表明，它与Aβ具有高度的亲和力^[18]。为了调节¹⁸F标记二苯乙烯的亲脂性，KUNG等^[19]利用不同链长的聚乙二醇单元合成了一系列二苯乙烯衍生物，并通过聚乙二醇侧链末端的亲核取代反应进行¹⁸F标记。试验证明，适当链长的聚乙二醇侧链可以使显影剂保持较高的Aβ结合亲和力，且更易透过血脑屏障^[20]。其中，二苯乙烯类衍生物类的［¹⁸F］氟倍他滨（［¹⁸F］florbetaben/［¹⁸F］-BAY94-9172，图2A）于2008年进行了人体试验^[21]，并于2014年获得FDA批准^[22]。临床前数据表明，［¹⁸F］-氟倍他滨对Aβ斑块有很高的特异性^[23]。另有研究对比了在路易体痴呆（DLB）患者和AD患者中［¹⁸F］氟倍他滨以及［¹¹C］-PiB的摄取差异^[24]，相较于DLB患者，在AD患者大脑中［¹⁸F］氟倍他滨的摄取水平更高，说明［¹⁸F］氟倍他滨有区分DLB和AD患者的优势^[25]。

显影剂的初始脑摄取情况、体内代谢方式、显像后能否从脑区域快速清除以及为实现最高靶-非靶比值选择的采集时间等因素都会影响到显像剂的实际效果。因此，在保留氟代聚乙二醇和二苯乙烯环母核结构的基础上，研究人员引入了吡啶环形成苯乙烯基吡啶结构。［¹⁸F］氟倍他平（［¹⁸F］florbetapir/［¹⁸F］AV-45，图2B）是一种苯乙烯基吡啶衍生物的Aβ显影剂^[26,27]，于2012年获FDA批准，并在AD神经影像学计划中被广泛用作研究生物标志物Aβ的显影剂。一项针对［¹⁸F］氟倍他平的Ⅲ期多中心临床试验^[28]考察了患者生前［¹⁸F］氟倍他平PET图像与死后Aβ病理之间的定性和定量关系，PET影像显示：［¹⁸F］氟倍他平分布在AD患者死后解剖的脑Aβ沉积部位中，这说明显影剂在AD大脑的成像区域与患者病灶的解剖学位置是吻合的，并且在引入了吡啶环后［¹⁸F］氟倍他平与Aβ结合的亲和力是［¹⁸F］氟倍他滨的2倍。2013年发表的一项多中心Ⅱ期临床试验显示，AD患者、MCI患者和健康受试者在使用［¹⁸F］氟倍他平后，均未观察到严重副作用。最新研究还发现，使用［¹⁸F］氟倍他平后，大脑枕叶皮质内的Aβ斑块沉积与临床晚期AD症状呈正相关，表明显影剂在此处的SUV高低可能有助于评估AD的严重程度^[29]。

放射性核素⁶⁴Cu是一种理想的PET核素（t_1/2=12.7 h，β⁺=17%，β^-=39%）^[30]。利用硫代氨基脲类衍生物用作金属螯合剂，可以开发⁶⁴Cu标记的Aβ显影剂。HICKEY等^[31]报道了一种苯乙烯基吡啶修饰的⁶⁴Cu放射性药物［⁶⁴Cu］-Cu（Ⅱ）-ATSM用于Aβ斑块成像。经荧光显微镜观察，［⁶⁴Cu］-1（图3A）和［⁶⁴Cu］-2（图3B）能与Aβ斑块有效结合。小鼠经尾静脉注射（~13 mBq）给药后，在脑部对［⁶⁴Cu］-1和［⁶⁴Cu］-2均有1.1%的摄取。由于［⁶⁴Cu］-Cu（Ⅱ）-ATSM稳定性好且可以穿过血脑屏障，该双功能螯合物可以用作神经成像。含有二苯乙烯官能团的［¹¹C］-SB-13分子建模结果表明，二苯乙烯可以通过苯基之间π-π堆积作用和Aβ肽链结合，使得该显影剂与Aβ的亲和力远强于其他类型的β折叠聚集体（包括NFT和路易体），因此基于二苯乙烯结构衍生的显影剂是靶向Aβ的优秀候选物^[31]。据此，LIM等^[32]开发了二苯乙烯官能团结合的双（硫代半碳氮杂）Cu（Ⅱ）配合物［⁶⁴Cu］-3（图3C），透射电子显微镜观察发现，用［⁶⁴Cu］-3处理合成的Aβ（1~42）纤维，纤维形态发生显著变化，表明该显影剂可与Aβ斑块进行有效结合，且与野生型小鼠相比，尾静脉注射［⁶⁴Cu］-3（85 mBq）的表达嵌合小鼠/人淀粉样蛋白前体蛋白（Mo/Huap695Swe）和突变的人早老素1（PS1-DE9）双转基因小鼠（APP/PS1）脑部显示［⁶⁴Cu］-3摄取更高。

