药物分析杂志

样品编号（sample No.）	样品名称（sample name）	采集地点（collection site）	样品编号（sample No.）	样品名称（sample name）	采集地点（collection site）
S1	兰州落叶松（Larix gmelinii from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S7	兰州樟子松（Pinus sylvestris from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S2	天水落叶松（Larix gmelinii from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S8	天水樟子松（Pinus sylvestris from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）
S3	兰州油松（Pinus tabuliformis from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S9	兰州华山松（Pinus armandii from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S4	天水油松（Pinus tabuliformis from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S10	天水华山松（Pinus armandii from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）
S5	兰州白皮松（Pinus bungeana from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S11	兰州雪松（Cedrus deodara from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S6	天水白皮松（Pinus bungeana from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S12	天水雪松（Cedrus deodara from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）

样品编号（sample No.）	样品名称（sample name）	采集地点（collection site）	样品编号（sample No.）	样品名称（sample name）	采集地点（collection site）
S1	兰州落叶松（Larix gmelinii from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S7	兰州樟子松（Pinus sylvestris from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S2	天水落叶松（Larix gmelinii from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S8	天水樟子松（Pinus sylvestris from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）
S3	兰州油松（Pinus tabuliformis from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S9	兰州华山松（Pinus armandii from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S4	天水油松（Pinus tabuliformis from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S10	天水华山松（Pinus armandii from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）
S5	兰州白皮松（Pinus bungeana from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S11	兰州雪松（Cedrus deodara from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S6	天水白皮松（Pinus bungeana from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S12	天水雪松（Cedrus deodara from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）

成分（component）	保留时间（retention time）/ min	母离子（parent ion）m/z	去簇电压（fragmentor）/V	子离子（daughter ion）m/z	碰撞能量（collision energy）/eV	扫描模式（scan mode）
没食子酸（gallic acid）	2.548	169.00	90	^*125.0[-C₆H₅O₃]^- 79.1[-C₅H₃O]^-	15 25	负离子模式（negative ion mode）
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	3.365	122.9	80	^*105.1[-C₇H₅O]⁺ 77.2[-C₆H₅]⁺	10 15	正离子模式（positive ion mode）
原儿茶酸（protocatechuic acid）	4.489	153.00	90	^*109.1[-C₆H₅O₂]^- 91.1[-C₆H₃O]^-	15 25	负离子模式（negative ion mode）
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	7.496	137.00	80	^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-	15 30	负离子模式（negative ion mode）
绿原酸（chlorogenic acid）	8.217	353.15	140	^*190.9[-C₇H₁₀O₆]^- 85.2[-C₄H₅O₂]^-	15 46	负离子模式（negative ion mode）
香草酸（vanillic acid）	9.043	166.90	80	^*151.8[-C₇H₄O₄]^- 108.2[-C₆H₄O₂]^-	10 16	负离子模式（negative ion mode）
咖啡酸（caffeic acid）	9.496	179.0	80	^*135.1[-C₈H₆O₂]^- 89.2[-C₄H₉O₂]^-	15 35	负离子模式（negative ion mode）
丁香酸（syringic acid）	9.800	197.0	80	^*122.9[-C₇H₇O₂]^- 167.0[-C₈H₇O₄]^-	22 18	负离子模式（negative ion mode）
对香豆酸（p-coumaricacid）	12.713	163.0	80	^*119.2[-C₈H₆O]^- 93.2[-C₆H₅O]^-	24 38	负离子模式（negative ion mode）
芥子酸（sinapic acid）	14.226	223.0	80	^*208.1[-C₁₀H₉O₅]^- 193.0[-C₁₀H₉O₄]^-	15 22	负离子模式（negative ion mode）
苯甲酸（benzoic acid）	15.426	122.12	65	^*82.0[-C₅H₆O]^- 77.2[-C₆H₅]^-	15 26	负离子模式（negative ion mode）
苯乙酸（phenylacetic acid）	16.652	135.0	80	^*91.3[-C₇H₇]⁺ 65.3[-C₅H₅]⁺	15 40	正离子模式（positive ion mode）
水杨酸（salicylic acid）	17.491	137.0	80	^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-	14 30	负离子模式（negative ion mode）
肉桂酸（cinnamic acid）	21.261	147.0	80	^*103.2[-C₈H₇]^- 77.2[-C₆H₅]^-	10 20	负离子模式（negative ion mode）

成分（component）	保留时间（retention time）/ min	母离子（parent ion）m/z	去簇电压（fragmentor）/V	子离子（daughter ion）m/z	碰撞能量（collision energy）/eV	扫描模式（scan mode）
没食子酸（gallic acid）	2.548	169.00	90	^*125.0[-C₆H₅O₃]^- 79.1[-C₅H₃O]^-	15 25	负离子模式（negative ion mode）
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	3.365	122.9	80	^*105.1[-C₇H₅O]⁺ 77.2[-C₆H₅]⁺	10 15	正离子模式（positive ion mode）
原儿茶酸（protocatechuic acid）	4.489	153.00	90	^*109.1[-C₆H₅O₂]^- 91.1[-C₆H₃O]^-	15 25	负离子模式（negative ion mode）
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	7.496	137.00	80	^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-	15 30	负离子模式（negative ion mode）
绿原酸（chlorogenic acid）	8.217	353.15	140	^*190.9[-C₇H₁₀O₆]^- 85.2[-C₄H₅O₂]^-	15 46	负离子模式（negative ion mode）
香草酸（vanillic acid）	9.043	166.90	80	^*151.8[-C₇H₄O₄]^- 108.2[-C₆H₄O₂]^-	10 16	负离子模式（negative ion mode）
咖啡酸（caffeic acid）	9.496	179.0	80	^*135.1[-C₈H₆O₂]^- 89.2[-C₄H₉O₂]^-	15 35	负离子模式（negative ion mode）
丁香酸（syringic acid）	9.800	197.0	80	^*122.9[-C₇H₇O₂]^- 167.0[-C₈H₇O₄]^-	22 18	负离子模式（negative ion mode）
对香豆酸（p-coumaricacid）	12.713	163.0	80	^*119.2[-C₈H₆O]^- 93.2[-C₆H₅O]^-	24 38	负离子模式（negative ion mode）
芥子酸（sinapic acid）	14.226	223.0	80	^*208.1[-C₁₀H₉O₅]^- 193.0[-C₁₀H₉O₄]^-	15 22	负离子模式（negative ion mode）
苯甲酸（benzoic acid）	15.426	122.12	65	^*82.0[-C₅H₆O]^- 77.2[-C₆H₅]^-	15 26	负离子模式（negative ion mode）
苯乙酸（phenylacetic acid）	16.652	135.0	80	^*91.3[-C₇H₇]⁺ 65.3[-C₅H₅]⁺	15 40	正离子模式（positive ion mode）
水杨酸（salicylic acid）	17.491	137.0	80	^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-	14 30	负离子模式（negative ion mode）
肉桂酸（cinnamic acid）	21.261	147.0	80	^*103.2[-C₈H₇]^- 77.2[-C₆H₅]^-	10 20	负离子模式（negative ion mode）

