药学学报

No.	δ_C	δ_H (J in Hz)		No.	δ_C	δ_H (J in Hz)
1	179.7	-		6	145.8	6.86 (1H, dd, 16.0, 6.1)
2	31.2	2.42 (1H, ddd, 13.0, 9.6, 7.0) 2.00 (1H, ddd, 13.0, 9.6, 7.9)	7	133.4	6.34 (1H, dd, 16.0, 1.4)
3	30.2	2.64 (2H, m)	8	200.8	-
4	89.2	-	9	27.2	2.29 (3H, s)
5	77.1	4.24 (1H, dd, 6.1, 1.4)	10	23.6	1.39 (3H, s)

No.	δ_C	δ_H (J in Hz)		No.	δ_C	δ_H (J in Hz)
1	179.7	-		6	145.8	6.86 (1H, dd, 16.0, 6.1)
2	31.2	2.42 (1H, ddd, 13.0, 9.6, 7.0) 2.00 (1H, ddd, 13.0, 9.6, 7.9)	7	133.4	6.34 (1H, dd, 16.0, 1.4)
3	30.2	2.64 (2H, m)	8	200.8	-
4	89.2	-	9	27.2	2.29 (3H, s)
5	77.1	4.24 (1H, dd, 6.1, 1.4)	10	23.6	1.39 (3H, s)

Compound	DPPH	ABTS
1	> 300	> 300
2	46.34 ± 5.80	50.56 ± 1.35
3	74.17 ± 8.71	54.37 ± 3.04
4	78.02 ± 8.94	55.61 ± 3.41
5	203.97 ± 17.64	82.56 ± 4.94
6	> 300	85.46 ± 4.07
Vc	39.36 ± 2.48	23.38 ± 1.85

Compound	DPPH	ABTS
1	> 300	> 300
2	46.34 ± 5.80	50.56 ± 1.35
3	74.17 ± 8.71	54.37 ± 3.04
4	78.02 ± 8.94	55.61 ± 3.41
5	203.97 ± 17.64	82.56 ± 4.94
6	> 300	85.46 ± 4.07
Vc	39.36 ± 2.48	23.38 ± 1.85

杜仲皮中一个新的五元环内酯类化合物

PDF下载

蒋飘飘 ¹ , 匡南 ¹ , 曾诚坤 ¹ , 袁汉文 ¹ , 向红辉 ² , 王汝琴 ² , 唐秋云 ² , 江星明 ¹^,^* , 李斌 ¹^,^* , 王炜 ¹

药学学报 | 研究论文 2026,61(4): 1321-1326

收起

药学学报 |研究论文 2026 , 61 (4) : 1321 -1326

杜仲皮中一个新的五元环内酯类化合物

全屏

蒋飘飘¹, 匡南¹, 曾诚坤¹, 袁汉文¹, 向红辉², 王汝琴², 唐秋云², 江星明¹^,^*, 李斌¹^,^*, 王炜¹

作者信息

¹湖南中医药大学药学院湖南省中医药民族医药国际联合实验室, 湖南长沙 410208

²张家界国仲生物科技有限公司, 湖南张家界 427200

通讯作者:

李斌, E-mail: libin@hnucm.edu.cn

江星明, E-mail: jxm519@qq.com

作者简介:

作者贡献:

蒋飘飘为本文第一作者, 负责化合物的分离、鉴定、抗氧化活性测定和文章撰写; 匡南和曾诚坤对提取分离提供了一定帮助; 向红辉、王汝琴和唐秋云提供了实验所需的药材; 袁汉文和江星明老师对于结构鉴定提供了一定的帮助; 李斌教授负责实验设计、结构解析及稿件修改等工作; 王炜教授对杜仲进行鉴定。

A new five-membered lactone from the bark of Eucommia ulmoides

Piao-piao JIANG¹, Nan KUANG¹, Cheng-kun ZENG¹, Han-wen YUAN¹, Hong-hui XIANG², Ru-qin WANG², Qiu-yun TANG², Xing-ming JIANG¹^,^*, Bin LI¹^,^*, Wei WANG¹

Affiliations

¹Traditional Chinese Medicine and Ethnomedicine Innovation & Development International Laboratory, School of Pharmacy, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China

