药学学报

Group	Dosage /mg·kg^-1	Adhesions grade	Assessed value
Normal group	-	9	1	0	0	0	6.15
Model group	-	0	0	2	3	5	46.80^##
Dexamethasone	2	0	4	3	3	0	28.65^**
RIN low dosage	3	0	2	2	3	3	39.00
RIN middle dosage	6	0	3	3	3	1	32.55^*
RIN high dosage	12	0	4	3	2	1	29.85^*

Group

Dosage /mg·kg^-1

Adhesions grade

Assessed value

Normal group

6.15

Model group

46.80^##

Dexamethasone

28.65^**

RIN low dosage

39.00

RIN middle dosage

32.55^*

RIN high dosage

29.85^*

Group	Dosage /mg·kg^-1	Adhesions grade	Assessed value
Normal group	-	9	1	0	0	0	6.15
Model group	-	0	0	2	3	5	46.80^##
Dexamethasone	2	0	4	3	3	0	28.65^**
RIN low dosage	3	0	2	2	3	3	39.00
RIN middle dosage	6	0	3	3	3	1	32.55^*
RIN high dosage	12	0	4	3	2	1	29.85^*

Group

Dosage /mg·kg^-1

Adhesions grade

Assessed value

Normal group

6.15

Model group

46.80^##

Dexamethasone

28.65^**

RIN low dosage

39.00

RIN middle dosage

32.55^*

RIN high dosage

29.85^*

钩藤碱通过抑制Smad信号通路磷酸化减轻腹腔粘连发生的作用机制

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宋宇 ^* , 张慧 , 刘瑞丽 , 海广范 , 王童 , 岳佳新 , 张炜丽 , 任禹珂

药学学报 | 研究论文 2017,52(2): 229-235

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药学学报 | 研究论文 2017, 52(2): 229-235

钩藤碱通过抑制Smad信号通路磷酸化减轻腹腔粘连发生的作用机制

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宋宇^*, 张慧, 刘瑞丽, 海广范, 王童, 岳佳新, 张炜丽, 任禹珂

作者信息

新乡医学院药学院, 河南新乡 453000

通讯作者:

* 宋宇, Tel:86-373-3029101, E-mail:songyugzyx@163.com

Prevention of abdominal adhesions in rats by rhynchophylline through inhibition of Smad singnaling pathway

Yu SONG^*, Hui ZHANG, Rui-li LIU, Guang-fan HAI, Tong WANG, Jia-xin YUE, Wei-li ZHANG, Yu-ke REN

Affiliations

College of Pharmacy, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453000, China

出版时间: 2017-02-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2016-0798

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摘要

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腹腔粘连是临床上术后常见的并发症，目前临床上还没有较好的针对性药物，临床防治主要依靠物理手段或激素。钩藤碱是传统中药钩藤的主要有效成分。本课题观察了钩藤碱对实验性腹腔粘连的防治效果，实验结果显示，钩藤碱可剂量依赖地减轻腹腔粘连的程度，显著降低大鼠血清白介素-6（interleukin-6，IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及腹腔液中转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）和结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）的蛋白含量。表明其防治腹腔粘连作用的机制可能与抑制炎症因子和TGF-β1/Smad信号通路有关。

关键词

钩藤碱 / 腹腔粘连 / 转化生长因子β1 / 结缔组织生长因子

Abstract

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Postoperative intra-abdominal adhesion is one of the most common complications in the postoperative period. Current remedies are very ineffective to prevent the pathological outcomes except steroid hormones. Rhynchophylline is deemed as a pharmacologically active component from traditional Oriental medicine Uncaria rhynchophylla (Miq.) Jacks. (Rubiaceae). This study was designed to investigate the preventative effect of rhynchophylline on the abdominal adhesions in rats. Rhynchophylline relieved the experimental abdominal adhesion and decreased the levels of interleukin-1β (IL-1β), interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) in the blood serum in a dose-dependent manner. The levels of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) and connective tissue growth factor (CTGF) were reduced significantly in the peritoneal fluid. The potential mechanism of the activity is related to inhibition of the TGF-β1/Smad signaling pathway.

