药学学报

Analyte	Regressive equation	R²	Linear range/μg·mL^-1
Notoginsenoside R1	Y = 0.039 5X + 0.052 1	0.999 3	16.96-203.5
Ginsenoside Rg1	Y = 0.054 6X - 0.032 9	0.999 3	54.46-653.5
Ginsenoside Re	Y = 0.074 3X - 0.041 0	0.999 6	10.96-131.5
Ginsenoside Rb1	Y = 0.076 4X + 0.287 8	0.999 0	51.50-618.0
Ginsenoside Rd	Y = 0.062 7X + 0.041 7	0.999 4	15.94-191.3

Analyte	Regressive equation	R²	Linear range/μg·mL^-1
Notoginsenoside R1	Y = 0.039 5X + 0.052 1	0.999 3	16.96-203.5
Ginsenoside Rg1	Y = 0.054 6X - 0.032 9	0.999 3	54.46-653.5
Ginsenoside Re	Y = 0.074 3X - 0.041 0	0.999 6	10.96-131.5
Ginsenoside Rb1	Y = 0.076 4X + 0.287 8	0.999 0	51.50-618.0
Ginsenoside Rd	Y = 0.062 7X + 0.041 7	0.999 4	15.94-191.3

Analyte	Weight/g	Origin/mg	Added/mg	Found/mg	Recovery/%	Mean Recovery/%	RSD/%
Notoginsenoside R1	0.250 1	1.569	1.528	3.096	99.97	98.96	0.87
0.250 2	1.569	1.528	3.074	98.49
0.250 1	1.569	1.528	3.099	100.2
0.250 0	1.568	1.528	3.073	98.50
0.2500	1.568	1.528	3.068	98.20
0.249 9	1.567	1.528	3.072	98.46
Ginsenoside Rg1	0.249 9	5.943	6.225	12.178	100.2	100.8	1.46
0.250 0	5.945	6.225	12.071	98.40
0.250 2	5.950	6.225	12.355	102.9
0.250 1	5.948	6.225	12.244	101.1
0.250 2	5.950	6.225	12.254	101.3
0.250 2	5.950	6.225	12.231	100.9
Ginsenoside Re	0.250 1	0.852	1.060	1.840	93.20	94.76	1.85
0.250 1	0.852	1.060	1.865	95.61
0.250 1	0.852	1.060	1.865	95.59
0.250 0	0.851	1.060	1.832	92.55
0.249 9	0.851	1.060	1.882	97.30
0.249 9	0.851	1.060	1.851	94.31
Ginsenoside Rb1	0.250 1	5.176	5.024	10.176	99.52	100.1	2.06
0.249 8	5.169	5.024	10.035	96.85
0.249 9	5.174	5.024	10.339	102.8
0.250 0	5.172	5.024	10.285	101.8
0.249 9	5.174	5.024	10.203	100.1
0.250 0	5.172	5.024	10.178	99.66
Ginsenoside Rd	0.250 1	1.251	1.256	2.558	104.1	103.1	0.96
0.250 1	1.251	1.256	2.532	102.0
0.250 2	1.251	1.256	2.539	102.5
0.250 1	1.251	1.256	2.537	102.4
0.250 0	1.250	1.256	2.563	104.5
0.250 0	1.250	1.256	2.545	103.0

Analyte	Weight/g	Origin/mg	Added/mg	Found/mg	Recovery/%	Mean Recovery/%	RSD/%
Notoginsenoside R1	0.250 1	1.569	1.528	3.096	99.97	98.96	0.87
0.250 2	1.569	1.528	3.074	98.49
0.250 1	1.569	1.528	3.099	100.2
0.250 0	1.568	1.528	3.073	98.50
0.2500	1.568	1.528	3.068	98.20
0.249 9	1.567	1.528	3.072	98.46
Ginsenoside Rg1	0.249 9	5.943	6.225	12.178	100.2	100.8	1.46
0.250 0	5.945	6.225	12.071	98.40
0.250 2	5.950	6.225	12.355	102.9
0.250 1	5.948	6.225	12.244	101.1
0.250 2	5.950	6.225	12.254	101.3
0.250 2	5.950	6.225	12.231	100.9
Ginsenoside Re	0.250 1	0.852	1.060	1.840	93.20	94.76	1.85
0.250 1	0.852	1.060	1.865	95.61
0.250 1	0.852	1.060	1.865	95.59
0.250 0	0.851	1.060	1.832	92.55
0.249 9	0.851	1.060	1.882	97.30
0.249 9	0.851	1.060	1.851	94.31
Ginsenoside Rb1	0.250 1	5.176	5.024	10.176	99.52	100.1	2.06
0.249 8	5.169	5.024	10.035	96.85
0.249 9	5.174	5.024	10.339	102.8
0.250 0	5.172	5.024	10.285	101.8
0.249 9	5.174	5.024	10.203	100.1
0.250 0	5.172	5.024	10.178	99.66
Ginsenoside Rd	0.250 1	1.251	1.256	2.558	104.1	103.1	0.96
0.250 1	1.251	1.256	2.532	102.0
0.250 2	1.251	1.256	2.539	102.5
0.250 1	1.251	1.256	2.537	102.4
0.250 0	1.250	1.256	2.563	104.5
0.250 0	1.250	1.256	2.545	103.0

