药物分析杂志

时间（time）/min	流动相比例（ratio of mobile phase）/%
0.00	80	20
5.00	40	60
5.01	30	70
11.00	0	100
15.00	0	100
15.01	50	50
18.00	50	50

时间（time）/min	流动相比例（ratio of mobile phase）/%
0.00	80	20
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5.01	30	70
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18.00	50	50

生物胺 (biogenic amine)	母离子 (precursor ion)m/z	子离子 (product ion)m/z	碰撞能量 (collision energy)/eV
苯乙胺(phenylethylamine)	355.3	157.2	25
		170.1^*	23
色胺(tryptamine)	394.3	130.1	40
		144.1^*	19
腐胺(putrescine)	555.1	170.3	33
		321.1^*	23
尸胺(cadaverine)	569.4	170.0	35
		234.3^*	30
组胺(histamine)	578.4	170.0	32
		315.4^*	24
亚精胺(spermidine)	845.5	305.4^*	34
		360.5	40
精胺(spermine)	1135.6	170.0	65
		360.3^*	48
章鱼胺(octopamine)	620.0	170.0	32
		234.0^*	37
胍丁胺(agmatine)	364.2	170.0	29
		305.1^*	20
酪胺(tyramine)	604.4	170.0	35
		370.4^*	25

生物胺 (biogenic amine)	母离子 (precursor ion)m/z	子离子 (product ion)m/z	碰撞能量 (collision energy)/eV
苯乙胺(phenylethylamine)	355.3	157.2	25
		170.1^*	23
色胺(tryptamine)	394.3	130.1	40
		144.1^*	19
腐胺(putrescine)	555.1	170.3	33
		321.1^*	23
尸胺(cadaverine)	569.4	170.0	35
		234.3^*	30
组胺(histamine)	578.4	170.0	32
		315.4^*	24
亚精胺(spermidine)	845.5	305.4^*	34
		360.5	40
精胺(spermine)	1135.6	170.0	65
		360.3^*	48
章鱼胺(octopamine)	620.0	170.0	32
		234.0^*	37
胍丁胺(agmatine)	364.2	170.0	29
		305.1^*	20
酪胺(tyramine)	604.4	170.0	35
		370.4^*	25

生物胺 (biogenic amine)	生物胺浓度 (concentration of biogenic amines)/(ng·mL-1)	骨肽注射液的企业 (enterprises of osteopeptide injection)
色胺 (tryptamine)	5	-10.48	1.7	-4.78	2.4	-8.71	3.7	4.09	2.5	3.29	3.3	3.80	2.7
	50	-0.07	0.30	-6.83	3.3	-7.64	0.20	5.64	0.50	12.38	2.80	13.29	1.1
	100	-4.98	1.1	-7.29	1.0	-2.13	0.80	7.63	1.2	1.21	0.30	3.59	1.50
苯乙胺 (phenylethylamine)	5	-0.81	2.2	-4.27	2.7	-4.16	1.9	5.85	2.2	-18.90	4.5	-17.60	0.80
	50	-1.98	1.7	-5.53	0.60	-11.20	2.9	2.15	1.8	-8.75	0.70	-17.17	1.7
	100	-4.27	2.4	-5.59	1.2	-1.61	1.0	1.30	2.4	-3.80	4.3	-6.69	2.1
腐胺 (putrescine)	5	-5.51	2.4	-6.53	1.4	-15.31	1.8	7.01	3.6	10.01	3.1	14.39	0.40
	50	-0.53	1.0	-5.32	2.2	-3.04	1.9	6.75	1.5	4.87	0.70	-0.22	2.9
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尸胺 (cadaverine)	5	-2.49	0.80	5.84	2.5	-17.56	2.1	18.56	3.9	3.91	1.8	6.06	2.4
	50	-1.78	1.3	2.67	1.1	-3.23	1.9	14.06	3.8	3.28	1.2	1.86	2.4
	100	-2.75	1.2	1.81	0.40	-1.78	1.0	7.53	1.9	2.66	1.5	1.09	0.70
组胺 (histamine)	1	-15.88	1.2	-14.07	1.7	-8.95	2.7	1.54	2.3	0.34	2.9	1.53	2.9
	50	2.75	0.8	-3.65	0.80	-10.29	0.50	1.89	2.7	1.11	3.3	1.56	0.80
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章鱼胺 (octopamine)	1	1.05	1.2	-2.57	0.80	-9.39	0.80	-4.28	0.30	2.49	1.6	5.72	2.9
	50	3.31	1.6	-5.90	1.3	-2.89	1.7	-3.09	1.3	3.88	2.2	5.88	3.3
	100	2.69	1.3	-7.46	2.8	-3.50	2.1	-0.64	0.20	4.89	1.9	6.11	1.1
胍丁胺 (agmatine)	5	-0.24	1.9	-4.13	3.1	-7.43	1.6	3.59	1.5	-5.95	2.0	-3.84	0.70
	25	-1.52	0.70	-4.45	2.0	-2.53	1.0	6.16	2.4	-6.65	2.1	-7.65	1.3
	50	-2.66	1.1	-1.94	0.60	-3.05	2.1	5.70	0.40	-1.49	0.1	-3.85	1.2
酪胺 (tyramine)	5	1.5	1.2	-3.89	1.6	6.03	3.5	-1.49	0.70	7.88	4.6	4.06	1.1
	25	6.25	2.3	-15.03	3.2	7.70	2.4	-16.82	7.1	9.51	2.3	14.13	3.3
	50	2.51	0.50	-2.56	1.7	9.00	0.40	-6.62	3.2	2.21	1.5	12.55	1.1
亚精胺 (spermidine)	10	2.45	1.3	9.36	2.4	9.40	3.5	4.63	3.0	-7.61	3.2	-3.67	0.90
	50	4.93	1.1	6.21	1.6	6.24	0.10	7.06	1.0	-5.77	1.7	-3.78	0.20
	100	0.7	0.20	1.80	1.9	1.81	0.20	1.67	0.20	-5.18	2.1	-3.13	1.6
精胺 (spermine)	5	3.91	1.2	-14.88	2.4	-14.91	3.7	-13.49	1.3	-17.21	0.40	-16.35	3.2
	50	5.33	0.80	-1.32	0.50	-1.34	2.4	-16.07	0.80	-14.08	0.50	-14.71	1.9
	100	0.86	0.80	-6.94	1.5	-6.95	0.90	-10.77	2.1	-13.76	0.70	-15.90	0.90