²Zhangjiajie Guozhong Biotechnology Co., Ltd., Zhangjiajie 427200, China

出版时间: 2026-04-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2025-1410

文章导航

摘要

收起

利用硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS、MCI色谱以及半制备HPLC柱色谱等技术对杜仲皮中化学成分进行分离和纯化, 结合NMR、IR、UV、MS等波谱学技术对化合物结构进行鉴定, 共分离得到6个化合物, 分别是杜仲内酯(1)、(7S, 8R)-4-hydroxy-3, 3′, 5′-trimethoxy-8, 9-dinor-8, 4′-oxyneoligna-7, 9-diol-7′-aldehye (2)、armaosigenin (3)、(-) evofolin B (4)、N-反式阿魏酸酪酰胺(5)、C-藜芦酰乙二醇(6)。其中化合物1是新的五元环内酯类化合物, 化合物2~5首次从杜仲皮中分离得到, 此外, 化合物2~4表现出一定的抗氧化能力, 对2, 2-二苯基-1-苦基肼基自由基(DPPH) 清除活性的IC₅₀值是46.34 ± 5.80、74.17 ± 8.71、78.02 ± 8.94 μg·mL^-1, 对2, 2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基(ABTS) 清除活性的IC₅₀值是50.56 ± 1.35、54.37 ± 3.04、55.61 ± 3.41 μg·mL^-1。

关键词

杜仲皮 / 化学成分 / 五元环内酯 / 抗氧化活性

Abstract

收起

The chemical constituents in the bark of Eucommia ulmoides were isolated and purified using chromatographic techniques, including silica gel, Sephadex LH-20, ODS, MCI, and semi-preparative HPLC. The structures of the compounds were elucidated by spectroscopic analyses (NMR, IR, UV, and MS). A total of six compounds were identified as duzhonglactone (1), (7S, 8R)-4-hydroxy-3, 3′, 5′-trimethoxy-8, 9-dinor-8, 4′-oxyneoligna-7, 9-diol-7′-aldehyde (2), armaosigenin (3), (-) evofolin B (4), N-trans-feruloyltyramine (5), and C-veratroylglycol (6). Among them, compound 1 was a new five-membered ring lactone, while compounds 2-5 were isolated for the first time from Eucommia ulmoides bark. Furthermore, compounds 2-4 demonstrated antioxidant activity, with IC₅₀ values for 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging of 46.34 ± 5.80, 74.17 ± 8.71, and 78.02 ± 8.94 μg·mL^-1, and for 2, 2′-azinobis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) scavenging of 50.56 ± 1.35, 54.37 ± 3.04, and 55.61 ± 3.41 μg·mL^-1, respectively.

Key words

Eucommia ulmoides bark / chemical composition / five-membered ring lactone / antioxidant activity

引用本文

蒋飘飘, 匡南, 曾诚坤, 袁汉文, 向红辉, 王汝琴, 唐秋云, 江星明, 李斌, 王炜. 杜仲皮中一个新的五元环内酯类化合物. 药学学报, 2026 , 61 (4) : 1321 -1326 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2025-1410

Piao-piao JIANG, Nan KUANG, Cheng-kun ZENG, Han-wen YUAN, Hong-hui XIANG, Ru-qin WANG, Qiu-yun TANG, Xing-ming JIANG, Bin LI, Wei WANG. A new five-membered lactone from the bark of Eucommia ulmoides[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2026 , 61 (4) : 1321 -1326 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2025-1410

正文

收起

杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.), 又称胶木、思仲, 属于杜仲科药用植物, 其干燥树皮在我国已有两千多年的药用历史, 是中国传统药材之一。据《神农本草经》记载: “杜仲药性甘温, 微辛, 适用于治疗肝肾不足、腰膝酸痛、筋骨无力、头晕目眩等症状。此外, 亦可用于肝肾亏虚引起的妊娠漏血、胎动不安”^{[1, 2]}。杜仲主要分布于云南、湖南、河南和甘肃等地。其化学成分主要包括木脂素类、环烯醚萜类、黄酮类、酚酸类及萜类等, 具备降血糖、降血压、调血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗骨质疏松症等多重药理作用^[3-8], 广泛应用于中成药及中医临床配方中。

为了深入揭示其药理活性的化学物质基础, 本实验对杜仲皮醇提取物的二氯甲烷层进行了化学成分研究, 并从中分离并鉴定出6个化合物。这些化合物分别是杜仲内酯(1)、(7S, 8R)-4-hydroxy-3, 3′, 5′-trimethoxy-8, 9-dinor-8, 4′-oxyneoligna-7, 9-diol-7′-aldehyde (2)、armaosigenin (3)、(-) evofolin B (4)、N-反式阿魏酸酪酰胺(5)、C-藜芦酰乙二醇(6), 结构见图1。此外, 本实验还研究了这些单体化合物对自由基的抗氧化能力。结果表明, 化合物2~4表现出一定的抗氧化能力, 对DPPH自由基清除活性的IC₅₀值分别为46.34 ± 5.80、74.17 ± 8.71、78.02 ± 8.94 μg·mL^-1, 对ABTS自由基清除活性的IC₅₀值分别为50.56 ± 1.35、54.37 ± 3.04、55.61 ± 3.41 μg·mL^-1。