⁶⁸Ga是另一种可用于PET成像的放射性核素，半衰期为68 min，可以通过母体核素⁶⁸Ge衰变获得。其母体核素⁶⁸Ge的半衰期为272 d，不同规格的⁶⁸Ge-⁶⁸Ga发生器通常可在长达一年的有效期时间内提供⁶⁸Ga核素^[33]。Ga³⁺作为硬酸金属，可以与如羧酸、氨基氮异羟肟酸酯以及酚盐等结构中的硬碱基团形成牢固的键^[34]，因此可以利用含有1,4, 7,10-四氮杂环十二烷-1,4, 7,10-四乙酸（DOTA）、NOTA-琥珀酰亚胺酯（NOTA-NHS-ester）等结构的双功能螯合剂进行标记。ZHA等^[35]报道了⁶⁸Ga标记的系列N, N’-双［2-羟基-5-（羧乙基）苄基］乙二胺-N, N’-二乙酸（HBED-CC）-苯乙烯基吡啶结构衍生的显影剂（图4），虽然体外放射自显影结果显示该类显影剂对Aβ斑块具有高度结合的亲和力，但由于透过血脑屏障能力差，仅能用于诊断脑淀粉样血管病。

tau蛋白显影剂

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AD患者脑中Aβ与tau蛋白聚集体的浓度差异较大（约5~20倍），且沉积在不同的区域^[36]。Aβ在额叶皮质的浓度最高，而tau蛋白聚集体在颞顶皮质的浓度最高，且折叠方式不同的亚型微管相关蛋白tau，包括四重复（4R）tau、三重复（3R）tau、混合3R/4R tau等的分布也不同，这些特点有助于tau蛋白相关疾病的鉴别诊断^[37]。在此，通过对不同结构类型，如喹啉衍生物、苯并咪唑并嘧啶和吡啶吲哚类衍生物、苯基/吡啶基-丁二烯基-苯并噻唑/苯并噻唑鎓（PBB）衍生物等，对已进行临床试验的tau蛋白显影剂进行介绍。

1　喹啉衍生物

对喹诺酮和苯并咪唑衍生物类tau蛋白放射性显影剂研究较早^[38,39]。与健康对照组相比，［¹⁸F］-THK523（@图5A）在AD患者的颞叶、顶叶、眶额叶以及海马中都有高摄取，但白质中的高摄取严重干扰了图像，阻碍了其在临床中的进一步使用。通过结构改进，设计合成了6-［（3-¹⁸F-2-羟基）丙氧基］-2-（4-二甲基氨基苯基）喹诺酮（［¹⁸F］-THK5105，@图5B）、6-［（3-¹⁸F-2-羟基）丙氧基］-2-（4-甲基氨基苯基）喹诺酮（［¹⁸F］-THK5117，@图5C）和6-［（3-18F-2-羟基）丙氧基］-2-（4-甲基氨基吡啶基）喹啉（［¹⁸F］-THK5351，@图5D）等tau蛋白显影剂，其结合亲和力较［¹⁸F］-THK523均有所提高^[40]。与［¹⁸F］-THK5105和［¹⁸F］-THK5117相比，［¹⁸F］-THK5351的非特异性清除速度更快，在白质中保留率更低，因此图像信噪比更高^[40,41]。

单胺氧化酶（MAO）-B是一个AD显影剂脱靶结合的位点，有研究显示［¹⁸F］-THK-5351存在脱靶与MAO-B结合的现象。为了克服这种缺陷，LERDSIRISUK等^[42]合成并评估了2-吡咯并吡啶基喹啉（PPQ）衍生物［¹⁸F］-PPQ8和［¹⁸F］-PPQ9（图5E、5F），体外竞争性结合实验表明，这两种新型PPQ衍生物对tau蛋白具有很高的结合亲和力（IC₅₀分别为4.9和6.9 nmol·L^-1），可作为选择性tau蛋白PET显影剂，但其药动学表现不佳，结构还有待进一步优化。

2　苯并咪唑并嘧啶和吡啶吲哚衍生物

-T807/［¹⁸F］-flortaucipir（图6A）和［¹⁸F］-T808（图6B）是苯并咪唑和苯并咪唑-嘧啶类tau蛋白放射性显影剂的优秀代表^[43-45]。通过对AD患者的脑切片进行放射自显影染色的Scatchard分析显示，［¹⁸F］-T807和［¹⁸F］-T808对配对螺旋样纤维的tau蛋白（PHF-tau）都具有高亲和力（K_d分别为14.6和22 nmol·L^-1）^[46]。2020年FDA批准［¹⁸F］-T807用于AD的影像诊断。但是体内研究显示［¹⁸F］-T807在AD和进行性核上性麻痹（PSP）中均显示出非特异性结合^[47]，这可能是因为T807是一种弱的非选择性的MAO抑制剂^[48]，可与基底神经节中的MAO结合，造成部分脱靶，从而改变了T807的结合方式。因此，KROTH等^[49]设计了［¹⁸F］-PI-2620显影剂（图6C），旨在减少与MAO-A和MAO-B的脱靶结合，对病理性的tau蛋白聚集体有很高的亲和力和选择性。结果显示，AD受试者tau蛋白沉积的［¹⁸F］-PI-2620 PET影像具有很高的图像质量和极好的信噪比^[50]，注射后30~90 min分别进行影像采集，经过30 min的PET扫描，通过分布容积比（DVR）和SUV两个指标进行评估，注射后45~75 min的图像可显著区分AD患者和健康受试者。

