中国药学杂志

No.	IC₅₀	No.	IC₅₀
1	3.01±0.13	9	17.55±0.13
2	1.27±0.02	10	4.21±0.65
3	1.65±0.02	11	7.85±0.43
4	1.88±0.03	12	1.28±0.22
5	1.64±0.35	13	>50
6	1.69±0.25	14	>50
7	1.35±0.52	15	>50
8	4.30±0.36	Dexamethasone(DX)	1.20±0.33

No.	IC₅₀	No.	IC₅₀
1	3.01±0.13	9	17.55±0.13
2	1.27±0.02	10	4.21±0.65
3	1.65±0.02	11	7.85±0.43
4	1.88±0.03	12	1.28±0.22
5	1.64±0.35	13	>50
6	1.69±0.25	14	>50
7	1.35±0.52	15	>50
8	4.30±0.36	Dexamethasone(DX)	1.20±0.33

鲜用艾叶萜类成分及其抗炎活性研究

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李齐激 ¹^,² , 李雨铭 ¹ , 王丽 ¹ , 周浪 ¹ , 陈发菊 ¹^,² , 杨小生 ¹^,²^,^*

中国药学杂志 | 论著 2024,59(19): 1807-1812

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中国药学杂志 | 论著 2024, 59(19): 1807-1812

鲜用艾叶萜类成分及其抗炎活性研究

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李齐激¹^,², 李雨铭¹, 王丽¹, 周浪¹, 陈发菊¹^,², 杨小生¹^,²^,^*

作者信息

¹ 贵州省天然产物研究中心, 贵州省天然产物高效利用工程技术研究中心, 贵阳 550014

² 贵州医科大学, 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室, 贵阳 550025

李齐激,男,博士,副研究员,硕士生导师研究方向:鲜药资源化学与利用

通讯作者:

^* 杨小生,男,博士,研究员,博士生导师研究方向:天然药物化学 Tel:(0851)83809055

Terpenoid Constituents from the Fresh-Used Leaves of Artemisia argyi and Their Anti-Inflammatory Activities

Qiji LI¹^,², Yuming LI¹, Li WANG¹, Lang ZHOU¹, Faju CHEN¹^,², Xiaosheng YANG¹^,²^,^*

Affiliations

¹ Engineering Research Center for Efficient Utilization of Natural Products in Cuizhou Province, Natural Products Research Center of Guizhou Province, Guiyang 550014, China

² State Key Laboratory of Functions and Applications of Medicinal Plants, Guizhou Medical University, Guiyang 550025, China

出版时间: 2024-10-08 doi: 10.11669/cpj.2024.19.004

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摘要

收起

目的研究新鲜艾叶(Artemisia argyi Levi. et Vant.)中萜类成分及其抗炎效果。方法利用高效制备液相色谱等现代植物化学分离技术对新鲜艾叶体积分数95%乙醇提取物进行分离,结合理化性质与质谱法(MS)、核磁共振谱法(NMR)等数据鉴定结构。以脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞释放一氧化氮(NO)抑制能力评价萜类物质的抗炎能力。结果共分离15个萜类物质:artanomaloide(1)、dehydroleucodin(2)、tamaulipin-B acetate(3)、莫沙坦内酯(4)、yomogin(5)、木香酸(6)、costic acid methyl ester(7)、PBI(8)、(-)-3-hydroxy-β-ionone(9)、pubinernoid A(10)、subamone(11)、artefrigin(12)、cassipourol(13)、3β-acetoxy-24-oxo-dammara-20,25-diene(14)、dammara-20,24-dien-3β-ol acetate(15),其中化合物1~12抗炎活性IC₅₀值介于(1.27±0.02)~(17.55±0.13) μmol·L^-1。结论鲜用艾叶中含有较为丰富的、具有明显抗炎活性的萜类物质,其中化合物3、7~14均为首次从艾叶中分离,该类成分有进一步在医药大健康产品中开发应用的潜能。

关键词

艾叶 / 鲜用 / 萜类成分 / 抗炎活性

Abstract

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OBJECTIVE To investigate the terpenoid constituents from the fresh-used leaves of Artemisia argyi Levl. et Vant. and their anti-inflammatory activities. METHODS Modern phytochemical separation techniques such as high performance preparative liquid chromatography (HPLC) were used to isolate the 95% ethanol extract of the fresh leaves from A. argyi and to identify the structure by combining physicochemical properties with MS and NMR data. The anti-inflammatory activity of terpenoids was evaluated by the inhibitory ability of nitric oxide (NO) release from LPS-induced RAW264.7 macrophages. RESULTS Fifteen terpenoids were isolated from the fresh leaves of A. argyi and identified as artanomaloide (1), dehydroleucodin (2), tamaulipin-B acetate (3), moxartenolide (4), yomogin (5), costic acid (6), costic acid methyl ester(7), PBI(8), (-)-3-hydroxy-β-ionone(9), pubinernoid A(10), subamone(11), artefrigin(12), cassipourol(13), 3β-acetoxy-24-oxo-dammara-20, 25-diene (14), dammara-20,24-dien-3β-ol acetate (15). The IC₅₀ values of the anti-inflammatory activity of compounds 1-12 ranged from (1.27±0.02) to (17.55±0.13) μmol·L^-1. CONCLUSION The fresh leaves from A. argyi are more abundant in terpenoids with anti-inflammatory activity, among which compounds 3 and 7-14 are isolated for the first time, and this kind of components can be applied in the development of pharmaceutical and health products.