生物胺 (biogenic amine)	生物胺浓度 (concentration of biogenic amines)/(ng·mL-1)	骨肽注射液的企业 (enterprises of osteopeptide injection)
色胺 (tryptamine)	5	-10.48	1.7	-4.78	2.4	-8.71	3.7	4.09	2.5	3.29	3.3	3.80	2.7
	50	-0.07	0.30	-6.83	3.3	-7.64	0.20	5.64	0.50	12.38	2.80	13.29	1.1
	100	-4.98	1.1	-7.29	1.0	-2.13	0.80	7.63	1.2	1.21	0.30	3.59	1.50
苯乙胺 (phenylethylamine)	5	-0.81	2.2	-4.27	2.7	-4.16	1.9	5.85	2.2	-18.90	4.5	-17.60	0.80
	50	-1.98	1.7	-5.53	0.60	-11.20	2.9	2.15	1.8	-8.75	0.70	-17.17	1.7
	100	-4.27	2.4	-5.59	1.2	-1.61	1.0	1.30	2.4	-3.80	4.3	-6.69	2.1
腐胺 (putrescine)	5	-5.51	2.4	-6.53	1.4	-15.31	1.8	7.01	3.6	10.01	3.1	14.39	0.40
	50	-0.53	1.0	-5.32	2.2	-3.04	1.9	6.75	1.5	4.87	0.70	-0.22	2.9
	100	-3.61	2.4	-1.68	2.8	-1.88	1.2	5.05	1.0	3.43	0.60	2.10	1.4
尸胺 (cadaverine)	5	-2.49	0.80	5.84	2.5	-17.56	2.1	18.56	3.9	3.91	1.8	6.06	2.4
	50	-1.78	1.3	2.67	1.1	-3.23	1.9	14.06	3.8	3.28	1.2	1.86	2.4
	100	-2.75	1.2	1.81	0.40	-1.78	1.0	7.53	1.9	2.66	1.5	1.09	0.70
组胺 (histamine)	1	-15.88	1.2	-14.07	1.7	-8.95	2.7	1.54	2.3	0.34	2.9	1.53	2.9
	50	2.75	0.8	-3.65	0.80	-10.29	0.50	1.89	2.7	1.11	3.3	1.56	0.80
	100	-1.82	0.50	-4.02	2.5	-4.24	1.8	7.04	1.2	0.76	0.60	2.22	1.1
章鱼胺 (octopamine)	1	1.05	1.2	-2.57	0.80	-9.39	0.80	-4.28	0.30	2.49	1.6	5.72	2.9
	50	3.31	1.6	-5.90	1.3	-2.89	1.7	-3.09	1.3	3.88	2.2	5.88	3.3
	100	2.69	1.3	-7.46	2.8	-3.50	2.1	-0.64	0.20	4.89	1.9	6.11	1.1
胍丁胺 (agmatine)	5	-0.24	1.9	-4.13	3.1	-7.43	1.6	3.59	1.5	-5.95	2.0	-3.84	0.70
	25	-1.52	0.70	-4.45	2.0	-2.53	1.0	6.16	2.4	-6.65	2.1	-7.65	1.3
	50	-2.66	1.1	-1.94	0.60	-3.05	2.1	5.70	0.40	-1.49	0.1	-3.85	1.2
酪胺 (tyramine)	5	1.5	1.2	-3.89	1.6	6.03	3.5	-1.49	0.70	7.88	4.6	4.06	1.1
	25	6.25	2.3	-15.03	3.2	7.70	2.4	-16.82	7.1	9.51	2.3	14.13	3.3
	50	2.51	0.50	-2.56	1.7	9.00	0.40	-6.62	3.2	2.21	1.5	12.55	1.1
亚精胺 (spermidine)	10	2.45	1.3	9.36	2.4	9.40	3.5	4.63	3.0	-7.61	3.2	-3.67	0.90
	50	4.93	1.1	6.21	1.6	6.24	0.10	7.06	1.0	-5.77	1.7	-3.78	0.20
	100	0.7	0.20	1.80	1.9	1.81	0.20	1.67	0.20	-5.18	2.1	-3.13	1.6
精胺 (spermine)	5	3.91	1.2	-14.88	2.4	-14.91	3.7	-13.49	1.3	-17.21	0.40	-16.35	3.2
	50	5.33	0.80	-1.32	0.50	-1.34	2.4	-16.07	0.80	-14.08	0.50	-14.71	1.9
	100	0.86	0.80	-6.94	1.5	-6.95	0.90	-10.77	2.1	-13.76	0.70	-15.90	0.90

生物胺 (biogenic amines)	线性范围 (liner range)/ng·mL^-1	回归方程 (regression equation)	r	LOD/（ng·mL^-1）	LOQ/（ng·mL^-1）
色胺(tryptamine)	1~100	Y=122 406X+44 389	0.999 8	0.05	0.15
苯乙胺(phenylethylamine)	1~100	Y=122 041X-28 701	0.999 1	0.10	0.30
腐胺(putrescine)	1~100	Y=384 042X+677 583	0.997 6	0.01	0.05
尸胺(cadaverine)	1~100	Y=319 873X+212 301	0.999 8	0.10	0.30
组胺(histamine)	0.5~100	Y=266 589X+79 442	0.999 9	0.05	0.15
章鱼胺(octopamine)	0.5~100	Y=128 556X-7 759.4	0.999 6	0.05	0.15
胍丁胺(agmatine)	0.5~50	Y=548 352X+735 514	0.997 0	0.05	0.15
酪胺(tyramine)	1~50	Y=263 865X+51 327	0.999 0	0.05	0.15
亚精胺(spermidine)	1~100	Y=79 679X+5 617.6	0.999 6	0.10	0.30
精胺(spermine)	5~100	Y=48 990X+707 442	0.990 0	0.10	0.30

生物胺 (biogenic amines)	线性范围 (liner range)/ng·mL^-1	回归方程 (regression equation)	r	LOD/（ng·mL^-1）	LOQ/（ng·mL^-1）
色胺(tryptamine)	1~100	Y=122 406X+44 389	0.999 8	0.05	0.15
苯乙胺(phenylethylamine)	1~100	Y=122 041X-28 701	0.999 1	0.10	0.30
腐胺(putrescine)	1~100	Y=384 042X+677 583	0.997 6	0.01	0.05
尸胺(cadaverine)	1~100	Y=319 873X+212 301	0.999 8	0.10	0.30
组胺(histamine)	0.5~100	Y=266 589X+79 442	0.999 9	0.05	0.15
章鱼胺(octopamine)	0.5~100	Y=128 556X-7 759.4	0.999 6	0.05	0.15
胍丁胺(agmatine)	0.5~50	Y=548 352X+735 514	0.997 0	0.05	0.15
酪胺(tyramine)	1~50	Y=263 865X+51 327	0.999 0	0.05	0.15
亚精胺(spermidine)	1~100	Y=79 679X+5 617.6	0.999 6	0.10	0.30
精胺(spermine)	5~100	Y=48 990X+707 442	0.990 0	0.10	0.30

生物胺 (biogenic amine)	理论值 (theoretical value)/（ng·mL^-1）	实测值 (measured value)/（ng·mL^-1）	回收率 (recovery)/%	RSD/%
色胺(tryptamine)	5	4.48	89.5	1.7
	50	49.97	99.9	0.30
	100	95.02	95.0	1.1
苯乙胺(phenylethylamine)	5	4.96	99.2	2.2
	50	49.01	98.0	1.7
	100	95.73	95.7	2.4
腐胺(putrescine)	5	4.72	94.5	2.4
	50	49.73	99.5	1.0
	100	96.39	96.4	2.4
尸胺(cadaverine)	5	4.88	97.5	0.80
	50	49.11	98.2	1.3
	100	97.25	97.2	1.2
组胺(histamine)	1	0.84	84.1	1.2
	50	51.37	102.7	0.8
	100	98.18	98.2	0.5
章鱼胺(octopamine)	1	1.01	101.0	1.2
	50	51.65	103.3	1.6
	100	102.69	102.7	1.3
胍丁胺(agmatine)	5	4.99	99.8	1.9
	25	26.56	98.5	0.70
	50	48.67	97.3	1.1
酪胺(tyramine)	5	5.08	101.5	1.2
	25	24.62	106.2	2.3
	50	51.25	102.5	0.5
亚精胺(spermidine)	10	5.12	102.4	1.3
	50	52.46	104.9	1.1
	100	100.70	100.7	0.2
精胺(spermine)	5	10.39	103.9	1.2
	50	52.76	105.3	0.8
	100	100.86	100.9	0.8