Sample No.	Notoginsenoside R1	Ginsenoside Rg1	Ginsenoside Re	Ginsenoside Rb1	Ginsenoside Rd	PNS
190505-1	0.627 7	2.465	0.327 5	1.960	0.495 3	5.876
190505-2	0.617 0	2.442	0.329 2	1.972	0.496 7	5.857
190506-1	0.604 2	2.417	0.323 7	1.915	0.484 0	5.744
190506-2	0.600 4	2.387	0.315 9	1.921	0.479 0	5.703
190507-1	0.586 6	2.350	0.317 9	1.897	0.470 2	5.622
190507-2	0.577 8	2.380	0.314 2	1.871	0.470 1	5.613
190508-1	0.595 9	2.440	0.322 0	1.923	0.519 3	5.800
190508-2	0.586 8	2.394	0.317 6	1.894	0.479 9	5.672
190509-1	0.572 1	2.295	0.303 3	1.849	0.466 2	5.486
190509-2	0.575 5	2.322	0.306 0	1.840	0.469 1	5.513
190510-1	0.561 7	2.253	0.298 3	1.819	0.459 4	5.391
190510-2	0.596 3	2.386	0.315 0	1.920	0.487 1	5.704
190511-1	0.557 0	2.689	0.306 3	1.760	0.453 6	5.766
190511-2	0.559 0	2.240	0.304 7	1.782	0.451 7	5.337
190512-1	0.563 2	2.534	0.307 4	1.799	0.459 5	5.663
190512-2	0.578 8	2.301	0.309 5	1.774	0.457 6	5.421
190513-1	0.584 3	2.482	0.317 5	1.808	0.468 7	5.660
190513-2	0.587 1	2.356	0.320 2	1.810	0.473 1	5.546
190514-1	0.630 8	2.270	0.325 5	1.821	0.495 8	5.543
190514-2	0.621 6	2.400	0.323 3	1.828	0.492 9	5.666
190515-1	0.615 5	2.286	0.322 9	1.820	0.505 7	5.550
190515-2	0.613 3	2.408	0.321 6	1.844	0.499 8	5.687
Mean	0.591 5	2.386	0.315 9	1.856	0.478 8	5.628
RSD	3.83	4.30	2.74	3.29	3.84	2.56

Sample No.	Notoginsenoside R1	Ginsenoside Rg1	Ginsenoside Re	Ginsenoside Rb1	Ginsenoside Rd	PNS
190505-1	0.627 7	2.465	0.327 5	1.960	0.495 3	5.876
190505-2	0.617 0	2.442	0.329 2	1.972	0.496 7	5.857
190506-1	0.604 2	2.417	0.323 7	1.915	0.484 0	5.744
190506-2	0.600 4	2.387	0.315 9	1.921	0.479 0	5.703
190507-1	0.586 6	2.350	0.317 9	1.897	0.470 2	5.622
190507-2	0.577 8	2.380	0.314 2	1.871	0.470 1	5.613
190508-1	0.595 9	2.440	0.322 0	1.923	0.519 3	5.800
190508-2	0.586 8	2.394	0.317 6	1.894	0.479 9	5.672
190509-1	0.572 1	2.295	0.303 3	1.849	0.466 2	5.486
190509-2	0.575 5	2.322	0.306 0	1.840	0.469 1	5.513
190510-1	0.561 7	2.253	0.298 3	1.819	0.459 4	5.391
190510-2	0.596 3	2.386	0.315 0	1.920	0.487 1	5.704
190511-1	0.557 0	2.689	0.306 3	1.760	0.453 6	5.766
190511-2	0.559 0	2.240	0.304 7	1.782	0.451 7	5.337
190512-1	0.563 2	2.534	0.307 4	1.799	0.459 5	5.663
190512-2	0.578 8	2.301	0.309 5	1.774	0.457 6	5.421
190513-1	0.584 3	2.482	0.317 5	1.808	0.468 7	5.660
190513-2	0.587 1	2.356	0.320 2	1.810	0.473 1	5.546
190514-1	0.630 8	2.270	0.325 5	1.821	0.495 8	5.543
190514-2	0.621 6	2.400	0.323 3	1.828	0.492 9	5.666
190515-1	0.615 5	2.286	0.322 9	1.820	0.505 7	5.550
190515-2	0.613 3	2.408	0.321 6	1.844	0.499 8	5.687
Mean	0.591 5	2.386	0.315 9	1.856	0.478 8	5.628
RSD	3.83	4.30	2.74	3.29	3.84	2.56

