药学学报

氯化两面针碱在大鼠心脏中的积聚及其机制研究

PDF下载

李翠 ¹^,² , 陈迎春 ² , 曾清泉 ² , 雷少伟 ¹^,² , 周慧 ² , 蒋惠娣 ² , 李丽萍 ²^,^*

药学学报 | 研究论文 2019,54(5): 913-918

收起

药学学报 | 研究论文 2019, 54(5): 913-918

氯化两面针碱在大鼠心脏中的积聚及其机制研究

全屏

李翠¹^,², 陈迎春², 曾清泉², 雷少伟¹^,², 周慧², 蒋惠娣², 李丽萍²^,^*

作者信息

1.浙江工业大学长三角绿色制药协同创新中心, 浙江杭州 310014

2.浙江大学药学院药物代谢与分析实验室, 浙江省抗肿瘤药物重点实验室, 浙江杭州 310058

通讯作者:

*李丽萍, Tel/Fax:86-571-88208417, E-mail:lillylp@zju.edu.cn

Accumulation of nitidine chloride in rat heart and the underlying mechanism

Cui LI¹^,², Ying-chun CHEN², Qing-quan ZENG², Shao-wei LEI¹^,², Hui ZHOU², Hui-di JIANG², Li-ping LI²^,^*

Affiliations

1. Collaborative Innovation Center of Yangtze River Delta Region Green Pharmaceuticals, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, China

2. Laboratory of Pharmaceutical Analysis and Drug Metabolism, Zhejiang Province Key Laboratory of Anti-Cancer Drug Research, College of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China

出版时间: 2019-05-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2019-0001

文章导航

摘要

收起

氯化两面针碱（nitidine chloride，NC）为抗肿瘤候选化合物。本研究考察其在大鼠心脏的分布及其机制，为其潜在的心脏毒性提供依据。动物实验获得了浙江大学医学中心动物保护和使用委员会的批准（2015-380-01），符合中国动物福利标准。大鼠单次静脉注射5 mg·kg^-1 NC后0.25、0.5和2 h，心脏中NC浓度分别为47.7、71.1和63.2 μg·g^-1，与相同时间点血浆中的浓度比分别为576、1 352和1 212。大鼠连续静脉注射5 mg·kg^-1 NC 20天，末次给药后2 h，心脏中NC浓度为458.5 μg ·g^-1，与血浆中的浓度比为7 336。NC在MDCK-hOCT1、MDCK-hOCT3中的积聚分别为mock细胞的16.1、4.99倍，但在MDCK-hOCTN1、MDCK-hOCTN2、MDCK-hPMAT中的积聚与mock细胞未显示明显差异。此外，OCTs的抑制剂奎尼丁、左旋延胡索乙素、Decynium 22可显著降低NC在原代培养的乳大鼠心肌细胞和成纤维细胞中的积聚。MTT结果显示，NC在心肌细胞和成纤维细胞上的LC₅₀分别为10.9和10.4 μmol·L^-1。此外，不同浓度的NC可显著增加原代心肌细胞和成纤维细胞中LDH酶渗漏。上述结果表明，NC在大鼠心脏积聚和蓄积，对原代心肌细胞和成纤维细胞具有一定的毒性；OCT1和OCT3可介导NC的心脏积聚。