成分（component）	线性范围（linear range）/ng	回归方程（regression equation）	相关系数（correlation coefficient）
没食子酸（gallic acid）	84.80~0.85	Y=5 866X+10.309 6	0.999 8
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	214.80~2.15	Y=73 435X-32.999	0.999 9
原儿茶酸（protocatechuic acid）	120.64~1.21	Y=19 782X+1.510 4	0.999 8
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	459.20~4.59	Y=38 329X-249.23	0.999 7
绿原酸（chlorogenic acid）	424.0~4.24	Y=139 250X-211.82	0.999 9
香草酸（vanillic acid）	137.20~1.37	Y=41 022X-205.815	0.999 9
咖啡酸（caffeic acid）	139.48~1.39	Y=45 265X-388.24	0.999 7
丁香酸（syringic acid）	126.40~1.26	Y=24 056X+34.514	0.999 8
对香豆酸（p-coumaricacid）	212.16~2.12	Y=54 634X-264.51	0.999 7
芥子酸（sinapic acid）	446.0~4.46	Y=158 448X-1 001.9	0.999 8
苯甲酸（benzoic acid）	404.8~4.05	Y=120 417X+476.7	0.999 9
苯乙酸（phenylacetic acid）	435.84~4.36	Y=118 439X+69.867	0.999 9
水杨酸（salicylic acid）	75.20~0.75	Y=25 161X-118.4	0.999 8
肉桂酸（cinnamic acid）	7.07~0.07	Y=4 205.3X+17.022	0.999 7

成分（component）	线性范围（linear range）/ng	回归方程（regression equation）	相关系数（correlation coefficient）
没食子酸（gallic acid）	84.80~0.85	Y=5 866X+10.309 6	0.999 8
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	214.80~2.15	Y=73 435X-32.999	0.999 9
原儿茶酸（protocatechuic acid）	120.64~1.21	Y=19 782X+1.510 4	0.999 8
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	459.20~4.59	Y=38 329X-249.23	0.999 7
绿原酸（chlorogenic acid）	424.0~4.24	Y=139 250X-211.82	0.999 9
香草酸（vanillic acid）	137.20~1.37	Y=41 022X-205.815	0.999 9
咖啡酸（caffeic acid）	139.48~1.39	Y=45 265X-388.24	0.999 7
丁香酸（syringic acid）	126.40~1.26	Y=24 056X+34.514	0.999 8
对香豆酸（p-coumaricacid）	212.16~2.12	Y=54 634X-264.51	0.999 7
芥子酸（sinapic acid）	446.0~4.46	Y=158 448X-1 001.9	0.999 8
苯甲酸（benzoic acid）	404.8~4.05	Y=120 417X+476.7	0.999 9
苯乙酸（phenylacetic acid）	435.84~4.36	Y=118 439X+69.867	0.999 9
水杨酸（salicylic acid）	75.20~0.75	Y=25 161X-118.4	0.999 8
肉桂酸（cinnamic acid）	7.07~0.07	Y=4 205.3X+17.022	0.999 7

成分（component）	样品含量（content）/mg	加入量（added）/mg	测得量（found）/mg	回收率（recovery）/%	RSD/%
没食子酸（gallic acid）	0.684	0.442	1.114	97.3	2.7
	0.684	0.680	1.376	101.8
	0.684	0.830	1.490	97.1
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	1.364	1.070	2.462	102.6	2.7
	1.364	1.380	2.772	102.1
	1.364	1.636	2.962	97.7
原儿茶酸（protocatechuic acid）	0.428	0.342	0.776	101.9	1.9
	0.428	0.428	0.866	102.5
	0.428	0.514	0.936	98.9
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	3.252	2.644	5.816	96.9	2.8
	3.252	3.260	6.522	100.3
	3.252	4.164	7.516	102.4
绿原酸（chlorogenic acid）	0.678	0.516	1.182	97.7	3.0
	0.678	0.708	1.412	103.6
	0.678	0.838	1.524	101.0
香草酸（vanillic acid）	0.227	0.182	0.404	97.4	2.6
	0.227	0.220	0.452	102.4
	0.227	0.252	0.482	101.3
咖啡酸（caffeic acid）	0.034	0.026	0.059	96.3	2.8
	0.034	0.034	0.066	96.6
	0.034	0.040	0.074	101.1
丁香酸（syringic acid）	0.106	0.088	0.194	99.9	1.7
	0.106	0.120	0.228	101.9
	0.106	0.130	0.240	103.3
对香豆酸（p-coumaricacid）	0.175	0.144	0.320	100.8	2.3
	0.175	0.174	0.344	97.2
	0.175	0.210	0.378	96.8
芥子酸（sinapic acid）	0.652	0.530	1.190	101.5	2.7
	0.652	0.662	1.294	97.0
	0.652	0.790	1.456	101.8
苯甲酸（benzoic acid）	1.176	0.918	2.096	100.2	0.85
	1.176	1.088	2.250	98.7
	1.176	1.412	2.590	100.2
苯乙酸（phenylacetic acid）	1.293	1.034	2.310	98.4	0.56
	1.293	1.292	2.574	99.2
	1.293	1.574	2.858	99.5
水杨酸（salicylic acid）	0.543	0.412	0.950	98.9	1.9
	0.543	0.558	1.104	100.6
	0.543	0.664	1.186	96.9
肉桂酸（cinnamic acid）	0.012	0.010	0.022	102.3	2.6
	0.012	0.012	0.024	98.6
	0.012	0.014	0.026	97.4

成分（component）	样品含量（content）/mg	加入量（added）/mg	测得量（found）/mg	回收率（recovery）/%	RSD/%
没食子酸（gallic acid）	0.684	0.442	1.114	97.3	2.7
	0.684	0.680	1.376	101.8
	0.684	0.830	1.490	97.1
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	1.364	1.070	2.462	102.6	2.7
	1.364	1.380	2.772	102.1
	1.364	1.636	2.962	97.7
原儿茶酸（protocatechuic acid）	0.428	0.342	0.776	101.9	1.9
	0.428	0.428	0.866	102.5
	0.428	0.514	0.936	98.9
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	3.252	2.644	5.816	96.9	2.8
	3.252	3.260	6.522	100.3
	3.252	4.164	7.516	102.4
绿原酸（chlorogenic acid）	0.678	0.516	1.182	97.7	3.0
	0.678	0.708	1.412	103.6
	0.678	0.838	1.524	101.0
香草酸（vanillic acid）	0.227	0.182	0.404	97.4	2.6
	0.227	0.220	0.452	102.4
	0.227	0.252	0.482	101.3
咖啡酸（caffeic acid）	0.034	0.026	0.059	96.3	2.8
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	0.034	0.040	0.074	101.1
丁香酸（syringic acid）	0.106	0.088	0.194	99.9	1.7
	0.106	0.120	0.228	101.9
	0.106	0.130	0.240	103.3
对香豆酸（p-coumaricacid）	0.175	0.144	0.320	100.8	2.3
	0.175	0.174	0.344	97.2
	0.175	0.210	0.378	96.8
芥子酸（sinapic acid）	0.652	0.530	1.190	101.5	2.7
	0.652	0.662	1.294	97.0
	0.652	0.790	1.456	101.8
苯甲酸（benzoic acid）	1.176	0.918	2.096	100.2	0.85
	1.176	1.088	2.250	98.7
	1.176	1.412	2.590	100.2
苯乙酸（phenylacetic acid）	1.293	1.034	2.310	98.4	0.56
	1.293	1.292	2.574	99.2
	1.293	1.574	2.858	99.5
水杨酸（salicylic acid）	0.543	0.412	0.950	98.9	1.9
	0.543	0.558	1.104	100.6
	0.543	0.664	1.186	96.9
肉桂酸（cinnamic acid）	0.012	0.010	0.022	102.3	2.6
	0.012	0.012	0.024	98.6
	0.012	0.014	0.026	97.4