HPLC-CAD法同时测定腰痹通胶囊中5种皂苷含量

PDF下载

斯乐婷 , 倪鸿飞 , 李倩 , 栾连军 , 陈勇 , 刘雪松 , 吴永江 ^*

药学学报 | 研究论文 2020,55(10): 2449-2453

收起

药学学报 | 研究论文 2020, 55(10): 2449-2453

HPLC-CAD法同时测定腰痹通胶囊中5种皂苷含量

全屏

斯乐婷, 倪鸿飞, 李倩, 栾连军, 陈勇, 刘雪松, 吴永江^*

作者信息

浙江大学药学院, 浙江杭州 310058

通讯作者:

*吴永江, Tel:86-571-88208455, E-mail:yjwu@zju.edu.cn

Simultaneous determination of five saponins in Yaobitong capsule by HPLC-CAD

Le-ting SI, Hong-fei NI, Qian LI, Lian-jun LUAN, Yong CHEN, Xue-song LIU, Yong-jiang WU^*

Affiliations

College of Pharmaceutical Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China

出版时间: 2020-10-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2020-1129

文章导航

摘要

收起

建立了高效液相色谱法联合电雾式检测器（charged aerosol detector，CAD）同时测定腰痹通胶囊中5种皂苷（三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd）含量，为腰痹通胶囊的质量控制提供了方法依据。以甲醇提取样品，色谱柱为Waters XBridge Phenol（150 mm×4.6 mm，3.5 μm），以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，柱温为30℃，流速为1.0 mL·min^-1，进样量为10 μL。电雾式检测器的雾化温度为35℃，气压为60.2 psi，滤波为3.6 s，采集频率为5 Hz。三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的线性关系良好，线性范围分别为16.96~203.5 μg·mL^-1（R²=0.999 3）、54.46~653.5 μg·mL^-1（R²=0.999 3）、10.96~131.5 μg·mL^-1（R²=0.999 6）、51.50~618.0 μg·mL^-1（R²=0.999 0）、15.94~191.3 μg·mL^-1（R²=0.999 4），平均回收率分别为98.96%、100.8%、94.76%、100.1%、103.1%，RSD分别为0.87%、1.46%、1.85%、2.06%、0.96%（n=6）。结果表明，此方法准确、简便、可靠，可用于腰痹通胶囊中5种皂苷的含量测定。

关键词

腰痹通胶囊 / HPLC-CAD / 三七皂苷 / 人参皂苷 / 含量测定

Abstract

收起

A high performance liquid chromatography charged aerosol detector (HPLC-CAD) method was established for the simultaneous determination of five saponins (notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re, ginsenoside Rb1, Ginsenoside Rd) in Yaobitong capsule, providing a method for quality control. The sample was extracted with methanol and chromatographic separation was performed on a Waters Xbridge Phenol column (150 mm×4.6 mm, 3.5 μm) using acetonitrile-water as the mobile phase with gradient elution at a flow rate of 1.0 mL·min^-1. The column temperature was 30℃ and the injection volume was 10 μL. The nebulizer temperature of CAD was 35℃ and the air pressure was 60.2 psi, the filtration was 3.6 s, and the collection frequency was 5 Hz. Notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re, ginsenoside Rb1 and ginsenoside Rd showed a good linear relationship in the range of 16.96-203.5 μg·mL^-1 (R²=0.999 3), 54.46-653.5 μg·mL^-1 (R²=0.999 3), 10.96-131.5 μg·mL^-1 (R²=0.999 6), 51.50-618.0 μg·mL^-1 (R²=0.999 0), 15.94-191.3 μg·mL^-1 (R²=0.999 4), respectively. The average recoveries were 98.96%, 100.8%, 94.76%, 100.1%, 103.1%, and RSDs were 0.87%, 1.46%, 1.85%, 2.06%, 0.96% (n=6), respectively. The proposed method is accurate, simple and reliable, and can be used for the determination of five saponins in Yaobitong capsule.

Key words

Yaobitong capsule / HPLC-CAD / notoginsenoside / ginsenoside / content determination

引用本文

斯乐婷, 倪鸿飞, 李倩, 栾连军, 陈勇, 刘雪松, 吴永江. HPLC-CAD法同时测定腰痹通胶囊中5种皂苷含量. 药学学报, 2020 , 55 (10) : 2449 -2453 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2020-1129

Le-ting SI, Hong-fei NI, Qian LI, Lian-jun LUAN, Yong CHEN, Xue-song LIU, Yong-jiang WU. Simultaneous determination of five saponins in Yaobitong capsule by HPLC-CAD[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2020 , 55 (10) : 2449 -2453 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2020-1129

正文

收起

腰痹通胶囊由三七、川芎、延胡索、白芍、牛膝、狗脊、熟大黄、独活八味中药制成^[1], 在治疗腰椎间盘突出症上疗效显著, 能明显减少患者疼痛^[2]。三七为腰痹通胶囊方中君药, 其主要活性部位为皂苷类成分, 具有散瘀止血、消肿定痛^{[3, 4]}的药效。腰痹通胶囊收录于2020版《中国药典》 (一部), 仅以人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1作为质量评价指标。目前已有文献研究采用一测多评法^[5]、指纹图谱法^[6]等建立腰痹通胶囊多指标含量测定方法, 但多采用紫外检测器进行检测。皂苷类成分由于仅有紫外末端吸收, 在用紫外检测器检测时, 常出现基线波动大、重现性差等问题, 严重影响腰痹通胶囊质量检测的稳定性, 而且样品前处理繁琐。