结果与讨论

收起

1　化合物1的结构鉴定

化合物1 橙黄色油状物质, 香草醛-浓硫酸反应(TLC) 斑点显灰色; [α]

$ {}_{\mathrm{D}}^{20} $

+60.02 (c 0.2, MeOH), HR-ESI-MS m/z 221.087 1 [M+Na]⁺ (C₁₀H₁₄O₄Na⁺, 计算值: 221.087 4), 确定该化合物分子式是C₁₀H₁₄O₄, 相对分子质量是198.089 2, 不饱和度为4。UV (MeOH) λ_max (log ε): 218 (7.32); IR光谱提示结构中具有甲基(2 941 cm^-1)、羟基(3 443 cm^-1)、酯羰基(1 768 cm^-1)、羰基(1 714 cm^-1) 和双键(1 634 cm^-1) 等官能团。¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) 谱(表1) 显示有1对反式双键质子信号δ_H 6.86 (1H, dd, J = 16.0, 6.1 Hz, H-6)、6.34 (1H, dd, J = 16.0, 1.4 Hz, H-7); 1个次甲基质子信号δ_H 4.24 (1H, dd, J = 6.1, 1.4 Hz, H-5); 2个亚甲基质子信号δ_H 2.64 (2H, m, H-3)、2.42 (1H, ddd, J = 13.0, 9.6, 7.0 Hz, H-2b)、2.00 (1H, ddd, J = 13.0, 9.6, 7.9 Hz, H-2a); 以及2个甲基质子信号δ_H 2.29 (3H, s, H-9)、1.39 (3H, s, H-10)。¹³C NMR (150 MHz, CD₃OD) 谱(表1) 和DEPT谱显示有10个碳信号, 其中包括2个羰基碳信号δ_C 200.8 (C-8) 和179.7 (C-1); 2个双键碳信号δ_C 145.8 (C-6) 和133.4 (C-7); 1个次甲基碳信号δ_C 77.1 (C-5); 2个亚甲基碳信号δ_C 31.2 (C-2) 和30.2 (C-3) 以及2个甲基碳信号δ_C 27.2 (C-9) 和23.6 (C-10)。¹H-¹H COSY谱中显示存在2个自旋偶合系统, 分别为H-5/H-6/H-7和H-2/H-3 (图2)。将化合物1的 ¹H NMR和¹³C NMR谱和(+)-(R)-pinnatolide的核磁共振氢谱和碳谱数据^{[9, 10]}进行比较, 两者五元内酯环部分的数据比较相似, 侧链部分不同。再结合¹H-¹H COSY谱确定的自旋偶合体系及HMBC图谱中H-2与C-1、C-4相关, H-3与C-1、C-4相关, H-10与C-3、C-4相关确定五元内酯环部分的结构; HMBC图谱中H-6、H-7与C-8相关, H-9与C-8相关(图2) 确定了侧链部分的结构; 最后HMBC图谱中H-5与C-4、C-10相关, H-10与C-5、C-3相关将五元内酯环与侧链连接在一起。从而确定了化合物1的平面结构如图2所示。

在NOESY相关谱中(图2) 可以观察到10-CH₃与5-H、H-2a之间存在明显相关信号, 提示10-CH₃、5-H与H-2a处于同一侧, 从而推测化合物1的相对构型为4β-CH₃, 5α-OH。化合物1的绝对构型可能为(4R, 5S) 或(4S, 5R) 两种对映异构体, 根据旋光色散理论, 手性分子的旋光特性与绝对构型存在直接关联, 因此采用旋光色散(ORD) 计算方法进一步确定化合物1的绝对构型^{[11, 12]}。通过Gaussian 09软件, 在B3LYP-D3(BJ)/6-31G*水平下完成两种异构体的结构优化与旋光值计算: (4R, 5S) 异构体的计算旋光值为-215.35, 与化合物1实验测得的旋光值+60.02方向相反, 尽管计算值和实验值存在数据差异, 但方向性匹配是构型判定的核心依据, 且偏差处于合理范围, 故确定化合物1的绝对构型是4S, 5R。综合上述波谱数据和构型分析结果, 化合物1被鉴定为新的五元环内酯类化合物, 命名为杜仲内酯, 结构如图1所示。

