药学学报

Position	1
2	115.2		114.7
3	81.6		81.8
3a	53.4	2.81 (1H, d, J = 9.2)	53.7	2.81 (1H, d, J = 9.2)
4	198.4		198.3
5	126.2	5.90 (1H, s)	126.2	5.90 (1H, s)
6	161.5		161.4
7	36.2	2.65 (2H, t, J = 7.6)	36.2	2.63 (2H, t, J = 7.3)
7a	73.2	4.62 (1H, m)	73.0	4.61 (1H, m)
8	84.4		84.1
9	76.5	3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1)	76.2	4.17 (1H, dd, J = 7.8, 7.0)
10	37.0	2.57 (1H, dd, J = 14.3, 7.3)	38.1	2.27 (1H, dd, J = 13.6, 6.7)
		2.03 (1H, dd, J = 14.4, 6.0)		2.15 (1H, dd, J = 13.6, 8.1)
11	26.2	1.17 (3H, s)	27.3	1.11 (3H, s)
12	21.4	1.26 (3H, s)	21.5	1.28 (3H, s)
13	20.0	1.35 (3H, s)	19.9	1.40 (3H, s)
14	23.3	1.96 (3H, s)	23.2	1.96 (3H, s)

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3a	53.4	2.81 (1H, d, J = 9.2)	53.7	2.81 (1H, d, J = 9.2)
4	198.4		198.3
5	126.2	5.90 (1H, s)	126.2	5.90 (1H, s)
6	161.5		161.4
7	36.2	2.65 (2H, t, J = 7.6)	36.2	2.63 (2H, t, J = 7.3)
7a	73.2	4.62 (1H, m)	73.0	4.61 (1H, m)
8	84.4		84.1
9	76.5	3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1)	76.2	4.17 (1H, dd, J = 7.8, 7.0)
10	37.0	2.57 (1H, dd, J = 14.3, 7.3)	38.1	2.27 (1H, dd, J = 13.6, 6.7)
		2.03 (1H, dd, J = 14.4, 6.0)		2.15 (1H, dd, J = 13.6, 8.1)
11	26.2	1.17 (3H, s)	27.3	1.11 (3H, s)
12	21.4	1.26 (3H, s)	21.5	1.28 (3H, s)
13	20.0	1.35 (3H, s)	19.9	1.40 (3H, s)
14	23.3	1.96 (3H, s)	23.2	1.96 (3H, s)

Compd.	Concentration/μmol·L^-1	Cell viability/%
1	50	80.7 ± 0.022
	25	79.8 ± 0.020
	12.5	80.1 ± 0.040
2	50	103.96 ± 3.19
	25	90.25 ± 2.88
	12.5	101.14 ± 2.30

Compd.	Concentration/μmol·L^-1	Cell viability/%
1	50	80.7 ± 0.022
	25	79.8 ± 0.020
	12.5	80.1 ± 0.040
2	50	103.96 ± 3.19
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	12.5	101.14 ± 2.30

No.	Concentration/μmol·L^-1	NO/μmol·mL^-1	PGE₂/μmol·mL^-1
Control	-	5.125 ± 0.151	6.621 ± 0.342
Model (1L-1β)	-	8.801 ± 0.345^###	8.544 ± 0.357
1	12.5	6.692 ± 0.124^***	8.530 ± 0.35
	50	2.354 ± 0.192^***	7.403 ± 0.296
2	12.5	6.051 ± 0.693^***	7.884 ± 0.489
	50	4.185 ± 0.681^***	7.342 ± 0.261

No.	Concentration/μmol·L^-1	NO/μmol·mL^-1	PGE₂/μmol·mL^-1
Control	-	5.125 ± 0.151	6.621 ± 0.342
Model (1L-1β)	-	8.801 ± 0.345^###	8.544 ± 0.357
1	12.5	6.692 ± 0.124^***	8.530 ± 0.35
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2	12.5	6.051 ± 0.693^***	7.884 ± 0.489
	50	4.185 ± 0.681^***	7.342 ± 0.261