Key words

rhynchophylline / abdominal adhesion / transforming growth factor-β1 / connective tissue growth factor

引用本文

宋宇, 张慧, 刘瑞丽, 海广范, 王童, 岳佳新, 张炜丽, 任禹珂. 钩藤碱通过抑制Smad信号通路磷酸化减轻腹腔粘连发生的作用机制. 药学学报, 2017 , 52 (2) : 229 -235 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2016-0798

Yu SONG, Hui ZHANG, Rui-li LIU, Guang-fan HAI, Tong WANG, Jia-xin YUE, Wei-li ZHANG, Yu-ke REN. Prevention of abdominal adhesions in rats by rhynchophylline through inhibition of Smad singnaling pathway[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2017 , 52 (2) : 229 -235 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2016-0798

正文

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腹腔粘连是腹部外科手术后常见的并发症, 发生率高达90%以上, 可导致严重的并发症, 如肠梗阻、腹痛和女性不孕不育等^{[1, 2]}。多年来, 国内外学者为此进行了大量的实验与临床探索, 迄今尚无理想的预防方法。腹腔粘连形成过程十分复杂, 其发生的确切机制目前尚不完全清楚。腹腔粘连的主要病理学特点是腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells, HPMC)的脱落、胶原纤维排列混乱、细胞外基质沉积及基底膜增厚。其形成与多种因素有关, 一方面, 在正常生理情况下, 完整的腹膜间皮细胞具有激活纤溶酶原的活性以溶解纤维蛋白, 使粘连无法形成。当各种因素导致腹膜炎症和损伤时, 不仅不能激活纤溶酶原的活性, 而且受损的间皮细胞可产生纤溶酶原激活抑制物, 当纤溶酶原受到抑制后, 将形成永久性纤维粘连。另一方面, 多种生长因子和细胞因子参与调控纤维蛋白沉积和降解之间的平衡, 其中转化生长因子β1 (transforming growth factor beta 1, TGF-β1)、纤连蛋白(fibronectin, FN)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)与粘连的形成关系密切。其中, TGF-β1作为组织纤维化病变中最重要的促发因子之一已经得到共识, 因此目前的研究多集中在细胞因子参与调控纤维蛋白沉积和降解之间的平衡和炎性因子在其病理过程中的作用^{[3, 4]}。中药在治疗和预防术后腹腔粘连中有其独特的效果^{[5, 6]}。钩藤碱(rhynchophylline, RIN)是从中药材钩藤中分离、提纯的生物碱, 前期研究表明钩藤碱具有钙拮抗剂作用、抗炎作用以及降压和缺血保护等药理效应; 钩藤碱的临床应用研究非常广泛, 尤其是对中枢炎症的治疗^[7-9]。因此, 近年来作者尝试将钩藤及其有效成分钩藤碱用于防治术后腹腔粘连和粘连性肠梗阻。本课题组对钩藤碱进行了药效学实验, 研究了钩藤碱对实验性腹腔粘连大鼠的保护作用, 通过对血清中白介素-1β (interleukin-1β, IL-1β)、白介素-6 (interleukin-6, IL-6)和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α)及腹腔液中TGF-β1、CTGF、纤溶酶源激活剂(tissue plasminogen activator, t-PA)、纤溶酶源激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor, PAI)的含量测定, 观察其对腹腔粘连防治作用的效果。同时观察了钩藤碱对TGF-β1刺激的腹膜间皮细胞功能的影响和对Smad信号通路的调节作用, 从多方面阐明了钩藤碱抗腹腔粘连发生的作用机制。

材料与方法

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实验动物 雄性SD大鼠, 体重(250±20) g, SPF级, 购自山东鲁抗医药股份有限公司实验动物室, 生产许可证号: SCKX鲁20080003。

试剂与仪器 地塞米松(dexamethasone)购自广州白云山制药股份有限公司(批号: 130632235); IL-6、IL-1β、TNF-α酶联免疫吸附试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司; TGF-β1和CTGF酶联免疫试剂盒购自北京中杉金桥公司; FN ELISA检测试剂盒购自上海雄森公司; Multiskun Mk3酶标仪, 美国Thermo公司; 台式高速低温离心机, 德国Heraeus公司; 电子分析天平, 德国Sartorius公司; U-2001型紫外分光光度仪, HITACHI公司。钩藤碱购自安徽百草实验试剂有限公司, 纯度 > 98%。-20 ℃保存, 使用前生理盐水配制成1、2和4 mg·mL^-1的工作液。