Key words

Artemisia argyi / fresh application / terpenoid / anti-inflammatory activity

引用本文

李齐激, 李雨铭, 王丽, 周浪, 陈发菊, 杨小生. 鲜用艾叶萜类成分及其抗炎活性研究. 中国药学杂志, 2024 , 59 (19) : 1807 -1812 . DOI: 10.11669/cpj.2024.19.004

Qiji LI, Yuming LI, Li WANG, Lang ZHOU, Faju CHEN, Xiaosheng YANG. Terpenoid Constituents from the Fresh-Used Leaves of Artemisia argyi and Their Anti-Inflammatory Activities[J]. Chinese Pharmaceutical Journal, 2024 , 59 (19) : 1807 -1812 . DOI: 10.11669/cpj.2024.19.004

正文

收起

艾叶(Artemisia argyi Levl. et Vant.),菊科多年生草本植物,广布全国^[1]。作为我国传统中药,苗、布依、土家、傣等民族习用药,具有温经止血,散寒止痛,主要用于治疗吐血,衄血,崩漏,少腹冷痛,经寒不调,宫冷不孕等症^[2]。鲜用艾叶始载《名医别录》用于止血、杀虫^[3], 随后《本草纲目》等载其捣汁用于咽喉肿痛^[4];土家、布依、傣族鲜煎水服用于咽喉痛、慢性支气管炎等^[5]。现代研究主要针对陈艾或干品开展,主要含有黄酮、挥发油、萜类等化学成分,在抗炎、抗氧化、抗病毒、抗菌等方面呈现出一定优势^[6];其中抗炎活性物质以挥发油为主,Reinhardt等^[7]发现艾叶中倍半萜内酯可通过抑制T细胞活性达到抗炎作用,Meng等^[8]揭示了鲜艾对于神经性皮炎具有很好的治疗效果。鉴于艾叶悠久的鲜用史,以及现有研究未能较好支撑艾叶鲜用的现状,本研究开展了新鲜艾叶的化学成分研究,从中获得15个萜类成分:artanomaloide(1)、dehydroleucodin(2)、tamaulipin-B acetate(3)、moxartenolide(4)、yomogin(5)、costic acid(6)、costic acid methyl ester(7)、PBI(8)、(-)-3-hydroxy-β-ionone(9)、pubinernoid A(10)、subamone(11)、artefrigin(12)、cassipourol(13)、3β-acetoxy-24-oxo-dammara-20,25-diene(14)、dammara-20,24-dien-3β-ol acetate(15);其中化合物3、7~14均为首次从艾叶中分离,化合物1~12具有明显的抗炎活性,可在医药健康产品开发中加以利用。

1 仪器与材料

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Bruker-600MHz核磁共振测试仪(美国Bruker公司);Hewlett Pakard 110 型质谱仪(美国惠普公司);Agilent-1260高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司);LC2050制备液相色谱仪(武汉睿合色谱技术有限公司);METTLER TOLEDO熔点仪(温度未校正,瑞士METTLER公司);VICTOR Nivo型酶标仪(珀金埃尔默企业管理有限公司);CCL-170B-8型CO₂培养箱(新加坡ESCO公司);全自动酶标计数仪(美国Thermo公司);DMEM培养基(北京索莱宝科技有限公司);脂多糖(LPS,美国Sigma 公司);双抗(青霉素、链霉素,美国GIBCO公司);NO试剂盒(批号 PS0236-0100,上海碧云天公司);胰蛋白酶(以色列Biological Indudtries公司); RAW264.7细胞[赛百慷(上海)技术股份有限公司];层析硅胶(300~400目,青岛海洋化工有限公司);Sephadex LH-20凝胶(瑞典Amersham公司);制备用色谱甲醇、乙腈(美国天地公司),分离试剂均由工业纯经重蒸处理使用。

新鲜艾叶于2022年7月采自贵州务川,经贵州中医药大学孙庆文教授鉴定为菊科植物艾(Artemisia argyi Levl. et Vant.)的叶,标本存于贵州省天然产物研究中心(标本号:NPRC-22-11)。