2　抗氧化活性

本实验对化合物1~6都进行了抗氧化能力的评估, 以维生素C (Vc) 为阳性对照药, 抗氧化活性结果(表2) 显示, 化合物2~4展现出一定的抗氧化能力, 而化合物1几乎不具备抗氧化能力, 化合物5和6则表现出较弱的抗氧化能力。其中, 化合物2是抗氧化活性最强的单体化合物, 其清除DPPH自由基的IC₅₀值为46.34 ± 5.80 μg·mL^-1, 清除ABTS自由基的IC₅₀值为50.56 ± 1.35 μg·mL^-1。

3　讨论

本实验从杜仲皮中分离得到6个化合物, 其中化合物1是新的五元环内酯类化合物, 化合物2~5首次从杜仲皮中分离得到, 此外, 本实验对化合物1~6都进行了抗氧化能力的评估, 结果显示化合物2~4展现出一定的抗氧化能力, 其中, 化合物2为抗氧化活性最高的单体化合物, 清除DPPH自由基的IC₅₀值是46.34 ± 5.80 μg·mL^-1, 清除ABTS自由基的IC₅₀值是50.56 ± 1.35 μg·mL^-1。本实验的结果丰富了杜仲皮的化学成分类型, 此外为杜仲抗氧化的药效物质基础提供了一定的依据。

实验部分

收起

Bruker Avance Neo 600MHz核磁共振波谱仪(德国Bruker公司); JASCO-FT/IR-4X红外光谱仪(日本Jasco公司); Shimadzu UV-1900i紫外光谱仪(日本岛津公司); J-1500圆二色光谱仪(日本Jasco公司); Autopol Ш旋光仪(美国鲁道夫公司); TECAN-Spark多功能酶标仪(瑞士TECAN公司); Agilent 1260 Infini高效液相色谱仪(美国Agilent公司); N-1300旋转蒸发仪(东京理化器械株式会社); WFH-203B暗箱式三用紫外线分析仪(杭州齐威仪器有限公司); SB-5200 DT超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司); NeoLab智能超纯水仪(杭州泽南科技有限公司); ME204E电子天平(瑞士梅特勒托利多集团); COSMOSIL半制备色谱柱(日本Nacalai Tesque公司); 葡聚糖凝胶Sephadex LH-20 (美国GEHealthcar Bio-Science AB公司); 柱色谱硅胶(80~100、200~300、300~400目) 和GF₂₅₄薄层色谱硅胶板(青岛海洋化工有限公司); ODS柱色谱填料(100 μm, 日本YMC公司); 过硫酸钾、石油醚、二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、无水乙醇(分析纯, 国药集团化学试剂有限公司); 甲醇(色谱纯, 美国Sigma-Alderich公司); DPPH、ABTS自由基和Vc (山东科源生化有限公司); 5%香草醛-浓硫酸显色剂(自制)。

本实验所用的材料为的杜仲的干燥皮, 产地为湖南省慈利县。经湖南中医药大学药学院王炜教授鉴定为杜仲科杜仲属植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的皮。

1　提取与分离

将干燥杜仲皮(75 kg) 用80%乙醇加热回流提取3次, 每次2 h, 合并提取液后进行减压浓缩, 再经冷冻干燥, 获得总浸膏(7.5 kg)。将总浸膏按1∶1比例用水进行分散, 超声处理后得到混悬溶液。依次用石油醚(PE)、二氯甲烷(DCM)、正丁醇(n-BuOH) 分别萃取3次, 萃取液经减压浓缩和冷冻干燥, 得到3种不同部位的浸膏。

取二氯甲烷部分(297.3 g), 通过200~300目硅胶柱色谱分离, 使用二氯甲烷-甲醇(100∶1~0∶100) 进行梯度洗脱, 经硅胶薄层色谱(TLC) 分析后, 合并得到11个流分(Fr. 1~Fr. 11)。

Fr. 4 (20.36 g) 经MCI柱色谱(40%~100%, 甲醇-水) 梯度洗脱得到10个流分Fr. 4-1~Fr. 4-10。Fr. 4-3 (6.39 g) 经硅胶柱色谱(二氯甲烷-甲醇, 100∶1~0∶100) 梯度洗脱得到12个流分Fr. 4-3-1~Fr. 4-3-12。Fr. 4-3-6 (2.93 g) 再通过硅胶柱色谱石油醚-乙酸乙酯洗脱得到17个流分Fr. 4-3-6-1~Fr. 4-3-6-17。Fr. 4-3-6-12 (582 mg) 通过硅胶柱色谱石油醚-乙酸乙酯洗脱得到14个流分Fr. 4-3-6-12-1~Fr. 4-3-6-12-14, Fr. 4-3-6-12-10 (67.2 mg) 通过半制备HPLC (40%甲醇, 3 mL·min^-1) 分离得到化合物4 (5.7 mg, t_R = 11.82 min)。