根据Scatchard分析，［¹⁸F］-T808仅与tau蛋白聚集体的一种结合位点结合，进一步证实了其对tau蛋白聚集体的选择性超过了Aβ^[46]。为了改善［¹⁸F］-T808代谢过程中出现脱氟致使颅骨沉积的问题，研究者合成了［¹⁸F］-T808的氘代类似物［¹⁸F］-GTP1（图6D）。［¹⁸F］-GTP1对tau蛋白的亲和力较高，与AD组织中的Aβ斑块或MAO-B结合较少，无明显的脱靶结合，能成功区分AD患者和健康受试者组^[51]。此外，KAIDE等^[52]还设计合成了带有氟代烷基氨基结构的¹⁸F标记苯并咪唑并吡啶（BIP）衍生物，［¹⁸F］-IBIPF1（图6E）和［¹⁸F］-IBIPF2（图6F），并评估了作为选择性tau蛋白显影剂的可能性。与［¹⁸F］-IBIPF2相比，［¹⁸F］-IBIPF1对tau蛋白选择性更好，tau/Aβ比值为34.8，大脑注射后2 min时为6.22% ID·g^-1，摄取较高，且在小鼠大脑中的代谢稳定。因此，基于BIP骨架的进一步结构优化也许可以开发更有效的tau蛋白显影剂。

兰索拉唑和阿司咪唑能选择性结合某些形式的tau蛋白^[53]，FAWAZ等^[54]设计合成了［¹¹C］-N-甲基兰索拉唑（NML）（图7A）和［¹⁸F］-NML（图7B）等兰索拉唑衍生物。［¹¹C］-NML是一种可以量化tau蛋白组成的NFT PET显影剂。虽然小鼠脑对［¹¹C］-NML的摄取很低，但非人类的灵长类动物大脑摄取却不受影响^[55]。对接结果显示，［¹¹C］-NML结构中用N-¹¹CH₃基团取代-NH基团可以增强对tau蛋白的亲和力^[56]。但［¹⁸F］-NML的人体试验表明，［¹⁸F］-NML在MCI/AD的患者脑部滞留低，且无法证明体内有与tau蛋白相对应的特定信号，不足以在体内检测tau蛋白病理。

3　PBB骨架的tau蛋白显影剂

-PBB3（图8A）具有PBB骨架，能与NFT进行结合^[57]，但代谢不稳定^[58]。而¹⁸F标记的衍生物［¹⁸F］-PM-PBB3（图8B）可以对P301L微管相关蛋白tau（MAPT）突变的FTD进行诊断，克服了［¹¹C］-PBB3的图像信噪较低、稳定性较差、代谢不稳定等缺陷，此研究证明了PBB3显影剂在脑中的滞留不仅与AD患者脑切片中的tau蛋白聚集、认知功能下降和灰质萎缩密切相关，而且在伴有4R和3R/4R tau蛋白病变的FTD患者中具有应用前景^[59]。

以突触蛋白为靶点的AD诊断PET显影剂

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AD等神经退行性疾病，是中枢神经系统或周围神经系统神经元进行性丢失的神经系统疾病。近期研究表明，大脑突触的破坏是AD患者认知缺陷的根源，突触丧失已被确定与AD认知障碍存在相关性^[59]。突触蛋白可以作为一种检测突触密度的潜在生物标志物，通过成像评估AD的认知功能。

1　左乙拉西坦结构衍生物

突触密度的一个候选标志物是突触小泡糖蛋白2（SV2）。SV2具有三种亚型（SV2A、SV2B和SV2C），在大鼠和人脑中均有表达，但分布不同。SV2A几乎在所有突触中都有表达，位于突触前末端的突触小泡中，不仅可以调节突触小泡的胞吐作用，还能改变突触功能。虽然突触素免疫染色可以评估神经元中突触形成情况，但SV2A在突触小泡中分布更均匀，利用其检测突触密度可能更为准确。