2 提取分离

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新鲜艾叶(19.75 kg)经体积分数95%乙醇回流提取3次,每次2 h。回收溶剂,加水溶解分散后,分别用石油醚、乙酸乙酯萃取,回收溶剂得石油醚萃取物360 g,乙酸乙酯萃取物270 g。石油醚萃取物经硅胶柱层析石油醚-乙酸乙酯(100∶1→1∶1)梯度洗脱得5个流分(Fr.1~Fr.5)。Fr.1经C₁₈反相硅胶柱层析甲醇-水(30∶70→100∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.1.1~Fr.1.3)。Fr.1.1经C₁₈反相硅胶柱层析甲醇-水(60∶40~100∶1)梯度洗脱得化合物15 (15.3 mg)。Fr.1.2经硅胶柱层析石油醚-乙酸乙酯(100∶1→1∶1)梯度洗脱得2个亚流分(Fr.1.2.1~Fr.1.2.2),Fr.1.2.1经半制备液相100%乙腈洗脱得化合物6 (6.3 mg,t_R=15.3 min)。Fr.1.2.2经LH-20葡聚糖凝胶柱层析二氯甲烷-甲醇(1∶1)洗脱化合物12(8.6 mg)、化合物14(25.4 mg)。Fr.3经C₁₈反相硅胶柱层析甲醇-水(30∶70→100∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.3.1~Fr.3.3)。Fr.3.1经半制备液相体积分数65%甲醇-水洗脱得化合物3(20.2 mg,t_R=26.3 min)、4(23.6 mg,t_R=38.4 min)。Fr.3.2经半制备液相体积分数60%甲醇-水洗脱得化合物2(16.8 mg, t_R=42.7 min)。Fr.4经C₁₈反相硅胶柱层析甲醇-水(30∶70→100∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.4.1~Fr.4.3);Fr.4.1经半制备液相体积分数60%甲醇-水洗脱得化合物10(6.8 mg, t_R=11.2 min)。

乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析石油醚-乙酸乙酯(100∶1→1∶1)梯度洗脱得5个流分(Fr.6~Fr.10)。Fr.6经C₁₈反相硅胶柱层析甲醇-水(30∶70→100∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.6.1~Fr.6.3);Fr.6.2经半制备液相体积分数45%乙腈-水洗脱得化合物7(8.3 mg, t_R=24.8 min)。Fr.7经C₁₈反相硅胶柱层析甲醇-水(30∶70→100∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.7.1~Fr.7.3);Fr.7.2经硅胶柱层析石油醚-乙酸乙酯(100∶1)洗脱得化合物13(4.2 mg)。Fr.9经C₁₈反相柱层析甲醇-水(30∶70→100∶1)梯度洗脱得3个流分(Fr.9.1~Fr.9.3)。Fr.9.1经半制备液相体积分数45%乙腈-水洗脱得化合物1(3.2 mg, t_R=40.7 min)。Fr.9.2经硅胶柱层析石油醚-乙酸乙酯(20∶1→1∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.9.2.1~Fr.9.2.3),Fr.9.2.3再经硅胶柱层析石油醚-乙酸乙酯(20∶1~1∶1)梯度洗脱得3个亚流分(Fr.9.2.3.1~Fr.9.2.3.3),Fr.9.2.3.1经半制备液相45%乙腈-水洗脱得化合物11(4.5 mg, t_R=16.6 min);Fr.9.2.3.2经半制备液相体积分数45%乙腈-水洗脱得化合物5(7.8 mg, t_R=14.8 min);Fr.9.2.3.3经半制备液相体积分数45%乙腈-水洗脱得化合物8(4.0 mg, t_R=9.2 min)、9(5.3 mg, t_R=12.5 min)。

3 结构鉴定

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化合物1:白色粉末,m.p. 210~212 ℃。ESI-MS m/z: 571.3 [M+Na]⁺,分子式为C₃₂H₃₆O₈。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.39(1H,d,J=5.5 Hz,H-2'),6.18(1H,s,H-3),6.11(1H,d,J=3.5 Hz,H-13'a),5.80(1H,d,J=5.6 Hz,H-3'),5.38(1H,d,J=3.5 Hz,H-13'b),5.05(1H,m,H-8),4.17(1H,t,J=9.8 Hz,H-6'),3.71(1H,t,J=10.1 Hz,H-5),3.48(1H,d,J=10.0 Hz,H-6),3.05(1H,m,H-7'),2.87(1H,t,J=10.2 Hz,H-7),2.40(3H,s,H-15),2.31(3H,s,H-14),2.03(3H,s,OAc),1.56(3H,s,H-15'),1.29(3H,s,H-14')。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 134.5(C-1),195.0(C-2),136.3(C-3),171.0(C-4),50.4(C-5),79.3(C-6),56.8(C-7),63.3(C-8),43.7(C-9),143.6(C-10),60.1(C-11),176.4(C-12),36.9(C-13),20.4(C-14),20.1(C-15),66.3(C-1'),143.0(C-2'),132.0(C-3'),57.4(C-4'),66.6(C-5'),79.7(C-6'),43.5(C-7'),23.8(C-8'),35.0(C-9'),72.8(C-10'),140.8(C-11'),170.6(C-12'),119.6(C-13'),30.0(C-14'),14.6(C-15'),21.9,170.3(OAc)。以上数据与文献[9]报道基本一致,故鉴定为artanomaloide。