独活中的两个新倍半萜化合物及其抗炎活性研究

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李明 ¹^,² , 温建辉 ¹^,² , 倪付勇 ¹^,² , 谢雪 ¹^,² , 吴云 ¹^,² , 王振中 ¹^,² , 肖伟 ¹^,²^,^*

药学学报 | 研究论文 2019,54(2): 343-347

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药学学报 | 研究论文 2019, 54(2): 343-347

独活中的两个新倍半萜化合物及其抗炎活性研究

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李明¹^,², 温建辉¹^,², 倪付勇¹^,², 谢雪¹^,², 吴云¹^,², 王振中¹^,², 肖伟¹^,²^,^*

作者信息

1.江苏康缘药业股份有限公司, 江苏连云港 222001

2.中药制药过程新技术国家重点实验室, 江苏连云港 222001

通讯作者:

*肖伟, Tel:15062965253, E-mail:15705279062@163.com

Anti-inflammatory activity of two new sesquiterpenoids from Radix Angelicae Pubescentis

Ming LI¹^,², Jian-hui WEN¹^,², Fu-yong NI¹^,², Xue XIE¹^,², Yun WU¹^,², Zhen-zhong WANG¹^,², Wei XIAO¹^,²^,^*

Affiliations

1. Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd., Lianyungang 222001, China

2. State Key Laboratory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process, Lianyungang 222001, China

出版时间: 2019-02-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2018-0960

文章导航

摘要

收起

采用Diaion HP-20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、硅胶柱色谱、制备液相色谱等分离方法对独活（Radix Angelicae Pubescentis）醇提组分进行分离纯化，并采用高分辨质谱、1D和2D核磁共振谱等波谱技术进行化合物结构鉴定。结果从独活醇提组分中分离得到两个新倍半萜类化合物Angesesquid A（1）和Angesesquid B（2）。采用原代大鼠椎间盘软骨细胞体外炎症模型对化合物进行体外抗炎活性评价，结果发现，化合物1和2对该体外炎症模型细胞的增殖均无明显影响，它们都能明显抑制原代大鼠椎间盘软骨细胞体外炎症模型细胞中NO的释放，但对PGE₂的释放无明显抑制作用。这说明化合物1和2一定程度上都能抑制炎症反应的发生。

关键词

独活 / 化学成分 / 结构鉴定 / 抗炎活性

Abstract

收起

Chemical constituents from the ethanol extract of Radix Angelicae Pubescentis was isolated and purified through Diaion HP-20 macroporous, silica gel column chromatography, gel filtration over Sephadex LH-20 and preparative HPLC. Two new sesquiterpenoid derivatives were identified as angesesquid A (1) and angesesquid B (2), and their structures were determined. In vitro degeneration model of primary rat disc chondrocytes was used to evaluate the anti-inflammatory activity of these two compounds. The results showed that compounds 1 and 2 had no anti-proliferation effect. Both compounds inhibited the release of NO, but had no inhibitory activity for the release of PGE₂. This finding implies that both of these two new sesquiterpenoids could moderately inhibit the inflammatory reaction to some extent.

Key words

Radix Angelicae Pubescentis / chemical constituent / structure determination / anti-inflammatory activity

引用本文

李明, 温建辉, 倪付勇, 谢雪, 吴云, 王振中, 肖伟. 独活中的两个新倍半萜化合物及其抗炎活性研究. 药学学报, 2019 , 54 (2) : 343 -347 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2018-0960

Ming LI, Jian-hui WEN, Fu-yong NI, Xue XIE, Yun WU, Zhen-zhong WANG, Wei XIAO. Anti-inflammatory activity of two new sesquiterpenoids from Radix Angelicae Pubescentis[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2019 , 54 (2) : 343 -347 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2018-0960