动物分组及模型制备 大鼠被随机分为6组:模型组、正常对照组、钩藤碱高、中、低剂量组、地塞米松阳性对照组, 每组10只。分别作如下处理:各组大鼠禁食、不禁水, 腹腔注射3%戊巴比妥钠(45 mg·kg^-1)麻醉, 仰卧位固定, 消毒, 根据文献^[10]要求的腹腔粘连制作方法, 在无菌条件下取前正中切口2.0 cm进腹, 提出盲肠, 置于无菌纱布上约5 min, 使浆膜干燥, 在回盲部右侧面用什锦锉刀反复磨擦浆膜层至表面针尖状出血点, 形成约2.5 cm × 2.5 cm的受损创面后纳入腹腔, 逐层关腹, 缝合消毒。正常对照组开腹但不手术, 其余组均手术造模。阳性对照组大鼠腹腔注射地塞米松2 mg·kg^-1体重。钩藤碱低中高剂量组分别灌胃给予钩藤碱每天3、6和12 mg·kg^-1。从造模后第1天起, 按上述药量给药10天, 每天1次。

粘连程度分级判断标准 按照Nair^[11]制定的5级分类法, 确定分级标准。0级:完全无粘连; 1级:内脏间或内脏与腹壁间一条粘连带; 2级:内脏间或内脏与腹壁间两条粘连带; 3级:多于二条粘连带, 而内脏未直接粘连到腹壁; 4级:内脏直接粘连到腹壁, 而不管粘连带多少。实验结束后, 将动物处死, 取出盲肠部, 进行粘连程度评级。

血清IL-6、IL-1β和TNF-α检测 造模后第11天, 以3%水合氯醛腹腔注射麻醉, 下腔静脉取血, 以4 000 r·min^-1离心20min分离血清, 置于超低温冰箱中保存待测。采用酶联免疫吸附法测定IL-6、IL-1β和TNF-α水平, 严格按说明书要求操作。

ELISA法测定大鼠腹腔液TGF-β1、CTGF、PAI和t-PA的含量 按ELISA检测试剂盒要求, 抽取大鼠腹腔液, 5 000 r·min^-1离心5 min, 取上清液用蒸馏水按照1：10稀释, 制备成检测样品, 同时进行标准品的稀释与加样, 加样后的样品用封板膜封板后置37 ℃孵育30 min, 小心揭掉封板膜, 弃去液体, 甩干, 每孔加满洗涤液, 静置30 s后弃去, 如此重复5次, 甩干。每孔加入酶标试剂50 μL, 空白孔除外, 各孔先加入显色剂A 50 μL, 再加入显色剂B 50 μL, 轻轻振荡混匀, 37 ℃避光显色15 min; 以空白孔调零, 450 nm波长依序测量各孔的吸收度(OD值)。

大鼠腹膜间皮细胞的分离、培养和鉴定 在无菌条件下取健康大鼠部分大网膜, 在0.25%胰酶-0.01% EDTA灭菌离心管中消化15 min, 用15% FCS-F12终止消化, 4 ℃、1 000 r·min^-1离心10 min, 弃上清, 加5 mL完全培养基(15% FCS-F12、0.5 μg·mL^-1胰岛素、1 μg·mL^-1氢化可的松、5 μg·mL^-1转铁蛋白、2 μmol·mL^-1谷氨酰胺), 转入0.1%明胶包被的25 cm²培养瓶中, 补充青霉素100 u·mL^-1、链霉素100 u·mL^-1, 置入37 ℃、5% CO₂培养箱中培养。当细胞生长融合成单层, 用胰酶消化传代, 取第3代用于实验。培养细胞经倒置显微镜、透射电镜及扫描电镜鉴定95%以上为间皮细胞特征, 免疫组织化学染色人角蛋白和波形蛋白抗原阳性。

细胞分组和给药 取分离培养的第2代腹膜间皮细胞, 待细胞60%~70%融合, 更换无血清培养基培养24 h, 将细胞分成空白组; TGF-β1刺激组(TGF-β1 5 ng·mL^-1刺激细胞24 h); 钩藤碱组(TGF-β1 5 ng·mL^-1 + 48 µg·L^-1钩藤碱, 孵育细胞24 h); 溶剂对照组(TGF-β1 5 ng·mL^-1 + 0.2% DMSO, 孵育细胞24 h); 实验结束后取细胞上清液和胞体备用。