化合物2:白色粉末,m.p. 203~205 ℃。ESI-MS m/z: 267.3 [M+Na]⁺,分子式为C₁₅H₁₆O₃。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.19(1H,d,J=3.2 Hz,H-13a),6.18(1H,d,J=1.3 Hz,H-3),5.46(1H,d,J=3.2 Hz,H-13b),3.62(1H,t,J=10.1 Hz,H-6),3.50(1H,m,H-5),2.89(1H,m,H-7),2.44(3H,d,J=1.0 Hz,H-14),2.32(3H,s,H-15)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 132.1(C-1),196.0(C-2),135.8(C-3),169.7(C-4),53.2(C-5),84.5(C-6),53.1(C-7),24.6(C-8),37.4(C-9),152.1(C-10),138.7(C-11),169.3(C-12),119.0(C-13),22.0(C-14),20.0(C-15)。以上数据与文献[10]报道基本一致,故鉴定为dehydroleucodin。

化合物3:黄色粉末,m.p. 155~157 ℃。ESI-MS m/z: 313.0 [M+Na]⁺,分子式为C₁₇H₂₂O₄。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.29(1H,d,J=3.4 Hz,H-13a),5.54(1H,d,J=3.4 Hz,H-13b),5.18(1H,dd,J=10.7,5.8 Hz,H-6),4.88(2H,m,H-1),4.57(1H,dd,J=9.9,8.6 Hz,H-3),2.53(1H,m,H-7),1.46(3H,s,H-14)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 125.8(C-1),32.3(C-2),81.1(C-3),139.6(C-4),124.3(C-5),79.1(C-6),50.1(C-7),28.3(C-8),41.1(C-9),138.9(C-10),138.9(C-11),170.2(C-12),120.4(C-13),16.5(C-14),12.7(C-15),21.2,170.3(OAc)。以上数据与文献[11]报道基本一致,故鉴定为tamaulipin-B acetate。

化合物4:白色粉末,m.p. 167~168 ℃。ESI-MS m/z: 707.2 [2M+Na]⁺,分子式为C₂₀H₂₂O₅。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.24(1H,d,J=1.5 Hz,H-3'),6.20(1H,d,J=2.8 Hz,H-3),5.63(1H,d,J=2.9 Hz,H-13a),6.23(H,d,J=2.9 Hz,H-13b),3.73(1H,t,J=10.1 Hz,H-8),3.33(1H,tt,J=10.3,3.0 Hz,H-7),2.75(1H,dd,J=13.4,10.8 Hz,H-9a),2.52(1H,dd,J=13.4,2.2 Hz,H-9b),2.47(3H,s,H-14),2.33(3H,d,J=1.6 Hz,H-15),1.92(3H,m,H-5')。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 133.7(C-1),195.2(C-2),136.2(C-3),169.5(C-4),51.7(C-5),81.6(C-6),55.4(C-7),68.8(C-8),44.6(C-9),145.0(C-10),136.3(C-11),168.6(C-12),122.0(C-13),21.5(C-14),20.0(C-15),166.5(C-1'),126.9(C-2'),141.1(C-3'),16.1(C-4'),20.6(C-5')。以上数据与文献[12]报道基本一致,故鉴定为莫沙坦内酯(moxartenolide)。

化合物5:无色针状结晶(甲醇),m.p. 153~155 ℃。ESI-MS m/z: 267.1 [M+Na]⁺,分子式为C₁₅H₁₆O₃。¹H-NMR(600 MHz,CD₃OD) δ: 7.04(1H,d,J=9.8 Hz,H-1),6.23(1H,d,J=9.9 Hz,H-2),6.20(1H,d,J=1.4 Hz,H-13a),5.87(1H,d,J=1.4 Hz,H-13b),4.60(1H,m,H-8),3.24(1H,m,H-7),1.98(3H,s,H-15),1.35(3H,s,H-14)。¹³C-NMR(150 MHz,CD₃OD) δ: 158.7(C-1),126.6(C-2),187.9(C-3),131.8(C-4),158.6(C-5),31.1(C-6),43.1(C-7),77.5(C-8),40.3(C-9),39.8(C-10),142.5(C-11),171.9(C-12),122.4(C-13),25.9(C-14),10.7(C-15)。以上数据与文献[13]报道基本一致,故鉴定为yomogin。