生物胺 (biogenic amine)	理论值 (theoretical value)/（ng·mL^-1）	实测值 (measured value)/（ng·mL^-1）	回收率 (recovery)/%	RSD/%
色胺(tryptamine)	5	4.48	89.5	1.7
	50	49.97	99.9	0.30
	100	95.02	95.0	1.1
苯乙胺(phenylethylamine)	5	4.96	99.2	2.2
	50	49.01	98.0	1.7
	100	95.73	95.7	2.4
腐胺(putrescine)	5	4.72	94.5	2.4
	50	49.73	99.5	1.0
	100	96.39	96.4	2.4
尸胺(cadaverine)	5	4.88	97.5	0.80
	50	49.11	98.2	1.3
	100	97.25	97.2	1.2
组胺(histamine)	1	0.84	84.1	1.2
	50	51.37	102.7	0.8
	100	98.18	98.2	0.5
章鱼胺(octopamine)	1	1.01	101.0	1.2
	50	51.65	103.3	1.6
	100	102.69	102.7	1.3
胍丁胺(agmatine)	5	4.99	99.8	1.9
	25	26.56	98.5	0.70
	50	48.67	97.3	1.1
酪胺(tyramine)	5	5.08	101.5	1.2
	25	24.62	106.2	2.3
	50	51.25	102.5	0.5
亚精胺(spermidine)	10	5.12	102.4	1.3
	50	52.46	104.9	1.1
	100	100.70	100.7	0.2
精胺(spermine)	5	10.39	103.9	1.2
	50	52.76	105.3	0.8
	100	100.86	100.9	0.8

生物胺 (biogenic amine)	理论值 (theoretical value)/（ng·mL^-1）	实测值 (measured value)/（ng·mL^-1）	回收率 (recovery)/%（n=6）	RSD/% （n=6）
色胺(tryptamine)	5	4.65	93.0	1.7
	50	50.71	96.2	2.7
	100	94.96	95.0	1.4
苯乙胺(phenylethylamine)	5	4.95	99.0	4.7
	50	50.69	102.0	6.1
	100	95.35	95.4	4.1
腐胺(putrescine)	5	4.73	94.6	3.3
	50	50.93	99.4	1.0
	100	96.99	97.0	2.0
尸胺(cadaverine)	5	4.80	96.0	1.6
	50	49.83	99.3	2.1
	100	95.90	95.9	2.9
组胺(histamine)	1	0.87	87.1	2.4
	50	51.07	92.8	2.2
	100	99.57	99.6	2.5
章鱼胺(octopamine)	1	1.01	100.7	2.9
	50	50.83	100.5	2.9
	100	99.34	99.3	2.8
胍丁胺(agmatine)	5	5.03	100.5	0.90
	25	26.35	102.1	1.6
	50	48.64	97.3	0.90
酪胺(tyramine)	5	5.09	101.8	1.2
	25	24.50	99.5	2.1
	50	49.44	98.9	3.1
亚精胺(spermidine)	10	10.40	103.3	1.0
	50	52.32	103.4	0.80
	100	101.90	101.9	3.3
精胺(spermine)	5	5.07	102.1	1.6
	50	52.82	104.8	1.2
	100	97.01	97.0	3.0

生物胺 (biogenic amine)	理论值 (theoretical value)/（ng·mL^-1）	实测值 (measured value)/（ng·mL^-1）	回收率 (recovery)/%（n=6）	RSD/% （n=6）
色胺(tryptamine)	5	4.65	93.0	1.7
	50	50.71	96.2	2.7
	100	94.96	95.0	1.4
苯乙胺(phenylethylamine)	5	4.95	99.0	4.7
	50	50.69	102.0	6.1
	100	95.35	95.4	4.1
腐胺(putrescine)	5	4.73	94.6	3.3
	50	50.93	99.4	1.0
	100	96.99	97.0	2.0
尸胺(cadaverine)	5	4.80	96.0	1.6
	50	49.83	99.3	2.1
	100	95.90	95.9	2.9
组胺(histamine)	1	0.87	87.1	2.4
	50	51.07	92.8	2.2
	100	99.57	99.6	2.5
章鱼胺(octopamine)	1	1.01	100.7	2.9
	50	50.83	100.5	2.9
	100	99.34	99.3	2.8
胍丁胺(agmatine)	5	5.03	100.5	0.90
	25	26.35	102.1	1.6
	50	48.64	97.3	0.90
酪胺(tyramine)	5	5.09	101.8	1.2
	25	24.50	99.5	2.1
	50	49.44	98.9	3.1
亚精胺(spermidine)	10	10.40	103.3	1.0
	50	52.32	103.4	0.80
	100	101.90	101.9	3.3
精胺(spermine)	5	5.07	102.1	1.6
	50	52.82	104.8	1.2
	100	97.01	97.0	3.0

生物胺 (biogenic amine)	峰面积(peak area)	RSD/%
色胺(tryptamine)	4 119 183	4 045 376	4 069 937	4 128 617	4 085 385	4 119 501	0.70
苯乙胺(phenylethylamine)	6 701 573	6 553 464	6 526 703	6 793 125	6 780 382	6 668 081	1.5
腐胺(putrescine)	23 606 776	23 702 536	24 400 091	23 566 663	24 338 099	24 338 400	1.5
尸胺(cadaverine)	18 369 289	18 673 109	18 741 316	18 597 267	18 201 829	18 587 268	1.0
组胺(histamine)	14 103 184	14 391 824	14 681 918	14 234 286	14 100 206	14 308 824	1.4
章鱼胺(octopamine)	6 373 315	6 571 230	6 503 622	6 229 026	6 335 332	6 471 839	1.8
胍丁胺(agmatine)	27 231 170	27 101 667	27 335 916	27 832 552	27 393 184	27 533 305	0.90
酪胺(tyramine)	13 440 670	13 332 678	13 288 106	13 337 480	13 363 843	13 222 083	0.50
亚精胺(spermidine)	5 207 247	5 139 346	5 116 004	5 327 536	5 169 879	5 219 641	1.3
精胺(spermine)	4 672 527	4 509 564	4 547 032	4 611 538	4 567 482	4 616 442	1.2