关键词

氯化两面针碱 / 心脏积聚 / OCT1和OCT3转运体 / 心脏毒性

Abstract

收起

Nitidine chloride (NC) is a compound with prominent anti-tumor activity. To determine potential cardiotoxicity of NC, this study was designed to investigate the distribution of NC in rat heart and the underlying mechanism. The animal studies were approved by Institutional Animal Care and Use Committee of Zhejiang University Medical Center (2015-380-01) and complied with the standards of animal welfare in China. At 0.25, 0.5 and 2 h after a single intravenous injection (iv) of 5 mg·kg^-1 NC, the concentrations of NC in rat heart were 47.7, 71.1 and 63.2 μg·g^-1 respectively, which were 576, 1 352 and 1 212 folds of that in plasma. This study also revealed that the NC concentration in heart was 458.5 μg·g^-1 (7 336 folds of that in plasma) at 2 h after the last dose in rats, after daily iv administration of NC at 5 mg·kg^-1·day^-1 for successive 20 days. Further studies showed that the accumulations of NC in MDCK-hOCT1 and MDCK-hOCT3 cells were 16.1 and 4.99 folds higher than that of the mock cells, respectively. There is no significant difference between the accumulations of NC in MDCK cells transfected with hOCTN1, hOCTN2 or hPMAT and the mock cells. Additionally, quinidine, L-tetrahydropalmatine and Decynium 22, the inhibitors of OCTs, clearly reduced the accumulations of NC in primary cardiomyocytes and cardiac fibroblasts from neonatal rats. MTT assay showed that the LC₅₀ of NC on cardiomyocytes and cardiac fibroblasts were 10.9 and 10.4 μmol·L^-1, respectively. Moreover, treatment of the primary cardiomyocytes and cardiac fibroblasts with NC (1~15 μmol·L^-1) for 48 h resulted in significantly increased LDH enzyme leakage. These results indicated that NC can be highly accumulated in the heart, and accumulation is mediated by OCT1 and OCT3, but not by OCTN1, OCTN2 and PMAT. The accumulated NC has potential cytotoxicity as shown in the results from primary cardiomyocytes and cardiac fibroblasts.

Key words

nitidine chloride / cardiac accumulation / organic cation transporter 1 and 3 (OCT1, OCT3) / car diotoxicity

引用本文

李翠, 陈迎春, 曾清泉, 雷少伟, 周慧, 蒋惠娣, 李丽萍. 氯化两面针碱在大鼠心脏中的积聚及其机制研究. 药学学报, 2019 , 54 (5) : 913 -918 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2019-0001

Cui LI, Ying-chun CHEN, Qing-quan ZENG, Shao-wei LEI, Hui ZHOU, Hui-di JIANG, Li-ping LI. Accumulation of nitidine chloride in rat heart and the underlying mechanism[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2019 , 54 (5) : 913 -918 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2019-0001

正文

收起

氯化两面针碱(nitidine chloride, NC, 图 1)是从芸香科花椒属藤本植物两面针Radix Zanthoxyli的干燥根中提取分离得到的一种苯骈菲啶类生物碱, 是传统中药两面针的主要活性成分之一, 且是两面针镇痛片、三九胃泰颗粒等中药制剂的有效成分^[1]。研究表明, NC具有抗肿瘤、抗炎、抗疟及镇痛等多种生物活性^[2], 近年来在卵巢癌、肝癌等抗肿瘤^{[3, 4]}方面显示出较强的作用, 是良好的抗肿瘤候选化合物。但有文献报道, NC可致斑马鱼心率降低并诱发心脏毒性^[5], 而心脏毒性是早期成药性评价的重要指标之一, NC是否会在哺乳动物心脏蓄积及其相关机制尚不清楚。

NC为季铵类生物碱, 被动透过性差, 需细胞膜转运体介导其跨细胞转运。人、鼠心脏上表达多种跨膜转运蛋白, 如有机阳离子转运体1和3 (OCT1、OCT3)、新型有机阳离子转运体1和2 (OCTN1、OCTN2)以及质膜单胺转运体(PMAT)等摄取型转运体^{[6, 7]}, 它们共同参与内源性和外源性物质由细胞外进入细胞内。

本研究首先考察NC在大鼠心脏的分布, 进一步应用多种稳定表达转运体的转基因细胞模型、原代心肌细胞和成纤维细胞, 研究NC的心脏积聚机制及毒性, 为NC的心脏毒性及成药性评价提供参考。

材料与方法

收起

药品和试剂 氯化两面针碱(NC, 纯度 > 98%, 批号: GR-134-170706)、左旋延胡索乙素(L-tetrahydropalmatine, L-THP, 纯度: 98%, 批号: ZL1612200426-LTD) (南京广润生物制品有限公司); 奎尼丁(quinidine, 纯度: 98%, 批号: G1705030)、左旋肉碱(L-carnitine, 纯度: 98%, 批号: J1423007)、氯雷他定(loratadine, 纯度≥98%, 批号: H1527108) (阿拉丁公司); Decynium 22 (纯 > 97%, 批号: 323764)、5-溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine, 纯度≥99%, 批号: HMBF8725V)、胶原酶Ⅰ (批号: SLBW6959)、DMSO (纯度≥99.5%, 批号: SHBJ7919) (美国Sigma公司); 胰酶(批号: 1910485)、青-链霉素溶液(双抗, 批号: 2018052503)、胎牛血清(批号: 1908121) (美国Gibco公司); DMEM培养基(批号: 0024518)、DMEM/F-12培养基(批号: 0011518) (以色列Biological Industries公司); MTT (纯度≥98%, 批号: EZ2411A401, 德国Biofroxx公司); 乳酸脱氢酶试剂盒(批号: 07672403, 瑞士Roche公司); BCA蛋白浓度测定试剂盒(批号: P0011, 碧云天生物技术研究所); 乙腈(色谱纯, 批号: 18095192, 美国Tedia公司); 其他试剂均为分析纯或更高级别。