成分（component）	含量（content）/（mg·g^-1）
没食子酸（gallic acid）	3.42	0.34	0.92	1.01	0.77	0.66	0.86	0.63	1.43	1.19	1.20	1.52
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	6.82	2.14	2.63	4.60	4.79	4.34	2.04	1.32	4.46	9.76	2.99	3.40
原儿茶酸（protocatechuic acid）	2.14	1.23	1.98	-	1.11	1.15	0.27	0.97	0.59	0.65	5.41	6.32
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	16.26	8.92	-	1.22	0.27	0.35	4.86	0.45	14.17	19.06	-	2.01
绿原酸（chlorogenic acid）	3.39	9.81	18.78	12.53	9.45	9.91	1.10	4.85	-	0.06	3.97	1.11
香草酸（vanillic acid）	1.13	3.81	3.61	2.01	1.43	1.61	2.15	1.04	0.35	0.16	0.14	1.34
咖啡酸（caffeic acid）	0.17	1.17	6.68	3.69	0.90	0.59	0.48	0.56	2.19	1.29	-	-
丁香酸（syringic acid）	0.53	4.64	1.60	3.37	0.09	1.45	1.12	2.78	0.77	0.47	0.55	0.68
对香豆酸（p-coumaricacid）	0.87	1.52	0.87	1.11	0.20	0.10	3.22	3.78	7.94	9.90	2.64	3.44
芥子酸（sinapic acid）	3.26	3.97	3.94	19.01	2.14	0.98	6.23	4.35	16.48	9.88	16.34	9.95
苯甲酸（benzoic acid）	5.88	11.93	2.25	1.28	3.37	2.73	18.21	17.92	2.57	4.29	2.15	4.94
苯乙酸（phenylacetic acid）	6.46	2.24	1.03	2.92	1.38	0.95	2.61	3.96	2.43	4.67	10.42	20.72
水杨酸（salicylic acid）	2.71	2.29	-	0.37	0.07	0.44	3.25	0.70	-	1.16	0.51	2.03
肉桂酸（cinnamic acid）	0.06	0.10	-	-	-	-	0.10	0.27	-	0.06	-	0.06

成分（component）	含量（content）/（mg·g^-1）
没食子酸（gallic acid）	3.42	0.34	0.92	1.01	0.77	0.66	0.86	0.63	1.43	1.19	1.20	1.52
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	6.82	2.14	2.63	4.60	4.79	4.34	2.04	1.32	4.46	9.76	2.99	3.40
原儿茶酸（protocatechuic acid）	2.14	1.23	1.98	-	1.11	1.15	0.27	0.97	0.59	0.65	5.41	6.32
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	16.26	8.92	-	1.22	0.27	0.35	4.86	0.45	14.17	19.06	-	2.01
绿原酸（chlorogenic acid）	3.39	9.81	18.78	12.53	9.45	9.91	1.10	4.85	-	0.06	3.97	1.11
香草酸（vanillic acid）	1.13	3.81	3.61	2.01	1.43	1.61	2.15	1.04	0.35	0.16	0.14	1.34
咖啡酸（caffeic acid）	0.17	1.17	6.68	3.69	0.90	0.59	0.48	0.56	2.19	1.29	-	-
丁香酸（syringic acid）	0.53	4.64	1.60	3.37	0.09	1.45	1.12	2.78	0.77	0.47	0.55	0.68
对香豆酸（p-coumaricacid）	0.87	1.52	0.87	1.11	0.20	0.10	3.22	3.78	7.94	9.90	2.64	3.44
芥子酸（sinapic acid）	3.26	3.97	3.94	19.01	2.14	0.98	6.23	4.35	16.48	9.88	16.34	9.95
苯甲酸（benzoic acid）	5.88	11.93	2.25	1.28	3.37	2.73	18.21	17.92	2.57	4.29	2.15	4.94
苯乙酸（phenylacetic acid）	6.46	2.24	1.03	2.92	1.38	0.95	2.61	3.96	2.43	4.67	10.42	20.72
水杨酸（salicylic acid）	2.71	2.29	-	0.37	0.07	0.44	3.25	0.70	-	1.16	0.51	2.03
肉桂酸（cinnamic acid）	0.06	0.10	-	-	-	-	0.10	0.27	-	0.06	-	0.06

UPLC-QQQ MS/MS法同时测定松针中的14个成分^*

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王信 ¹ , 李彬 ¹ , 辛安琪 ¹ , 王梦凡 ¹ , 马趣环 ² , 刘兴国 ³ , 石晓峰 ²^,^**

药物分析杂志 | 成分分析 2024,44(10): 1713-1721

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药物分析杂志 | 成分分析 2024, 44(10): 1713-1721

UPLC-QQQ MS/MS法同时测定松针中的14个成分^*

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王信¹, 李彬¹, 辛安琪¹, 王梦凡¹, 马趣环², 刘兴国³, 石晓峰²^,^**

作者信息

^1.甘肃中医药大学药学院，兰州 739946

^2.甘肃省医学科学研究院，兰州 730000

^3.甘肃省药品检验研究院，兰州 730000

Tel：（0931）2306684；E-mail：8138762@qq.com

通讯作者:

^** Tel：（0931）2302664；E-mail：shixiaofeng2005@sina.com

Simultaneous determination of 14 components in pine needles by using UPLC-QQQ MS/MS^*

Xin WANG¹, Bin LI¹, An-qi XIN¹, Meng-fan WANG¹, Qu-huan MA², Xing-guo LIU³, Xiao-feng SHI²^,^**

Affiliations

^1.College of Pharmacy, Gansu University of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 739946, China

^2.Gansu Academy of Medical Sciences, Lanzhou 730000, China

^3.Gansu Institute of Drug Control, Lanzhou 730000, China

出版时间: 2024-10-31 doi: 10.16155/j.0254-1793.2024-0247

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摘要

收起

目的：

建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-QQQ MS/MS)同时测定不同品种和产地的松针中14个成分的含量测定方法。

方法：

运用UPLC-QQQ MS/MS技术，采用Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱，柱温35 ℃，以0.1%的甲酸-乙腈溶液（A）和0.1%的甲酸-水溶液（B）为流动相，梯度洗脱，流速0.2 mL·min^-1；电喷雾离子源，多反应监测模式。各成分的监测离子对分别为m/z 125.0/79.1（没食子酸）、m/z 105.1/77.2（对羟基苯甲醇）、m/z 109.1/91.1（原儿茶酸）、m/z 93.1/65.2（对羟基苯甲酸）、m/z 190.9/85.2（绿原酸）、m/z 151.8/108.2（香草酸）、m/z 135.1/89.2（咖啡酸）、m/z 167.0/122.9（丁香酸）、m/z 119.2/93.2（对香豆酸）、m/z 208.1/193.0（芥子酸）、m/z 82.0/77.2（苯甲酸）、m/z 91.3/65.3（苯乙酸）、m/z 93.1/65.2（水杨酸）、m/z 103.2/77.2（肉桂酸）。

结果：

所测定的12份松针样品中各成分含量范围分别为没食子酸0.34~3.42 mg·g^-1、对羟基苯甲醇1.32~9.76 mg·g^-1、原儿茶酸0~6.32 mg·g^-1、对羟基苯甲酸0~19.06 mg·g^-1、绿原酸0~18.78 mg·g^-1、香草酸0.16~3.81 mg·g^-1、咖啡酸0~6.68 mg·g^-1、丁香酸0.09~4.64 mg·g^-1、对香豆酸0.10~9.90 mg·g^-1、芥子酸0.98~19.01 mg·g^-1、苯甲酸1.28~18.21 mg·g^-1、苯乙酸0.95~20.72 mg·g^-1、水杨酸0~3.25 mg·g^-1、肉桂酸0~0.27 mg·g^-1，各成分在测试范围内线性关系良好，平均加样回收率均在98.0%~101.7%，14个成分定量限介于0.01~0.4 ng。

结论：

本方法适用于常见松针中酚酸类成分的含量测定，其中对羟基苯甲醇、绿原酸、香草酸、丁香酸、对香豆酸、芥子酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸9个成分为首次在松针中发现和测定，可为松针中多种酚酸类成分含量测定提供参考。

关键词

樟子松 / 油松 / 华山松 / 白皮松 / 雪松 / 落叶松 / 酚酸类成分 / 三重四极杆液质联用 / 同时测定

Abstract

收起

Objective:

To establish a content determination method for 14 components in pine needles of different varieties and origins simultaneously by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-QQQ MS/MS).