生物胺 (biogenic amine)	峰面积(peak area)	RSD/%
色胺(tryptamine)	4 119 183	4 045 376	4 069 937	4 128 617	4 085 385	4 119 501	0.70
苯乙胺(phenylethylamine)	6 701 573	6 553 464	6 526 703	6 793 125	6 780 382	6 668 081	1.5
腐胺(putrescine)	23 606 776	23 702 536	24 400 091	23 566 663	24 338 099	24 338 400	1.5
尸胺(cadaverine)	18 369 289	18 673 109	18 741 316	18 597 267	18 201 829	18 587 268	1.0
组胺(histamine)	14 103 184	14 391 824	14 681 918	14 234 286	14 100 206	14 308 824	1.4
章鱼胺(octopamine)	6 373 315	6 571 230	6 503 622	6 229 026	6 335 332	6 471 839	1.8
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酪胺(tyramine)	13 440 670	13 332 678	13 288 106	13 337 480	13 363 843	13 222 083	0.50
亚精胺(spermidine)	5 207 247	5 139 346	5 116 004	5 327 536	5 169 879	5 219 641	1.3
精胺(spermine)	4 672 527	4 509 564	4 547 032	4 611 538	4 567 482	4 616 442	1.2

生物胺 (biogenic amines)	对称性 (symmetry)	拖尾因子 (trailing factor)	信噪比 (signal to noise ratio)
色胺(tryptamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
苯乙胺(phenylethylamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
腐胺(putrescine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
尸胺(cadaverine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
组胺(histamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
章鱼胺(octopamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
胍丁胺(agmatine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
酪胺(tyramine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
亚精胺(spermidine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
精胺(spermine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed

生物胺 (biogenic amines)	对称性 (symmetry)	拖尾因子 (trailing factor)	信噪比 (signal to noise ratio)
色胺(tryptamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
苯乙胺(phenylethylamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
腐胺(putrescine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
尸胺(cadaverine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
组胺(histamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
章鱼胺(octopamine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
胍丁胺(agmatine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
酪胺(tyramine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
亚精胺(spermidine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed
精胺(spermine)	Passed	Failed	Passed	Failed	Passed	Passed

企业 (enterprise)	批次 (lot No.)	含量（content）/（ng·mg^-1）
A	1	/	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	2	/	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	3	/	/	/	/	/	/	/	/	/	/
B	1	540.6	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	2	477.4	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	3	581.3	/	/	/	/	/	/	/	/	/
C	1	27.47	/	/	10.4	55.4	192.6	228.4	/	/	/
	2	31.89	/	/	9.6	51.3	206.4	206.5	/	/	/
	3	29.72	/	/	10.0	55.7	143.6	214.0	/	/	/
D	1	13.1	/	/	50.6	/	10.4	132.3	/	/	/
	2	13.5	/	/	54.4	/	9.6	112.3	/	/	/
	3	14.4	/	/	57.0	/	13.8	158.2	/	/	/
E	1	15.3	/	/	/	15.9	18.9	85.5	/	/	/
	2	15.3	/	/	/	20.4	30.9	133.6	/	/	/
	3	15.1	/	/	/	36.6	13.8	128.6	/	/	/
F	1	16.7	/	/	17.9	14.5	19.0	52.8	/	/	/
	2	16.3	/	/	18.7	16.4	11.2	41.4	/	/	/
	3	19.1	/	/	21.8	15.2	9.3	60.2	/	/	/

企业 (enterprise)	批次 (lot No.)	含量（content）/（ng·mg^-1）
A	1	/	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	2	/	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	3	/	/	/	/	/	/	/	/	/	/
B	1	540.6	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	2	477.4	/	/	/	/	/	/	/	/	/
	3	581.3	/	/	/	/	/	/	/	/	/
C	1	27.47	/	/	10.4	55.4	192.6	228.4	/	/	/
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D	1	13.1	/	/	50.6	/	10.4	132.3	/	/	/
	2	13.5	/	/	54.4	/	9.6	112.3	/	/	/
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E	1	15.3	/	/	/	15.9	18.9	85.5	/	/	/
	2	15.3	/	/	/	20.4	30.9	133.6	/	/	/
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F	1	16.7	/	/	17.9	14.5	19.0	52.8	/	/	/
	2	16.3	/	/	18.7	16.4	11.2	41.4	/	/	/
	3	19.1	/	/	21.8	15.2	9.3	60.2	/	/	/

基于柱前衍生-高效液相色谱-串联质谱联用技术的骨肽注射液中10种生物胺定量测定方法及其稳定性研究^*

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林新丽 ¹^,² , 吴畅 ³ , 谭力 ² , 孟长虹 ² , 陆益红 ²^,³ , 汪玉馨 ²^,^** , 史清水 ²^,^**

药物分析杂志 | 成分分析 2024,44(3): 405-418

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药物分析杂志 | 成分分析 2024, 44(3): 405-418

基于柱前衍生-高效液相色谱-串联质谱联用技术的骨肽注射液中10种生物胺定量测定方法及其稳定性研究^*

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林新丽¹^,², 吴畅³, 谭力², 孟长虹², 陆益红²^,³, 汪玉馨²^,^**, 史清水²^,^**

作者信息

^1.中国药科大学药物分析教研室，南京 211198

^2.江苏省食品药品监督检验研究院，国家药品监督管理局化学药品杂质谱研究重点实验室，南京 210019

^3.徐州医科大学药物分析教研室，徐州 221004

　Tel：15195805157；E-mail：lin252025@126.com

通讯作者:

**汪玉馨　Tel：（025）86251278；E-mail：wyx_carrie@163.com;

史清水　Tel：（025）862510060；E-mail：qsshi@126.com

Research on determination and stability of 10 biogenic amines in osteopeptide injections based on HPLC-MS/MS with pre-column derivatization^*

Xin-li LIN¹^,², Chang WU³, Li TAN², Chang-hong MENG², Yi-hong LU²^,³, Yu-xin WANG²^,^**, Qing-shui SHI²^,^**

Affiliations

^1.Department of Pharmaceutical Analysis，China Pharmaceutical University，Nanjing 211198，China

^2.Key Laboratory for Impurity Profile of Chemical Drugs，National Medical Products Administration，Jiangsu Institute for Food and Drug Control，Nanjing 210019，China

^3.Department of Pharmaceutical Analysis，Xuzhou Medical University，Xuzhou 221004，China

出版时间: 2024-03-31 doi: 10.16155/j.0254-1793.2024.03.05

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摘要

收起

目的：

采用柱前衍生化-高效液相色谱-串联质谱联用技术建立骨肽注射液中生物胺类物质定量测定方法，并通过影响因素试验和加速试验考察其生物胺类物质的稳定性。

方法：

采用丹磺酰氯衍生化法对样品进行前处理，经ZORBAX SB-C₁₈色谱柱梯度洗脱分离，电喷雾离子源正离子模式下多反应监测，对骨肽注射液中10种生物胺进行定量测定，并于高温条件、强光照条件和加速试验条件下考察生物胺类物质的稳定性。

结果：

方法学考察结果显示10种生物胺线性关系良好，相关系数均大于0.990，方法检测限为0.01~0.10 ng·mL^-1，定量限为0.05~0.30 ng·mL^-1，准确性、重复性和耐用性较好。稳定性研究结果显示不同条件下骨肽注射液中生物胺类物质变化存在差异，高温条件下腐胺增多，精胺和亚精胺减少，强光照条件及加速试验条件中生物胺类物质含量均存在变化。

结论：

方法学验证表明该方法可用于同时测定骨肽注射液中10种生物胺，为骨肽及其它药品质量标准中生物胺类物质检测方法的建立和完善提供了参考，同时生物胺类物质稳定性研究结果表明高温及强光条件可对其稳定性产生影响，提示药品生产及贮存过程中应加强质控和监管，从而保障药品质量的稳定性。

关键词

骨肽注射液 / 生物胺 / 柱前衍生化 / 液相色谱-串联质谱 / 稳定性研究

Abstract

收起

Objective:

To establish a pre-column derivatization high performance liquid chromatography-mass spectrometry to determine biogenic amines in osteopeptide injections and determine the changes of biogenic amines after the stability influence factor test and accelerated test.