Fr. 5 (22 g) 经MCI柱色谱(40%~100%, 甲醇-水) 梯度洗脱得到14个流分Fr. 5-1~Fr. 5-14。Fr. 5-4 (1.18 g) 经Sephadex LH-20凝胶柱色谱(甲醇) 洗脱得到12个流分Fr. 5-4-1~Fr. 5-4-12。Fr. 5-4-10 (79 mg) 通过半制备HPLC (30%甲醇, 3 mL·min^-1) 分离得到化合物6 (9.3 mg, t_R = 7.15 min)。Fr. 5-4-6 (487 mg) 通过硅胶柱色谱(二氯甲烷-甲醇, 100∶1~0∶100) 梯度洗脱得到10个流分Fr. 5-4-6-1~Fr. 5-4-6-10。Fr. 5-4-6-3 (110.5 mg) 通过Sephadex LH-20凝胶柱色谱(甲醇) 洗脱得到7个流分Fr. 5-4-6-3-1~Fr. 5-4-6-3-7。Fr. 5-4-6-3-4 (78.7 mg) 半制备HPLC (20%甲醇, 3 mL·min^-1) 分离得到化合物1 (6.3 mg, t_R = 10.32 min)。Fr. 5-6 (487 mg) 通过(二氯甲烷-甲醇, 100∶1~0∶100) 梯度洗脱得到9个流分Fr. 5-6-3~Fr. 5-6-9。Fr. 5-6-3 (40.5 mg) 通过半制备HPLC (45%甲醇, 3 mL·min^-1) 分离得到化合物2 (2.8 mg, t_R = 8.99 min)。Fr. 5-8 (521 mg) 通过硅胶柱(二氯甲烷-甲醇, 100∶1~0∶100) 梯度洗脱得到10个流分Fr. 5-8-1~Fr. 5-8-10。Fr. 5-8-4 (67.8 mg) 经过Sephadex LH-20凝胶柱色谱用三氯甲烷-甲醇(1∶1) 洗脱得到4个流分Fr. 5-8-4-1~Fr. 5-8-4-4。Fr. 5-8-4-2 (29.1 mg) 半制备HPLC (40%甲醇, 3 mL·min^-1) 分离得到化合物5 (0.7 mg, t_R = 35.88 min)。Fr. 5-8-3 (142.7 mg) 经过Sephadex LH-20凝胶柱色谱用三氯甲烷-甲醇(1∶1) 洗脱得到4个流分Fr. 5-8-3-1~Fr. 5-8-3-4。Fr. 5-8-3-2 (76 mg) 经过硅胶柱色谱用石油醚-丙酮梯度洗脱得到7个流分Fr. 5-8-3-2-1~Fr. 5-8-3-2-7。Fr. 5-8-3-2-6 (8.2 mg) 半制备HPLC (35%甲醇, 3 mL·min^-1) 分离得到化合物3 (1.5 mg, t_R = 19.87 min)。

2　结构鉴定

化合物2 无色胶状物质, 香草醛-浓硫酸反应(TLC) 斑点显灰色, HR-ESI-MS m/z 401.119 7 [M+Na]⁺, 分子式为C₁₉H₂₂O₈; ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ_H 9.85 (1H, s, 7′-CHO), 8.77 (1H, s, 4-OH), 7.21 (2H, s, H-2′, 6′), 6.91 (1H, d, J = 1.9 Hz, H-2), 6.73 (1H, dd, J = 8.1, 1.9 Hz, H-6), 6.68 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-5), 5.19 (1H, d, J = 4.8 Hz, 7-OH), 4.77 (1H, t, J = 5.0 Hz, H-7), 4.42 (1H, m, H-8), 4.16 (1H, t, J = 5.8 Hz, 9-OH), 3.83 (6H, s, 3′, 5′-OCH₃), 3.73 (3H, s, 3-OCH₃), 3.71 (1H, m, H-9b), 3.51 (1H, m, H-9a); ¹³C NMR(150 MHz, DMSO-d₆) δ_C 133.2 (C-1), 110.9 (C-2), 147.0 (C-3), 145.4 (C-4), 114.6 (C-5), 119.4 (C-6), 72.2 (C-7), 86.5 (C-8), 60.3 (C-9), 130.9 (C-1′), 106.8 (C-2′, 6′), 152.9 (C-3′, 5′), 141.8 (C-4′), 191.7 (C-7′), 55.5 (3-OCH₃), 56.1 (3′, 5′-OCH₃)。以上数据跟文献^[13]报道的基本一致, 故鉴定化合物2为(7S, 8R)-4-hydroxy-3, 3′, 5′-trimethoxy-8, 9-dinor-8, 4′- oxyneoligna-7, 9-diol-7′-aldehyde。