最近，开发了以左乙拉西坦结构为母核的衍生物［¹¹C］-UCB-J（图9A），对SV2A具有高的亲和力和选择性，已被用于人体研究。使用［¹¹C］-UCB-J的PET显像对突触蛋白密度的初步研究表明，评估AD患者内侧颞叶的突触密度时，AD患者突触密度比健康受试者低，说明通过SV2A检测突触密度，可作为跟踪疾病进展和治疗效果的有力工具，其结果可以为AD病理学提供依据^[60]。［¹⁸F］-SDM-8（图9B）的成像特性，如高的脑摄取率、合适的组织动力学表现和高特异性结合，使得其与［¹¹C］-UCB-J同样具有吸引力。鉴于¹⁸F较长的半衰期以及集中生产和多站点分布的可行性，［¹⁸F］-SDM-8有望成为优秀靶向SV2A的放射性显影剂^[61]。SV2A的PET成像方法可以结合其他病理生理变化，如在大脑功能区中tau或Aβ的积聚情况，血液中生物标志物与认知能力之间的联系，从而对AD的神经生物学进行深入探究。

2　3-氟-4-乙炔基苄腈的结构衍生物

代谢型谷氨酸受体第5亚型（mGluR5）是调节突触传递的G蛋白偶联受体，可通过介导Aβ寡聚体的突触毒性作用在AD发病中发挥重要作用，辅助AD诊断和监测神经系统疾病进展，准确性高。［¹⁸F］-FPEB（图10A）是在中枢神经系统中对mGluR5的丰度和分布进行成像的PET显像剂。VARLOW等^[62]研究比较了［¹⁸F］-FPEB的多种标记方法，含有氯或硝基取代基的前体，放射化学产率（RCY）较低（<10%），而通过金刚烷基的螺环碘鎓盐（SCIDY）前体和磺酸盐前体标记得到［¹⁸F］-FPEB的RCY分别为25%和36%。在APP/PS1模型小鼠静脉注射［¹⁸F］-FPEB显影剂后5 min的全脑分布显示，相比野生型，年龄一致的对照组的SUV略高（4.0±0.2 vs. 4.8±0.4）。该研究初步支持了mGluR5可以作为诊断AD的生物标志物的观点。采用［¹⁸F］-FPEB的PET影像评估体内mGluR5表达水平的研究显示，与健康个体相比，AD患者海马中mGluR5的表达明显降低，［¹⁸F］-FPEB在皮质和皮质下灰质的摄取率高，在小脑的摄取率低。采用推注加恒量输注给药方法给予［¹⁸F］-FPEB，成像结果重现性良好，是人用mGluR5显影剂的最佳候选者。目前，mGluR5降低水平及其与认知和功能损害的关系仍需要进一步研究，定量分析AD中mGluR5水平可以深化对AD发病机制的认识并促进开发新的治疗方法和生物标志物^[63]。而另一种候选显影剂［¹⁸F］-SP203（图10B）在体内出现脱氟后的骨骼显像，即游离放射氟离子与颅骨相结合并积聚，可能会干扰脑部组织吸收值的测定^[64]。

3　以酮色林为结构母核的氟苯甲酰基衍生物

AD的神经元丢失模式始于内嗅皮质和海马，谷氨酸能锥体细胞可接受来自中缝背核的5-羟色胺（5-HT）能神经元的支配。因此，5-HT系统的成分变化可以用来研究AD早期的分子变化。基于5-HT在AD认知和行为症状中的作用这一假设，人们对AD引起的脑内5-HT系统的改变进行了大量的研究。AD患者尸检和影像学研究显示脑5-HT_2A受体在早期显著减少。MARNER等^[65]发现，［¹⁸F］altanserin（图11A）在AD患者大脑与5-HT_2A的结合显著减少，而早期AD患者的新皮质中5-HT能神经元实际上得到了保留，这一发现为AD患者使用选择性5-HT再摄取抑制剂进行抗抑郁治疗提供了理论支持。有研究对比了9例可能的AD患者和8例老年健康受试者的［¹⁸F］deuteroaltanserin（图11B）用药情况并发现，AD患者脑前扣带回中显影剂的特异性SUV/血液中药物浓度、母体示踪剂/示踪剂放射性代谢物等比率，均相较其他的脑部区域低，说明该处5-HT_2A受体水平较低^[66]。另一项试验用［¹⁸F］setoperine（图11C）的PET显影评估了9例AD患者脑区5-HT_2A的情况，发现多个脑区域包括颞叶、额叶、顶叶、颞顶叶交界处皮质均表现出对［¹⁸F］setoperine特异性结合，与37例健康受试者相比，AD患者中这些皮质区域的5-HT_2A受体水平较低^[67]。

