药学学报

No.	Name	Abbreviation	Molecular formula	n
1	Polyethylene glycol	PEG	H(OCH₂CH₂)_nOH	9-32
2	Polyethylene glycerol	PG	C₃H₈O₃(OCH₂CH₂)_n	16-43
3	Polyoxyethylene glycerol mono-ricinoleate	PGM-ricinoleate	C₂₁H₄₀O₅(OCH₂CH₂)_n	16-35
4	Polyoxyethylene glycerol di-ricinoleate	PGD-ricinoleate	C₃₉H₇₂O₇(OCH₂CH₂)_n	20-32
5	Polyoxyethylene glycerol tri-ricinoleate	PGTri-ricinoleate	C₅₇H₁₀₄O₉(OCH₂CH₂)_n	25-29
6	Polyoxyethylene glycerol mono-linoleate	PGM-linoleate	C₂₁H₃₂O₄(OCH₂CH₂)_n	19-39
7	Polyoxyethylene glycerol mono-palmitate	PGM-palmitate	C₁₉H₃₈O₄(OCH₂CH₂)_n	24-32
8	Polyoxyethylene mono-ricinoleate	PM-ricinoleate	C₁₈H₃₄O₃(OCH₂CH₂)_n	4-33
9	Polyoxyethylene mono-arachidate	PM-arachidate	C₂₀H₄₀O₂(OCH₂CH₂)_n	37-60
10	Polyoxyethylene mono-oleate	PM-oleate	C₁₈H₃₄O₂(OCH₂CH₂)_n	13-19
11	Polyoxyethylene mono-linoleate	PM-linoleate	C₁₈H₃₂O₂(OCH₂CH₂)_n	3-33
12	Polyoxyethylene di-ricinoleate	PD-ricinoleate	C₃₆H₆₆O₅(OCH₂CH₂)_n	5-33
13	Polyoxyethylene di-soft-oleate	PD-soft-oleate	C₃₂H₅₈O₃(OCH₂CH₂)_n	13-28

No.	Name	Abbreviation	Molecular formula	n
1	Polyethylene glycol	PEG	H(OCH₂CH₂)_nOH	9-32
2	Polyethylene glycerol	PG	C₃H₈O₃(OCH₂CH₂)_n	16-43
3	Polyoxyethylene glycerol mono-ricinoleate	PGM-ricinoleate	C₂₁H₄₀O₅(OCH₂CH₂)_n	16-35
4	Polyoxyethylene glycerol di-ricinoleate	PGD-ricinoleate	C₃₉H₇₂O₇(OCH₂CH₂)_n	20-32
5	Polyoxyethylene glycerol tri-ricinoleate	PGTri-ricinoleate	C₅₇H₁₀₄O₉(OCH₂CH₂)_n	25-29
6	Polyoxyethylene glycerol mono-linoleate	PGM-linoleate	C₂₁H₃₂O₄(OCH₂CH₂)_n	19-39
7	Polyoxyethylene glycerol mono-palmitate	PGM-palmitate	C₁₉H₃₈O₄(OCH₂CH₂)_n	24-32
8	Polyoxyethylene mono-ricinoleate	PM-ricinoleate	C₁₈H₃₄O₃(OCH₂CH₂)_n	4-33
9	Polyoxyethylene mono-arachidate	PM-arachidate	C₂₀H₄₀O₂(OCH₂CH₂)_n	37-60
10	Polyoxyethylene mono-oleate	PM-oleate	C₁₈H₃₄O₂(OCH₂CH₂)_n	13-19
11	Polyoxyethylene mono-linoleate	PM-linoleate	C₁₈H₃₂O₂(OCH₂CH₂)_n	3-33
12	Polyoxyethylene di-ricinoleate	PD-ricinoleate	C₃₆H₆₆O₅(OCH₂CH₂)_n	5-33
13	Polyoxyethylene di-soft-oleate	PD-soft-oleate	C₃₂H₅₈O₃(OCH₂CH₂)_n	13-28

聚氧乙烯35蓖麻油的UPCC-Q-TOF-MS成分分析与安全性初探

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李婷 ¹^,^# , 王珏 ¹^,^# , 袁铭 ² , 孙会敏 ¹^,^*

药学学报 | 研究论文 2020,55(11): 2688-2694

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药学学报 | 研究论文 2020, 55(11): 2688-2694

聚氧乙烯35蓖麻油的UPCC-Q-TOF-MS成分分析与安全性初探

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李婷¹^,^#, 王珏¹^,^#, 袁铭², 孙会敏¹^,^*