化合物3 淡黄色油状物质, 香草醛-浓硫酸反应(TLC) 斑点显灰色, HR-ESI-MS m/z 427.135 1 [M+Na]⁺, 分子式为C₂₁H₂₄O₈; ¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ_H 9.63 (1H, d, J = 7.8 Hz, 9′-CHO), 7.60 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-7′), 7.01 (2H, s, H-2′, 6′), 6.98 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 6.79 (1H, m, overlapped, H-6), 6.75 (1H, dd, J = 15.8, 7.8 Hz, H-8′), 6.73 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-5), 4.91 (1H, d, J = 5.4 Hz, H-7), 4.39 (1H, td, J = 5.4, 3.5 Hz, H-8), 3.92 (1H, dd, J = 12.1, 5.4 Hz, H-9b), 3.87 (6H, s, 3′, 5′-OCH₃), 3.82 (3H, s, 3-OCH₃), 3.64 (1H, dd, J = 12.1, 3.5 Hz, H-9a); ¹³C NMR(150 MHz, CD₃OD) δ_C 133.8 (C-1), 111.5 (C-2), 148.7 (C-3), 146.9 (C-4), 115.7 (C-5), 120.8 (C-6), 74.2 (C-7), 87.5 (C-8), 61.8 (C-9), 131.4 (C-1′), 107.3 (C-2′, 6′), 154.8 (C-3′, 5′), 140.0 (C-4′), 155.2 (C-7′), 129.0 (C-8′), 196.0 (C-9′), 56.3 (3-OCH₃), 56.8 (3′, 5′-OCH₃)。以上数据跟文献^[14]报道的基本一致, 故鉴定化合物3为armaosigenin。

化合物4 棕色无定形粉末, 香草醛-浓硫酸反应(TLC) 斑点显淡紫色, HR-ESI-MS m/z 319.116 9 [M+H]⁺, 分子式为C₁₇H₁₈O₆; ¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ_H 7.61 (1H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz, H-4), 7.56 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-6), 6.89 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2′), 6.78 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-3), 6.76 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz, H-6′), 6.72 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5′), 4.75 (1H, dd, J = 8.7, 5.2 Hz, H-8), 4.24 (1H, dd, J = 10.7, 8.7 Hz, H-9b), 3.86 (3H, s, 5-OCH₃), 3.82 (3H, s, 3′-OCH₃), 3.71 (1H, dd, J = 10.7, 5.2 Hz, H-9a); ¹³C NMR(150 MHz, CD₃OD) δ_C 130.1 (C-1), 153.8 (C-2), 115.8 (C-3), 125.3 (C-4), 149.3 (C-5), 112.7 (C-6), 199.6 (C-7), 56.2 (C-8), 65.5 (C-9), 129.9 (C-1′), 112.5 (C-2′), 147.0 (C-3′), 149.1 (C-4′), 116.6 (C-5′), 122.2 (C-6′), 56.4 (5-OCH₃), 56.3 (3′-OCH₃)。以上数据跟文献^[15]报道的基本一致, 故鉴定化合物4为(-) evofolin B。

化合物5 黄色无定形粉末, HR-ESI-MS m/z 321.124 7 [M+H-H₂O]^-, 分子式为C₁₈H₁₉NO₄; ¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ_H 7.43 (1H, d, J = 15.7 Hz, H-8), 7.12 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.05 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-2′, 6′), 7.02 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz, H-6), 6.79 (1H, d, J = 8.2 Hz, H-5), 6.72 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-3′, 5′), 6.40 (1H, d, J = 15.7 Hz, H-7), 3.89 (3H, s, 3-OCH₃), 3.47 (2H, t, J = 7.4 Hz, Hz, H-8′), 2.76 (2H, t, J = 7.4 Hz, H-7′); ¹³C NMR(150 MHz, CD₃OD) δ_C 128.4 (C-1), 111.7 (C-2), 149.5 (C-3), 149.5 (C-4), 116.6 (C-5), 123.4 (C-6), 142.3 (C-7), 118.8 (C-8), 170.6 (C-9), 131.5 (C-1′), 130.8 (C-2′, 6′), 116.4 (C-3′, 5′), 154.1 (C-4′), 35.9 (C-7′), 42.7 (C-8′), 56.5 (3-OCH₃)。以上数据跟文献^[16]报道的基本一致, 故鉴定化合物5为N-反式阿魏酸酪酰胺。