Methods:

The osteopeptide injections were separated by a ZORBAX SB-C₁₈ chromatographic column and gradient elution after derivatization by dansyl chloride. Ten kinds of biogenic amines was determined by mass spectrometry with electrospray ion source and multiple reaction monitoring in positive mode. The osteopeptide injections were placed under high temperature，strong light and accelerated experimental conditions to inspect the stability of biogenic amines.

Results:

Method validation showed that the linear relationship of 10 biological amines was good，and the correlation coefficients were higher than 0.990. The detection limits were 0.01-0.10 ng·mL^-1，the quantitation limits were 0.05-0.30 ng·mL^-1. Good accuracy，repeatability and durability were obtained. Under different conditions，the changes of biogenic amines in osteopeptide injections were significant. The accumulation of putrescine increased under high temperature，while spermine and spermidine decreased. The biogenic amines were unstable under strong light and accelerated test.

Conclusion:

Method validation shows that the method can be applicable to simultaneous determine 10 biogenic amines in osteopeptide injections. It provided a reference to establish and improve the quality standards of biogenic amines in osteopeptide and other drugs. In addition，the research of the stability of biological amines shows that high temperature and strong light will affect the stability of biogenic amines. Therefore，quality control and supervision should be strengthened during drug production and storage to ensure the stability of drug.

Key words

osteopeptide injections / biogenic amine / pre-column derivatization / liquid chromatography- mass spectrometry / stability

引用本文

林新丽, 吴畅, 谭力, 孟长虹, 陆益红, 汪玉馨, 史清水. 基于柱前衍生-高效液相色谱-串联质谱联用技术的骨肽注射液中10种生物胺定量测定方法及其稳定性研究^*. 药物分析杂志, 2024 , 44 (3) : 405 -418 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2024.03.05

Xin-li LIN, Chang WU, Li TAN, Chang-hong MENG, Yi-hong LU, Yu-xin WANG, Qing-shui SHI. Research on determination and stability of 10 biogenic amines in osteopeptide injections based on HPLC-MS/MS with pre-column derivatization^*[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2024 , 44 (3) : 405 -418 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2024.03.05

正文

收起

多组分生化药原料药多提取自动物组织或体液，普遍具有来源复杂，提取物成分不明确，稳定性差，易腐败等特点，动物源性原材料贮存或发酵过程中^[1]，游离氨基酸极易通过脱羧反应降解为生物胺。虽然生物胺是由氨基酸脱羧生成的含氮小分子有机化合物，广泛分布于食品和人类有机体中，适量生物胺在体内具有生物活性，但过量摄入则会损害机体。在生物胺的不良反应报道中，组胺最为常见^[2]。目前在药品质量控制中，2020年版《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）针对组胺类物质，设置降压物质检查项，通过判断制剂引起麻醉猫血压下降的程度或其引起豚鼠离体回肠收缩的程度来考察并控制组胺类物质^[3]。但由于动物实验存在个体差异大，离体器官稳定性不易保证，实验技术要求高，过程复杂，耗时长等问题^[4]，同时无法明确不良反应的物质基础，因此有必要建立灵敏、高效、快速的生物胺检测方法，并对多组分生化药中的生物胺进行筛查及研究，为临床不良反应的探究及控制提供依据及参考，为企业产品质控和政府监管提供新的科学手段。

骨肽注射液是一种提取自猪或胎牛四肢骨的多组分生化药，临床上用于骨折、关节炎和风湿等疾病治疗^[5]。近年来，骨肽注射液的不良反应引起关注，临床表现为皮疹、发热、呼吸困难和血压下降等^[6]。而骨肽注射液降压物质研究中发现其存在降压效应，故有必要进一步探究其降压效应的物质基础^[7]。药理学研究表明生物胺类物质的种类和含量与血压变化存在一定相关性，组胺激活H1受体，扩张小动脉和小静脉，外周阻力降低，血压下降；腐胺和尸胺可抑制组胺相关代谢酶的活性，从而增强组胺的作用^[8]；亚精胺通过改善心肌舒张功能，扩张血管，血压下降^[9]；色胺、苯乙胺、章鱼胺和酪胺使交感神经系统释放去甲肾上腺素，血压上升^[10]，因此骨肽注射液中生物胺类物质检测方法的建立和筛查是探究其与药理相关性的基础。

生物胺类物质的检测中毛细管电泳-质谱（CE-MS）、超临界流体色谱-二极管阵列检测器（SFC-DAD）和气相色谱-质谱（GC-MS）等多种联用技术的应用逐渐广泛，上述方法虽具有分析时间短、灵敏度高的特点，但难以分离复杂基质样品中的生物胺，选择性较差^[11]。考虑到柱前衍生-高效液相色谱-串联质谱法（柱前衍生-HPLC-MS/MS）具有高分离能力和高灵敏度的特点，其中衍生化可降低生物胺类物质的极性，改善色谱分离情况；串联质谱可降低背景干扰，提高选择性，故该方法更适用于分析复杂基质中的痕量物质，是分离多组分生化药中生物胺的理想选择^[12]。本研究拟建立柱前衍生-HPLC-MS/MS生物胺类物质定量测定方法，从线性范围、检测限、精密度、准确度和耐用性多个角度进行方法学验证，并对骨肽注射液中10种生物胺进行筛查，依据影响因素试验及加速试验的研究结果，分析骨肽注射液中生物胺类物质的稳定性，从而为潜在风险药物及组分的排查和机制的阐述，生产工艺的优化和质量控制，临床安全用药提供更多的评价方法及技术支撑。

1　仪器与材料

收起

1.1　仪器

Thermo TSQ Quantum Access MAX串联三重四极杆质谱仪（Thermo Scientific公司），配Dionex Ultimate 3000 RS高效液相色谱仪；AB Sciex 5500型串联四极杆质谱仪（AB公司）；XP6型/XS205DU型万分之一电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；超纯水机（Millipore公司）；DK-S26电热恒温水浴锅（上海森信实验仪器有限公司）；SI-T256涡旋混合器（Talboys公司）；HPP 260恒温恒湿箱（Memmert公司）；0.2 μm聚四氟乙烯过滤器（安捷伦公司）。

1.2　材料

乙腈（色谱纯，Thermo Fisher公司）、甲醇（色谱纯，Thermo Fisher公司）、丹磺酰氯（色谱纯，Sigma-Aldrich）、丙酮（分析纯，南京化学试剂股份有限公司）、无水碳酸钠（分析纯，天津市化学试剂研究所有限公司）、氨水（色谱纯，Aladdin）、盐酸（分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