作者信息

1.国家药品监督管理局药用辅料质量研究与评价重点实验室, 中国食品药品检定研究院, 北京 100050

2.沃特世科技有限公司, 上海 201206

通讯作者:

*孙会敏, Tel:86-10-67095721, E-mail:sunhm@126.com

Safety study and compositional analysis of polyoxyethylene 35 castor oil by UPCC-Q-TOF-MS

Ting LI¹, Jue WANG¹, Ming YUAN², Hui-min SUN¹^,^*

Affiliations

1. NMPA Key Laboratory for Quality Research and Evaluation of Pharmaceutical Excipients, National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China

2. Waters Corporation, Shanghai 201206, China

出版时间: 2020-11-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2020-0670

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摘要

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建立UPCC-Q-TOF-MS法分析聚氧乙烯35蓖麻油（polyoxyethylene 35 castor oil，CrEL）成分，并初探样品的安全性。采用Acquity UPCC Torus Diol色谱柱（3.0 mm×100 mm，1.7 μm），以CO₂和甲醇-乙腈（50：50）为流动相，梯度洗脱，柱温50℃，流速1.0 mL·min^-1，背压2 000 psi，以含2.5 mmol·L^-1甲酸铵的甲醇为离子化试剂，离子化试剂流速0.2 mL·min^-1，电喷雾正离子电离连同MS^E技术，结合Progenesis QI软件进行快速结构确证及建立主成分分析（PCA）模型。以L-02细胞和RBL-2H3细胞作为细胞模型考察样品的细胞毒性和组胺释放。得到分离良好的13类成分，共255个化合物；以归一化法计算，所有样品中定义成分聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯（polyoxyethylene glycerol tri-ricinoleate，PGTri-蓖麻油酸酯）仅占0.36%~2.80%，主要成分为聚乙二醇、乙氧基化甘油和聚氧乙烯甘油单蓖麻油酸酯。所有样品均存在不同程度的细胞毒性和组胺释放，与PGTri-蓖麻油酸酯含量负相关，与聚氧乙烯脂肪酸酯含量正相关。UPCC-Q-TOF-MS法简单快速、分离能力强且准确性高，适用于分析CrEL成分；建议对注射用CrEL标准补充脂肪酸组成检查项，提高PGTri-蓖麻油酸酯含量和降低聚氧乙烯脂肪酸酯含量，从而提高产品安全性。

关键词

聚氧乙烯35蓖麻油 / 超高效合相色谱 / 四级杆飞行时间质谱 / L-02细胞 / RBL-2H3细胞

Abstract

收起

A UPCC-Q-TOF-MS method was established to analyze the components of polyoxyethylene 35 castor oil. The separation was performed at 50℃ on a Waters Acquity UPCC system by an Torus Diol column (3.0 mm×100 mm, 1.7 μm) with gradient elution of CO₂ and methanol-acetonitrile (50:50); the flow rate was 1.0 mL·min^-1, the back pressure was 2 000 psi, and methanol containing 2.5 mmol·L^-1 ammonium formate was used as ionization reagent, whose flow rate was 0.2 mL·min^-1. Positive ion electrospray ionization (ESI) mode and MS^E technology were used. The qualitative analyses were carried out by using precise mass information of the parent and product ions and a PCA model was established by UPCC-Q-TOF-MS. L-02 cells and RBL-2H3 cells were used to study the cytotoxicity and histamine release of CrEL samples in vitro. A total of 13 kinds of CrEL components were obtained and their structures were identified by UPCC-Q-TOF-MS, with 255 compounds in total. The percentage content of 13 types of components was calculated by the normalization method. The content of polyoxyethylene glycerol tri-ricinoleate (PGTri-ricinoleate) in all samples was 0.36%-2.80% and the main components were polyethylene glycol, polyethylene glycerol and polyoxyethylene glycerol mono-ricinoleate. All samples have different degrees of cytotoxicity and histamine release, which is negatively correlated with the content of PGTri-ricinoleate and positively correlated with the content of polyoxyethylene glycol fatty acid esters. The UPCC-Q-TOF-MS method is simple and rapid, has strong separation ability and high accuracy. It is suitable for the analysis of CrEL components. It is suggested that the fatty acid composition should be included in the monograph of CrEL for injection to increase the content of PGTri-ricinoleate and decrease the content of polyoxyethylene glycol fatty acid esters, so as to improve the product safety.