化合物6 橙黄色固体, HR-ESI-MS m/z 213.075 3 [M+H]⁺, 分子式为C₁₀H₁₂O₅; ¹H NMR (600 MHz, CD₃OD) δ_H 7.58 (1H, dd, J = 8.3, 2.1 Hz, H-2′), 7.56 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-6′), 6.86 (1H, d, J = 8.3 Hz, H-5′), 5.13 (1H, dd, J = 5.2, 3.6 Hz, H-2), 3.90 (3H, s, 3′-OCH₃), 3.89 (1H, dd, J = 11.7, 3.6 Hz, H-3b), 3.73 (1H, dd, J = 11.7, 5.2 Hz, H-3a); ¹³C NMR(150 MHz, CD₃OD) δ_C 199.7 (C-1), 75.6 (C-2), 66.6 (C-3), 127.5 (C-1′), 112.6 (C-2′), 149.9 (C-3′), 155.5 (C-4′), 116.5 (C-5′), 125.6 (C-6′), 56.6 (3′-OCH₃)。以上数据跟文献^[17]报道的基本一致, 故鉴定化合物6为C-藜芦酰乙二醇。

3　抗氧化活性研究

3.1　DPPH自由基清除活性

参考文献^[18]报道的方法, 精密称取3.94 mg DPPH粉末, 加入无水乙醇配制成浓度为0.1 mmol·L^-1的工作液备用(吸光度在0.9~1.0之间)。精密吸取40 μL不同浓度的待测样品溶液(300、200、100、50、25、10 μg·mL^-1) 加入96孔板中, 随后加入160 μL DPPH溶液, 在室温下避光反应30 min。在517 nm波长下测得的吸光度记为(A₁), 以160 μL无水乙醇替代DPPH乙醇溶液测得的吸光度记为(A₂), 以40 μL无水乙醇替代样品溶液测得的吸光度记为(A₀)。同时, 以相同浓度的维生素C作为对照, 每个浓度平行测定3次。根据公式计算样品对DPPH自由基的清除率, 其清除能力用IC₅₀表示, 清除率计算见公式(1)。

$\mathrm{DPPH} \cdot \text { 清除率 }=\left[1-\left(A_1-A_2\right) / A_0\right] \times 100 \%$

(1)

3.2　ABTS自由基清除活性

参考文献^[19]报道的方法, 将7 mmol·L^-1 ABTS与2.45 mmol·L^-1过硫酸钾等体积混合, 在室温且避光的条件下反应14~18 h。第二天, 使用无水乙醇进行稀释, 稀释倍数约为20~40倍, 摇匀后静置10 min, ABTS工作液即配制完成(吸光度约为0.7)。精密吸取40 μL不同浓度的待测样品溶液(300、200、100、50、25、10 μg·mL^-1), 加入到96孔板中, 随后加入160 μL ABTS溶液, 在室温下避光反应30 min。在734 nm波长下测得的吸光度记为(A₃), 以160 μL无水乙醇替代ABTS溶液测得的吸光度记为(A₄); 以40 μL无水乙醇替代样品溶液测得的吸光度记为(A₅)。同时, 以相同浓度的维生素C作为对照, 每个浓度平行测定3次。根据公式计算样品对ABTS自由基的清除率, 其清除能力用IC₅₀表示, 清除率计算见公式(2)。

$\text { ABTS•清除率 }=\left[1-\left(A_3-A_4\right) / A_5\right] \times 100 \%$

(2)

3.3　数据处理

采用GraphPad Prism 9.5.1统计软件进行数据分析, 数据以均数±标准差(

$ \overline{x} $

± s) 表示, 所有实验均重复3次, 计算半数抑制浓度。

参考文献

收起

文献

收起

参考文献引证文献

排序方式：

Gao HW, Li YP, Li SC, et al. Study advances in chemical constituents and pharmacological effects of Eucommia ulmoides Oliv. [J]. Inf Tradit Chin Med (中医药信息), 2021, 38: 73-81.

Peng MF, Zhou YH, Liu BS, et al. Biological properties and potential application of extracts and compounds from different medicinal parts (bark, leaf, staminate flower, and seed) of Eucommia ulmoides: A review [J]. Heliyon, 2024, 10: e27870.

Zhang M, Liang FN, Sun YW, et al. Research progress on chemical constituents, pharmacological effects and clinical application of Eucommia ulmoides [J]. Chin Tradit Herb Drugs (中草药), 2023, 54: 4740-4761.