生物胺对照品：腐胺（纯度97.30%，批号G150059）、尸胺（纯度98.80%，批号738356）、2-苯乙胺（纯度98.62%，批号G941631）、酪胺盐酸盐（纯度98.90%，批号G980212）、盐酸亚精胺（纯度99.90%，批号168904）、盐酸章鱼胺（纯度99.39%，批号G160376）、组胺盐酸盐（纯度99.44%，批号G165368）均购自Dr. Ehrenstorfer公司；胍丁胺硫酸盐（纯度97.00%，批号MKCH3294）、色胺（纯度97.00%，批号BCBX4824）、精胺（纯度97.00%，批号BCBZ7305）均购自上海Sigma-Aldrich公司。

骨肽注射液来源于6家企业A（规格为2 mL：10 mg）、B（规格为2 mL：10 mg）、C（规格为2 mL：10 mg）、D（规格为2 mL：10 mg）、E（规格为2 mL：10 mg）、F（规格为5 mL：25 mg），每家企业各3批。

2　方法

收起

2.1　色谱条件

采用Agilent ZORBAX SB-C₁₈（2.1 mm×150 mm，1.8 μm）色谱柱，流动相A为含0.1%乙酸的0.01 mol·L^-1乙酸铵溶液-乙腈(90:10)，流动相B为含0.1%乙酸的0.01 mol·L^-1乙酸铵溶液-乙腈（10:90），梯度洗脱如表1所示，流速0.3 mL·min^-1，柱温45 ℃，进样量10 μL。

2.2　质谱条件

电喷雾电离离子源（ESI）；多反应监测扫描模式（MRM）；喷雾电压为4.3 kV；毛细管温度为350 ℃；鞘气压力为0.241 MPa；辅助气流量为5 arb；定量和定性离子对碰撞能量等参数见表2。

2.3　溶液配制

2.3.1　生物胺混合对照品溶液

分别称取10种生物胺对照品10 mg，用0.1 mol·L^-1盐酸溶液溶解并稀释至10 mL量瓶中，质量浓度为1 mg·mL^-1，分别准确量取1 mL至10 mL量瓶中，混合并摇匀。

2.3.2　丹磺酰氯衍生试剂

称取丹磺酰氯80 mg，用丙酮溶解并稀释至10 mL量瓶中，摇匀，即得质量浓度为8 mg·mL^-1的衍生试剂溶液，于4 ℃冰箱中避光保存。

2.3.3　供试品溶液

用0.1 mol·L^-1盐酸溶液稀释骨肽注射液供试品至0.5 mg·mL^-1，使骨肽注射液中的生物胺的浓度在线性范围内。

2.4　衍生化方法

吸取生物胺混合对照品溶液和供试品溶液，置于不同的离心管内，分别加入0.2 mol·L^-1碳酸钠溶液70 μL调节pH 8~9和丹磺酰氯衍生化试剂300 μL，将以上混合物涡旋30 s混匀，置于60 ℃水浴加热，黑暗条件下开始衍生化反应，计时30 min。冷却至室温，分别加入氨水10 μL与溶液中过量的丹磺酰氯反应，置于60 ℃水浴加热，黑暗条件下反应，计时15 min。终溶液加入50%乙腈溶液定容至1 mL，经0.2 μm聚四氟乙烯过滤器过滤后，进样检测分析。

2.5　稳定性影响因素试验

根据2020年版《中国药典》四部指导原则<9001>《原料药物及制剂稳定性试验指导原则》^[13]，研究骨肽注射液在高温、高湿、光照条件下杂质的变化情况。高温试验（温度为60 ℃）强光照射试验（光照强度约4500 Lx），取样时间点设定为0、5、10 d，采用建立的方法进行检测。由于骨肽注射液为含有水性介质的制剂，可不要求相对湿度，故未进行高湿试验。

2.6　加速试验

根据2020年版《中国药典》四部指导原则< 9001>《原料药物及制剂稳定性试验指导原则》，研究骨肽注射液中生物胺在加速条件下的变化情况。取待测物置于恒温恒湿箱中（温度40 ℃，相对湿度75%），取样时间点设定为0 d、1个月、3个月、6个月，采用建立的方法进行检测。

3　结果

收起

3.1　基质效应

采用Matuszewski等^[14]提出的提取后添加法定量评价基质效应强度，分别将高、中、低浓度的混合对照品分别加入6家企业的骨肽注射液基质中，经衍生化反应后，进样分析，不同浓度平行测定3次，使用以下等式计算基质效应ME：

S₀为骨肽基质基底峰面积

S₁为稀释剂中加入相同高、中、低浓度的混合对照品峰面积

S₂为骨肽基质中加入高、中、低浓度的混合对照品峰面积

基质效应包括2种方式，基质诱导色谱响应增强效应和基质诱导色谱响应抑制效应，ME≤0为基质诱导色谱响应抑制效应，ME≥0为基质诱导色谱响应增强效应，-20%≤ME≤20%范围内被认为基质效应不显著，可忽略不计。不同企业的骨肽基质效应值如表3所示，同种骨肽注射液基质中，同种生物胺在不同浓度下表现相同的增强或抑制效应，6种骨肽注射液的基质效应在-18.90%~18.56%，骨肽注射液的基质效应较小，即采用溶剂标曲代替基质标曲进行测定。

3.2　分析方法验证

3.2.1　专属性

取0.1 mol·L^-1盐酸溶液、生物胺混合对照品溶液和供试品溶液，经衍生化后混合对照品终浓度为10 ng·mL^-1，分别进样，如图1所示，在对照品色谱峰相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，空白溶液在此峰位无吸收，方法专属性良好。

3.2.2　线性范围、定量限和检测限

取100 μg·mL^-1生物胺混合对照品溶液，用0.1 mol·L^-1盐酸溶液稀释至1 μg·mL^-1，逐级稀释，经衍生化后，混合溶液的生物胺终浓度稀释10倍，得到浓度为100、50、25、5、1、0.5、0.1、0.05、0.01 ng·mL^-1的生物胺混合标准溶液，从浓度低到高依次进样。以各生物胺的峰面积Y为纵坐标，以各生物胺的梯度浓度X为横坐标作线性回归计算，以S/N为10时的浓度作为定量限；以S/N为3时的浓度作为检测限。

3.2.3　准确度和精密度

在企业A溶液中加入3个浓度水平的对照品，制备成生物胺高、中、低浓度的模拟样品，浓度的设定考虑样品的浓度范围。不同浓度各平行制备3份样品，进样分析。计算回收率和各生物胺峰面积的RSD测得精密度。10种生物胺的回收率均在84.1%~106.2%范围内，峰面积RSD均不大于2.4%，在可接受范围内，说明本法准确度和重复性良好，符合检测要求。

3.2.4　中间精密度

为考察随机变动的因素对中间精密度的影响，另一分析人员在不同日期另平行制备供试品加标溶液，在相同的色谱和质谱条件下进行测定，将测定结果与准确度试验结果进行比较。结果表明RSD均不>6.1%，中间精密度良好，测定方法的精密度符合要求。