小结

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近20年来，随着新显影剂和图像分析技术的发展，用于诊断AD的PET成像研究取得了重大进展。第一代Aβ和tau蛋白PET显影剂虽然具有良好的靶点摄取，但其在脑部位非靶摄取过高，清除较慢，选择性摄取较低，易产生脱靶，某些显影剂更是难以透过血脑屏障。针对上述缺陷，设计并合成的第二代Aβ斑块PET显影剂［¹⁸F］氟倍他平和［¹⁸F］氟倍他滨，已分别于2012年和2014年获得FDA的批准上市，性能得到极大改善。目前，已进入临床研究阶段的tau蛋白PET显影剂中，［¹⁸F］-THK5117比［¹⁸F］-THK5105具有更高的信噪比，［¹⁸F］-THK5117将NFT病理可视化，纵向PET研究表明，其滞留情况与痴呆严重程度相关。与第一代显影剂［¹⁸F］-THK523相比，［¹⁸F］-THK5351有体内清除速度更快、对比度更高和皮质下白质滞留更低等优点。在临床研究中，［¹⁸F］-T807表现出良好的PET成像特性，［¹⁸F］-T807的摄取与AD各阶段预期的tau蛋白病理分布密切相关。这些二代显影剂均表现出的良好选择性和影像表现稳定性，使其更有望进入放射性药品市场。新靶点的发现也会为新显影剂的设计提供更广阔的思路。如叉头框蛋白O3a（FOXO3a），在AD中易受神经变性影响的大脑区域中高度表达，可以成为早期检测AD的潜在新型标志物，有望未来开发靶向FOXO3a的新型PET显影剂^[68]。

2021年6月FDA批准上市的aducanumab作为减少Aβ斑块沉积的新药在治疗过程中出现了更为严重的Aβ成像异常^[69]。 2023年7月，靶向Aβ的AD治疗新药lecanemab获得了FDA的批准，该药能够显著降低AD患者认知功能的衰退幅度，治疗18个月后，PET检测患者大脑中的Aβ水平显著低于基线水平（P<0.01），脑水肿和轻微脑出血等副作用以及Aβ相关的影像学异常的发生率也在预期之内（13%）^[70]。这都说明AD相关PET影像诊断不可或缺，为考量药物有效性和安全性提供了更为高效的诊断信息。

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西南医科大学附属医院博士启动基金(20015)

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参考文献引证文献

排序方式：

[1]

Anon. 2023 Alzheimer’s disease facts and figures[J]. Alzheimers Dement, 2023, 19（4）: 1598-1695.

[2]

REITZ

. Alzheimer’s disease and the amyloid cascade hypothesis:a critical review [J]. Int J Alzheimers Dis, 2012, 2012 : 369808.

[3]

DETURE

, DICKSON

. The neuropathological diagnosis of Alzheimer’s disease[J]. Mol Neurodegener, 2019, 14（1）:396.

[4]

HANE

, ROBINSON

, LEE

, et al. Recent progress in Alzheimer’s disease research, part 3: diagnosis and treatment[J]. J Alzheimers Dis, 2017, 57（3）: 645-665.

[5]

MCKHANN

, KNOPMAN

, CHERTKOW

, et al. The diagnosis of dementia due to Alzheimer’s disease: recommendations from the National Institute on Aging-Alzheimer’s Association workgroups on diagnostic guidelines for Alzheimer’s disease[J]. Alzheimers Dement, 2011, 7（3）: 263-269.

[6]

KLUNK

, ENGLER

, NORDBERG

, et al. Imaging brain amyloid in Alzheimer’s disease with Pittsburgh Compound-B[J]. Ann Neurol, 2004, 55（3）: 306-319.

[7]

ENGLER

, SANTILLO

, WANG

, et al. In vivo amyloid imaging with PET in frontotemporal dementia[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2008, 35 （1）: 100-106.

[8]

RABINOVICI

, ROSEN

, ALKALAY

, et al. Amyloid vs FDG-PET in the differential diagnosis of AD and FTLD[J]. Neurology, 2011, 77 （23）: 2034-2042.

[9]

RABINOVICI

, FURST

, O'NEIL

, et al. 11C-PIB PET imaging in Alzheimer disease and frontotemporal lobar degeneration[J]. Neurology, 2007, 68（15）: 1205-1212.

[10]

EDISON

, ROWE

, RINNE

, et al. Amyloid load in Parkinson’s disease dementia and Lewy body dementia measured with [11C]-PIB positron emission tomography[J]. J Neurol Neurosurg Psychiatry, 2008, 79 （12）: 1331-1338.

[11]

MINTUN

, LAROSSA

, SHELINE

et al. [¹¹C]PiB in a nondemented population: potential antecedent marker of Alzheimer disease[J]. Neurology, 2006, 67（3）: 446-452.

[12]

ITO

, SHIMADA

, SHINOTOH

, et al. Quantitative analysis of amyloid deposition in Alzheimer disease using PET and the radiotracer11C-AZD2184[J]. J Nucl Med, 2014, 55（6）: 932-938.

[13]

SNELLMAN

, ROKKA

, LOPEZ-PICON

, et al. Pharmacokinetics of ¹⁸F-flutemetamol in wild-type rodents and its binding to beta amyloid deposits in a mouse model of Alzheimer’s disease[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2012, 39 （11）: 1784-1795.

[14]

RABINOVICI

. The translational journey of brain β-amyloid imaging: from positron emission tomography to autopsy to clinic [J]. JAMA Neurol, 2015, 72（3）: 265-266.