电雾式检测器(charged aerosol detector, CAD)作为一种新型的检测器, 灵敏度高, 通用性强, 尤其适用于无紫外吸收或弱紫外吸收的物质检测, 已逐渐被用于中药成分分析^[7-10]。为更全面控制腰痹通胶囊质量, 优化检测方法, 本文采用HPLC-CAD同时测定腰痹通胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd等5种皂苷类成分含量, 同时考察了CAD的参数设置对检测结果的影响, 以期为中药皂苷类等无紫外吸收成分的分析提供参考。

材料与方法

收起

仪器 Thermo Scientific UltiMate 3000高效液相色谱仪(美国Thermo Fisher公司), 配有GPG-3600SD双三元梯度泵, WPS-3000自动进样器, TCC-3x00 (RS)柱温箱, VWD-3x00 (RS)检测器, Corona Veo电雾式检测器; XS105十万分之一电子分析天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司]; FA2004B万分之一电子分析天平(上海越平科学仪器有限公司); Milli-Q超纯水仪(美国Millipore公司)。

试药、试剂与样品 三七皂苷R1对照品(批号MUST-18121705, 纯度99.98%)、人参皂苷Rg1对照品(批号MUST-19022811, 纯度99.16%)、人参皂苷Re对照品(批号MUST-19072510, 纯度98.72%)、人参皂苷Rb1 (批号MUST-19060116, 纯度98.58%)和人参皂苷Rd (批号MUST-19060116, 纯度98.55%), 均购自成都曼思特生物技术有限公司。乙腈和甲醇(HPLC级, 北京百灵威科技有限公司); 实验用水为超纯水, 其余试剂均为分析纯。22批(190505-1、190505-2、190506-1、190506-2、190507-1、190507-2、190508-1、190508-2、190509-1、190509-2、190510-1、190510-2、190511-1、190511-2、190512-1、190512-2、190513-1、190513-2、190514-1、190514-2、190515-1、190515-2)腰痹通胶囊成品由江苏康缘药业股份有限公司提供。

对照品溶液制备 取适量三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd对照品, 精密称定, 置25 mL量瓶中, 用甲醇溶解并定容至刻度, 摇匀, 制成质量浓度分别为0.339 2、1.089 2、0.219 2、1.030 0和0.318 8 mg·mL^-1的混合对照品储备液。

供试品溶液制备 取腰痹通胶囊内容物, 研细后取0.5 g, 精密称定, 置于250 mL锥形瓶中, 用移液管精密加入甲醇50 mL, 称定重量, 加热回流30 min, 放冷, 用甲醇补足减失的重量, 以4 000 r·min^-1的转速离心5 min后用0.22 μm的滤膜过滤, 即得供试品溶液。

色谱条件 色谱柱: Waters XBridge Phenol (150 mm×4.6 mm, 3.5 μm); 流动相:乙腈(A)-水(B), 梯度洗脱程序如下: 0~18 min, 15% A→21% A; 18~30 min, 21% A→23% A; 30~50 min, 23% A→32% A; 50~60 min, 32% A→34% A; 60~65 min, 34% A→60% A。柱温: 30 ℃, 流速: 1.0 mL·min^-1, 进样量: 10 μL。CAD雾化温度: 35 ℃; 气压: 60.2 psi (1 psi ≈ 6.9 kPa); 滤波: 3.6 s; 采集频率: 5 Hz。

方法学验证

专属性取空白溶剂、混合对照品溶液和供试品溶液, 在上述色谱条件下进样分析, 比较空白溶剂、混合对照品和供试品的色谱图。

线性关系精密移取0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00和6.00 mL混合对照品储备液, 用甲醇稀释至10 mL, 制成一系列浓度混合对照品溶液, 在上述色谱条件下进样分析, 记录色谱图。以对照品浓度为横坐标(X), 峰面积为纵坐标(Y), 分别计算5种皂苷的线性回归方程和相关系数。

精密度取腰痹通胶囊(批号: 190508-1), 按“供试品溶液制备”方法制得供试品溶液, 在上述色谱条件下连续进样6针, 分别记录5种皂苷成分的峰面积, 计算RSD值。

重复性取同一批腰痹通胶囊内容物(批号: 190508-1) 6份, 按“供试品溶液制备”方法平行制备6份供试品溶液, 在上述色谱条件下进样分析, 测定5种皂苷成分含量, 计算RSD值。

加样回收率取同一批已知含量的腰痹通胶囊内容物(批号: 190508-1) 6份, 按5种皂苷成分含量的100%水平加入对照品, 按“供试品溶液制备”方法制备供试品溶液, 在上述色谱条件下进样分析, 测定5种皂苷成分含量, 计算平均加样回收率和RSD。