正文

收起

独活为伞形科植物重齿毛当归(Angelica pubescens Maxim. F. biserrata Shan et Yuan)的干燥根^[1], 其主要含有香豆素类、挥发油类, 以及少量甾醇和糖类等化学成分^[2]。独活中的挥发油类成分主要为单萜和倍半萜及其衍生物^[3], 香豆素类成分主要包括甲氧基欧芹素、香柑内酯、花椒毒素、伞形花内酯、佛手酚、欧芹烯酚、欧芹酚甲醚、二氢欧山芹醇、二氢欧山芹素、二氢欧山芹醇乙酸酯、异欧前胡素、补骨脂素等^[4]。研究显示, 独活具有抗炎镇痛^[5-7]、抗老年痴呆^[8]、抗胃溃疡、抑菌、抗肿瘤和抗氧化等作用^[2]。

为进一步明确中药材独活的物质基础, 为制定科学合理的质量控制方法提供依据, 并为其作用机制研究奠定良好基础, 本论文对独活醇提组分的化学成分进行了研究。采用Diaion HP-20大孔吸附树脂、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、硅胶柱色谱和制备液相色谱等方法对独活醇提组分的化学成分进行分离纯化, 结果分离得到两个新倍半萜类化合物angesesquid A (1)和angesesquid B (2)。进一步研究发现, 化合物1和2都能明显抑制原代大鼠椎间盘软骨细胞中NO的释放, 但对PGE₂的抑制作用不明显, 这说明它们一定程度上都能抑制炎症反应的发生。

结果与讨论

收起

1 结构鉴定

Angesesquid A (1, 图 1)为白色无定形粉末, HR-ESI-MS: m/z为305.136 8 [M+Na]⁺ (理论计算值为305.136 5), 说明其相对分子质量为282, 化合物分子式为C₁₅H₂₂O₅, 不饱和度为5。其¹H NMR谱显示4个甲基质子信号, 包括两个偕甲基δ_H 1.17 (3H, s, H-11)和δ_H 1.26 (3H, s, H-12), 1个与烯碳相连的甲基δ_H 1.96 (3H, s, H-14), 1个甲基单峰δ_H 1.35 (3H, s, H-13);同时, 还有两个连氧的次甲基质子信号δ_H 3.85 (1H, dd, J = 7.1 Hz, 6.1 Hz, H-9)和δ_H 4.62 (1H, m, H-7), 一个烯质子信号δ_H 5.90 (1H, s, H-5)。¹³C NMR谱和DEPT谱显示15个碳信号, 包括1个羰基碳δ_C 198.4 (C-4), 一对双键碳δ_C 126.2 (C-5)和δ_C 161.5 (C-6), 1个季碳δ_C 115.2 (C-2), 两个偕氧的季碳δ_C 84.4 (C-8)和δ_C 81.6 (C-3), 两个连氧的次甲基碳δ_C 76.5 (C-9)和δ_C 73.2 (C-7a), 1个次甲基碳δ_C 53.4 (C-3a), 2个亚甲基碳δ_C 37.0 (C-10)和δ_C 36.2 (C-7), 4个甲基碳δ_C 26.2 (C-11)、δ_C 23.2 (C-14)、δ_C 21.4 (C-12)和δ_C 20.0 (C-13)。综合上述质谱、¹H和¹³C NMR谱, 可推测化合物1为一个倍半萜化合物, 其结构中存在3个环。