化合物6:白色无定型粉末,m.p. 171~173 ℃。ESI-MS: m/z: 233.3 [M-H]^-,分子式为C₁₅H₂₂O₂。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.31(1H,s,H-13a),5.69(1H,s,H-13b),4.71(1H,d,J=1.9 Hz,H-15),4.41(1H,d,J=2.0 Hz,H-15),2.54(1H,td,J=12.1,6.1 Hz,H-7),1.90(1H,d,J=11.9 Hz,H-5),0.74(3H,s,H-14)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 41.9(C-1),23.6(C-2),36.9(C-3),150.8(C-4),50.0(C-5),30.1(C-6),39.5(C-7),27.4(C-8),41.2(C-9),36.1(C-10),145.2(C-11),171.6(C-12),124.9(C-13),16.5(C-14),105.6(C-15)。以上数据与文献[14]报道基本一致,故鉴定为木香酸(costic acid)。

化合物7:黄色油状物。EI-MS m/z: 248.0 [M]⁺,分子式为C₁₆H₂₄O₂。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.17(1H,s,H-13a),5.59(1H,s,H-13b),4.73(1H,m,H-15),4.43(1H,d,J=1.4 Hz,H-15'),3.75(3H,s,H-16),2.54(1H,m,H-7),0.74(3H,s,H-14)。¹³C-NMR (150 MHz,CDCl₃) δ: 42.0(C-1),23.6(C-2),37.0(C-3),150.9(C-4),50.0(C-5),30.1(C-6),39.8(C-7),27.4(C-8),41.2(C-9),36.1(C-10),146.0(C-11),168.1(C-12),122.6(C-13),16.5(C-14),105.6(C-15),51.9(-OCH₃)。以上数据与文献[15]报道基本一致,故鉴定为costic acid methyl ester。

化合物8:黄色油状物。ESI-MS m/z: 223.1 [M-H]^-,分子式为C₁₃H₂₀O₃。¹H-NMR(600 MHz,CD₃OD) δ: 6.98(1H,d,J=16.1 Hz,H-7),6.44(1H,d,J=16.1 Hz,H-8),2.88(1H,d,J=13.7 Hz,H-2α),2.45(1H,m,H-5),2.32(3H,s,H-10),1.86(1H,dd,J=13.7,2.2 Hz,H-2β),1.00(3H,s,H-12),0.96(3H,s,H-11),0.90(3H,m,H-13)。¹³C-NMR(150 MHz,CD₃OD) δ: 44.1(C-1),52.3(C-2),213.9(C-3),45.8(C-4),37.5(C-5),78.7(C-6),152.3(C-7),132.4(C-8),200.7(C-9),27.5(C-10),25.0(C-11,12),16.3(C-13)。以上数据与文献[16]报道基本一致,故鉴定为PBI。

化合物9:黄色油状物。ESI-MS m/z: 231.1 [M+Na]⁺,分子式为C₁₃H₂₀O₂。¹H-NMR(600 MHz,CD₃OD) δ: 7.33(1H,m,H-7),6.14(1H,d,J=16.5 Hz,H-8),3.93(1H,m,H-3),2.41(1H,dd,J=17.5,5.7 Hz,H-4α),2.30(3H,s,H-10),2.07(1H,dd,J=17.5,9.7 Hz,H-4β),1.79(3H,s,H-12),1.14(3H,s,H-11),1.11(3H,s,H-12)。¹³C-NMR(150 MHz,CD₃OD) δ: 37.8(C-1),49.3(C-2),64.9(C-3),43.5(C-4),133.2(C-5),136.9(C-6),144.5(C-7),134.3(C-8),201.2(C-9),27.2(C-10),30.6(C-11),28.8(C-12),21.7(C-13)。以上数据与文献[17]报道基本一致,故鉴定为(-)-3-hydroxy-β-ionone。

化合物10:无色油状物。ESI-MS m/z: 415.5 [2M+Na]⁺,分子式为C₁₁H₁₆O₃。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 5.69(1H,s,H-6),4.32(1H,m,H-2),2.45(1H,dt,J=14.1,2.6 Hz,H-3β),1.46(3H,s,H-9),1.27(3H,s,H-10)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 47.4(C-1),67.0(C-2),45.8(C-3),86.9(C-4),182.6(C-5),113.1(C-6),172.1(C-7),36.1(C-8),26.6(C-9),30.8(C-10),27.1(C-11)。以上数据与文献[18]报道基本一致,故鉴定为pubinernoid A。