RT-PCR方法检测各组细胞的FN mRNA表达水平 引物序列利用Primer Primier 5.0软件进行设计, 并查询美国Gene-bank进行核对后, 委托宝生物工程(大连)有限公司合成。细胞总RNA的提取方法按试剂盒说明进行, 并测定总RNA浓度, 吸收度(A_{260 nm}/A_{280 nm})比值在1.8~2.0。然后将两次测值取平均值, 用2 400除以平均值, 就是该样本的RNA逆转录时所需的加样量。取总RNA 2 μg逆转录, FN引物序列为:上游5'-AGCCGCCACGTGCCAGGATTAC-3', 下游5'-CTTATGGGGGTGGCCGTTGTGG-3', 扩增片段长度为345 bp。GAPDH引物序列为:上游5'-CCAT GTTCGTCATGGGTGTGAACCA-3', 下游5'-GCCAG TAGAGGCAGGGATGATGTTC-3'扩增片段长度为251 bp。扩增条件: 65 ℃水浴5 min后立即置于冰上, 加入试剂的混合液, 振荡混匀后离心, 37 ℃水浴60 min, 95 ℃水浴5 min, -20 ℃保存备用, cDNA聚合酶连反应(PCR)扩增参数: 95 ℃预变性5 min, 95 ℃变性30 s, 60 ℃ (GAPDH)、57 ℃ (FN)退火30 s, 72 ℃延伸30 s, 35个循环, 72 ℃终末延伸10 min。扩增产物用1.7%琼脂糖凝胶电泳, 结果用凝胶成像及分析系统及相应的软件Quantity One进行电泳条带分析, FN相对含量用其目的条带(灰度值×面积)与GAPDH的(灰度值×面积)之间的比值表示。

ELISA检测培养上清液中FN的含量 按照操作说明书进行ELISA检测各组培养上清液FN含量, 选择在490 nm处检测吸收度值, FN浓度与吸收度值之间成正比, 通过标准曲线即可求出各组上清液中FN的浓度。

Western blot检测Ⅰ型胶原和Smad信号通路相关蛋白表达水平 实验结束后收集各组细胞, 按照磷酸化蛋白提取试剂盒说明书操作提取蛋白, 用BCA法蛋白定量。10%聚丙烯酰胺凝胶电泳, 上样量为80 μg蛋白, 按湿转法将电泳产物转移到PVDF膜, 5%的脱脂奶粉4 ℃封闭2 h, 滴加抗Smad2/3 (1：500)、p-Smad2/3 (1：200)、Smad7 (1：500)或β-actin (1：2 000)一抗4 ℃过夜, TBST洗3次, 辣根过氧化物酶标记的二抗(1：500)室温下孵育2 h, 10 mL TBST洗3次, 每次洗膜10 min, ECL试剂盒显色, 凝胶成像仪采集图像并用Quantity One软件进行数分析。

统计学处理 采用SPSS 19.0统计软件进行统计处理。数据采用均数±标准差($\overline{x}±s$)表示, 组间比较采用单因素方差分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。动物的粘连程度分级评分进行秩和检验。

结果

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1 整体观察

各组动物均无死亡, 所有动物均无切口裂开, 愈合情况较好。打开腹腔可以看到各组腹腔粘连程度不同。正常组仅有1例在第8天时在腹壁切口与肠管之间形成一轻微粘连带, 余者皆无粘连形成。模型组粘连组织明显, 呈带状并与肠壁连接紧密, 较难分离, 有5例壁层腹膜与网膜间及肠管的创面之间存在带状粘连组织, 粘连牢固。钩藤碱低剂量组均有较重程度的粘连现象。中剂量情况介于低剂量和高剂量组之间。高剂量组有4例形成轻微程度粘连, 疏松易分, 无和腹壁粘连的情况的发生; 2例子腹膜和肠管形成一定程度的粘连。

2 粘连程度评分

实验所有动物的粘连程度分级评分, 结果见表 1。与模型组比较, 钩藤碱中、高剂量组的腹腔粘连程度均明显减轻(P < 0.05), 其中高剂量组效果最好(P < 0.05), 地塞米松作用相似但更强(P < 0.01)。