实验所用mock细胞及MDCK-hOCT1、MDCK-hOCT3、MDCK-hOCTN1、MDCK-hOCTN2、MDCK-hPMAT为本课题组构建^[8-11]。

实验动物 新生P₀代SD乳鼠; 8周龄SD大鼠(n = 30), 雌雄各半, 体重220 ± 20 g, 均由浙江省医学科学院动物中心提供(许可证号: SCXK (浙) 2015-0001, 清洁二级), 饲养于温度(22 ± 2) ℃和湿度(55 ± 5) %, 自由饮水进食。所有实验过程均获得了浙江大学医学中心动物保护和使用委员会的批准(2015-380-01), 符合中国动物福利标准。

动物给药与样品收集 将30只SD大鼠, 雌雄各半, 随机分成4组, 其中单次给药组每组6只, 连续给药组每组12只。大鼠单次静脉注射(iv) 5 mg·kg^-1 NC, 其中3组分别于给药后0.25、0.5及2 h取全血(肝素抗凝)、麻醉后处死取心脏组织; 另1组连续iv 20天, 末次给药后2 h取全血、心脏组织。4 ℃、3 000 r·min^-1离心10 min分离血浆; 心脏组织以溶剂(水-乙腈=1:1)制成125 mg·mL^-1组织匀浆液, -80 ℃保存, 以LC-MS/MS测定NC浓度。

细胞培养 MDCK-hOCT1、MDCK-hOCT3、MDCK-hOCTN1、MDCK-hOCTN2、MDCK-hPMAT及mock细胞于含1%双抗、10%胎牛血清的DMEM培养基中生长, 于37 ℃、5% CO₂饱和湿度的培养箱中培养。待细胞生长至80%~90%融合度时, 用0.25%胰酶消化传代, 并采用经典底物和抑制剂验证细胞功能。

细胞积聚 将各转基因细胞及mock细胞按密度2×10⁵个/孔接种于24孔板, 生长3天后, 进行NC在细胞上的积聚实验。吸弃细胞培养液, 用37 ℃ HBSS (MDCK-hOCT1、MDCK-hOCT3细胞)或KRH (MDCK-hOCTN1、MDCK-hOCTN2、MDCK-hPMAT细胞)洗两遍, 预孵育10 min后, 加NC, 使终浓度为0.5~2 μmol·L^-1, 或NC及各种转运体的经典抑制剂(OCT1、OCT3、OCTN1:奎尼丁, OCTN2:左旋肉碱, PMAT: Decynium 22;各抑制剂的浓度为4~100 μmol·L^-1)共孵育, 孵育一定时间后迅速弃去孵育液, 用冰冷的PBS洗3遍终止积聚, 加100 μL 0.1% SDS裂解细胞, -80 ℃冻存, 以LC-MS/MS测定裂解液中NC浓度, 并以BCA法测定蛋白浓度进行校正。

乳鼠原代心肌细胞和成纤维细胞的分离 根据文献^[12]进行改良:取乳鼠心脏, 清洗剪碎, 加入含0.05%胶原酶Ⅰ和0.03%胰酶进行消化, 所得细胞培养于含1%双抗、10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中, 置37 ℃、5% CO₂培养箱培养1.5 h后, 将未贴壁的心肌细胞转移至新的培养皿中, 加入终浓度为0.1 mmol·L^-1的5-溴脱氧尿嘧啶抑制成纤维细胞的增殖, 48 h后换液, 成纤维细胞因生长迅速, 2天即呈融合状态可用于传代, 其细胞排列紧密、平坦, 胞质薄而透明; 心肌细胞则逐渐伸出伪足, 变为三角形、多边形等不规则形态, 并交织成网。