化合物11:无色油状物。ESI-MS m/z: 191.3 [M+Na]⁺,分子式为C₁₀H₁₆O₂。¹H-NMR(600 MHz,CD₃OD) δ: 6.72(1H,s,H-2),4.29(1H,dt,J=9.8,2.1 Hz,H-7),2.36(1H,dd,J=16.1,3.7 Hz,H-5β),1.91(1H,m,H-6),0.95(3H,d,J=7.1 Hz,H-9),0.89(3H,d,J=6.9 Hz,H-10)。¹³C-NMR(150 MHz,CD₃OD) δ: 202.1(C-1),135.3(C-2),151.8(C-3),27.2(C-4),37.2(C-5),51.1(C-6),69.4(C-7),20.9(C-8),15.4(C-9),16.8(C-10)。以上数据与文献[19]报道基本一致,故鉴定为subamone。

化合物12:白色针状结晶(氯仿),m.p. 231~232 ℃。ESI-MS m/z: 249.1 [M-H]^-,分子式为C₁₆H₂₆O₂。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 6.30(2H,q,J=1.5 Hz,H-2,6),3.81(3H,s,-OCH₃),2.50(2H,m,H-7),2.07(3H,s,H-15),0.88(3H,d,J=7.0 Hz,H-14)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 142.0(C-1),103.6(C-2),158.6(C-3),109.2(C-4),154.3(C-5),108.1(C-6),36.2(C-7),31.6(C-8),29.8(C-9),29.5(C-10),29.8(C-11),32.1(C-12),22.9(C-13),14.3(C-14),7.9(C-15),55.8(-OCH₃)。以上数据与文献[20]报道基本一致,故鉴定为artefrigin。

化合物13:黄色油状物。ESI-MS: m/z: 295.3 [M+H]⁺,分子式为C₂₀H₃₈O。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 5.40(1H,tq,J=7.0,1.4 Hz,H-14),4.15(2H,d,J=6.9 Hz,H-15),1.66(3H,d,J=1.3 Hz,H-20)。¹³C-NMR(150MHz,CDCl₃) δ: 36.8(C-1),39.5(C-2),24.9(C-3),37.5(C-4),28.1(C-5),32.9(C-6),24.6(C-7),37.4(C-8),32.8(C-9),37.6(C-10),25.3(C-11),40.0(C-12),140.4(C-13),123.2(C-14),59.6(C-15),22.9(C-16),22.8(C-17),19.9(C-18),19.9(C-19),16.3(C-20)。以上数据与文献[21]报道基本一致,故鉴定为cassipourol。

化合物14:白色针状结晶(氯仿),m.p. 333~335 ℃。ESI-MS m/z: 505.6 [M+Na]⁺,分子式为C₃₂H₅₀O₃。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 5.97(1H,s,H-26a),5.76(1H,s,H-26b),4.75(1H,s,H-27a),4.64(1H,s,H-27b),4.47(1H,dd,J=10.9,5.6 Hz,H-3),1.87(3H,s,H-27),0.96(3H,s,H-18),0.86(3H,s,H-28),0.85(3H,s,H-29),0.84(6H,s,H-19,30)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 38.9(C-1),23.8(C-2),81.0(C-3),38.0(C-4),56.1(C-5),18.3(C-6),35.4(C-7),40.6(C-8),50.9(C-9),37.2(C-10),21.5(C-11),25.0(C-12),48.0(C-13),49.6(C-14),31.4(C-15),29.0(C-16),45.4(C-17),16.4(C-18),15.8(C-19),151.9(C-20),107.6(C-21),36.3(C-22),28.6(C-23),201.8(C-24),144.7(C-25),124.5(C-26),17.8(C-27),16.6(C-28),28.1(C-29),16.0(C-30),171.1(C-31),21.4(C-32)。以上数据与文献[22]报道相符,故鉴定为3β-acetoxy-24-oxo-dammara-20,25-diene。

化合物15:白色针状晶体(氯仿),m.p. 301~303 ℃。ESI-MS m/z: 491.7 [M+Na]⁺,分子式为C₃₂H₅₂O₂。¹H-NMR(600 MHz,CDCl₃) δ: 5.13(1H,m,H-24),4.74(1H,s,H-21a),4.70(1H,s,H-21b),4.48(1H,m,H-3α),2.04(3H,s,OAc),1.69(3H,s,H-26),1.62(3H,s,H-27),0.97(3H,s,H-18),0.87(3H,s,H-28),0.86(3H,s,H-29),0.85(6H,s,H-19,30)。¹³C-NMR(150 MHz,CDCl₃) δ: 38.9(C-1),23.9(C-2),81.1(C-3),38.1(C-4),56.1(C-5),18.3(C-6),35.5(C-7),40.6(C-8),51.0(C-9),37.3(C-10),21.5(C-11),25.1(C-12),48.0(C-13),49.6(C-14),31.5(C-15),27.2(C-16),45.4(C-17),16.0(C-18),16.4(C-19),152.9(C-20),107.6(C-21),34.3(C-22),29.1(C-23),124.6(C-24),131.6(C-25),25.9(C-26),17.9(C-27),28.1(C-28),15.8(C-29),16.7(C-30),21.5,171.2(OAc)。以上数据与文献[23]报道相符,故鉴定为dammara-20,24-dien-3β-ol acetate。