Methods:

The UPLC-QQQ MS/MS was adopted. A Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC (100 mm×2.1 mm，1.7 μm) chromatographic column was used，with a column temperature of 35 ℃. The mobile phase was a mixture of 0.1% formic acid-acetonitrile solution (A) and 0.1% formic acid-aqueous solution (B) for gradient elution，with a flow rate of 0.2 mL·min^-1. Electrospray ionization was used，and multiple reaction monitoring mode was employed. The monitored ion pairs of each component were m/z 125.0/79.1(gallic acid)，m/z 105.1/77.2(p-hydroxybenzyl alcohol)，m/z 109.1/91.1(protocatechuic acid)，m/z 93.1/65.2(p-hydroxybenzoic acid)，m/z 190.9/85.2(chlorogenic acid)，m/z 151.8/108.2(vanillic acid)，m/z 135.1/89.2(caffeic acid)，m/z 167.0/122.9(syringic acid)，m/z 119.2/93.2(p-coumaric acid)，m/z 208.1/193.0(sinapic acid)，m/z 82.0/77.2(benzoic acid)，m/z 91.3/65.3(phenylacetic acid)，m/z 93.1/65.2(salicylic acid)，and m/z 103.2/77.2(cinnamic acid).

Results:

The content ranges of each component in the 12 determined pine needle samples were as follows：gallic acid 0.34-3.42 mg·g^-1，p-hydroxybenzyl alcohol 1.32-9.76 mg·g^-1，protocatechuic acid 0-6.32 mg·g^-1，p-hydroxybenzoic acid 0-19.06 mg·g^-1，chlorogenic acid 0-18.78 mg·g^-1，vanillic acid 0.16-3.81 mg·g^-1，caffeic acid 0-6.68 mg·g^-1，syringic acid 0.09-4.64 mg·g^-1，p-coumaric acid 0.10-9.90 mg·g^-1，sinapic acid 0.98-19.01 mg·g^-1，benzoic acid 1.28-18.21 mg·g^-1，phenylacetic acid 0.95-20.72 mg·g^-1，salicylic acid 0-3.25 mg·g^-1，and cinnamic acid 0-0.27 mg·g^-1. Each component had a good linear relationship within the test range，and the average sample recovery rate was between 98.0% and 101.7%. The quantitative limits of the 14 components were between 0.01 and 0.4 ng.

Conclusion:

This method is applicable for the determination of phenolic acids in common pine needles，in which 9 compounds，including p-hydroxybenzyl alcohol，chlorogenic acid，vanillic acid，syringic acid，p-coumaric acid，sinapic acid，benzoic acid，salicylic acid，are determined for the first time in pine needles，which can provide reference for the determination of various phenolic acids in pine needles.

Key words

Cedrus deodara (Roxb.) G. Don / Pinus bungeana Zucc. ex Endl. / Pinus tabuliformis Carrière / Pinus sylvestris var. mongholica Litv. / Pinus armandii Franch. / Larix gmelinii (Rupr.) Kuzen. / phenolic acid / UPLC-QQQ MS/MS / simutaniously determination

引用本文

王信, 李彬, 辛安琪, 王梦凡, 马趣环, 刘兴国, 石晓峰. UPLC-QQQ MS/MS法同时测定松针中的14个成分^*. 药物分析杂志, 2024 , 44 (10) : 1713 -1721 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2024-0247

Xin WANG, Bin LI, An-qi XIN, Meng-fan WANG, Qu-huan MA, Xing-guo LIU, Xiao-feng SHI. Simultaneous determination of 14 components in pine needles by using UPLC-QQQ MS/MS^*[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2024 , 44 (10) : 1713 -1721 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2024-0247

正文

收起

松针是松属植物的针状叶，在历史上被视为重要的药食同源天然产品。中医理论认为松针具有“祛风湿，调节内脏阴阳，轻身不饥，延年益寿”的作用^[1]。现代药理研究表明，松针具有抗癌抗真菌抗关节炎降血糖降血脂抗氧化防治动物疾病等作用^[2-3]。酚酸类化合物是在包括松属在内的植物中含有的天然活性物质，是主要的次生代谢产物^[4]。它广泛存在于植物的各个部位，具有显著的抗氧化^[5]，抗炎^[6]和抗微生物^[7]活性。对于松针化学成分研究的报道颇多^[8-10]，然而对于松针中酚酸类成分的研究相对较少，关于松针抗氧化和抑菌活性的物质基础研究较多以“总酚酸”的形式呈现，其酚酸类单体成分研究不够丰富^[11]。超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS/MS)技术具有高通量，重复性好，适合定量分析等特点，目前用于定性、定量分析已较为普及，是含量测定研究的常用技术^[12-13]，适合用于解决酚酸类成分在松针中含量差异大且易产生干扰等分析困难。本文在前期对松针酚酸类成分单体分离、鉴定的基础上，参考了相关文献^[14-16]，运用UPLC-QQQ MS/MS法，进行酚酸类成分的含量表征方法的研究，为该类成分进一步精准研究和开发提供参考。

1　仪器与材料

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1.1　仪器

CPA225D十万分之一电子分析天平（赛多利斯科技有限公司），安捷伦1290液相色谱系统-安捷伦6460-triple quad LC/MS三重四极杆质谱分析系统（安捷伦科技有限公司），HK3310LHC型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2　试验材料

对照品没食子酸（批号C17D10C105977，含量≥98%），由上海源叶生物科技有限公司提供；苯甲酸（批号106419-202003，含量≥99.90%），由中国食品药品检定研究院提供；对羟基苯甲醇（批号MUST-22111517，含量≥99.88%）、原儿茶酸（批号MUST-23083012，含量≥99.99%）、对羟基苯甲酸（批号MUST-23070408，含量≥99.97%）、绿原酸（批号MUST-22111711，含量≥99.82%）、香草酸（批号MUST-23012113，含量≥99.62%）、咖啡酸（批号MUST-23061118，含量≥99.82%）、丁香酸（批号MUST-23033115，含量≥99.81%）、对香豆酸（批号MUST-23033113，含量≥99.99%）、芥子酸（批号MUST-22110218，含量≥99.94%）、苯乙酸（批号MUST-23092508，含量≥98.56%）、水杨酸（批号MUST-23040202，含量≥99.91%）和肉桂酸（批号MUST-23071910，含量≥99.99%），均由武汉曼斯特生物科技有限公司提供。试验中所用松针均采自甘肃省兰州市和天水市，其品种由甘肃省医学科学研究院药物研究所石晓峰研究员鉴定，分别为雪松（Cedrus deodara（Roxb.）G. Don）、白皮松（Pinus bungeana Zucc. ex Endl.）、油松（Pinus tabuliformis Carrière）、樟子松（Pinus sylvestris var. mongholica Litv.）、华山松（Pinus armandii Franch.）和落叶松（Larix gmelinii（Rupr.）Kuzen.）的针叶（表1）。乙腈（批号Lichrosolv. JA087530，默克公司）、甲醇（批号Supelco. L1084107 021，默克公司）、甲酸（批号YRJGH-WS F0513，TCI上海化成工业发展有限公司），均为色谱纯；实验用水为自制超纯水（Milipore，默克公司）；0.22 μm微孔滤膜（批号20230629上海兴亚净化材料厂）。

2　方法与结果

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2.1　色谱-质谱条件

2.1.1　色谱条件

采用Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)色谱柱，柱温35 ℃，以0.1%的甲酸-乙腈(A)及0.1%的甲酸-水溶液(B)为流动相，梯度洗脱(0.00~8.00 min，95%B→87%B；8.00~12.00 min，87%B→77%B；12.00~21.00 min，77%B→65%B；21.00~26.00 min，65%B→0%B；26.01 min，95%B)，流速0.2 mL·min^-1，进样量2 μL。