化合物1的¹H-¹H COSY谱中(图 2), 可观察到烯烃质子δ_H 5.90 (1H, s, H-5)与δ_H 1.96 (3H, s, H-14)、δ_H 2.65 (2H, t, J = 7.6 Hz, H-7)的相关, δ_H 2.65 (2H, t, J = 7.6 Hz, H-7)与δ_H 4.62 (1H, m, H-7a)的相关, δ_H 4.62 (1H, m, H-7a)与δ_H 2.81 (1H, d, J = 9.2 Hz, H-3a)的相关, δ_H 3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1 Hz, H-9)与δ_H 2.57 (1H, dd, J = 14.4, 7.3 Hz, H-10)、δ_H 2.03 (1H, dd, J = 14.4, 6.0 Hz, H-10)的相关。化合物1的HMBC谱中(图 2), 烯质子δ_H 5.90 (1H, s, H-5)与δ_C 53.4 (C-3a)、δ_C 23.2 (C-14)、δ_C 36.2 (C-7)相关, δ_H 2.82 (1H, d, J = 9.2 Hz, H-3a)与δ_C 198.4 (C-4)、δ_C 73.2 (C-7a)、δ_C 36.2 (C-7)的碳相关, 表明结构中存在1个取代的环己烯酮片段。δ_H 1.96 (3H, s, H-14)与δ_C 161.5 (C-6)、δ_C 126.2 (C-5)和δ_C 36.2 (C-7)的HMBC相关也证明C-6位被甲基取代。此外, δ_H 1.35 (3H, s, H-13)与δ_C 53.4 (C-3a)、δ_C 81.6 (C-3)、δ_C 115.2 (C-2)相关, δ_H 2.03 (1H, dd, J = 14.3, 5.9 Hz, H-10a)与δ_C 115.2 (C-2)、δ_C 84.4 (C-8)、δ_C 76.5 (C-9)相关, δ_H 3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1 Hz, H-9)与δ_C 115.2 (C-2)、δ_C 26.2 (C-11)相关, 证明了侧链的存在, 且环己烯酮的δ_C 53.4 (C-3a)与侧链的δ_C 81.6 (C-3)相连。综合以上信息, δ_C 84.4 (C-8)的季碳只有与δ_C 115.2 (C-2)的季碳通过氧相连并成环才合理, 同样的, δ_C 73.2 (C-7a)的次甲基碳只有与δ_C 115.2 (C-2)的季碳通过氧相连并成环才合理, 该化合物的平面结构确定。化合物1的NOESY谱(图 3), H-3a/H-7a、H-3a/H-13的Noe相关证明H-3a、H-7a和H-13在同侧, H-9/H-13相关证明H-9和H-13在同侧。由此化合物1的相对构型被确定(图 1)。该化合物的结构未见文献报道, 其碳和氢信号归属列于表 1。

Angesesquid B (2, 图 1)为白色无定形粉末, HR-ESI-MS: m/z为305.136 8 [M+Na]⁺ (理论计算值为305.136 5), 说明其相对分子质量为282, 化合物分子式为C₁₅H₂₂O₅, 不饱和度为5。化合物2的¹³C NMR (100 MHz, CD₃OD)和DEPT与化合物1相似, 具有15个碳信号, 其中1个羰基碳信号δ_C 198.3 (C-4), 一对双键碳δ_C 126.2 (C-5)、δ_C 161.4 (C-6), 1个季碳δ_C 114.7 (C-2), 两个偕氧的季碳信号δ_C 84.1 (C-8)、δ_C 81.8 (C-3), 两个连氧的次甲基碳信号δ_C 76.2 (C-9)、δ_C 73.0 (C-7a), 1个次甲基碳δ_C 53.7 (C-3a), 2个亚甲基碳δ_C 38.1 (C-10)、δ_C 36.2 (C-7), 4个甲基碳δ_C 27.3 (C-11)、δ_C 23.2 (C-14)、δ_C 21.4 (C-12)、δ_C-13 20.0 (C-13)。化合物2的¹H NMR (400 MHz, CD₃OD)与化合物1相似, 具有4个甲基质子信号:两个偕甲基δ_H 1.11 (3H, s, H-11)、δ_H 1.28 (3H, s, H-12), 1个连在烯碳上的甲基δ_H 1.96 (3H, s, H-14), 1个单峰甲基δ_H 1.40 (3H, s, H-13); 1个烯质子信号δ_H 5.90 (1H, s, H-5); 1个连氧的次甲基质子信号δ_H 4.62 (1H, m, H-7a); 化合物2的1个连氧的次甲基质子信号δ_H 4.17 (1H, dd, J = 7.8, 7.0 Hz, H-9)与化合物1的一个连氧的次甲基质子信号δ_H 3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1 Hz, H-9)不同, 可能是相对构型不同。¹H-¹H COSY和HMBC谱(图 4)表明其平面结构和化合物1相同, 其全部的碳和氢信号归属见表 1。NOESY谱中(图 3), 化合物1能明显看到H-9/H-13的相关, 而化合物2无此相关, 证明化合物2的9-OH构型与化合物1相反。化合物2的相对构型被确定(图 1)。其结构也未见文献报道, 碳和氢信号归属列于表 1。