Key words

polyoxyethylene 35 castor oil / ultraperformance convergence chromatography / quadrupole time-of-flight mass spectrometry / L-02 cell / RBL-2H3 cell

引用本文

李婷, 王珏, 袁铭, 孙会敏. 聚氧乙烯35蓖麻油的UPCC-Q-TOF-MS成分分析与安全性初探. 药学学报, 2020 , 55 (11) : 2688 -2694 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2020-0670

Ting LI, Jue WANG, Ming YUAN, Hui-min SUN. Safety study and compositional analysis of polyoxyethylene 35 castor oil by UPCC-Q-TOF-MS[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2020 , 55 (11) : 2688 -2694 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2020-0670

正文

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聚氧乙烯35蓖麻油(polyoxyethylene 35 castor oil, CrEL)是一种非离子型表面活性剂, 常作为口服、眼部和注射制剂的乳化剂或增溶剂, 尤其在注射剂和大输液中, 单位剂量中的最大用量可达到50%以上, 属于高风险性药用辅料^[1]。根据《中国药典》2015年版四部^[2], CrEL系聚氧乙烯甘油三蓖麻酸酯(polyoxyethylene glycerol tri-ricinoleate, PGTri-蓖麻油酸酯), 起始物料为甘油、环氧乙烷和蓖麻油^[3], 合成工艺见图 1。事实上因原料蓖麻油脂肪酸组成多样^[4]、环氧乙烷聚合度的差异和酯化程度的不同, CrEL实际是复杂的混合物, 其组成复杂, 存在结构相似和异构体, 致使分离分析困难, 缺乏快速有效的测定手段。

有人用高效液相色谱法测定血液中CrEL和CrEL中聚乙二醇(PEG)、蓖麻油酸的含量^[5-8]; 还有研究者通过反相制备型液相色谱分离CrEL得到17个混合馏分, 用于探究各馏分与逆转多药耐药、氨基酸转运和细胞毒性的相关性^[9]; 也有用胶束电动毛细管色谱-间接紫外检测器法对其进行分离, 再通过延时萃取基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱法(DE-MALDI-TOF-MS)进行定性分析^[10]。人们在上述研究中获取许多对CrEL的认知, 然而还是因各种方法自身的局限, 如前处理复杂、成本高、耗时长等, 无法对CrEL成分进行快速分离和准确分析。

超高效合相色谱(ultraperformance convergence chromatography, UPCC)是建立在成熟的超高效液相色谱(UPLC)之上, 以绿色经济的超临界流体CO₂作为主要流动相的超临界流体色谱(SFC), 它兼具气相色谱和超高效液相色谱的特点, 与四级杆飞行时间质谱(Q-TOF-MS)等高分辨质谱串联后, 大大提高检测灵敏度, 同时扩大了分析研究的范围。与常规反相超高效液相法相比, UPCC法具有选择性更高、柱效更优、洗脱程序更佳且分析速度更快的优点, 更适用于疏水性较强的物质^{[11, 12]}, 还可与Progenesis QI分析软件联用, 通过正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)快速评价不同来源产品的质量^[13]。因此, 本实验建立UPCC-Q-TOF-MS法分析CrEL成分。

CrEL在临床应用中出现了较多不良反应, 如细胞毒性、急性超敏反应、神经毒性、溶血等^{[8, 14-17]}, 这些毒性的产生与哪些成分相关的深层次研究相对较少。而注射用CrEL引起的过敏反应现已证实属于由补体激活所引起的急性超敏反应^[18], 且与自身成分有关, 主要是乙氧基化和酯化的不饱和脂肪酸或羟化脂肪酸^[19]。为了初步探究CrEL产品的安全性, 本研究选用L-02细胞为模型考察其体外细胞毒性; 采用RBL-2H3细胞作为肥大细胞模型细胞, β-氨基己糖苷酶作为组胺的体外评价指标, 以评价产品的细胞致敏性, 该方法成熟、简便经济、应用广泛且结果稳定性好^{[20, 21]}。