稳定性取腰痹通胶囊(批号: 190508-1), 按“供试品溶液制备”方法制得供试品溶液, 分别置于室温0、4、8、12、16、20和24 h时后, 在上述色谱条件下进样分析, 记录5种皂苷成分的峰面积, 计算RSD。

含量测定分别取22批腰痹通胶囊按“供试品溶液制备”方法制得供试品溶液, 在上述色谱条件下进样分析, 测定5种皂苷成分的含量, 计算含量平均值和RSD。

结果

收起

1 方法学验证

1.1 专属性

空白溶剂、混合对照品和供试品溶液的液相色谱图如图 1所示。从图中可知, 样品中其他成分及空白溶剂对测定指标成分无影响, 且结果表明, 5种指标成分的理论塔板数均大于40 000, 色谱峰分离度均大于1.5, 峰形对称。

1.2 线性关系

三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd分别在16.96~203.5、54.46~653.5、10.96~131.5、51.5~618.0和15.94~191.3 μg·mL^-1内呈良好线性关系, R²均在0.999 0以上, 结果见表 1。

1.3 精密度

5种皂苷成分峰面积RSD分别为1.31%、1.15%、1.20%、1.98%和0.14%, 表明仪器的精密度良好。

1.4 重复性

5种皂苷成分含量RSD分别为1.69%、1.88%、1.98%、1.45%和1.84%, 表明该方法重复性良好。

1.5 加样回收率

5种皂苷成分的加样回收率分别为98.96%、100.8%、94.76%、100.1%和103.1%, RSD分别为0.87%、1.46%、1.85%、2.06%和0.96%, 结果见表 2。

2 含量测定

按上述方法, 测得22批腰痹通胶囊中5种皂苷的含量平均值分别为0.5915%、2.386%、0.3159%、1.856%和0.4788%, RSD分别为3.83%、4.30%、2.73%、3.29%和3.83%。将5种皂苷含量相加得到三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS), 计算平均含量为5.628%, RSD为2.56%, 结果见表 3, 表明腰痹通胶囊批次间皂苷类成分含量无显著差异, 批次间一致性较好, 工艺稳定。

讨论

收起

2020版《中华人民共和国药典》采用加热回流萃取法测定腰痹通胶囊中人参皂苷Rg1与人参皂苷Rb1含量, 该法操作繁琐复杂, 萃取过程易造成有效成分损失。实验首先比较了加热回流、加热回流萃取两种处理方法对含量测定的影响, 结果表明, 萃取过程仅除去一部分大极性杂质, 对主要成分影响不大, 且萃取过程消耗大量饱和正丁醇, 耗时较长, 故选择加热回流法; 其次比较了两种提取方式(超声提取、加热回流提取)的提取效果, 结果发现加热回流提取效果更佳; 在此基础上, 分别对提取溶剂(50%甲醇、水、纯甲醇、纯乙醇)和提取时间(0.5、1和1.5 h)进行了考察, 结果表明纯甲醇提取0.5 h即可提取完全。

比较了CORTECS C₁₈柱(150 mm×4.6 mm, 2.7 μm)、XSelect CSH TM C₁₈柱(150 mm×4.6 mm, 3.5 μm)、XBridge Phenol柱(150 mm×4.6 mm, 3.5 μm), 三种型号的色谱柱均能满足各色谱峰基线分离的要求, 其中XBridge Phenol柱的分离效果、各色谱峰理论塔板数及对称因子均最佳, 故选用此色谱柱。还考察了不同流速(0.8、0.9、1.0和1.1 mL·min^-1)和不同柱温(30、35和40 ℃)对色谱峰分离效果的影响, 结果表明柱温为30 ℃时, 分离效果最佳, 且低温有利于保护色谱柱。随着流速的加快, 出峰时间前移, 但均能满足各色谱峰分离度 > 1.5的要求。故选用了较低的柱温30 ℃和最常用的流速1.0 mL·min^-1。

研究过程中串联了紫外检测器和电雾式检测器, 将紫外检测图谱与CAD图谱进行比较, 结果发现紫外检测图谱易出现基线漂移, CAD图谱基线更平稳, 重现性更好, 对三萜皂苷类成分的测定具有明显优势。本实验还对CAD的检测参数进行了优化, 分别设定雾化温度为35和50 ℃进样分析, 结果表明, 雾化温度对各成分的分离效果无影响, 雾化温度为50 ℃时各成分响应明显减小, 故设定雾化温度为35 ℃, 与柱温相近, 不易产生因温差带来的波动。幂律因子(power function value, PFV)是影响CAD测定含量的重要参数之一, 有文献^[11]提出幂律因子对方法的线性与加样回收率均有一定影响。实验比较了幂律因子在1.00、1.20、1.25、1.30、1.35和1.40时的线性, 结果表明, R²随着幂律因子的增加先升高后又有所下降。在此基础上, 考察了幂律因子对加样回收率的影响, 结果表明, 幂律因子的改变对加样回收率的影响不大, 均能达到回收率的要求。综合幂律因子对线性和加样回收率的影响, 三七皂苷R1、人参皂苷Re可选择的幂律因子为1.20、1.25、1.30、1.35和1.40, 人参皂苷Rg1和Rb1可选择的幂律因子为1.35和1.40, 人参皂苷Rd可选择的幂律因子为1.25、1.30、1.35和1.40。本实验5种皂苷成分最终选择的幂律因子分别为1.20、1.25、1.35、1.25和1.35。