2 化合物的抗炎活性

采用原代大鼠椎间盘软骨细胞体外炎症模型对化合物进行抗炎活性评价。结果显示, 化合物1和2对该体外炎症模型细胞的增殖均无明显影响(表 2), 它们都能明显抑制NO的释放(表 3), 但对PGE₂的释放无明显抑制作用。上述结果说明化合物1和2能一定程度上抑制炎症反应的发生。

实验部分

收起

Waters Snapt G2质谱仪; Bruker AV-300/400超导核磁共振波谱仪; Agilent 1260分析型高效液相色谱仪和Agilent 1260制备型高效液相色谱仪; Agilent RRHD SB-C18 (2.1 mm×100 mm, 1.8 μm)色谱柱和Ultimate XB-C18 (250 mm×21.2 mm, 5 μm), 上海月旭科技股份有限公司; 超净工作台(SW-CJ-2F, 苏州安泰空气技术有限公司, 中国); 二氧化碳培养箱(Thermo scientific 3100, Thermo Fisher Scientific, 美国); 倒置显微镜(CKX41SF, OLYPÌS, 日本); 酶标仪(Spectra Max 340 PC, Molecular Devices, 美国); 立式压力蒸气灭菌锅(BXM-30R, 上海博讯实业有限公司医疗设备厂, 中国); 离心机(LD4-2A, 北京众益中和生物技术有限公司, 中国); 细胞自动计数仪(Cl028, Invitrogen, 美国); 移液枪(Eppendorf, 德国); 96孔细胞培养板、细胞培养瓶购自于美国Costar公司; Diaion HP-20大孔吸附树脂购自日本三菱; 柱色谱硅胶(200~300目)购自于青岛海洋化工公司; 薄层色谱硅胶预制板购自青岛海洋化工公司; Sephadex LH-20柱色谱填料购自瑞典Pharmacia公司; 色谱纯乙腈、甲醇购自于瑞典Oceanpak公司; 食用级95%乙醇购自连云港长和酒业有限公司; 氘代试剂购自美国CIL公司; DMEM (Dulbecco's modified Eagle medium)培养基、胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)、青霉素及链霉素均购自于美国Gibco公司; 二甲基亚砜(DMSO)购自于美国Sigma公司; CCK-8试剂盒购自于上海贝博生物公司; NO、PGE₂检测试剂盒购自于碧云天生物技术研究所; SD大鼠, 雄性, SPF级, 体重260~300 g, 由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供, 许可证号: SCXK (沪) 2008-0016, 动物饲养于屏障环境中, 12/12 h明暗交替, 温度22~25 ℃, 相对湿度50%~60%, 动物自由进食饮水, 适应7天后开始实验。

中药材购自安徽亳州药材市场(产地甘肃, 批号20170911), 由连云港康济大药房连锁有限公司吴舟执业药师鉴定为独活(Radix Angelicae Pubescentis)。药材留样(编号:独活20170911)现保存江苏康缘药业股份有限公司现代中药研究院中药组分库。