[15]

CURTIS

, GAMEZ

, SINGH

, et al. Phase 3 trial of flutemetamol labeled with radioactive fluorine 18 imaging and neuritic plaque density[J]. JAMA Neurol, 2015, 72 （3）: 287-294.

[16]

HATASHITA

, YAMASAKI

, SUZUKI

, et al. [¹⁸F]-Flutemetamol amyloid-beta PET imaging compared with [¹¹C]-PiB across the spectrum of Alzheimer’s disease[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2014, 41（2）: 290-300.

[17]

PARK

, BYUN

, KIM

, et al. The correlation of neuropsychological evaluation with ¹¹C-PiB and ¹⁸F-FC119S amyloid PET in mild cognitive impairment and Alzheimer disease[J]. Medicine （Baltimore）, 2020, 99（16）: e19620.

[18]

KUNG

, LEE

, ZHUANG

, et al. Novel stilbenes as probes for amyloid plaques[J]. J Am Chem Soc, 2001, 123（50）:12740-12741.

[19]

KUNG

, CHOIS

, QU

, et al. ¹⁸F stilbenes and styrylpyridines for PET imaging of A beta plaques in Alzheimer’s disease: a miniperspective[J]. Med Chem, 2010, 53（3）: 933-941.

[20]

STEPHENSON

, CHANDRA

, ZHUANG

, et al. Fluoropegylated （FPEG） imaging agents targeting Abeta aggregates[J]. Bioconjug Chem, 2007, 18（1）: 238-246.

[21]

VILLEMAGNE

, ONG

, MULLIGAN

, et al. Amyloid imaging with ¹⁸F-florbetaben in Alzheimer disease and other dementias[J]. J Nucl Med, 2011, 52（8）: 1210-1217.

[22]

MARTINEZ

, VERNOOIJ

, FUENTES PADILLA

, et al. ¹⁸F PET with florbetaben for the early diagnosis of Alzheimer’s disease dementia and other dementias in people with mild cognitive impairment （MCI） [J]. Cochrane Database Syst Rev, 2017, 11（11）: CD012883.

[23]

ROWE

, ACKERMAN

, BROWNE

, et al. Imaging of amyloid beta in Alzheimer’s disease with ¹⁸F-BAY94-9172, a novel PET tracer: proof of mechanism[J]. Lancet Neurol, 2008, 7（2）:129-135.

[24]

ROWE

, VILLEMAGNE

. Brain amyloid imaging[J]. J Nucl Med, 2011, 52（11）: 1733-1740.

[25]

FODERO-TAVOLETTI

, BROCKSCHNIEDER

, VILLEMAGNE

, et al. In vitro characterization of [¹⁸F]-florbetaben, an Aβ imaging radiotracer[J]. Nucl Med Biol, 2012,39（7）: 1042-1048.

[26]

CHOI

, GOLDING

, ZHUANG

, et al. Preclinical properties of ¹⁸F-AV-45: a PET agent for Abeta plaques in the brain[J]. J Nucl Med, 2009, 50（11）: 1887-1894.

[27]

WONG

, ROSENBERG

, ZHOU

, et al. In vivo imaging of amyloid deposition in Alzheimer disease using the radioligand ¹⁸F-AV-45 （florbetapir [corrected]¹⁸F） [J]. J Nucl Med, 2010, 51（6）: 913-920.

[28]

CLARK

, SCHNEIDER

, BEDELL

, et al. Use of florbetapir-PET for imaging beta-amyloid pathology[J]. JAMA,2011, 305（18）: 275-283.

[29]

THIENTUNYAKIT

, THONGPRAPARN

, SETHANANDHA

, et al. Relationship between F-18 florbetapir uptake in occipital lobe and neurocognitive performance in Alzheimer’s disease[J]. Jpn J Radiol, 2021, 39（10）: 984-993.

[30]

SHARMA

, SCHULTZ

, PRIOR

, et al. Coordination chemistry of bifunctional chemical agents designed for applications in ⁶⁴Cu PET imaging for Alzheimer’s disease[J]. Inorg Chem,2017, 56（22）: 13801-13814.

[31]

HICKEY

, LIM

, HAYNE

, et al. Diagnostic imaging agents for Alzheimer’s disease: copper radiopharmaceuticals that target Aβ plaques[J]. J Am Chem Soc, 2013, 135（43）: 16120-16132.

[32]

LIM

, PATERSON

, FODERO-TAVOLETTI

, et al. A copper radiopharmaceutical for diagnostic imaging of Alzheimer’s disease: a bis （thiosemicarbazonato） copper （II） complex that binds to amyloid-β plaques[J]. Chem Commun, 2010, 46（30）:5437-5439.

[33]

BANERJEE

, POMPER

. Clinical applications of Gallium-68[J]. Appl Radiat Isot, 2013, 76: 2-13.

