药学学报

乌拉尔甘草中两个新的二氢黄酮苷类成分

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刘圆圆 ¹ , 杨桠楠 ¹ , 王尉 ² , 杜宁 ² , 张经华 ² , 冯子明 ¹ , 姜建双 ¹ , 张培成 ¹^,^*

药学学报 | 研究论文·药物化学 2017,52(6): 948-951

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药学学报 | 研究论文·药物化学 2017, 52(6): 948-951

乌拉尔甘草中两个新的二氢黄酮苷类成分

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刘圆圆¹, 杨桠楠¹, 王尉², 杜宁², 张经华², 冯子明¹, 姜建双¹, 张培成¹^,^*

作者信息

1.天然药物活性物质与功能国家重点实验室, 中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所, 北京 100050

2.北京市理化分析测试中心, 北京 100089

通讯作者:

* 张培成, Tel:86-10-63165231, E-mail:pczhang@imm.ac.cn

Two new flavanone glucosides identified in Glycyrrhiza uralensis

Yuan-yuan LIU¹, Ya-nan YANG¹, Wei WANG², Ning DU², Jing-hua ZHANG², Zi-ming FENG¹, Jian-shuang JIANG¹, Pei-cheng ZHANG¹^,^*

Affiliations

1. State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines, Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100050, China

2. Beijing Centre for Physical and Chemical Analysis, Beijing 100089, China

出版时间: 2017-06-12 doi: 10.16438/j.0513-4870.2017-0204

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摘要

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为进一步研究乌拉尔甘草中的黄酮类化学成分，通过采用大孔吸附树脂、RP-C₁₈、Sephadex LH-20、MCI柱色谱和HPLC等多种色谱分离方法从乌拉尔甘草80%乙醇提取物中分离得到2个黄酮类化合物。根据化合物的理化性质和光谱数据，鉴定其结构分别为：（2S）-甘草素-4´-O-β-D-葡萄糖-（1→6）-O-β-D-葡萄糖苷（1）、（2R）-甘草素-4´-O-β-D-葡萄糖-（1→6）-O-β-D-葡萄糖苷（2）。化合物1与化合物2均为新化合物，其母核结构为一对对映异构体。

关键词

乌拉尔甘草 / 化学成分 / 二氢黄酮

Abstract

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Two flavanone glucosides were isolated from the 80% ethanol extract of Glycyrrhiza uralensis using various chromatographic techniques, including macroporous adsorbent resin, RP-C₁₈, Sephadex LH-20, MCI and preparative HPLC. On the basis of chemical properties and spectra data, these compounds were identified as (2S)-liquiritigenin-4´-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside (1), (2R)-liquiritigenin-4´-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside (2), respectively. Compounds 1 and 2 are new compounds, and their aglycones are enantiomers.

Key words

Glycyrrhiza uralensis / chemical composition / flavanone

引用本文

刘圆圆, 杨桠楠, 王尉, 杜宁, 张经华, 冯子明, 姜建双, 张培成. 乌拉尔甘草中两个新的二氢黄酮苷类成分. 药学学报, 2017 , 52 (6) : 948 -951 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2017-0204

Yuan-yuan LIU, Ya-nan YANG, Wei WANG, Ning DU, Jing-hua ZHANG, Zi-ming FENG, Jian-shuang JIANG, Pei-cheng ZHANG. Two new flavanone glucosides identified in Glycyrrhiza uralensis[J]. Acta Pharmaceutica Sinica, 2017 , 52 (6) : 948 -951 . DOI: 10.16438/j.0513-4870.2017-0204

正文

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甘草(Radix Glycyrrhiza)为豆科多年生草本植物, 作为药用甘草有乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)、胀果甘草(Glycyrrhiza Inflate)及光果甘草(Glycyrrhiza glabra)的根及根茎。甘草性平、味甘, 具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛等功效, 被广泛应用于医药及食品工业的调味剂和赋形剂^[1]。