本研究以腰痹通胶囊为研究对象, 首次建立了HPLC-CAD同时测定腰痹通胶囊中5种皂苷成分的方法, 同时对提取条件、色谱条件、CAD雾化温度和幂律因子等参数进行了优化。方法学验证表明, 所建立的含量测定方法满足定量要求, 且简单易行, 为腰痹通胶囊的多指标质量控制提供了方法基础, 同时也为CAD用于其他含三七药材制剂质量研究提供了参考。

作者贡献:斯乐婷为第一作者, 负责实验设计、液相条件的摸索和稿件编写, 倪鸿飞和李倩分别负责液相数据分析、文献的研究和整理, 栾连军、陈勇、刘雪松提出实验思路, 负责指导实验设计, 通讯作者吴永江全面负责实验设计、稿件撰写与修改等。

利益冲突:所有作者均声明不存在利益冲突。

基金

收起

国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2018ZX09201-010)

参考文献

收起

文献

收起

参考文献引证文献

排序方式：

[1]

Chinese Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of the People's Republic of China (中华人民共和国药典)[S]. Part 1. Beijing: China Medical Science Press, 2020: 1805-1807.

[2]

. Therapeutic effect of Yaobitong capsules on prolapse of lumbar intervertebral disc and its influence on IL-6 and IL-8[J]. Med J Air Force (空军医学杂志), 2018, 34: 199-201. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=kjzyyxb201803015

[3]

Chen

, Chen

, Lu

et al . Advances in pharmacological of Panax notoginseng saponins[J]. Hunan J Tradit Chin Med (湖南中医杂志), 2019, 35: 154-157.

[4]

Guo

, Wang

, Gu

et al . The progress of pharmacological study of Panax notoginseng saponins in preventing deep venous thrombosis[J]. Jiangsu J Tradit Chin Med (江苏中医药), 2019, 51: 90-93.

[5]

Dai

, Sun

, Li

et al . Simultaneous determination of five saponins in Yao-Bi-Tong capsules by QAMS[J]. Mod Tradit Chin Med Mater Med-World Sci Technol (世界科学技术-中医药现代化), 2014, 16: 2227-2232. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=sjkxjs-zyxdh201410031

[6]

, Deng

, Xiao

et al . Study on HPLC fingerprint of Yaobitong capsules[J]. J Shenyang Pharm Univ (沈阳药科大学学报), 2020, 37: 429-432. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=syykdxxb202005009

[7]

Liao

, Liu

, Wang

. Determination of the contents of saikosaponin a, b₂ and d in Bupleurum Chinense from different habitats by HPLC-CAD[J]. J Sichuan Tradit Chin Med (四川中医), 2020, 38: 62-66. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=sczy202001021

[8]

Yan

, Wu

, Gao

. Determination of four kinds of saponnins in Rhizoma Anemarrhenae before and after processing by HPLC-CAD[J]. Res Pract Chin Med (现代中药研究与实践), 2019, 33: 46-49. http://en.cnki.com.cn/Article_en/CJFDTotal-JZZY201901012.htm

[9]

Long

, Zhao

. Determination of terpene lactones in Gingko tablets by high performance liquid chromatography-charged aerosol detector[J]. Cent South Pharm (中南药学), 2020, 18: 105-107. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=znyx202001022

[10]

Xing

, Song

. Simultaneous determination of seven active constituents in Qianbai Biyan Tablets by HPLC-CAD[J]. China Pharm (中国药师), 2020, 23: 1216-1219. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=zgys202006049

[11]

Wang

, Liu

, Yue

et al . Comparison between the charged aerosol detector and evaporative light scattering detector for the analysis of sugar in Zhusheyong Yiqifumai and the study on the accuracy of methods[J]. China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2020. DOI:10.19540/j.cnki.cjcmm.20200221.306.

https://doi.org/10.19540/j.cnki.cjcmm.20200221.306

2020年第55卷第10期

PDF下载

125

引用本文

BibTeX

文章信息

doi: 10.16438/j.0513-4870.2020-1129

接收时间：2020-07-06
首发时间：2026-01-23
出版时间：2020-10-12

补充材料

相关文章

文章信息

作者

出版历史

收稿日期：2020-07-06
修回日期：2020-08-26

基金

国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2018ZX09201-010)

作者信息

浙江大学药学院, 浙江杭州 310058

通讯作者:

*吴永江, Tel:86-571-88208455, E-mail:yjwu@zju.edu.cn

参考文献

分享链接

https://castjournals.cast.org.cn/joweb/yxxb/CN/10.16438/j.0513-4870.2020-1129

分享至

全文二维码

扫描看全文

引用本文

BibTeX

本文的引用情况

2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

关闭全屏

BibTeX
EndNote
RefWorks
TxT

Analyte	Regressive equation	R²	Linear range/μg·mL^-1
Notoginsenoside R1	Y = 0.039 5X + 0.052 1	0.999 3	16.96-203.5
Ginsenoside Rg1	Y = 0.054 6X - 0.032 9	0.999 3	54.46-653.5
Ginsenoside Re	Y = 0.074 3X - 0.041 0	0.999 6	10.96-131.5
Ginsenoside Rb1	Y = 0.076 4X + 0.287 8	0.999 0	51.50-618.0
Ginsenoside Rd	Y = 0.062 7X + 0.041 7	0.999 4	15.94-191.3

Analyte

Regressive equation

R²

Linear range/μg·mL^-1

Notoginsenoside R1

Y = 0.039 5X + 0.052 1

0.999 3

16.96-203.5

Ginsenoside Rg1

Y = 0.054 6X - 0.032 9

0.999 3

54.46-653.5

Ginsenoside Re

Y = 0.074 3X - 0.041 0

0.999 6

10.96-131.5

Ginsenoside Rb1

Y = 0.076 4X + 0.287 8

0.999 0

51.50-618.0

Ginsenoside Rd

Y = 0.062 7X + 0.041 7

0.999 4

15.94-191.3

Analyte	Weight/g	Origin/mg	Added/mg	Found/mg	Recovery/%	Mean Recovery/%	RSD/%
Notoginsenoside R1	0.250 1	1.569	1.528	3.096	99.97	98.96	0.87
0.250 2	1.569	1.528	3.074	98.49
0.250 1	1.569	1.528	3.099	100.2
0.250 0	1.568	1.528	3.073	98.50
0.2500	1.568	1.528	3.068	98.20
0.249 9	1.567	1.528	3.072	98.46
Ginsenoside Rg1	0.249 9	5.943	6.225	12.178	100.2	100.8	1.46
0.250 0	5.945	6.225	12.071	98.40
0.250 2	5.950	6.225	12.355	102.9
0.250 1	5.948	6.225	12.244	101.1
0.250 2	5.950	6.225	12.254	101.3
0.250 2	5.950	6.225	12.231	100.9
Ginsenoside Re	0.250 1	0.852	1.060	1.840	93.20	94.76	1.85
0.250 1	0.852	1.060	1.865	95.61
0.250 1	0.852	1.060	1.865	95.59
0.250 0	0.851	1.060	1.832	92.55
0.249 9	0.851	1.060	1.882	97.30
0.249 9	0.851	1.060	1.851	94.31
Ginsenoside Rb1	0.250 1	5.176	5.024	10.176	99.52	100.1	2.06
0.249 8	5.169	5.024	10.035	96.85
0.249 9	5.174	5.024	10.339	102.8
0.250 0	5.172	5.024	10.285	101.8
0.249 9	5.174	5.024	10.203	100.1
0.250 0	5.172	5.024	10.178	99.66
Ginsenoside Rd	0.250 1	1.251	1.256	2.558	104.1	103.1	0.96
0.250 1	1.251	1.256	2.532	102.0
0.250 2	1.251	1.256	2.539	102.5
0.250 1	1.251	1.256	2.537	102.4
0.250 0	1.250	1.256	2.563	104.5
0.250 0	1.250	1.256	2.545	103.0