2.1.2　质谱条件

采用电喷雾离子源(AJS ESI)，正、负离子扫描模式，多反应监测模式(MRM)；离子化电压5 500、-4 500 V；离子源温度450 ℃，喷雾气为氮气，压力0.38 MPa；辅助加热气为N₂，压力0.38 MPa；气帘气为氮气，压力0.21 MPa。质谱分析条件见表2，MRM提取的离子流图见图1-B。

2.2　溶液制备

2.2.1　混合对照品储备液

精密称取肉桂酸对照品17.7 mg，置于50 mL量瓶中，加入50%甲醇水30 mL溶解并定容至刻度，摇匀，用0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液0.5 mL，置于50 mL量瓶中，精密加入对照品没食子酸2.12 mg、对羟基苯甲醇5.37 mg、原儿茶酸3.02 mg、对羟基苯甲酸11.48 mg、绿原酸10.60 mg、香草酸3.43 mg、咖啡酸3.49 mg、丁香酸3.16 mg、对香豆酸5.30 mg、芥子酸11.15 mg、苯甲酸10.12 mg、苯乙酸10.90 mg、水杨酸1.88 mg，加入50%甲醇水40 mL，超声5 min使充分溶解，取出，静置至室温，加入50%甲醇水定容至刻度，摇匀，用0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为混合对照品储备液。

2.2.2　供试品溶液

称取松针样品0.5 g，精密称定，置于具塞锥形瓶内，加入50%甲醇水50 mL，精密称量，超声（40 kHz，160 W，不加热）提取15 min，取出后静置至室温，再称量，用50%甲醇水补足减失的量，摇匀，用0.22微孔滤膜滤过，取续滤液1 mL置于10 mL量瓶中，加入50%甲醇水定容至刻度，摇匀，即得。

2.3　方法学考察

2.3.1　系统适用性试验

精密吸取混合对照品储备液5 μL，置于100 mL量瓶中，用50%甲醇水稀释至刻度，摇匀，精密吸取2 μL，注入UPLC-QQQ MS/MS仪进行测定；并以上述稀释后的溶液浓度为最低值，采用逐渐增加混合对照品储备液吸取体积的方式配制浓度递增的混合对照品溶液进行测定，记录各成分定量限，结果显示含量测定和方法学验证中所测定浓度的各物质信噪比均>10：1，系统灵敏度良好。在“2.1”项色谱-质谱条件下，按进样量2 μL计算，没食子酸、对羟基苯甲醇、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、芥子酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、肉桂酸的定量限依次约为0.1、0.2、0.03、0.2、0.05、0.1、0.4、0.3、0.1、0.3、0.2、0.2、0.06和0.01 ng；另吸取50%甲醇水作为空白溶液进行分析，发现空白溶液对以上14个成分的测定无干扰(图1)。

2.3.2　线性与范围

精密吸取混合对照品储备液20.0、10.0、5.0、2.5和1.0 mL，分别置于100 mL量瓶中，用50%甲醇水稀释至刻度，摇匀，静置，即得系列混合对照品稀释液。取混合对照品储备液及系列混合对照品稀释液，分别按“2.1”项下色谱-质谱条件进行分析，以对照品进样量为横坐标，响应面积为纵坐标，绘制标准曲线并计算回归方程，见表3。

2.3.3　稳定性实验

取“2.2.2”项下供试品溶液，于室温静置，分别于0、1、2、4、8、16、24 h精密吸取2 μL，按“2.1”色谱-质谱条件进行测定，测得不同时间点没没食子酸、对羟基苯甲醇、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、芥子酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、肉桂酸峰面积的RSD分别为0.63%、0.25%、0.44%、0.41%、0.29%、0.13%、0.75%、0.36%、0.60%、0.37%、0.84%、0.22%、0.58%、0.39%，表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

2.3.4　重复性试验

分别精密称取松针样品(S1)0.50 g，共6份，分别置于具塞锥形瓶中，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下条件进样测定，结果没食子酸、对羟基苯甲醇、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、对香豆酸、芥子酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、肉桂酸平均含量分别为3.42、6.82、2.13、16.15、3.39、1.13、0.17、0.53、0.85、3.26、5.87、6.45、2.70、0.06 mg·g^-1，RSD分别为0.58%、2.0%、1.3%、0.25%、2.1%、1.5%、1.6%、1.0%、1.4%、1.5%、2.1%、0.59%、1.8%和1.4%，表明本方法重复性良好。

2.3.5　精密度试验

精密吸取对照品储备液5 mL，加入50 mL量瓶中，用50%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，按“2.1”项下色谱-质谱条件连续测定6次，结果14个成分响应面积的RSD分别为没食子酸0.79%、对羟基苯甲醇1.4%、原儿茶酸1.6%、对羟基苯甲酸2.1%、绿原酸1.5%、香草酸1.2%、咖啡酸2.3%、丁香酸1.3%、对香豆酸0.43%、芥子酸1.3%、苯甲酸0.87%、苯乙酸1.0%、水杨酸1.5%和肉桂酸2.5%，表明仪器精密度良好。

2.3.6　加样回收率试验

分别精密称取样品(S1)9份，每份0.2 g。每组3份，分别加入低、中、高3种浓度的对照品溶液，使加入量分别为样品中各成分含有量的0.8、1.0、1.2倍，按照“2.2.2”项下方法制备供试溶液，按“2.1”项下色谱-质谱条件进行测定。计算加样回收率，结果见表4。

2.4　含量测定

精密吸取对照品储备液5 mL，加入50 mL容量瓶中，用50%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液2 μL，按“2.1”项下色谱-质谱条件进行分析，采用正/负离子扫描模式，以定量离子的响应面积代入回归方程计算，得到各松针中对应成分的含量，见表5。

3　结论与讨论

收起

本研究考查了纯水、纯甲醇、30%甲醇溶液、50%甲醇溶液、70%甲醇溶液以及纯乙醇、50%乙醇溶液的提取效果，发现纯水不能完全提取出所测成分，特别是苯乙酸、水杨酸等成分影响较大；纯水、纯甲醇、30%甲醇中多糖等水溶性杂质较高，影响待测成分的分离，除杂效果不佳；70%甲醇溶液以及纯乙醇、50%乙醇溶液提取液中杂质较高，可能与树脂含量增高有关，这造成基线在后半段分析时间内漂移较大；综合考虑，发现50%甲醇作为溶剂超声提取液所测的图谱分离度较好，基线平稳，能够较好的满足分析需要，故采用50%甲醇作为提取溶剂。另外，实验中考查了Waters ACQUITY UPLC HSS C₁₈ (100 mm×2.1 mm，1.8 μm)、Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)和Agilent Eclipse Plus C₁₈ RRHD(150 mm×2.1 mm，1.8 μm)色谱柱对样品的分离表现，发现Agilent Eclipse Plus C₁₈ RRHD (150 mm×2.1 mm，1.8 μm)柱测得的酚酸色谱峰对称性不佳，拖尾明显，Waters ACQUITY UPLC HSS C₁₈ (100 mm×2.1 mm，1.8 μm)柱所测的各成分保留时间不稳定，受流动相中甲酸含量影响较明显，相对而言，Waters ACQUITY UPLC BEH HILIC(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)柱对所测成分的分离效果理想、对称性好，适合较多酚酸成分的同时测定需要，故采用Waters ACQUITY UPLC BEN HILIC(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)柱进行分析。

通过提取、分离、纯化、结构鉴定等工作，首先在雪松松针中得到了文中所述的14个单体化合物，后续研究发现，这些成分普遍存在于各种松针中。其中对羟基苯甲醇、绿原酸、香草酸、丁香酸、对香豆酸、芥子酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸等9个物质是在松针中首次分离、和测定。这些成分以酚酸类成分为主，可能是松针发挥抗氧化和抑菌活性的部分物质基础，同时可能也是松针化感作用和胃肠道刺激作用的主要来源。因此本研究对于未来松针精准、科学的应用具有一定的参考价值。