OCT1、OCT3抑制剂对NC在原代心肌细胞和成纤维细胞中积聚的影响 将心肌细胞按密度5×10⁵个/孔接种于12孔板, 成纤维细胞按密度2×10⁵个/孔接种于24孔板, 48 h后, 进行NC的细胞积聚研究。吸弃细胞培养液, 用37 ℃ HBSS洗两遍, 预孵育10 min后, 心肌细胞、成纤维细胞对照组加入含NC的HBSS溶液, 使NC终浓度分别为4、2 μmol·L^-1, 抑制剂组加入含OCT1、OCT3阳性抑制剂(250 μmol·L^-1奎尼丁, 250 μmol·L^-1左旋肉碱, 5 μmol·L^-1 Decynium 22)的同等浓度NC溶液。37 ℃孵育10 min, 迅速弃去孵育液, 按“细胞积聚”项下操作。

样品处理与LC-MS/MS分析 取血浆、组织匀浆液各100、50 μL, 分别加入200、400 μL乙腈(含内标氯雷他定30 ng·mL^-1)沉淀蛋白; 细胞样品解冻后吹打收集裂解液80 μL, 加入乙腈160 μL (含内标氯雷他定20 ng·mL^-1)沉淀蛋白, 旋涡振荡5 min, 4 ℃、13 000 r·min^-1离心15 min, 取上清进行LC-MS/MS分析, 样品检测参考文献方法^[13]。

MTT法细胞存活率和培养液中LDH检测 将原代心肌细胞和成纤维细胞分别以1×10⁵个/孔和1×10⁴个/孔的密度接种于96孔板, 贴壁后, 进行NC对细胞的毒性实验。细胞以含0.1~50 μmol·L^-1 NC的培养液培养24 h后, 以同等NC浓度换液继续培养24 h, 同时设置DMSO空白对照组。以MTT法检测细胞存活率。同法选择2.5~10 μmol·L^-1 NC给药刺激48 h后, 收集细胞培养液, 以LDH试剂盒测定LDH活力。

数据分析 以GraphPad Prism 5.0对实验数据进行作图分析, 结果均以$\bar x \pm s$表示, 体外实验均至少重复2次, 每次至少平行3份。两组间差异采用Unpaired Two-tailed Student's t-test; 多组间差异采用One-way ANOVA (Dunnett或Tukey)分析, P < 0.05为有统计学差异。

结果

收起

1 NC在大鼠心脏中的积聚

图 2显示, 大鼠单次iv 5 mg·kg^-1 NC后0.25、0.5和2 h, 心脏中NC的平均浓度分别为47.7、71.1和63.2 μg·g^-1, 与相同时间点血浆中的浓度比分别为576、1 352和1 212。大鼠连续iv 5 mg·kg^-1 NC 20天, 末次给药后2 h, 心脏中NC平均浓度为458.5 μg·g^-1, 为血浆中NC浓度的7 336倍, 单次给药后2 h浓度的7.3倍。上述结果提示, NC可在心脏组织中浓集和蓄积。

2 不同阳离子转运体在NC细胞积聚中的作用

为探讨NC在心脏中的积聚机制, 本研究应用转基因细胞模型, 考察心脏上可能与NC积聚有关的转运体对NC的摄取作用。结果显示(图 3): NC在MDCK-hOCT1和MDCK-hOCT3细胞中的积聚分别是mock细胞的16.1和4.99倍, 提示NC为OCT1、OCT3的底物; 而NC在MDCK-hOCTN1、MDCK-hOCTN2、MDCK-hPMAT细胞中的积聚与mock细胞无明显差异(P > 0.05), 提示NC不是OCTN1、OCTN2、PMAT的底物。上述结果提示, NC可能通过OCT1和OCT3摄取进入心脏。

3 OCT1和OCT3抑制剂减少NC在原代心肌细胞和成纤维细胞中的积聚

为进一步阐明OCT1、OCT3在NC大鼠心脏摄取中的作用, 本研究考察了OCT1、OCT3抑制剂奎尼丁、左旋延胡索乙素、Decynium 22对NC在乳大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞中积聚的抑制。结果显示, OCT1、OCT3抑制剂均能明显降低NC在细胞中的积聚(图 4), 提示OCT1、OCT3参与NC在大鼠心脏的浓集和蓄积。