Analyte

Weight/g

Origin/mg

Added/mg

Found/mg

Recovery/%

Mean Recovery/%

RSD/%

Notoginsenoside R1

0.250 1

1.569

1.528

3.096

99.97

98.96

0.87

0.250 2

1.569

1.528

3.074

98.49

0.250 1

1.569

1.528

3.099

100.2

0.250 0

1.568

1.528

3.073

98.50

0.2500

1.568

1.528

3.068

98.20

0.249 9

1.567

1.528

3.072

98.46

Ginsenoside Rg1

0.249 9

5.943

6.225

12.178

100.2

100.8

1.46

0.250 0

5.945

6.225

12.071

98.40

0.250 2

5.950

6.225

12.355

102.9

0.250 1

5.948

6.225

12.244

101.1

0.250 2

5.950

6.225

12.254

101.3

0.250 2

5.950

6.225

12.231

100.9

Ginsenoside Re

0.250 1

0.852

1.060

1.840

93.20

94.76

1.85

0.250 1

0.852

1.060

1.865

95.61

0.250 1

0.852

1.060

1.865

95.59

0.250 0

0.851

1.060

1.832

92.55

0.249 9

0.851

1.060

1.882

97.30

0.249 9

0.851

1.060

1.851

94.31

Ginsenoside Rb1

0.250 1

5.176

5.024

10.176

99.52

100.1

2.06

0.249 8

5.169

5.024

10.035

96.85

0.249 9

5.174

5.024

10.339

102.8

0.250 0

5.172

5.024

10.285

101.8

0.249 9

5.174

5.024

10.203

100.1

0.250 0

5.172

5.024

10.178

99.66

Ginsenoside Rd

0.250 1

1.251

1.256

2.558

104.1

103.1

0.96

0.250 1

1.251

1.256

2.532

102.0

0.250 2

1.251

1.256

2.539

102.5

0.250 1

1.251

1.256

2.537

102.4

0.250 0

1.250

1.256

2.563

104.5

0.250 0

1.250

1.256

2.545

103.0

Sample No.	Notoginsenoside R1	Ginsenoside Rg1	Ginsenoside Re	Ginsenoside Rb1	Ginsenoside Rd	PNS
190505-1	0.627 7	2.465	0.327 5	1.960	0.495 3	5.876
190505-2	0.617 0	2.442	0.329 2	1.972	0.496 7	5.857
190506-1	0.604 2	2.417	0.323 7	1.915	0.484 0	5.744
190506-2	0.600 4	2.387	0.315 9	1.921	0.479 0	5.703
190507-1	0.586 6	2.350	0.317 9	1.897	0.470 2	5.622
190507-2	0.577 8	2.380	0.314 2	1.871	0.470 1	5.613
190508-1	0.595 9	2.440	0.322 0	1.923	0.519 3	5.800
190508-2	0.586 8	2.394	0.317 6	1.894	0.479 9	5.672
190509-1	0.572 1	2.295	0.303 3	1.849	0.466 2	5.486
190509-2	0.575 5	2.322	0.306 0	1.840	0.469 1	5.513
190510-1	0.561 7	2.253	0.298 3	1.819	0.459 4	5.391
190510-2	0.596 3	2.386	0.315 0	1.920	0.487 1	5.704
190511-1	0.557 0	2.689	0.306 3	1.760	0.453 6	5.766
190511-2	0.559 0	2.240	0.304 7	1.782	0.451 7	5.337
190512-1	0.563 2	2.534	0.307 4	1.799	0.459 5	5.663
190512-2	0.578 8	2.301	0.309 5	1.774	0.457 6	5.421
190513-1	0.584 3	2.482	0.317 5	1.808	0.468 7	5.660
190513-2	0.587 1	2.356	0.320 2	1.810	0.473 1	5.546
190514-1	0.630 8	2.270	0.325 5	1.821	0.495 8	5.543
190514-2	0.621 6	2.400	0.323 3	1.828	0.492 9	5.666
190515-1	0.615 5	2.286	0.322 9	1.820	0.505 7	5.550
190515-2	0.613 3	2.408	0.321 6	1.844	0.499 8	5.687
Mean	0.591 5	2.386	0.315 9	1.856	0.478 8	5.628
RSD	3.83	4.30	2.74	3.29	3.84	2.56

Sample No.

Notoginsenoside R1

Ginsenoside Rg1

Ginsenoside Re

Ginsenoside Rb1

Ginsenoside Rd

PNS

190505-1

0.627 7

2.465

0.327 5

1.960

0.495 3

5.876

190505-2

0.617 0

2.442

0.329 2

1.972

0.496 7

5.857

190506-1

0.604 2

2.417

0.323 7

1.915

0.484 0

5.744

190506-2

0.600 4

2.387

0.315 9

1.921

0.479 0

5.703

190507-1

0.586 6

2.350

0.317 9

1.897

0.470 2

5.622

190507-2

0.577 8

2.380

0.314 2

1.871

0.470 1

5.613

190508-1

0.595 9

2.440

0.322 0

1.923

0.519 3

5.800

190508-2

0.586 8

2.394

0.317 6

1.894

0.479 9

5.672

190509-1

0.572 1

2.295

0.303 3

1.849

0.466 2

5.486

190509-2

0.575 5

2.322

0.306 0

1.840

0.469 1

5.513

190510-1

0.561 7

2.253

0.298 3

1.819

0.459 4

5.391

190510-2

0.596 3

2.386

0.315 0

1.920

0.487 1

5.704

190511-1

0.557 0

2.689

0.306 3

1.760

0.453 6

5.766

190511-2

0.559 0

2.240

0.304 7

1.782

0.451 7

5.337

190512-1

0.563 2

2.534

0.307 4

1.799

0.459 5

5.663

190512-2

0.578 8

2.301

0.309 5

1.774

0.457 6

5.421

190513-1

0.584 3

2.482

0.317 5

1.808

0.468 7

5.660

190513-2

0.587 1

2.356

0.320 2

1.810

0.473 1

5.546

190514-1

0.630 8

2.270

0.325 5

1.821

0.495 8

5.543

190514-2

0.621 6

2.400

0.323 3

1.828

0.492 9

5.666

190515-1

0.615 5

2.286

0.322 9

1.820

0.505 7

5.550

190515-2

0.613 3

2.408

0.321 6

1.844

0.499 8

5.687

Mean

0.591 5

2.386

0.315 9

1.856

0.478 8

5.628

RSD

3.83

4.30

2.74

3.29

3.84

2.56