松针作为能够抑菌和抗氧化的天然产物，在医疗保健以及食品保鲜方面广泛应用，这与其所含的酚酸类成分密切相关，所测定的松针中各酚酸类成分含量差异较为明显，6种松针中，白皮松测得的总酚酸含量最低(<26 mg·g^-1)，而华山松中测得的总酚酸含量最高(>43 mg·g^-1)；与其他品种的松针相比，落叶松以水杨酸含量最高，咖啡酸含量较低为特征；油松松针以绿原酸、咖啡酸含量最高为特征；樟子松松针以苯甲酸含量最高为特征；华山松松针以对香豆酸含量最高为特征，雪松松针以苯乙酸含量最高、咖啡酸含量最低为特征；以上特征与松针的来源有关，同品种的松针因产地不同，在成分上亦产生较大差别，说明生长环境对植物的次生代谢产物含量影响同样重要；另外，对雪松、白皮松、华山松不同生长年限次生代谢产生的酚酸类成分含量与其抑菌活性的关系进行考察，发现松针抑菌活性与酚酸的含量有关，但同时受其他因素影响，考虑到这不是本文重点讨论的内容，因此另作讨论。目前虽不能将植物种酚酸类成分的差异与生物学活性之间的联系完全阐明，然而，本文对不同松针酚酸类成分化学轮廓的描述以及未来谱效关系的建立仍具有参考价值。

作者曾用HPLC法对文中所述的14个成分进行测定，除检测波长需要按照不同成分最大吸收波长进行切换外，还需要对所测成分进一步富集，所建立的色谱条件基本与文中所述的色谱方法相同，同样能测定松针中的以上成分；然而，由于个别成分在松针中含量不高，一些酚酸峰面积相差几百倍，加之各成分检测波长相差较大，导致色谱图中这些峰的识别不够直观，含量很低的成分积分误差较为明显，检测限的建立相对困难；若采用测波长切换技术则限制了多数品牌HPLC之间的通用性，且较为烦琐；故使用液质联用技术对这些成分进一步分析研究，这样可以较好地解决前述问题。

基金

收起

^*甘肃省科技计划资助项目(23CXGA0038)
兰州市科技局指导性项目(2020-ZD-125)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

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2024年第44卷第10期

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doi: 10.16155/j.0254-1793.2024-0247

接收时间：2024-04-11
首发时间：2026-03-15
出版时间：2024-10-31

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收稿日期：2024-04-11

基金

^*甘肃省科技计划资助项目(23CXGA0038)

兰州市科技局指导性项目(2020-ZD-125)

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^1.甘肃中医药大学药学院，兰州 739946

^2.甘肃省医学科学研究院，兰州 730000

^3.甘肃省药品检验研究院，兰州 730000

通讯作者:

^** Tel：（0931）2302664；E-mail：shixiaofeng2005@sina.com

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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TxT

样品编号（sample No.）	样品名称（sample name）	采集地点（collection site）	样品编号（sample No.）	样品名称（sample name）	采集地点（collection site）
S1	兰州落叶松（Larix gmelinii from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S7	兰州樟子松（Pinus sylvestris from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S2	天水落叶松（Larix gmelinii from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S8	天水樟子松（Pinus sylvestris from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）
S3	兰州油松（Pinus tabuliformis from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S9	兰州华山松（Pinus armandii from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S4	天水油松（Pinus tabuliformis from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S10	天水华山松（Pinus armandii from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）
S5	兰州白皮松（Pinus bungeana from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）	S11	兰州雪松（Cedrus deodara from Lanzhou）	兰州市植物园（Lanzhou Botanical Park）
S6	天水白皮松（Pinus bungeana from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）	S12	天水雪松（Cedrus deodara from Tianshui）	天水市小陇山（Xiaolong Mountain in Tianshui）

样品编号
（sample No.）

样品名称
（sample name）

采集地点
（collection site）

样品编号
（sample No.）

样品名称
（sample name）

采集地点
（collection site）

兰州落叶松
（Larix gmelinii from Lanzhou）

兰州市植物园
（Lanzhou Botanical Park）

兰州樟子松
（Pinus sylvestris from Lanzhou）

兰州市植物园
（Lanzhou Botanical Park）

天水落叶松
（Larix gmelinii from Tianshui）

天水市小陇山
（Xiaolong Mountain in Tianshui）

天水樟子松
（Pinus sylvestris from Tianshui）

天水市小陇山
（Xiaolong Mountain in Tianshui）

兰州油松
（Pinus tabuliformis from Lanzhou）

兰州市植物园
（Lanzhou Botanical Park）

兰州华山松
（Pinus armandii from Lanzhou）

兰州市植物园
（Lanzhou Botanical Park）

天水油松
（Pinus tabuliformis from Tianshui）

天水市小陇山
（Xiaolong Mountain in Tianshui）

S10

天水华山松
（Pinus armandii from Tianshui）

天水市小陇山
（Xiaolong Mountain in Tianshui）

兰州白皮松
（Pinus bungeana from Lanzhou）

兰州市植物园
（Lanzhou Botanical Park）

S11

兰州雪松
（Cedrus deodara from Lanzhou）

兰州市植物园
（Lanzhou Botanical Park）

天水白皮松
（Pinus bungeana from Tianshui）

天水市小陇山
（Xiaolong Mountain in Tianshui）

S12

天水雪松
（Cedrus deodara from Tianshui）

天水市小陇山
（Xiaolong Mountain in Tianshui）

成分（component）	保留时间（retention time）/ min	母离子（parent ion）m/z	去簇电压（fragmentor）/V	子离子（daughter ion）m/z	碰撞能量（collision energy）/eV	扫描模式（scan mode）
没食子酸（gallic acid）	2.548	169.00	90	^*125.0[-C₆H₅O₃]^- 79.1[-C₅H₃O]^-	15 25	负离子模式（negative ion mode）
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	3.365	122.9	80	^*105.1[-C₇H₅O]⁺ 77.2[-C₆H₅]⁺	10 15	正离子模式（positive ion mode）
原儿茶酸（protocatechuic acid）	4.489	153.00	90	^*109.1[-C₆H₅O₂]^- 91.1[-C₆H₃O]^-	15 25	负离子模式（negative ion mode）
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	7.496	137.00	80	^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-	15 30	负离子模式（negative ion mode）
绿原酸（chlorogenic acid）	8.217	353.15	140	^*190.9[-C₇H₁₀O₆]^- 85.2[-C₄H₅O₂]^-	15 46	负离子模式（negative ion mode）
香草酸（vanillic acid）	9.043	166.90	80	^*151.8[-C₇H₄O₄]^- 108.2[-C₆H₄O₂]^-	10 16	负离子模式（negative ion mode）
咖啡酸（caffeic acid）	9.496	179.0	80	^*135.1[-C₈H₆O₂]^- 89.2[-C₄H₉O₂]^-	15 35	负离子模式（negative ion mode）
丁香酸（syringic acid）	9.800	197.0	80	^*122.9[-C₇H₇O₂]^- 167.0[-C₈H₇O₄]^-	22 18	负离子模式（negative ion mode）
对香豆酸（p-coumaricacid）	12.713	163.0	80	^*119.2[-C₈H₆O]^- 93.2[-C₆H₅O]^-	24 38	负离子模式（negative ion mode）
芥子酸（sinapic acid）	14.226	223.0	80	^*208.1[-C₁₀H₉O₅]^- 193.0[-C₁₀H₉O₄]^-	15 22	负离子模式（negative ion mode）
苯甲酸（benzoic acid）	15.426	122.12	65	^*82.0[-C₅H₆O]^- 77.2[-C₆H₅]^-	15 26	负离子模式（negative ion mode）
苯乙酸（phenylacetic acid）	16.652	135.0	80	^*91.3[-C₇H₇]⁺ 65.3[-C₅H₅]⁺	15 40	正离子模式（positive ion mode）
水杨酸（salicylic acid）	17.491	137.0	80	^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-	14 30	负离子模式（negative ion mode）
肉桂酸（cinnamic acid）	21.261	147.0	80	^*103.2[-C₈H₇]^- 77.2[-C₆H₅]^-	10 20	负离子模式（negative ion mode）