3.2.5　稳定性

以3.2.1专属性项下的供试品加标溶液为样品，24 h内不同时间点进样考察稳定性，10种生物胺的峰面积RSD均不大于1.8%，结果如表7所示，说明衍生化样品稳定性良好。

3.2.6　耐用性

以“3.2.1”专属性项下的供试品加标溶液为样品，采用不同仪器和不同色谱柱检测应满足系统适用性试验要求，以确保方法的可靠性。

3.2.6.1　仪器

采用AB Sciex5500液质联用仪进行检测，提取离子流图中10种生物胺均峰型良好，拖尾因子均在0.95~1.05范围内，信噪比均大于3，精密度实验RSD均不大于4.0%，故使用不同仪器检测满足系统适用性试验要求，该方法耐用性良好。

3.6.6.2　色谱柱

分别采用Thermo Hypersil GOLD aQ C₁₈（1.9 μm，2.1 mm×150 mm）和Shimadzu Shim-pack Velox SP-C₁₈（1.8 μm，2.1 mm×150 mm）色谱柱进行检测。根据LCQuan数据处理软件系统，h_0.5峰高处对称性不低于90%，拖尾因子均在0.95~1.05范围内，信噪比均大于3，即判定为系统适用性良好。结果如表8所示，Thermo Hypersil GOLD aQ C₁₈柱的系统适用性良好，且精密度实验RSD均不大于2%，Shimadzu Shim-pack Velox SP-C₁₈　柱的系统适用性较差，且胍丁胺峰型较差无法定量，如图2所示。

3.3　样品检测

采用所建立的方法对18批次骨肽注射液样品进行检测，以“2.3.3”项方法制备供试品溶液，“2.4”项的衍生化方法进行前处理，“2.1”和“2.2”项的分析条件进样测定，记录生物胺的峰面积，以随行标准曲线计算含量。结果表明，酪胺、胍丁胺、章鱼胺、苯乙胺均没有检出，而腐胺、色胺、尸胺、组胺、精胺、亚精胺均有不同程度的检出，见表9。

3.4　稳定性影响因素实验

高温试验结果显示，高温条件下腐胺和尸胺均有不同程度升高，腐胺含量增加1.5%~56.5%，尸胺含量增加36.5%~80.4%；组胺、精胺和亚精胺均有不同程度降低，组胺含量下降25.9%~72.1%，精胺含量下降15.4%~100%，亚精胺含量下降23.2%~69.1%。结果见图3。

强光照试验结果显示，腐胺在0~5 d内含量增加7.0%~107.3%，5~10 d内变化9.5%~37.1%，0~10 d，尸胺含量增加2.1%~11.0%；组胺含量下降12.2%~86.9%，精胺含量下降24.0%~100.0%，亚精胺含量下降7.7~27.7%。结果见图4。

3.5　加速试验

加速试验结果显示，0~3个月，企业B的腐胺含量下降14.2%，其他企业的腐胺含量增加89.7%~194.0%，考虑企业B中腐胺初始含量较高且生物胺转化酶可能存在差异导致企业B的腐胺含量变化趋势与其它企业略有不同；尸胺含量增加76.0%~378.1%，组胺含量增加170.8%~430.8%。3~6个月，腐胺、尸胺和组胺含量出现不同程度的下降。0~6个月，精胺含量增加74.6%~242.8%，亚精胺含量变化3.6%~30.7%。结果见图5。

4　讨论

收起

通过采用柱前衍生-HPLC-MS/MS建立了骨肽注射液中10种生物胺类物质：苯乙胺、色胺、酪胺、章鱼胺、组胺、胍丁胺、尸胺、腐胺、亚精胺和精胺的定量测定方法，方法学验证显示，线性范围、检测限、精密度、准确度和耐用性均符合要求，与高效液相色谱法相比，该方法灵敏度高，检测速度快，适合高通量检测；相较于超高效合相色谱-四极杆质谱联用仪法，该方法通过一级MS得到带电离子、二级MS裂解获得更多分子结构的信息^[15]，从而降低背景干扰，对目标物质定性和定量均更准确。

不同色谱柱耐用性考察发现，Thermo Hypersil GOLD aQ C₁₈分析柱对生物胺类物质中极性较大的化合物保留更强，考虑其填料为极性包埋C₁₈键合相，与传统的烷基键合相相比具有独特的选择性。Shimadzu Shim-pack Velox SP-C₁₈和Agilent ZORBAX SB-C₁₈虽填料均使用具有较大异丁基侧链基团的硅烷（不封端），较大的侧链基团增大了空间位阻，从而增加化合物的保留，不封端柱裸露较多的硅羟基，对分极性化合物的分析提供更好的分离效果，但在系统适用性考察中发现Agilent ZORBAX SB-C₁₈分离分析结果更优，Shimadzu Shim-pack Velox SP-C₁₈对于生物胺类化合物特别是胍丁胺拖尾因子及对称性均较差。

骨肽注射剂中生物胺类物质筛查发现，腐胺、色胺、尸胺、组胺、精胺、亚精胺均有检出，其中腐胺检出比例最高，达总批次的83%，其次为亚精胺、精胺；3家企业9批次骨肽注射液中检出组胺，其中组胺含量最高的3批次样品降压物质检查实验中降压效应较为明显，故有必要进一步对该类产品中生物胺类物质定量测定结果与临床不良反应相关性进行研究分析。

稳定性影响因素试验和加速试验结果显示，骨肽注射液中生物胺类物质含量存在变化，考虑骨肽注射液中的胶原蛋白可分解产生小分子多肽，进而水解产生多种氨基酸，为生物胺的产生提供前体物质^[16-17]。氨基酸在微生物产生的脱羧酶作用下可转化为生物胺，即使生产工艺中存在除菌过程对微生物进行控制，某些脱羧酶仍可脱离微生物细胞的完整性而维持其活性^[18]。同时在精胺合成酶和亚精胺合成酶的作用下，腐胺可进一步精胺和亚精胺转化^[19]，而酶的活性受温度影响，酶在最适温度的活力最大，积累的生物胺越多，反之越少，进而影响生物胺的含量^[20]。故通过对骨肽注射液中生物胺类物质含量的检测评估，并考察不同储存条件、时间，原料及成品中生物胺含量及变化，可为原料和制剂质量控制和临床安全性提供参考和依据。由于生物胺的种类较多，建立高效简便的检测方法是有效控制生物胺含量、监测其变化的前提。目前针对多组分生化药中的生物胺检测方法不多，因此根据样品类型与所检测生物胺的特点选取适宜的前处理与检测方法进行系统研究，并结合临床应用探究生物胺类物质含量与不良反应发生的可能性，进一步明确原料及制剂工艺及储存条件的影响和质控要求，可为多组分生化药安全性评估、风险因素排查分析、临床安全用药提供支持和保障。

基金

收起

*江苏省市场监督管理局科技项目计划(No.KJ21125030)

参考文献

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文献

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2024年第44卷第3期

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doi: 10.16155/j.0254-1793.2024.03.05

接收时间：2023-04-20
首发时间：2026-03-13
出版时间：2024-03-31

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收稿日期：2023-04-20

基金

*江苏省市场监督管理局科技项目计划(No.KJ21125030)