1 提取与分离

独活药材10 kg经300 L、75%乙醇提取2次, 合并2次提取液, 70 ℃减压浓缩得350 g醇提浸膏。醇提浸膏经硅胶柱色谱分离、梯度洗脱[二氯甲烷-甲醇(100:0; 100:1; 100:2; 100:4; 100:10; 100:50; 100:100; 0:100, v/v)]得到8个组分(Fr.1~Fr.8)。其中组分Fr.5经Saphadex LH-20柱色谱, 甲醇洗脱得到18个组分(Fr.5-1~Fr.5-18), 其中Fr.5-(6~7), 经制备液相色谱等度洗脱[乙腈-水(35:65, v/v)]得到的4个组分[Fr.5-(6~7)-1~Fr.5-(6~7)-4], 其中Fr.5-(6~7)-3再经制备液相色谱等度洗脱[乙腈-水(30:70, v/v)]得到化合物1 (15 mg, t_R = 35 min), 其中Fr.5-(6~7)-4再经制备液相色谱等度洗脱[乙腈-水(30:70, v/v)]得到化合物2 (18 mg, t_R = 40 min)。

2 CCK-8法检测细胞增殖^[9]

取对数生长期的原代大鼠椎间盘软骨细胞, 用0.25%胰酶-0.02% EDTA消化约2 min后, 弃胰酶, 加入含10% FBS的DMEM培养基中和胰酶作用, 轻轻吹打使成单细胞悬液, 离心弃上清, 用完全培养基重悬细胞并计数, 调整细胞悬液至每毫升1×10⁵个细胞, 按每孔200 μL接种至96孔培养板, 37 ℃、5% CO₂条件下培养24 h, 吸弃上清, 每孔加入100 μL无血清DMEM培养基饥饿24 h使其同步化, 吸弃上清, 按实验需要分为对照组、化合物组, 并给予相应药物, 继续培养24 h, 提前4 h每孔加入10 μL CCK-8, 4 h后于酶标仪450 nm波长处检测吸光度值(A₄₅₀)。实验重复3次, 每组设3个复孔。

3 Griess法测定细胞上清中NO^[10]

取对数生长期细胞以每毫升1×10⁵个细胞的浓度接种于96孔培养板, 每孔200 μL, 于37 ℃、5% CO₂细胞培养箱中培养24 h。吸弃上清, 每孔加入100 μL无血清DMEM培养基饥饿24 h使其同步化, 吸弃上清后, 对照组给予无血清培养基100 μL, 模型组给予用无血清培养基配制的IL-1β 100 μL (终质量浓度为10 µg·L^-1), 化合物组给予含10 µg·L^-1 IL-1β (终质量浓度)无血清培养基配制的药液100 μL (终浓度为50 µmol·L^-1), 37 ℃、5% CO₂细胞培养箱中继续培养24 h。取上清50 μL, 检测炎症因子NO。对炎症因子NO有明显抑制作用的化合物将进一步检测炎症因子PGE₂。实验重复3次, 每组实验设3个复孔。

4 统计分析方法

采用SPSS 19.0统计软件进行分析, 实验结果以x ± SD表示, 组间比较采用单因素方差分析, 组内两两比较采用LSD检验。P < 0.05为差异有显著性, P < 0.01为差异有非常显著性, P < 0.001为差异有极显著性。

基金

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国家重大新药创制科技专项-腰痹通胶囊欧盟注册申请及Ⅱ期临床试验研究(2018ZX09737016)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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Chinese

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2019年第54卷第2期

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doi: 10.16438/j.0513-4870.2018-0960

接收时间：2018-10-24
首发时间：2026-01-26
出版时间：2019-02-12

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出版历史

收稿日期：2018-10-24
修回日期：2018-11-22

基金

国家重大新药创制科技专项-腰痹通胶囊欧盟注册申请及Ⅱ期临床试验研究(2018ZX09737016)

作者信息

1.江苏康缘药业股份有限公司, 江苏连云港 222001

2.中药制药过程新技术国家重点实验室, 江苏连云港 222001

通讯作者:

*肖伟, Tel:15062965253, E-mail:15705279062@163.com

参考文献

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https://castjournals.cast.org.cn/joweb/yxxb/CN/10.16438/j.0513-4870.2018-0960

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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RefWorks
TxT