成分
（component）

保留时间
（retention time）/ min

母离子
（parent ion）m/z

去簇电压
（fragmentor）/V

子离子
（daughter ion）m/z

碰撞能量
（collision energy）/eV

扫描模式
（scan mode）

没食子酸（gallic acid）

2.548

169.00

^*125.0[-C₆H₅O₃]^- 79.1[-C₅H₃O]^-

15
25

负离子模式
（negative ion mode）

对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）

3.365

122.9

^*105.1[-C₇H₅O]⁺ 77.2[-C₆H₅]⁺

10
15

正离子模式
（positive ion mode）

原儿茶酸（protocatechuic acid）

4.489

153.00

^*109.1[-C₆H₅O₂]^- 91.1[-C₆H₃O]^-

15
25

负离子模式
（negative ion mode）

对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）

7.496

137.00

^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-

15
30

负离子模式
（negative ion mode）

绿原酸（chlorogenic acid）

8.217

353.15

140

^*190.9[-C₇H₁₀O₆]^- 85.2[-C₄H₅O₂]^-

15
46

负离子模式
（negative ion mode）

香草酸（vanillic acid）

9.043

166.90

^*151.8[-C₇H₄O₄]^- 108.2[-C₆H₄O₂]^-

10
16

负离子模式
（negative ion mode）

咖啡酸（caffeic acid）

9.496

179.0

^*135.1[-C₈H₆O₂]^- 89.2[-C₄H₉O₂]^-

15
35

负离子模式
（negative ion mode）

丁香酸（syringic acid）

9.800

197.0

^*122.9[-C₇H₇O₂]^- 167.0[-C₈H₇O₄]^-

22
18

负离子模式
（negative ion mode）

对香豆酸（p-coumaricacid）

12.713

163.0

^*119.2[-C₈H₆O]^- 93.2[-C₆H₅O]^-

24
38

负离子模式
（negative ion mode）

芥子酸（sinapic acid）

14.226

223.0

^*208.1[-C₁₀H₉O₅]^- 193.0[-C₁₀H₉O₄]^-

15
22

负离子模式
（negative ion mode）

苯甲酸（benzoic acid）

15.426

122.12

^*82.0[-C₅H₆O]^- 77.2[-C₆H₅]^-

15
26

负离子模式
（negative ion mode）

苯乙酸（phenylacetic acid）

16.652

135.0

^*91.3[-C₇H₇]⁺ 65.3[-C₅H₅]⁺

15
40

正离子模式
（positive ion mode）

水杨酸（salicylic acid）

17.491

137.0

^*93.1[-C₆H₅O]^- 65.2[-C₅H₅]^-

14
30

负离子模式
（negative ion mode）

肉桂酸（cinnamic acid）

21.261

147.0

^*103.2[-C₈H₇]^- 77.2[-C₆H₅]^-

10
20

负离子模式
（negative ion mode）

成分（component）	线性范围（linear range）/ng	回归方程（regression equation）	相关系数（correlation coefficient）
没食子酸（gallic acid）	84.80~0.85	Y=5 866X+10.309 6	0.999 8
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	214.80~2.15	Y=73 435X-32.999	0.999 9
原儿茶酸（protocatechuic acid）	120.64~1.21	Y=19 782X+1.510 4	0.999 8
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	459.20~4.59	Y=38 329X-249.23	0.999 7
绿原酸（chlorogenic acid）	424.0~4.24	Y=139 250X-211.82	0.999 9
香草酸（vanillic acid）	137.20~1.37	Y=41 022X-205.815	0.999 9
咖啡酸（caffeic acid）	139.48~1.39	Y=45 265X-388.24	0.999 7
丁香酸（syringic acid）	126.40~1.26	Y=24 056X+34.514	0.999 8
对香豆酸（p-coumaricacid）	212.16~2.12	Y=54 634X-264.51	0.999 7
芥子酸（sinapic acid）	446.0~4.46	Y=158 448X-1 001.9	0.999 8
苯甲酸（benzoic acid）	404.8~4.05	Y=120 417X+476.7	0.999 9
苯乙酸（phenylacetic acid）	435.84~4.36	Y=118 439X+69.867	0.999 9
水杨酸（salicylic acid）	75.20~0.75	Y=25 161X-118.4	0.999 8
肉桂酸（cinnamic acid）	7.07~0.07	Y=4 205.3X+17.022	0.999 7

成分（component）

线性范围（linear range）/ng

回归方程（regression equation）

相关系数（correlation coefficient）

没食子酸（gallic acid）

84.80~0.85

Y=5 866X+10.309 6

0.999 8

对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）

214.80~2.15

Y=73 435X-32.999

0.999 9

原儿茶酸（protocatechuic acid）

120.64~1.21

Y=19 782X+1.510 4

0.999 8

对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）

459.20~4.59

Y=38 329X-249.23

0.999 7

绿原酸（chlorogenic acid）

424.0~4.24

Y=139 250X-211.82

0.999 9

香草酸（vanillic acid）

137.20~1.37

Y=41 022X-205.815

0.999 9

咖啡酸（caffeic acid）

139.48~1.39

Y=45 265X-388.24

0.999 7

丁香酸（syringic acid）

126.40~1.26

Y=24 056X+34.514

0.999 8

对香豆酸（p-coumaricacid）

212.16~2.12

Y=54 634X-264.51

0.999 7

芥子酸（sinapic acid）

446.0~4.46

Y=158 448X-1 001.9

0.999 8

苯甲酸（benzoic acid）

404.8~4.05

Y=120 417X+476.7

0.999 9

苯乙酸（phenylacetic acid）

435.84~4.36

Y=118 439X+69.867

0.999 9

水杨酸（salicylic acid）

75.20~0.75

Y=25 161X-118.4

0.999 8

肉桂酸（cinnamic acid）

7.07~0.07

Y=4 205.3X+17.022

0.999 7

成分（component）	样品含量（content）/mg	加入量（added）/mg	测得量（found）/mg	回收率（recovery）/%	RSD/%
没食子酸（gallic acid）	0.684	0.442	1.114	97.3	2.7
	0.684	0.680	1.376	101.8
	0.684	0.830	1.490	97.1
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	1.364	1.070	2.462	102.6	2.7
	1.364	1.380	2.772	102.1
	1.364	1.636	2.962	97.7
原儿茶酸（protocatechuic acid）	0.428	0.342	0.776	101.9	1.9
	0.428	0.428	0.866	102.5
	0.428	0.514	0.936	98.9
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	3.252	2.644	5.816	96.9	2.8
	3.252	3.260	6.522	100.3
	3.252	4.164	7.516	102.4
绿原酸（chlorogenic acid）	0.678	0.516	1.182	97.7	3.0
	0.678	0.708	1.412	103.6
	0.678	0.838	1.524	101.0
香草酸（vanillic acid）	0.227	0.182	0.404	97.4	2.6
	0.227	0.220	0.452	102.4
	0.227	0.252	0.482	101.3
咖啡酸（caffeic acid）	0.034	0.026	0.059	96.3	2.8
	0.034	0.034	0.066	96.6
	0.034	0.040	0.074	101.1
丁香酸（syringic acid）	0.106	0.088	0.194	99.9	1.7
	0.106	0.120	0.228	101.9
	0.106	0.130	0.240	103.3
对香豆酸（p-coumaricacid）	0.175	0.144	0.320	100.8	2.3
	0.175	0.174	0.344	97.2
	0.175	0.210	0.378	96.8
芥子酸（sinapic acid）	0.652	0.530	1.190	101.5	2.7
	0.652	0.662	1.294	97.0
	0.652	0.790	1.456	101.8
苯甲酸（benzoic acid）	1.176	0.918	2.096	100.2	0.85
	1.176	1.088	2.250	98.7
	1.176	1.412	2.590	100.2
苯乙酸（phenylacetic acid）	1.293	1.034	2.310	98.4	0.56
	1.293	1.292	2.574	99.2
	1.293	1.574	2.858	99.5
水杨酸（salicylic acid）	0.543	0.412	0.950	98.9	1.9
	0.543	0.558	1.104	100.6
	0.543	0.664	1.186	96.9
肉桂酸（cinnamic acid）	0.012	0.010	0.022	102.3	2.6
	0.012	0.012	0.024	98.6
	0.012	0.014	0.026	97.4