乌拉尔甘草是甘草属植物中分布最广、产量最多的药用甘草, 主要分布于吉林、辽宁、内蒙古、新疆、青海等地^[2]。现代药理学研究^[3-5]表明甘草具有抗氧化、抗炎、抗病毒、免疫抑制、抗菌、抗肿瘤、保肝、降糖等活性。目前已从甘草中得到黄酮类^[6]、三萜皂苷类^[7]、香豆素类^[8]、多糖^[9]等多种化学成分。通过文献^[10-12]调研发现, 甘草中黄酮类化合物是其主要的活性物质基础之一。为了进一步揭示乌拉尔甘草的药效物质基础, 本实验通过对乌拉尔甘草的80%乙醇提取物进行系统分离和结构鉴定, 得到2个二氢黄酮类化合物(图 1), 均为新化合物。

化合物1 淡黄色无定形粉末, UV (MeOH) λ_max (log ε): 275.4 (2.44)、312.4 (2.34) nm, IR显示该化合物结构中含有羟基(3 366 cm^-1)、共轭酮羰基(1 663 cm^-1)、苯环(1 607、1 512、1 465 cm^-1); HR-ESI-MS m/z 603.167 7 [M+Na]⁺ (Calcd. 603.168 4), 提示化合物1的分子式为C₂₇H₃₂O₁₄。¹H NMR (500 MHz, CD₃OD)数据(表 1)显示1组AA´BB´偶合系统的苯环质子信号δ_H 7.41 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-2´/6´)和7.13 (2H, d, J = 8.5 Hz, H-3´/5´), 以及1组ABX自旋偶合系统的苯环质子信号δ_H 7.69 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-5)、6.46 (1H, dd, J = 8.5, 2.5 Hz, H-6) 和6.32 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-8)。进一步结合¹H NMR谱中高场区的氢信号δ_H 5.40 (1H, dd, J = 12.5, 2.5 Hz, H-2)、3.01 (1H, m, H-3a)和2.69 (1H, m, H-3b), 提示该化合物可能为一个二氢黄酮类化合物。经查阅文献^{[13, 14]}, 可确定化合物1的苷元为甘草素(liquiritigenin)。在¹³C NMR (125 MHz, CD₃OD)谱中共显示了27个碳信号, 除了15个二氢黄酮碳信号外, 还包括2分子葡萄糖的12个碳信号。¹H NMR谱中δ_H 4.90 (1H, d, J = 7.5 Hz)及δ_H 4.34 (1H, d, J = 7.5 Hz)分别是两分子β-葡萄糖单元的端基质子信号H-1"和H-1"´。参照文献^[15], 利用酸水解的方法获得单体葡萄糖, 结合GC分析, 确定两分子葡萄糖的构型均为D型。在HMBC谱中(图 2), H-1"´ (δ_H4.34) 与C-6" (δ_C 69.6)、C-2"´ (δ_C 74.8)、C-3"´ (δ_C 77.9) 相关, 说明两分子葡萄糖是1→6连接; H-1" (δ_H4.90) 与C-4´ (δ_C 159.1)、C-3" (δ_C 77.9) 相关, 说明糖链连接在C-4´位。

CD光谱显示(图 3), 化合物1在301.5 nm出现负Cotton效应, 在329.5 nm出现正Cotton效应, 可确定C-2的绝对构型为S^[16]。

综上所述, 化合物1的结构被确定为(2S)-甘草素-4´-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物2 淡黄色无定形粉末, HR-ESI-MS m/z 603.166 1 [M+Na]⁺ (Calcd. 603.168 4), 提示化合物2分子式为C₂₇H₃₂O₁₄。化合物2的¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆)和¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆)数据均与化合物1相似。不同之处在于, 化合物2的CD光谱(图 4)显示出与化合物1相反的Cotton效应, 即在292.0 nm出现正Cotton效应, 在317.5 nm出现负Cotton效应。因此, 化合物2的C-2位构型为R。

根据以上推断, 化合物2的结构被鉴定为(2R)-甘草素-4´-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷。