4 NC对心脏原代心肌细胞和成纤维细胞毒性研究

鉴于NC在大鼠心脏积聚现象, 以及乳大鼠心脏原代细胞可通过OCT1和OCT3介导NC的摄取, 本研究对NC是否引起原代心肌细胞和成纤维细胞的毒性进行了考察。

4.1 NC对细胞生长的影响

乳大鼠心肌细胞和成纤维细胞以不同浓度NC处理48 h后, 置显微镜下观察形态变化, 典型图片见图 5A和5B。由图可见, 经1、5和10 μmol·L^-1 NC处理后, 心肌细胞和成纤维细胞形态逐渐萎缩、脱落、死亡, 细胞密度随NC浓度的增加逐渐降低。

4.2 NC对细胞存活率和细胞LDH渗漏的影响

为进一步考察NC潜在的心脏毒性, 本研究考察了NC对心肌细胞和成纤维细胞存活率及细胞培养液中LDH活力的影响, 结果显示: 0.01~50 μmol·L^-1 NC能降低心肌细胞和成纤维细胞的存活率, 且细胞毒性呈明显的浓度依赖性, LC₅₀值分别为10.9和10.4 μmol·L^-1 (图 6A, B)。此外, 2.5~10 μmol·L^-1 NC显著增加细胞培养液中LDH的活性(图 6C, D), 提示NC处理增加细胞释放LDH。上述结果提示, NC对大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞具有潜在的毒性。

讨论

收起

NC为抗肿瘤候选化合物, 具有抗癌谱广、作用强等特点, 但也发现其具有肝脏、肾脏及心脏毒性^{[2, 5, 13]}。本研究在NC的组织分布中发现, NC在大鼠心脏中高度浓集。为探讨NC在心脏中的积聚机制, 根据NC的结构特征及心脏转运体分布^{[14, 15]}, 首先应用稳定表达有机阳离子类转运体的细胞模型, 考察了NC的细胞积聚, 发现NC是OCT1和OCT3的底物, 但不是OCTN1、OCTN2以及PMAT的底物。基于心肌细胞是心脏的基本功能单位, 成纤维细胞占非心肌细胞90%, 是构成心脏的主要细胞, 为更好地阐明NC的心脏积聚机制, 本研究进一步考察了在有或无OCT1和OCT3抑制剂存在下, NC在大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞中的积聚情况。结果发现, 多种OCT1、OCT3抑制剂均能显著降低NC在心肌细胞和成纤维细胞中的积聚^{[13, 16, 17]}, 进一步提示OCT1、OCT3参与了NC在心脏中的积聚。此外, 心脏上也表达MDR1、MRP5、MATE1等外排转运体^{[6, 18, 19]}, 但本研究发现NC并不是MDR1、MRP5的底物, 而NC虽为MATE1的底物, 但其对NC的转运能力(Clint: 20.6 μL·mg^-1 pro·min^-1)远低于OCT1 (Clint: 311 μL·mg^-1 pro·min^-1)^[13]。同时, 也不能排除心脏上其他外排转运体参与NC的转运, 但其对NC的外排可能弱于OCT1或OCT3对NC的摄取。

本研究发现10 μmol·L^-1的NC可导致大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞存活率显著降低及LDH显著升高, 且大鼠单次iv 5 mg·kg^-1 NC后0.25~2 h, 心脏中NC浓度为47.7~71.1 μg·g^-1 (约124.3~185.2 μmol·L^-1), 连续iv 5 mg·kg^-1 NC 20天, 末次给药后2 h, 心脏中NC浓度为458.5 μg·g^-1 (约1 194.6 μmol·L^-1)。因此, NC在心脏中的高浓度积聚对心脏具有潜在的毒性。实验室前期相关研究也表明^[13], NC是OCT2高亲和力的底物, 而OCT2介导NC进入肾脏产生蓄积。大鼠连续20天iv 5 mg·kg^-1 NC, 末次给药后2 h, NC在肾脏中的浓度为145.1 μmol·L^-1, 同时也观察到NC引起的肾脏损伤。但值得说明的是, 尽管本研究发现了NC在大鼠心脏蓄积, 却未发现心脏组织相关生化指标和组织病理上的显著变化。这一现象可能与心脏自身的抗氧化酶防御系统有关^{[20, 21]}, 研究表明^[22], 成纤维生长因子21以自分泌方式调节抗氧化基因参与心脏的保护作用。此外, 已有文献表明, 心肌细胞上OCT1和OCT3的表达, 且其功能可被奎尼丁显著抑制^[23], 但尚未有文献报道成纤维细胞上OCT1、OCT3的表达。在原代细胞的NC积聚实验中, 本研究发现OCT1、OCT3的抑制剂既能显著抑制NC在心肌细胞中的积聚, 同时也能抑制其在成纤维细胞中的积聚, 推测成纤维细胞上可能也有OCT1和OCT3表达并参与NC的心脏积聚。