成分
（component）

样品含量
（content）/mg

加入量
（added）/mg

测得量
（found）/mg

回收率
（recovery）/%

RSD/%

没食子酸（gallic acid）

0.684

0.442

1.114

97.3

2.7

0.684

0.680

1.376

101.8

0.684

0.830

1.490

97.1

对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）

1.364

1.070

2.462

102.6

2.7

1.364

1.380

2.772

102.1

1.364

1.636

2.962

97.7

原儿茶酸（protocatechuic acid）

0.428

0.342

0.776

101.9

1.9

0.428

0.866

102.5

0.428

0.514

0.936

98.9

对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）

3.252

2.644

5.816

96.9

2.8

3.252

3.260

6.522

100.3

3.252

4.164

7.516

102.4

绿原酸（chlorogenic acid）

0.678

0.516

1.182

97.7

3.0

0.678

0.708

1.412

103.6

0.678

0.838

1.524

101.0

香草酸（vanillic acid）

0.227

0.182

0.404

97.4

2.6

0.227

0.220

0.452

102.4

0.227

0.252

0.482

101.3

咖啡酸（caffeic acid）

0.034

0.026

0.059

96.3

2.8

0.034

0.066

96.6

0.034

0.040

0.074

101.1

丁香酸（syringic acid）

0.106

0.088

0.194

99.9

1.7

0.106

0.120

0.228

101.9

0.106

0.130

0.240

103.3

对香豆酸（p-coumaricacid）

0.175

0.144

0.320

100.8

2.3

0.175

0.174

0.344

97.2

0.175

0.210

0.378

96.8

芥子酸（sinapic acid）

0.652

0.530

1.190

101.5

2.7

0.652

0.662

1.294

97.0

0.652

0.790

1.456

101.8

苯甲酸（benzoic acid）

1.176

0.918

2.096

100.2

0.85

1.176

1.088

2.250

98.7

1.176

1.412

2.590

100.2

苯乙酸（phenylacetic acid）

1.293

1.034

2.310

98.4

0.56

1.293

1.292

2.574

99.2

1.293

1.574

2.858

99.5

水杨酸（salicylic acid）

0.543

0.412

0.950

98.9

1.9

0.543

0.558

1.104

100.6

0.543

0.664

1.186

96.9

肉桂酸（cinnamic acid）

0.012

0.010

0.022

102.3

2.6

0.012

0.024

98.6

0.012

0.014

0.026

97.4

成分（component）	含量（content）/（mg·g^-1）
没食子酸（gallic acid）	3.42	0.34	0.92	1.01	0.77	0.66	0.86	0.63	1.43	1.19	1.20	1.52
对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）	6.82	2.14	2.63	4.60	4.79	4.34	2.04	1.32	4.46	9.76	2.99	3.40
原儿茶酸（protocatechuic acid）	2.14	1.23	1.98	-	1.11	1.15	0.27	0.97	0.59	0.65	5.41	6.32
对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）	16.26	8.92	-	1.22	0.27	0.35	4.86	0.45	14.17	19.06	-	2.01
绿原酸（chlorogenic acid）	3.39	9.81	18.78	12.53	9.45	9.91	1.10	4.85	-	0.06	3.97	1.11
香草酸（vanillic acid）	1.13	3.81	3.61	2.01	1.43	1.61	2.15	1.04	0.35	0.16	0.14	1.34
咖啡酸（caffeic acid）	0.17	1.17	6.68	3.69	0.90	0.59	0.48	0.56	2.19	1.29	-	-
丁香酸（syringic acid）	0.53	4.64	1.60	3.37	0.09	1.45	1.12	2.78	0.77	0.47	0.55	0.68
对香豆酸（p-coumaricacid）	0.87	1.52	0.87	1.11	0.20	0.10	3.22	3.78	7.94	9.90	2.64	3.44
芥子酸（sinapic acid）	3.26	3.97	3.94	19.01	2.14	0.98	6.23	4.35	16.48	9.88	16.34	9.95
苯甲酸（benzoic acid）	5.88	11.93	2.25	1.28	3.37	2.73	18.21	17.92	2.57	4.29	2.15	4.94
苯乙酸（phenylacetic acid）	6.46	2.24	1.03	2.92	1.38	0.95	2.61	3.96	2.43	4.67	10.42	20.72
水杨酸（salicylic acid）	2.71	2.29	-	0.37	0.07	0.44	3.25	0.70	-	1.16	0.51	2.03
肉桂酸（cinnamic acid）	0.06	0.10	-	-	-	-	0.10	0.27	-	0.06	-	0.06

成分
（component）

含量（content）/（mg·g^-1）

S10

S11

S12

没食子酸（gallic acid）

3.42

0.34

0.92

1.01

0.77

0.66

0.86

0.63

1.43

1.19

1.20

1.52

对羟基苯甲醇（p-hydroxybenzyl alcohol）

6.82

2.14

2.63

4.60

4.79

4.34

2.04

1.32

4.46

9.76

2.99

3.40

原儿茶酸（protocatechuic acid）

2.14

1.23

1.98

1.11

1.15

0.27

0.97

0.59

0.65

5.41

6.32

对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）

16.26

8.92

1.22

0.27

0.35

4.86

0.45

14.17

19.06

2.01

绿原酸（chlorogenic acid）

3.39

9.81

18.78

12.53

9.45

9.91

1.10

4.85

0.06

3.97

1.11

香草酸（vanillic acid）

1.13

3.81

3.61

2.01

1.43

1.61

2.15

1.04

0.35

0.16

0.14

1.34

咖啡酸（caffeic acid）

0.17

1.17

6.68

3.69

0.90

0.59

0.48

0.56

2.19

1.29

丁香酸（syringic acid）

0.53

4.64

1.60

3.37

0.09

1.45

1.12

2.78

0.77

0.47

0.55

0.68

对香豆酸（p-coumaricacid）

0.87

1.52

0.87

1.11

0.20

0.10

3.22

3.78

7.94

9.90

2.64

3.44

芥子酸（sinapic acid）

3.26

3.97

3.94

19.01

2.14

0.98

6.23

4.35

16.48

9.88

16.34

9.95

苯甲酸（benzoic acid）

5.88

11.93

2.25

1.28

3.37

2.73

18.21

17.92

2.57

4.29

2.15

4.94

苯乙酸（phenylacetic acid）

6.46

2.24

1.03

2.92

1.38

0.95

2.61

3.96

2.43

4.67

10.42

20.72

水杨酸（salicylic acid）

2.71

2.29

0.37

0.07

0.44

3.25

0.70

1.16

0.51

2.03

肉桂酸（cinnamic acid）

0.06

0.10

0.27

0.06