作者信息

^1.中国药科大学药物分析教研室，南京 211198

^2.江苏省食品药品监督检验研究院，国家药品监督管理局化学药品杂质谱研究重点实验室，南京 210019

^3.徐州医科大学药物分析教研室，徐州 221004

通讯作者:

**汪玉馨　Tel：（025）86251278；E-mail：wyx_carrie@163.com;

史清水　Tel：（025）862510060；E-mail：qsshi@126.com

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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TxT

时间（time）/min	流动相比例（ratio of mobile phase）/%
0.00	80	20
5.00	40	60
5.01	30	70
11.00	0	100
15.00	0	100
15.01	50	50
18.00	50	50

时间
（time）/min

流动相比例（ratio of mobile phase）/%

0.00

5.00

5.01

11.00

100

15.00

100

15.01

18.00

生物胺 (biogenic amine)	母离子 (precursor ion)m/z	子离子 (product ion)m/z	碰撞能量 (collision energy)/eV
苯乙胺(phenylethylamine)	355.3	157.2	25
		170.1^*	23
色胺(tryptamine)	394.3	130.1	40
		144.1^*	19
腐胺(putrescine)	555.1	170.3	33
		321.1^*	23
尸胺(cadaverine)	569.4	170.0	35
		234.3^*	30
组胺(histamine)	578.4	170.0	32
		315.4^*	24
亚精胺(spermidine)	845.5	305.4^*	34
		360.5	40
精胺(spermine)	1135.6	170.0	65
		360.3^*	48
章鱼胺(octopamine)	620.0	170.0	32
		234.0^*	37
胍丁胺(agmatine)	364.2	170.0	29
		305.1^*	20
酪胺(tyramine)	604.4	170.0	35
		370.4^*	25

生物胺
(biogenic amine)

母离子
(precursor ion)m/z

子离子
(product ion)m/z

碰撞能量
(collision energy)/eV

苯乙胺(phenylethylamine)

355.3

157.2

170.1^*

色胺(tryptamine)

394.3

130.1

144.1^*

腐胺(putrescine)

555.1

170.3

321.1^*

尸胺(cadaverine)

569.4

170.0

234.3^*

组胺(histamine)

578.4

170.0

315.4^*

亚精胺(spermidine)

845.5

305.4^*

360.5

精胺(spermine)

1135.6

170.0

360.3^*

章鱼胺(octopamine)

620.0

170.0

234.0^*

胍丁胺(agmatine)

364.2

170.0

305.1^*

酪胺(tyramine)

604.4

170.0

370.4^*

生物胺 (biogenic amine)	生物胺浓度 (concentration of biogenic amines)/(ng·mL-1)	骨肽注射液的企业 (enterprises of osteopeptide injection)
色胺 (tryptamine)	5	-10.48	1.7	-4.78	2.4	-8.71	3.7	4.09	2.5	3.29	3.3	3.80	2.7
	50	-0.07	0.30	-6.83	3.3	-7.64	0.20	5.64	0.50	12.38	2.80	13.29	1.1
	100	-4.98	1.1	-7.29	1.0	-2.13	0.80	7.63	1.2	1.21	0.30	3.59	1.50
苯乙胺 (phenylethylamine)	5	-0.81	2.2	-4.27	2.7	-4.16	1.9	5.85	2.2	-18.90	4.5	-17.60	0.80
	50	-1.98	1.7	-5.53	0.60	-11.20	2.9	2.15	1.8	-8.75	0.70	-17.17	1.7
	100	-4.27	2.4	-5.59	1.2	-1.61	1.0	1.30	2.4	-3.80	4.3	-6.69	2.1
腐胺 (putrescine)	5	-5.51	2.4	-6.53	1.4	-15.31	1.8	7.01	3.6	10.01	3.1	14.39	0.40
	50	-0.53	1.0	-5.32	2.2	-3.04	1.9	6.75	1.5	4.87	0.70	-0.22	2.9
	100	-3.61	2.4	-1.68	2.8	-1.88	1.2	5.05	1.0	3.43	0.60	2.10	1.4
尸胺 (cadaverine)	5	-2.49	0.80	5.84	2.5	-17.56	2.1	18.56	3.9	3.91	1.8	6.06	2.4
	50	-1.78	1.3	2.67	1.1	-3.23	1.9	14.06	3.8	3.28	1.2	1.86	2.4
	100	-2.75	1.2	1.81	0.40	-1.78	1.0	7.53	1.9	2.66	1.5	1.09	0.70
组胺 (histamine)	1	-15.88	1.2	-14.07	1.7	-8.95	2.7	1.54	2.3	0.34	2.9	1.53	2.9
	50	2.75	0.8	-3.65	0.80	-10.29	0.50	1.89	2.7	1.11	3.3	1.56	0.80
	100	-1.82	0.50	-4.02	2.5	-4.24	1.8	7.04	1.2	0.76	0.60	2.22	1.1
章鱼胺 (octopamine)	1	1.05	1.2	-2.57	0.80	-9.39	0.80	-4.28	0.30	2.49	1.6	5.72	2.9
	50	3.31	1.6	-5.90	1.3	-2.89	1.7	-3.09	1.3	3.88	2.2	5.88	3.3
	100	2.69	1.3	-7.46	2.8	-3.50	2.1	-0.64	0.20	4.89	1.9	6.11	1.1
胍丁胺 (agmatine)	5	-0.24	1.9	-4.13	3.1	-7.43	1.6	3.59	1.5	-5.95	2.0	-3.84	0.70
	25	-1.52	0.70	-4.45	2.0	-2.53	1.0	6.16	2.4	-6.65	2.1	-7.65	1.3
	50	-2.66	1.1	-1.94	0.60	-3.05	2.1	5.70	0.40	-1.49	0.1	-3.85	1.2
酪胺 (tyramine)	5	1.5	1.2	-3.89	1.6	6.03	3.5	-1.49	0.70	7.88	4.6	4.06	1.1
	25	6.25	2.3	-15.03	3.2	7.70	2.4	-16.82	7.1	9.51	2.3	14.13	3.3
	50	2.51	0.50	-2.56	1.7	9.00	0.40	-6.62	3.2	2.21	1.5	12.55	1.1
亚精胺 (spermidine)	10	2.45	1.3	9.36	2.4	9.40	3.5	4.63	3.0	-7.61	3.2	-3.67	0.90
	50	4.93	1.1	6.21	1.6	6.24	0.10	7.06	1.0	-5.77	1.7	-3.78	0.20
	100	0.7	0.20	1.80	1.9	1.81	0.20	1.67	0.20	-5.18	2.1	-3.13	1.6
精胺 (spermine)	5	3.91	1.2	-14.88	2.4	-14.91	3.7	-13.49	1.3	-17.21	0.40	-16.35	3.2
	50	5.33	0.80	-1.32	0.50	-1.34	2.4	-16.07	0.80	-14.08	0.50	-14.71	1.9
	100	0.86	0.80	-6.94	1.5	-6.95	0.90	-10.77	2.1	-13.76	0.70	-15.90	0.90

生物胺
(biogenic amine)

生物胺浓度
(concentration of biogenic amines)/(ng·mL-1)

骨肽注射液的企业
(enterprises of osteopeptide injection)