[34]

AGDEPPA

, KEPE

, LIU

, et al. Binding characteristics of radiofluorinated 6-dialkylamino-2-naphthylethylidene derivatives as positron emission tomography imaging probes for beta-amyloid plaques in Alzheimer’s disease[J]. J Neurosci, 2001, 21（24）:RC189.

[35]

ZHA

, SONG

, CHOI

S R

, et al. 68Ga-bivalent polypegylated styrylpyridine conjugates for imaging Aβ plaques in cerebral amyloid angiopathy[J]. Bioconjug Chem, 2016, 27（5）: 1314-1323.

[36]

NASLUND

, HAROUTUNIAN

, MOHS

, et al. Correlation between elevated levels of amyloid beta-peptide in the brain and cognitive decline[J]. JAMA, 2000, 283（12）: 1571-1577.

[37]

RRIAGADA

, GROWDON

, HEDLEY-WHYTEE

, et al. Neurofibrillary tangles but not senile plaques parallel duration and severity of Alzheimer’s disease[J]. Neurology, 1992, 42 （3 Pt 1）:631-639.

[38]

MACCIONI

, FARIAS

, MORALES

, et al. The revitalized tau hypothesis on Alzheimer’s disease[J]. Arch Med Res, 2010, 41（3）: 226-231.

[39]

VILLEMAGNE

, FURUMOTO

, FODERO-TAVOLETTI

, et al. The challenges of tau imaging[J]. Future Neurol, 2012, 7（4）:409-421.

[40]

OKAMURA

, FURUMOTO

, HARADA

, et al. Novel ¹⁸F-labeled arylquinoline derivatives for noninvasive imaging of Tau pathology in Alzheimer disease[J]. J Nucl Med, 2013, 54（8）:1420-1427.

[41]

VILLEMAGNE

, FURUMOTO

, FODERO-TAVOLETTI

, et al. In vivo evaluation of a novel tau imaging tracer for Alzheimer’s disease[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2014, 41（5）: 816-826.

[42]

LERDSIRISUK

, HARADA

, HAYAKAWA

, et al. Synthesis and evaluation of 2-pyrrolopyridinylquinoline derivatives as selective tau PET tracers for the diagnosis of Alzheimer’s disease[J]. J Nucl Med Biol, 2021, 93: 11-18.

[43]

CHIEN

, BAHRI

, S ZARDENINGS

, et al. Early clinical PET imaging results with the novel PHF-tau radioligand [¹⁸F]-T807[J]. J Alzheimers Dis, 2013, 34（2）: 457-468.

[44]

DECLERCQ

, CELEN

, LECINA

, et al. Comparison of new tau pet-tracer candidates with [¹⁸F]T808 and [¹⁸F]T807[J]. Mol Imaging, 2016, 15: 1536012115624920.

[45]

PASSAMONTI

, RODRIGUEZ

, HONG

, et al. ¹⁸F-AV-1451 positron emission tomography in Alzheimer’s disease and progressive supranuclear palsy[J]. Brain, 2017, 140（3）:781-791.

[46]

UZUEGBUNAM

, LIBRIZZI

, HOOSHYAR

. PET radiopharmaceuticals for Alzheimer’s disease and Parkinson’s disease diagnosis, the current and future landscape[J]. Molecules, 2020, 25（4）: 977.

[47]

GANDY

, DEKOSKY

. [¹⁸F]-T807 tauopathy PET imaging in chronic traumatic encephalopathy[J]. F1000Res, 2014, 3: 229.

[48]

LEMOINE

, GILLBERG

, SVEDBERG

, et al. Comparative binding properties of the tau PET tracers THK5117, THK5351, PBB3, and T807 in postmortem Alzheimer brains[J]. Alzheimers Res Ther, 2017, 9（1）: 96.

[49]

KROTH

, ODEN

, MOLETTE

, et al. Discovery and preclinical characterization of [¹⁸F]PI-2620, a next-generation tau PET tracer for the assessment of tau pathology in Alzheimer’s disease and other tauopathies[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2019, 46（10）:2178-2189.

[50]

MUELLER

, BULLICH

, BARRET

, et al. Tau PET imaging with 18F-PI-2620 in patients with Alzheimer disease and healthy controls: a first-in-humans study[J]. J Nucl Med, 2020, 61（6）:911-919.

[51]

SANABRIA

, MARIK

, OGASAWARA

, et al. ¹⁸F-GTP1（Genentech Tau Probe 1）, a radioligand for detecting neurofibrillary tangle tau pathology in Alzheimer’s disease[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2019, 46（10）: 2077-2089.

[52]

KAIDE

, WATANABE

, SHIMIZU

, et al. ¹⁸F-labeled benzimidazopyridine derivatives for PET imaging of tau pathology in Alzheimer’s disease[J]. Bioorg Med Chem, 2019, 27（16）:3587-3594.

[53]

SHO

, HIROYUKI

, YOICHI

, et al. ¹⁸F-labeled benidazopyridine derivatives for PET imaging of tau pathology in Alzheimer’s disease[J]. Bioorg Med Chem, 2019, 27（16）:3587-3594.