4 抗炎活性检测

收起

利用LPS诱导RAW 264.7细胞构建炎症模型,Griess 法测定细胞NO释放量^[24-25]。将RAW 264.7巨噬细胞培养并配成细胞悬液,以每毫升2×10⁵个接种于96孔板中,每孔80 μL,37 ℃、5% CO₂培养箱内培育24 h。细胞按空白、模型、样品、阳性对照[地塞米松(DX)]进行分组,样品组浓度分别为0.5、1.0、5.0、10.0、20.0 μmol·L^-1,各浓度设复孔3个。除空白外,各组加 LPS 刺激(5.0 μg·mL^-1),继续培养24 h,取细胞上清液50 μL,每孔依次加 Griess Ⅰ、Griess Ⅱ试剂各50 μL,混匀后于540 nm波长测定吸光度,计算NO浓度,结果见表1。由表1可知,化合物1~12表现出明显的抗炎活性,IC₅₀值介于(1.27±0.02)~(17.55±0.13) μmol·L^-1,其作用与阳性对照DX相当,是鲜艾叶主要的非挥发性抗炎物质,这些非挥发性物质可在后续抗炎产品开发中与其挥发油搭配使用,亦可作为候选先导分子进一步加以甄选。

5 讨论

收起

挥发油提取是鲜用艾叶的重要形式,以桉叶素、樟脑、龙脑、松油醇、石竹烯等为主的萜类成分是其物质基础,在医药大健康产业中得到广泛应用^[6]。然而在挥发油应用中,非挥发性萜类往往被忽略,倍半萜类物质作为蒿属(Artemisia L.)植物的重要特征性成分,具有多种生物活性,具有较好的应用前景^[26]。本研究针对鲜用艾叶中化学成分进行研究,从中分离得到15个萜类成分,其中化合物3、7~14均为首次从艾叶中分离;通过LPS诱导RAW 264.7细胞炎症模型对所有化合物进行活性筛选,初步揭示了鲜艾叶非挥发性抗炎活性物质是以倍半萜类为主的萜类成分。为更好发挥鲜艾叶的药用价值,在今后的抗炎产品应用中,可考虑合理提取非挥发性萜类成分搭配挥发油进行使用,既能更好地增强抗炎效果,又可减少资源浪费。

基金

收起

贵州省科技创新能力建设专项资助(黔科合服企〔2020〕4013号)
贵州省天然产物高效利用工程研究中心项目资助(黔财建〔2019〕303(黔财建〔2019〕303)
贵州食药用生物资源可持续利用特色重点实验室项目资助(黔教合KY字〔2020〕018(黔教合KY字〔2020〕018)

参考文献

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文献

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参考文献引证文献

排序方式：

[1]

Flora of China Editorial Committee Chinese Academy of Science. Flora of China(中国植物志)[M]. Vol 76. Beijing: Science Press, 1991: 87.

[2]

Ch.P (2020) Vol Ⅰ(中国药典2020年版. 一部)[S]. 2020: 91.

[3]

TAO

H J

. Mingyi Bie Lu (名医别录)[M]. Beijing: China Press of Chinese Medicine, 2013: 115.

[4]

S Z

. Compendium of Materia Medica (本草纲目)[M]. Beijing: Huaxia Publishing House, 2008: 648.

[5]

JIA

M R

, LI

K W

. Zhongguo Minzuyao Zhiyao(中国民族药物志要)[M]. Beijing: China Press of Chinese Medicine, 2005: 66.

[6]

LAN

X Y

, ZHANG

, ZHU

L B

, et al. Research progress on chemical constituents from Artemisia argyi Folium and their pharmacological activities and quality control[J]. China J Chin Mater Med(中国中药杂志), 2020, 45(17): 4017-4030.

[7]

REINHARDT

J K

, KLEMD

A M

, DANTON

, et al. Sesquiterpene lactones from Artemisia argyi: absolute configuration and immunosuppressant activity[J]. J Nat Prod, 2019, 82(6): 1424-1433.

[8]

MENG

Q Y

. The fresh leaves of Artemisia argyi are effective in the treatment of neurodermatitis[J]. Anthol Med(医学文选), 1990, 1: 92.

[9]

ZHANG

S J

, MA

Y L

, WANG

J L

, et al. Chemical constituents of Artemisia argyi[J]. Chin Tradit Herb Drugs(中草药), 2019, 50(8): 1906-1914.

[10]

WANG

J L

, MA

Y L

, WANG

M J

, et al. Sesquiterpenoids from Artemisia integrifolia[J]. Chin Tradit Herb Drugs(中草药), 2018, 49(16): 3758-3762.