综上, 本研究结果提示, NC可在大鼠心脏高度浓集, 且OCT1、OCT3可介导NC在心脏积聚, 同时本研究还显示, NC对原代心肌细胞和成纤维细胞具有一定的毒性。因此, 本研究为NC在心脏中的积聚及潜在毒性提供了依据。

基金

收起

国家自然科学基金资助项目(81872929)
浙江省自然科学基金资助项目(LY19H310005)

参考文献

收起

文献

收起

参考文献引证文献

排序方式：

[1]

Yang

, Lu

. Using HPLC method to determine the content of the two side of chloride in the tri-ninth gastric granules[J]. Chin J Ethnomed Ethnopharm (中国民族民间医药), 2017, 26: 25-27.

[2]

, Tu

, Yang

et al . The contribution of human OCT1, OCT3, and CYP3A4 to nitidine chloride-induced hepatocellular toxicity[J]. Drug Metab Dispos, 2014, 42: 1227-1234.

https://doi.org/10.1124/dmd.113.056689

[3]

Chen

, Yang

, Feng

. Nitidine chloride inhibits proliferation and induces apoptosis in ovarian cancer cells by activating the Fas signalling pathway[J]. J Pharm Pharmacol, 2018, 70: 778-786.

https://doi.org/10.1111/jphp.2018.70.issue-6

[4]

Liu

, Xiong

, Lin

et al . DNA topoisomerase 1 and 2 A function as oncogenes in liver cancer and may be direct targets of nitidine chloride[J]. Int J Oncol, 2018, 53: 1897-1912.

[5]

Huan

, Liu

, Meng

et al . Effect of nitidine chloride on the heart development of zebra fish embryos[J]. Guangxi Med J (广西医学), 2011, 33: 546-548.

[6]

Koepsell

, Lips

, Volk

. Polyspecific organic cation trans porters:structure, function, physiological roles, and biopharma ceutical implications[J]. Pharm Res, 2007, 24: 1227-1251.

https://doi.org/10.1007/s11095-007-9254-z

[7]

Barnes

, Dobrzynski

, Foppolo

et al . Distribution and func tional characterization of equilibrative nucleoside transporter-4, a novel cardiac adenosine transporter activated at acidic pH[J]. Circ Res, 2006, 99: 510-519.

https://doi.org/10.1161/01.RES.0000238359.18495.42

[8]

, Sun

, Wang

et al . Organic cation transporter 1 mediates the uptake of monocrotaline and plays a key role in its hepatotoxicity[J]. Toxicology, 2013, 311: 225-230.

https://doi.org/10.1016/j.tox.2013.06.009

[9]

Sun

, Wang

, Lei

et al . Inhibition of organic cation transporter 2 and 3 may be involved in the mechanism of the antidepressant-like action of berberine[J]. Prog Neuropsycho pharmacol Biol Psychiatry, 2014, 49: 1-6.

https://doi.org/10.1016/j.pnpbp.2013.11.005

[10]

Weng

, Jin

, Wang

et al . Establishment and application of cell models with stable expression of hOCTN1/2[J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2016, 51: 931-937. http://www.yxxb.com.cn:8081/aps/CN/abstract/abstract16052.shtml

[11]

Sun

, Zhou

, Lei

et al . Jatrorrhizine reduces 5-HT and NE uptake via inhibition of uptake-2 transporters and produces antidepressant-like action in mice[J]. Xenobiotica, 2018. DOI:10.1080/00498254.2018.1542188.

https://doi.org/10.1080/00498254.2018.1542188

[12]

Louch

, Sheehan

, Wolska

. Methods in cardio myocyte isolation, culture, and gene transfer[J]. J Mol Cell Cardiol, 2011, 51: 288-298.

https://doi.org/10.1016/j.yjmcc.2011.06.012

[13]

, Song

, Weng

et al . Role of OCT2 and MATE1 in renal disposition and toxicity of nitidine chloride[J]. Br J Pharmacol, 2016, 173: 2543-2554.