实验部分

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JASCO V-650型紫外分光光度仪; Nicolet 5700型红外光谱仪(美国热电公司); JASCO P-2000型旋光仪; Bruker-500 MHz核磁共振仪; Agilent 6520 HPLC-Q-TOF质谱仪; JASCO J-815型圆二色谱仪; Agilent 1200型高效液相色谱仪, 包括四元高压梯度泵、自动脱气机、二极管阵列检测器、自动进样器、柱温箱; Shimadzu LC-6AD制备型高效液相色谱仪; HP-20大孔吸附树脂(日本三菱化学株式会社); Sephadex LH-20 (GE公司); Rp-C₁₈ (50 µm, YMC, 日本东京); 分析纯试剂, 北京化工厂生产; 色谱纯试剂, Fischer公司、天津科密欧公司。

甘草药材于2013年11月购于内蒙古乌拉尔, 由中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所马林教授鉴定为乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)的根及根茎, 标本储存在中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所标本室, 标本号为ID-S-2813。

1 提取分离

乌拉尔甘草100 kg, 80%乙醇回流提取(3×2 h), 得总浸膏35 kg。将浸膏分散于水中, 搅拌, 静止, 除去沉淀。所得水溶性部位(10 kg)经大孔吸附树脂柱色谱分离, 以水-乙醇梯度洗脱, 共得到5个部分, 分别为Fr.1 (H₂O)、Fr.2 (15% EtOH-H₂O)、Fr.3 (30% EtOH-H₂O)、Fr.4 (50% EtOH-H₂O)和Fr.5 (95% EtOH-H₂O)。Fr.3 (260 g)经中压反相柱色谱, 用水-甲醇进行梯度洗脱(100:0~0:100), 共得到40个部分(Fr.3-1~Fr.3-40), 其中Fr.3-28 (60 mg)再经Sephadex LH-20柱色谱和制备型高效液相分离(流动相: 25% MeOH-H₂O; 流速: 5 mL·min^-1), 得到化合物1 (32 mg, R_t = 114 min)与化合物2 (16 mg, R_t = 124 min)。

2 结构鉴定

化合物1 淡黄色无定形粉末; UV (MeOH) λ_max(log ε): 275.4 (2.44)、312.4 (2.34) nm; [α]20 D-48.2 (c 0.067, MeOH); IR (KBr) ν_max: 3 366、1 663、1 607、1 512、1 465 cm^-1; CD (MeOH) λ_max (∆ε): 301.5 (-2.73)、329.5 (1.44) nm; HR-ESI-MS m/z 603.167 7 [M+Na]⁺ (C₂₇H₃₂O₁₄)。¹H NMR (500 MHz, CD₃OD)和¹³C NMR (125 MHz, CD₃OD)数据见表 1。

化合物2 淡黄色无定形粉末; UV (MeOH) λ_max (log ε): 276.2 (2.50)、313.6 (2.30) nm; [α]20 D-45.2 (c 0.067, MeOH); IR (KBr) ν_max: 3 391、1 739、1 608、1 510 cm^-1; CD (MeOH) λ_max (∆ε): 292.0 (0.26)、317.5 (-0.03) nm; HR-ESI-MS m/z 603.166 1 [M+Na]⁺ (Calcd. 603.168 4), 确定分子式为C₂₇H₃₂O₁₄。¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆)和¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d₆)数据见表 1。

基金

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中国医学科学院医学与健康科技创新工程经费资助(2016-I2M-1-007)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

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2017年第52卷第6期

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doi: 10.16438/j.0513-4870.2017-0204

接收时间：2017-03-06
首发时间：2026-01-14
出版时间：2017-06-12

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作者

出版历史

收稿日期：2017-03-06
修回日期：2017-03-17

基金

中国医学科学院医学与健康科技创新工程经费资助(2016-I2M-1-007)

作者信息

1.天然药物活性物质与功能国家重点实验室, 中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所, 北京 100050

2.北京市理化分析测试中心, 北京 100089

通讯作者:

* 张培成, Tel:86-10-63165231, E-mail:pczhang@imm.ac.cn

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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