[11]

YOSHIOKA

, RENOLD

, FISCHER

N H

, et al. Sesquiterpene lactones from Ambrosia confertiflora (Compositae)[J]. Phytochemistry, 1970, 9(4): 823-832.

[12]

MASAYUKI

, HIROMI

, HISASHI

, et al. Bioactive constituents of Chinese natural medicines. Ⅰ. new sesquiterpene ketones with vasorelaxant effect from Chinese moxa, the processed leaves of Artemisia argyi Levl. et Vant.: moxartenone and moxartenolide[J]. Chem Pharm Bull, 1996, 44(9): 1656-1662.

[13]

XUE

G M

, ZHAO

C G

, XUE

J F

, et al. Chemical constituents from seeds of Artemisia argyi[J]. Chin Tradit Herb Drugs(中草药), 2022, 53(9): 2605-2611.

[14]

LONDERO

V S

, COSTASILVA

T A

, ANTAR

G M

, et al. Antitrypanosomal lactones from Nectandra barbellata[J]. J Nat Prod, 2021, 84(5): 1489-1497.

[15]

ALFREDO

, RUBEŁN

A T

, EMMA

. A costic acid guaianyl ester and other constituents of Podachaenium eminens[J]. Phytochemistry, 1998, 49(4): 1085-1090.

[16]

M Z

, TORRES

, VARELA

R M

, et al. Isolation of bioactive compounds from sunflower leaves (Helianthus annuus L.) extracted with supercritical carbon dioxide[J]. J Agric Food Chem, 2015, 63(28): 6410-6421.

[17]

Z Q

, CAI

Y N

, CHEN

Y D

, et al. Chemical constituents from the leaves of Baphicacanthus cusia[J]. J Chin Med Mater(中药材), 2021, 44(8): 1875-1879.

[18]

CHEN

J K

, CUL

W X

, BU

, et al. Study on terpenes with diverse skeletons from soft coral Sinularia sp. and their bioactivities[J]. Chin Tradit Herb Drugs(中草药), 2023, 54(5): 1370-1376.

[19]

CHEN

H Q

, FAN

Y J

, CAI

C H

, et al. Chemical constituents and their bioactivities from seeds of Clausena lansium[J]. Chin Tradit Herb Drugs(中草药), 2019, 50(2): 324-329.

[20]

BORCHULUUN

, WANG

Q H

, XU

Y H

, et al. Structure elucidation and NMR assignments of a new sesquiterpene of volatile oil from Artemisia frigida Willd[J]. Nat Prod Res, 2021, 35(14): 2367-2380.

[21]

, WANG

X T

, GUO

X H

, et al. Study on the chemical components and their antibacterial activities from Eriocaulon cinereum R. Br.[J]. Chin J Med Chem(中国药物化学杂志), 2022, 32(9): 700-706.

[22]

THOMAS

J S

, MEIKE

R H

, GUNTER

. New dihydrobenzofurans and triterpenoids from roots of Microglossa pyrifolia[J]. Planta Med, 2003, 69(3): 258-264.

[23]

ZHANG

, CHEN

R Y

. Study on chemical constituents in roots of Inula racemose[J]. Chin Pharm J(中国药学杂志), 2011, 46(15): 1159-1162.

[24]

FAN

Y Q

, PENG

, XIONG

, et al. Terpenoids from Fructus leonuri and their anti-inflammatory activities[J]. Chin Pharm J(中国药学杂志), 2023, 58(7): 571-575.

[25]

WANG

, LI

L L

, LI

Q J

, et al. Anti-inflammatory activity of Cili extracts and its therapeutic effect on ulcerative colitis model of mice[J]. Food Mach(食品与机械), 2023, 39(1): 164-169.

[26]

PAULA

T L

, ANTONIO

J D

, LUIZ

C A

, et al. Chemical composition and larvicidal activity of essential oils of three Artemisia species[J]. J Appl Entomol, 2023, 147(2): 116-125.

2024年第59卷第19期

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文章信息

doi: 10.11669/cpj.2024.19.004

接收时间：2024-02-04
首发时间：2025-12-30
出版时间：2024-10-08

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收稿日期：2024-02-04

基金

贵州省科技创新能力建设专项资助(黔科合服企〔2020〕4013号)

贵州省天然产物高效利用工程研究中心项目资助(黔财建〔2019〕303(黔财建〔2019〕303)

贵州食药用生物资源可持续利用特色重点实验室项目资助(黔教合KY字〔2020〕018(黔教合KY字〔2020〕018)

作者信息

¹ 贵州省天然产物研究中心, 贵州省天然产物高效利用工程技术研究中心, 贵阳 550014

² 贵州医科大学, 省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室, 贵阳 550025

通讯作者:

^* 杨小生,男,博士,研究员,博士生导师研究方向:天然药物化学 Tel:(0851)83809055

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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