https://doi.org/10.1111/bph.v173.16

[14]

Wagner

, Hu

, Wang

. Polyspecific organic cation trans porters and their impact on drug intracellular levels and pharma codynamics[J]. Pharmacol Res, 2016, 111: 237-246.

https://doi.org/10.1016/j.phrs.2016.06.002

[15]

Grube

, Ameling

, Noutsias

et al . Selective regulation of cardiac organic cation transporter novel type 2(OCTN2) in dilated cardiomyopathy[J]. Am J Pathol, 2011, 178: 2547-2559.

https://doi.org/10.1016/j.ajpath.2011.02.020

[16]

Bourdet

, Pritchard

, Thakker

. Differential substrate and inhibitory activities of ranitidine and famotidine toward human organic cation transporter 1(hOCT1; SLC22A1), hOCT2(SLC22A2), and hOCT3(SLC22A3)[J]. J Pharmacol Exp Ther, 2005, 315: 1288-1297.

https://doi.org/10.1124/jpet.105.091223

[17]

Hayer-Zillgen

, Brüss

, Bönisch

. Expression and pharma cological profile of the human organic cation transporters hOCT1, hOCT2 and hOCT3[J]. Br J Pharmacol, 2002, 136: 829-836.

https://doi.org/10.1038/sj.bjp.0704785

[18]

Krishnamurthy

, Vedam

, Kanagasabai

et al . Heat shock factor-1 knockout induces multidrug resistance gene, MDR1b, and enhances P-glycoprotein (ABCB1)-based drug extrusion in the heart[J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2012, 109: 9023-9028.

https://doi.org/10.1073/pnas.1200731109

[19]

Dazert

, Meissner

, Vogelgesang

et al . Expression and localization of the multidrug resistance protein 5(MRP5/ABCC5), a cellular export pump for cyclic nucleotides, in human heart[J]. Am J Pathol, 2003, 163: 1567-1577.

https://doi.org/10.1016/S0002-9440(10)63513-4

[20]

Doherty

, Wappel

, Talbert

et al . Multi-parameter in vitro toxicity testing of crizotinib, sunitinib, erlotinib, and nilotinib in human cardiomyocytes[J]. Toxicol Appl Pharmacol, 2013, 272: 245-255.

https://doi.org/10.1016/j.taap.2013.04.027

[21]

, Tang

, Li

et al . Cytoprotective effect of p62/Nrf2 signaling pathway[J]. Acta Pharm Sin (药学学报), 2018, 53: 1995-2005. http://www.yxxb.com.cn:8081/aps/CN/abstract/abstract17362.shtml

[22]

Planavila

, Redondo-Angulo

, Ribas

et al . Fibroblast growth factor 21 protects the heart from oxidative stress[J]. Cardiovasc Res, 2015, 106: 19-31.

https://doi.org/10.1093/cvr/cvu263

[23]

Rossato

, Costa

, de Pinho

et al . Structural isomeriza tion of synephrine influences its uptake and ensuing glutathione depletion in rat-isolated cardiomyocytes[J]. Arch Toxicol, 2011, 85: 929-939.

https://doi.org/10.1007/s00204-010-0630-9

2019年第54卷第5期

PDF下载

101

引用本文

BibTeX

文章信息

doi: 10.16438/j.0513-4870.2019-0001

接收时间：2019-01-02
首发时间：2026-01-26
出版时间：2019-05-12

补充材料

相关文章

文章信息

作者

出版历史

收稿日期：2019-01-02
修回日期：2019-01-19

基金

国家自然科学基金资助项目(81872929)

浙江省自然科学基金资助项目(LY19H310005)

作者信息

1.浙江工业大学长三角绿色制药协同创新中心, 浙江杭州 310014

2.浙江大学药学院药物代谢与分析实验室, 浙江省抗肿瘤药物重点实验室, 浙江杭州 310058

通讯作者:

*李丽萍, Tel/Fax:86-571-88208417, E-mail:lillylp@zju.edu.cn

参考文献

分享链接

https://castjournals.cast.org.cn/joweb/yxxb/CN/10.16438/j.0513-4870.2019-0001

分享至

全文二维码

扫描看全文

引用本文

BibTeX

本文的引用情况

2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

关闭全屏

BibTeX
EndNote
RefWorks
TxT