Position	1
2	115.2		114.7
3	81.6		81.8
3a	53.4	2.81 (1H, d, J = 9.2)	53.7	2.81 (1H, d, J = 9.2)
4	198.4		198.3
5	126.2	5.90 (1H, s)	126.2	5.90 (1H, s)
6	161.5		161.4
7	36.2	2.65 (2H, t, J = 7.6)	36.2	2.63 (2H, t, J = 7.3)
7a	73.2	4.62 (1H, m)	73.0	4.61 (1H, m)
8	84.4		84.1
9	76.5	3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1)	76.2	4.17 (1H, dd, J = 7.8, 7.0)
10	37.0	2.57 (1H, dd, J = 14.3, 7.3)	38.1	2.27 (1H, dd, J = 13.6, 6.7)
		2.03 (1H, dd, J = 14.4, 6.0)		2.15 (1H, dd, J = 13.6, 8.1)
11	26.2	1.17 (3H, s)	27.3	1.11 (3H, s)
12	21.4	1.26 (3H, s)	21.5	1.28 (3H, s)
13	20.0	1.35 (3H, s)	19.9	1.40 (3H, s)
14	23.3	1.96 (3H, s)	23.2	1.96 (3H, s)

Position

δ_C

δ_H

δ_C

δ_H

115.2

114.7

81.6

81.8

53.4

2.81 (1H, d, J = 9.2)

53.7

2.81 (1H, d, J = 9.2)

198.4

198.3

126.2

5.90 (1H, s)

126.2

5.90 (1H, s)

161.5

161.4

36.2

2.65 (2H, t, J = 7.6)

36.2

2.63 (2H, t, J = 7.3)

73.2

4.62 (1H, m)

73.0

4.61 (1H, m)

84.4

84.1

76.5

3.85 (1H, dd, J = 7.1, 6.1)

76.2

4.17 (1H, dd, J = 7.8, 7.0)

37.0

2.57 (1H, dd, J = 14.3, 7.3)

38.1

2.27 (1H, dd, J = 13.6, 6.7)

2.03 (1H, dd, J = 14.4, 6.0)

2.15 (1H, dd, J = 13.6, 8.1)

26.2

1.17 (3H, s)

27.3

1.11 (3H, s)

21.4

1.26 (3H, s)

21.5

1.28 (3H, s)

20.0

1.35 (3H, s)

19.9

1.40 (3H, s)

23.3

1.96 (3H, s)

23.2

1.96 (3H, s)

Compd.	Concentration/μmol·L^-1	Cell viability/%
1	50	80.7 ± 0.022
	25	79.8 ± 0.020
	12.5	80.1 ± 0.040
2	50	103.96 ± 3.19
	25	90.25 ± 2.88
	12.5	101.14 ± 2.30

Compd.

Concentration/μmol·L^-1

Cell viability/%

80.7 ± 0.022

79.8 ± 0.020

12.5

80.1 ± 0.040

103.96 ± 3.19

90.25 ± 2.88

12.5

101.14 ± 2.30

No.	Concentration/μmol·L^-1	NO/μmol·mL^-1	PGE₂/μmol·mL^-1
Control	-	5.125 ± 0.151	6.621 ± 0.342
Model (1L-1β)	-	8.801 ± 0.345^###	8.544 ± 0.357
1	12.5	6.692 ± 0.124^***	8.530 ± 0.35
	50	2.354 ± 0.192^***	7.403 ± 0.296
2	12.5	6.051 ± 0.693^***	7.884 ± 0.489
	50	4.185 ± 0.681^***	7.342 ± 0.261

No.

Concentration/μmol·L^-1

NO/μmol·mL^-1

PGE₂/μmol·mL^-1

Control

5.125 ± 0.151

6.621 ± 0.342

Model (1L-1β)

8.801 ± 0.345^###

8.544 ± 0.357

12.5

6.692 ± 0.124^***

8.530 ± 0.35

2.354 ± 0.192^***

7.403 ± 0.296

12.5

6.051 ± 0.693^***

7.884 ± 0.489

4.185 ± 0.681^***

7.342 ± 0.261