材料与方法

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仪器与材料 Acquity超高效合相色谱仪和Vion IMS四级杆飞行时间质谱(美国沃特世科技有限公司); Forma371型CO₂培养箱和Multifuge X3R离心机(美国赛默飞世尔科技公司); IX53倒置荧光显微镜(日本奥林巴斯); SpectraMax iD3多功能酶标仪(美国MD公司); Progenesis QI软件; SoftMax Pro软件; Origin Pro软件; CrEL (A、B、C、D、E、F、G、H 8个厂家, 共22批次, 平均相对分子质量为2 472);色谱纯甲醇、乙腈和甲酸铵(德国Merck公司); 二氧化碳(> 99.99%, 北京市北氧特种气体研究所有限公司); L-02细胞(中国医学科学院肿瘤细胞库); RBL-2H3细胞(北纳创联生物科技有限公司); 1640培养基、MEM (minimum essential medium)培养基、胎牛血清、双抗和0.25%胰蛋白酶-EDTA (美国Gibco公司); PBS (美国HyClone公司); MTS染色液(美国Progema公司); 改良Tyrode液(北京雷根生物技术有限公司, 批号: 0704A18); Compound48/80 (批号: 017M4089V)和对硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷(美国Sigma公司); TritonX-100 (美国Amresco公司); 柠檬酸钠、柠檬酸、碳酸氢钠、碳酸钠均购于国药集团化学试剂有限公司; 生理盐水注射液(石家庄四药有限公司); 细胞培养用96孔板(美国Corning公司)。

UPCC-Q-TOF-MS法确证CrEL成分结构

CrEL供试品溶液的配制取CrEL样品适量, 精密称定, 用甲醇溶解, 制得浓度为0.5 mg·mL^-1的供试品溶液。

色谱条件色谱柱: Acquity UPCC Torus Diol (3.0 mm×100 mm, 1.7 μm, 130 A); 流动相: A: CO₂, B:甲醇-乙腈(50:50), 梯度洗脱程序: 0~0.2 min, 94% A; 0.2~18 min, 94% A~75% A; 18~22 min, 75% A~55% A; 22~22.5 min, 55% A~94% A; 22.5~25 min, 94% A; 流速: 1.0 mL·min^-1; 离子化试剂:甲醇+ 2.5 mmol·L^-1甲酸铵; 离子化试剂流速: 0.2 mL·min^-1, 柱温: 50 ℃; 背压: 2 000 psi (1 psi≈6.9 kPa)。

质谱条件离子化方式: ESI; 离子极性: ES⁺; 毛细管电压: 1.5 kV; 离子源温度: 120 ℃; 采样锥电压: 40 V; 雾化气温度: 500 ℃; 雾化气流速: 900 L·h^-1; 采集模式: MS^E。

Progenesis QI数据处理 UPCC-Q-TOF-MS^E采集样品中各成分的分子离子和碎片离子信息, 采用Progenesis QI软件进行结构确证, 导入质谱数据后, 选择参比样品(A1), 进行保留时间校准; 创建“汇总运行”, 涵盖所有样品中的化合物离子; 选择分析峰和加合离子(NH₄⁺、Na⁺、H⁺)与电荷(1~3价)去卷积, 确定中性母离子; 最后使用MetaScope检索工具, 对CrEL成分进行鉴定。

L-02细胞毒性实验

样品储备液配制分别称取CrEL样品适量, 用生理盐水注射液溶解, 制得浓度为10 000 μmol·L^-1样品储备液。

细胞培养 L-02细胞培养于含10%胎牛血清的1640培养基, 将L-02细胞置于37 ℃、5% CO₂、饱和湿度的CO₂培养箱中无菌培养。细胞呈单层贴壁生长, 每2~3天传代一次, 传代时用0.25%胰蛋白酶-EDTA室温下消化2~3 min。

MTS实验采用MTS法检测不同浓度的CrEL样品对L-02细胞的细胞毒性。取浓度为每毫升1×10⁵个的L-02细胞悬液接种于96孔板, 每孔100 μL。24 h贴壁后, 弃去孔液, 加入不同浓度的样品溶液(由1640培养基稀释样品储备液制得), 每孔100 μL, 设置6个复孔。培养24 h后, 加MTS溶液20 μL, 继续培养3 h。选择490 nm作为检测波长, 650 nm作为参比波长, 测定各孔吸光度(A)值。用SoftMax Pro软件处理结果, 以浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标绘制细胞抑制率曲线, 得到半最大效应浓度(EC₅₀)。EC₅₀值越大, 说明样品的体外细胞毒性越小。

RBL-2H3细胞致敏性实验

阳性对照溶液配制称取Compound48/80适量, 用改良Tyrode液(137 mmol·L^-1氯化钠, 2.7 mmol·L^-1氯化钾, 5.6 mmol·L^-1葡萄糖, 1.8 mmol·L^-1氯化钙, 1 mmol·L^-1氯化镁, 20 mmol·L^-1 4-羟乙基哌嗪乙磺酸, 1 mg·mL^-1牛血清白蛋白, pH 7.4)溶解, 制得浓度为2 mg·mL^-1阳性对照溶液。