3 血清IL-6、IL-1β和TNF-α含量的检测

血清中的炎症因子水平见图 1, 与正常组比较, 模型组IL-6、IL-1β和TNF-α的表达均明显增加(P < 0.05)。与模型组相比, 钩藤碱中、高剂量组能明显降低血清IL-1β和TNF-α的表达(P < 0.05), 低剂量组IL-1β、TNF-α含量无明显变化, 但各给药组的IL-6变化不明显。

4 大鼠腹腔液中TGF-β1、CTGF、PAI和t-PA的含量

TGF-β1和CTGF的含量见图 2, 与正常组对比, 粘连模型组大鼠腹腔液TGF-β1和CTGF含量升高具有显著性差异(P < 0.05);与模型组对比, 钩藤碱中、高剂量组、地塞米松组显著性降低了TGF-β1和CTGF水平(P < 0.01), 可见钩藤碱对粘连模型的TGF-β1含量有明显的抑制作用。

PAI和t-PA的含量见图 3, 与正常组对比, 粘连模型组大鼠腹腔液t-PA含量显著性的降低(P < 0.05);与模型组对比, 钩藤碱中剂量组、地塞米松组显著性降低了t-PA水平(P < 0.05)。同时, 与正常组对比, 模型组PAI的含量明显升高(P < 0.05);与模型组对比, 钩藤碱高剂量组、地塞米松组显著降低了PAI的水平(P < 0.05)。

5 腹膜间皮细胞FN mRNA和蛋白表达水平的变化

钩藤碱对FN的mRNA表达量的影响见图 4, 钩藤碱孵育能够显著抑制FN mRNA的表达(P < 0.05), 溶剂对照组的抑制作用不明显。钩藤碱对细胞上清液中FN含量的影响见图 5, TGF-β1刺激能显著升高细胞上清液中FN的含量, 而钩藤碱能够有效地减少细胞上清液中FN的表达浓度(P < 0.05)。

6 腹膜间皮细胞Ⅰ型胶原蛋白表达水平的变化

TGF-β1刺激能够显著增加腹腔间皮细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白, 而钩藤碱处理可以有效降低Ⅰ型胶原的表达水平, 见图 6。

7 腹膜间皮细胞中Smad信号通路相关蛋白表达水平的变化

如图 7所示, TGF-β1刺激明显增加p-Smad2/3的蛋白含量, 与TGF-β1刺激组相比, 钩藤碱可以显著降低p-Smad2/3的蛋白表达水平。同时TGF-β1刺激抑制了Smad7的表达, 而钩藤碱可以显著提高Samd7的蛋白水平, 而溶剂对照组的作用则不明显。

讨论

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腹腔粘连是腹腔手术后并发症之一, 许多因素与腹腔粘连的形成有关, 如手术损伤、异物残留和组织缺血等^{[12, 13]}。多种生长因子和细胞因子参与调控纤维蛋白沉积和降解之间的平衡, 其中TGF-β1和CTGF与粘连的形成关系密切, 粘连侵润导致的炎症和炎症因子也对粘连发展具有重要影响^[14-17]。现代中医对临床实践常用验方的治疗机制进行了多方面探讨, 发现有些中药具有抗炎、提高纤溶系统酶活性、改善腹腔脏器的血液循环的功能^{[18, 19]}。钩藤碱是本课题组在对经典中药钩藤研究的基础上, 结合临床实践效果进行优化得到的有效抗腹腔粘连的生物活性物质。

本实验研究结果显示, 钩藤碱可不同程度降低腹腔粘连级别评分, 但以高剂量组的粘连级别评分降低明显。本实验还观察了钩藤碱对实验性腹腔粘连大鼠血清中炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的含量, 结显示, 模型组血清中前述各种炎症因子的含量都明显升高, 而钩藤碱可以剂量依赖地降低IL-1β和TNF-α的含量, 尤其高剂量的钩藤碱的作用有显著性差异。但对IL-6的含量没有影响。表明钩藤碱具有较好的抗炎作用。