[54]

FAWAZ

, BROOKS

, RODNICK

, et al. High affinity radiopharmaceuticals based upon lansoprazole for PET imaging of aggregated tau in alzheimer’s disease and progressive supranuclear palsy: Synthesis, preclinical evaluation, and lead selection[J]. ACS Chem[J]. Neurosci, 2014, 5（8）: 718-730.

[55]

ROJO

, ALZATE-MORALES

, SAAVEDRA

, et al. Selective interaction of lansoprazole and astemizole with tau polymers:potential new clinical use in diagnosis of Alzheimer’s disease[J]. Alzheimer’s Dis, 2010, 19（2）: 573-589.

[56]

SHAO

, CARPENTER

, DESMOND

, et al. Evaluation of[¹¹C]N-methyl lansoprazole as a radiopharmaceutical for PET imaging of tau neurofibrillary tangles[J]. ACS Med Chem Lett,2012, 3（11）: 936-941.

[57]

ONO

, SAHARA

, KUMATA

, et al. Distinct binding of PET ligands PBB3 and AV-1451 to tau fibril strains in neurodegenerative tauopathies[J]. Brain, 2017, 140（3）: 764-780.

[58]

MECCA

, O’DELL

, SHARP

, et al. Synaptic density and cognitive performance in Alzheimer’s disease: a PET imaging study with [¹¹C]UCB-J[J]. Alzheimers Dement, 2022, 18（12）:2527-2536.

[59]

, FU

, YU

, et al. Tau PET imaging with [¹⁸F]PM-PBB3 in frontotemporal dementia with MAPT mutation[J]. J Alzheimers Dis, 2020, 76（1）: 149-157.

[60]

CHEN

, MECCA

, NAGANAWA

, et al. Assessing synaptic density in Alzheimer disease with synaptic vesicle glycoprotein 2A positron emission tomographic imaging[J]. JAMA Neurol, 2018, 75（10）: 1215-1224.

[61]

, CAI

, WU

, et al. Synthesis and in vivo evaluation of a novel PET radiotracer for imaging of synaptic vesicle glycoprotein 2A（SV2A） in nonhuman primates[J]. ACS Chem Neurosci, 2019,10（3）: 1544-1554.

[62]

VARLOW

, MURRELL

, HOLLAND

, et al. Revisiting the radiosynthesis of [¹⁸F]FPEB and preliminary PET imaging in a mouse model of Alzheimer’s disease[J]. Molecules, 2020, 25（4）:982.

[63]

MECCA

, MCDONALD

, MICHALAK

, et al. PET imaging of metabotropic glutamate receptor 5 binding in Alzheimer’s disease[J]. Alzheimers Dement, 2018, 14（7）:501-503.

[64]

BROWN

, KIMURA

, ZOGHBI

, et al. Metabotropic glutamate subtype 5 receptors are quantified in the human brain with a novel radioligand for PET[J]. J Nucl Med, 2008, 49（12）:2042-2048.

[65]

MARNER

, FROKJAER

, KALBITZER

, et al. Loss of serotonin 2A receptors exceeds loss of serotonergic projections in early Alzheimer’s disease: a combined [¹¹C]DASB and [¹⁸F]altanserin-PET study[J]. Neurobiol Aging, 2012, 33（3）: 479-487.

[66]

van DYCK

, SOARES

, TAN

, et al. Equilibrium modeling of 5-HT（2A） receptors with [¹⁸F]deuteroaltanserin and PET:feasibility of a constant infusion paradigm[J]. Nucl Med Biol,2000, 27（8）: 715-722.

[67]

BLIN

, BARON

, DUBOIS

, et al. Loss of brain 5-HT2 receptors in Alzheimer’s disease. In vivo assessment with positron emission tomography and [¹⁸F]setoperone[J]. Brain, 1993, 116（3）: 497-510.

[68]

NHO

, HERGERT

. FoxO3a and disease progression[J]. World J Biol Chem, 2014, 5（3）: 346-354.

[69]

AMPEL

, HARDY

, BLENNOW

, et al. The Amyloid-β pathway in Alzheimer’s disease[J]. Mol Psychiatry, 2021, 26（10）: 5481-5503.

[70]

van DYCK

, SWANSON

, AISEN

, et al. Lecanemab in early Alzheimer’s disease[J]. N Engl J Med, 2023, 388（1）: 9-21.

2024年第43卷第7期

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doi: 10.14109/j.cnki.xyylc.2024.07.03

接收时间：2022-11-11
首发时间：2026-03-13
出版时间：2024-07-25

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收稿日期：2022-11-11
录用日期：2024-03-13

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西南医科大学附属医院博士启动基金(20015)

作者信息

^1.西南医科大学附属医院核医学科/核医学与分子影像四川省重点实验室/四川省院士（专家）工作站，四川泸州　646000

^2.西南医科大学药学院，四川泸州　646000

通讯作者:

王力

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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