样品溶液配制分别称取CrEL样品适量, 用改良Tyrode液溶解, 制得浓度为100 mg·mL^-1、125 mg·mL^-1和150 mg·mL^-1样品溶液。

细胞培养 RBL-2H3细胞培养于含15%胎牛血清的MEM培养基, 将RBL-2H3细胞置于37 ℃、5% CO₂、饱和湿度的CO₂培养箱中无菌培养。细胞呈单层贴壁生长, 每2~3天传代一次, 传代时用0.25%胰蛋白酶-EDTA室温下消化2~3 min。

实验方法取浓度为每毫升2×10⁵个的RBL-2H3细胞悬液接种于96孔板, 每孔200 μL, 24 h贴壁后, 弃去孔液, 用改良Tyrode液洗2遍, 加入各种受试液: ①阴性对照组加入改良Tyrode液; ②阳性对照组加入阳性对照溶液; ③裂解组加改良Tyrode液; ④试验组加入各组样品溶液, 每孔200 μL, 设置3个复孔; 孵育1 h后, 置于冰上10 min终止反应。裂解组相应的复孔中加入40 μL 1.2% TritonX-100, 冰上裂解10 min, 获得细胞裂解液; 4 ℃、1 500 r·min^-1离心5 min。分别取细胞上清50 μL或细胞裂解液60 μL, 转移至新96孔板, 在各组细胞上清液及阴性对照中加入1.2% TritonX-100溶液10 μL补齐体积至60 μL。各孔加入底物(5 mmol·L^-1对硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷+ 0.1 mol·L^-1柠檬酸钠缓冲液, pH 4.5) 60 μL; 孵育1 h后, 每孔加入终止液(100 mmol·L^-1 Na₂CO₃、100 mmol·L^-1 NaHCO₃缓冲液, pH 10.7) 150 μL终止反应, 于405 nm处测定吸光度(A)值, 计算β-氨基己糖苷酶释放率(%), 见式(1)。释放率越高, 说明样品的组胺释放越大, 细胞致敏性越大。

(1)$\beta \text { - 氨基己糖苷酶释放率 }(\%)=\frac{A_{\text {样品 }}-A_{\text {空白 }}}{A_{\text {裂解 }}-A_{\text {空白 }}} \times 100 \%$

Person相关性分析采用Origin Pro软件分析CrEL中13类成分含量与其细胞毒性和组胺释放的Person相关性, ^*P < 0.05表示相关性良好。

结果

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1 UPCC-Q-TOF-MS法测定CrEL各成分及建立主成分分析(PCA)模型

本文中CrEL各成分形成了3种分子离子[M+NH₄]⁺、[M+Na]⁺和[M+H]⁺, 以一价、二价和三价的[M+NH₄]⁺的分子离子及对应的碎片离子数据为主, [M+Na]⁺和[M+H]⁺的分子离子及对应的碎片离子数据为辅, 利用Progenesis QI软件将其还原为中性质量, 排除共流出成分干扰。由于不同系列成分在各自保留时间范围且有规律, 质量误差小于百万分之五, 因此以保留时间和m/z作为定性评判标准, 根据原料和合成工艺整理所有系列成分的元素组成, 形成数据库, 通过元素组成与目标成分匹配进行结构确证。

1.1 CrEL成分表征

UPCC-Q-TOF-MS分离CrEL峰强度(base peak intensity, BPI)色谱图见图 2, 分析结果表明CrEL含13类成分共255个化合物, 分别为PEG、乙氧基化甘油(PG)、聚氧乙烯甘油单蓖麻油酸酯(PGM-蓖麻油酸酯)、聚氧乙烯甘油二蓖麻油酸酯(PGD-蓖麻油酸酯)、PGTri-蓖麻油酸酯、聚氧乙烯甘油单亚油酸酯(PGM-亚油酸酯)、聚氧乙烯甘油单棕榈酸酯(PGM-棕榈酸酯)、聚氧乙烯蓖麻油酸酯(PM-蓖麻油酸酯)、聚氧乙烯花生酸酯(PM-花生酸酯)、聚氧乙烯油酸酯(PM-油酸酯)、聚氧乙烯亚油酸酯(PM-亚油酸酯)、聚氧乙烯二蓖麻油酸酯(PD-蓖麻油酸酯)和聚氧乙烯二软脂油酸酯(PD-软脂油酸酯) (表 1), 化学结构式见图 3, 其中定义成分PGTri-蓖麻油酸酯的典型质谱图见图 4。