TGF-β1和CTGF与粘连的形成关系密切。本实验对各组大鼠腹腔液中TGF-β1和CTGF的含量进行了检测, 实验结果显示, 模型组大鼠腹腔液中TGF-β1和CTGF的含量显著上升, 而钩藤碱可以剂量依赖地降低其含量。与模型组相比, 钩藤碱中、高剂量组的降低作用具有显著性差异。其中高剂量组的效果甚至优于阳性药, 表明钩藤碱具有很强的抗粘连作用, 并且其作用机制可能是通过降低TGF-β1信号通路进而干预了粘连的形成。腹膜损伤后受伤的纤维蛋白胶原开始重建, 腹膜纤溶系统可溶解纤维蛋白, 纤溶系统的激活使纤维蛋白溶酶原转化成纤维蛋白溶酶, 后者高效降解纤维蛋白, 形成其降解产物。本实验对各组大鼠腹腔液中t-PA、PAI的含量进行了研究, 结果发现模型组中t-PA含量降低, PAI含量升高。而各给药组与模型组比较, 对t-PA/PAI的分泌调节有一定的改善。

在腹腔粘连形成的过程中, 腹膜间皮细胞纤维化具有至关重要的作用, 而研究表明TGF-β1作为组织纤维化病变中最重要的促发因子之一是腹腔粘连发病过程中的关键调节点。TGF-β1抑制间皮细胞增殖、刺激腹膜间皮细胞分泌Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型胶原及FN等基质成分和分泌基质蛋白降解酶的抑制物等^[20]。Smad信号通路是细胞纤维化的一条十分重要的信号途径, 其胞内信号传导分子是胞质蛋白Smad, 其包括受体调节型Smads: Smad1、2、3、5、8;共用介导型Smad: Smad4;抑制型Smads: Smad6、7。其中, Smad2和Smad3是TGF-β1激活的信号通路的下游信号分子, 磷酸化的Smad2或Smad3可与Smad4结合形成多聚体并由胞浆转入胞核, 参与靶基因的转录表达。而Smad7可阻断TPR I特异性识别和磷酸化Smad2、3, 使得磷酸化的Smad2、3不能与Smad4形成多聚体, 从而抑制TGF-β/Smads信号通路^[21]。Smad信号通路在正常情况下处于非激活状态, TGF-β1能特异性激活该通路^[22]。Smad2/3磷酸化水平的高低也反映了纤维化的严重程度^[23]。本课题的实验结果表明TGF-β1刺激的腹膜间皮细胞, 其p-Smad2/3的含量明显升高。而钩藤碱孵育显著地抑制了p-Smad2/3的含量。而Smad7作为Smad信号通路的抑制性因子, TGF-β1刺激的腹膜间皮细胞Smad7的表达明显下降, 而钩藤碱孵育可显著恢复Smad7的蛋白含量。表明钩藤碱可以通过调节Smad信号通路的激活, 从而减少粘连相关蛋白基因的启动和表达, 进而达到抗粘连发生的作用。FN和Ⅰ型胶原是细胞外基质的重要组成部分, 其含量的变化也间接地反映了腹腔粘连的形成程度。RT-PCR检测也发现钩藤碱可以显著降低TGF-β1诱导的FN的mRNA水平; 同时, 钩藤碱还可以降低Ⅰ型胶原的蛋白表达, 表明钩藤碱有效地减轻粘连的形成。

综上所述, 本实验表明了钩藤碱具有很好的抗术后腹腔粘连作用, 降低粘连级别评分和血清中炎症因子IL-1β和TNF-α的含量, 并剂量依赖地降低了大鼠腹腔液中TGF-β1和CTGF的含量, 有效抑制了腹腔粘连的发生, 并且其抗粘连机制主要是调控TGF-β1及其下游通路发挥作用。

基金

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江苏省2012年度普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ12_0620)
南京中医药大学基础研究与重点培育项目(09XPY05)
河南省高等院校基金(15A31000)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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2017年第52卷第2期

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doi: 10.16438/j.0513-4870.2016-0798

接收时间：2016-08-30
首发时间：2026-01-14
出版时间：2017-02-12

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作者

出版历史

收稿日期：2016-08-30
修回日期：2016-10-27

基金

江苏省2012年度普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ12_0620)

南京中医药大学基础研究与重点培育项目(09XPY05)

河南省高等院校基金(15A31000)

作者信息

新乡医学院药学院, 河南新乡 453000

通讯作者:

* 宋宇, Tel:86-373-3029101, E-mail:songyugzyx@163.com

参考文献

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https://castjournals.cast.org.cn/joweb/yxxb/CN/10.16438/j.0513-4870.2016-0798

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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