Li WY, Zhang JX, Xie XW, et al. Research progress on chemical components, pharmacological activities and modern applications of Eucommia folium [J]. Nat Prod Res Dev (天然产物研究与开发), 2024, 36: 900-917.

Zeng M, Long YQ, Zeng J, et al. Comparison of chemical constituents in different parts of Eucommia cortex [J]. Chin Tradit Pat Med (中成药), 2023, 45: 1184-1194.

He XR, Wang JH, Li MX, et al. Eucommia ulmoides Oliv. : Ethnopharmacology, phytochemistry and pharmacology of an important traditional Chinese medicine [J]. J Ethnopharmacol, 2014, 151: 78-92.

Hu Y, Li XZ, Liu Y, et al. Research progress on chemical constituents, pharmacological effects and applications of Eucommia ulmoides [J]. Asia Pac Tradit Med (亚太传统医药), 2022, 18: 234-239.

Zhang RZ, Li Q, Pei J, et al. Overview of chemical components and pharmacological effects of Eucommia ulmoides [J]. J Shaanxi Univ Tradit Chin Med (陕西中医药大学学报), 2024, 47: 87-91.

Zdero C, Lehmann L, Bohlmann F. Chemotaxonomy of Athanasia and related genera [J]. Phytochemistry, 1991, 30: 1161-1163.

Tietze LF, Wolfram T, Holstein JJ, et al. First enantioselective total synthesis of (+)-(R)-pinnatolide using an asymmetric domino allylation reaction [J]. Org Lett, 2012, 14: 4035-4037.

Chen JF, Liu F, Qiao MM, et al. Vasorelaxant effect of curcusubabanin A isolated from Curcuma longa through the PI3K/Akt/eNOS signaling pathway [J]. J Ethnopharmacol, 2022, 294: 115332.

Cank KB, Shepherd RA, Knowles SL, et al. Polychlorinated cyclopentenes from a marine derived Periconia sp. (strain G1144) [J]. Phytochemistry, 2022, 199: 113200.

Wang L, Zou K, Zhang QQ, et al. Study on chemical constituents of Rhododendron auriculatum [J]. Lishizhen Med Mater Med Res (时珍国医国药), 2016, 27: 1818-1820.

Liang S, Shen YH, Tian JM, et al. Phenylpropanoids from Daphne feddei and their inhibitory activities against NO production [J]. J Nat Prod, 2008, 71: 1902-1905.

Rahman MA, Moon SS. Isoetin 5′-methyl ether: A cytotoxic flavone from Trichosanthes kirilowii [J]. Bull Korean Chem Soc, 2007, 28: 1261-1264.

Wu CH, Chen Y, Li XX, et al. Isolation and structural identification of chemical constituents from Acorus tatarinowii [J]. Chin J Med Chem (中国药物化学杂志), 2014, 24: 209-213.

Baderschneider B, Winterhalter P. Isolation and characterization of novel benzoates, cinnamates, flavonoids, and lignans from Riesling wine and screening for antioxidant activity [J]. J Agric Food Chem, 2001, 49: 2788-2798.

Cheng HJ, Zhang J, Liu XY, et al. Chemical constituents and antioxidant activity of Viburnum rhytidophyllum Hemsl [J]. Mod Food Sci Technol (现代食品科技), 2024, 40: 168-177.

Liu XM, Zhao JM, Lan JH, et al. Chemical constituents from fruits of Tribulus terrestrer and their antioxidant activity [J]. Chin Tradit Herb Drugs (中草药), 2023, 54: 4774-4779.

2026年第61卷第4期

PDF下载

180

引用本文

BibTeX

文章信息

doi: 10.16438/j.0513-4870.2025-1410

接收时间：2025-11-26
首发时间：2026-09-21
出版时间：2026-04-12

补充材料

相关文章

文章信息

作者

出版历史

收稿日期：2025-11-26
修回日期：2026-01-21

基金

作者信息

¹湖南中医药大学药学院湖南省中医药民族医药国际联合实验室, 湖南长沙 410208

²张家界国仲生物科技有限公司, 湖南张家界 427200

通讯作者:

李斌, E-mail: libin@hnucm.edu.cn

江星明, E-mail: jxm519@qq.com

参考文献

分享链接

https://castjournals.cast.org.cn/joweb/yxxb/CN/10.16438/j.0513-4870.2025-1410

分享至

全文二维码

扫描看全文

引用本文

BibTeX

本文的引用情况

2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

关闭全屏

BibTeX
EndNote
RefWorks
TxT