1.2 CrEL样品组成比较

根据每类成分的响应, 采用归一化法计算样品中13类成分的百分含量。结果显示, 所有样品中定义成分PGTri-蓖麻油酸酯的含量极低, 仅占0.36%~2.80%, 而PEG、PG、PGM-蓖麻油酸酯的含量相对较高, 都大于15%。按照化学结构式, 13类成分可被统分为4大类: PEG、PG、聚氧乙烯甘油脂肪酸酯和聚氧乙烯脂肪酸酯, 图 5可见A、B、C和D厂家样品的批间一致性较好, E厂家E4样品与其他5批样品有较大差异, A、E4和G厂家样品与其他厂家样品有明显差异: PEG和聚氧乙烯脂肪酸酯含量明显高于其他样品, 而PG和聚氧乙烯甘油脂肪酸酯含量明显低于其他样品。

1.3 PCA模型

基于UPCC-Q-TOF-MS给出的各企业不同批次所含组分的种类和含量, 采用Progenesis QI软件对所有样品建立PCA模型, 结果显示8个厂家的样品被分为5类, 分别为A、G、B/C/D/F/H、E (除E4)和E4。其中, D样品为纯化级样品, E样品为注射级样品。如果能够进一步扩大样本量, 获取的分类意义会更加突出, 有望对未知样品的质量属性进行快速评估, 并可对样品进行分级, 如注射级和非注射级。

2 L-02细胞毒性EC₅₀值

图 6显示, 所有样品均有体外细胞毒性, 其中A和G厂家样品的体外细胞毒性明显高于其他厂家样品。

3 β-氨基己糖苷酶释放率

选取低、中、高浓度(100、125和150 mg·mL^-1)刺激RBL-2H3细胞, 测定并计算β-氨基己糖苷酶释放率(%)。结果显示, 3个浓度下所有样品均引起β-氨基己糖苷酶释放, 其中A和G厂家样品的释放率明显高于其他厂家样品(图 7)。

4 Person相关性分析

Pearson相关性结果显示, CrEL的细胞毒性和组胺释放与PGTri-蓖麻油酸酯含量负相关(约-0.8^*), 与聚氧乙烯脂肪酸酯含量正相关(约0.9^*), 说明PGTri-蓖麻油酸酯含量越高, 聚乙二醇脂肪酸酯含量越低, CrEL的细胞毒性和组胺释放越小, 与文献^[19]报道一致。其中, PM-蓖麻油酸酯(约0.8^*)、PM-油酸酯(约0.8^*)和PM-亚油酸酯(约0.9^*)含量与CrEL的细胞毒性和组胺释放有关, 该结论仍需进一步的实验研究。

讨论

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CrEL的组成与其生产原料蓖麻油纯度有关, 因此, 脂肪酸组成检查是原料源头控制的重要指标; 作为高风险制剂(注射用、眼用)中使用的CrEL需要对其进行质量风险评估, 而现行的中国药典标准中并未设置此检查项, 建议增加该项对主要脂肪酸含量进行控制, 提高生产原料蓖麻油的纯度, 控制定义成分PGTri-蓖麻油酸酯和聚乙二醇脂肪酸酯的含量, 以减少产品带来的不良反应, 提高含CrEL制剂的临床用药安全性。

作者贡献:孙会敏、王珏、李婷构思和设计实验; 李婷、袁铭进行实验并收集数据; 王珏、李婷完成初稿; 孙会敏、王珏修改文章; 所有作者都对文章内容负有主要责任。

利益冲突:无任何利益冲突。

基金

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国家科技重大专项资助项目(2017ZX09101001006)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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2020年第55卷第11期

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doi: 10.16438/j.0513-4870.2020-0670

接收时间：2020-04-30
首发时间：2026-01-23
出版时间：2020-11-12

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作者

出版历史

收稿日期：2020-04-30
修回日期：2020-06-10

基金

国家科技重大专项资助项目(2017ZX09101001006)

作者信息

1.国家药品监督管理局药用辅料质量研究与评价重点实验室, 中国食品药品检定研究院, 北京 100050

2.沃特世科技有限公司, 上海 201206

通讯作者:

*孙会敏, Tel:86-10-67095721, E-mail:sunhm@126.com

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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