微生物学报

Primer names	Primer sequences (5′→3′)	Product length (bp)
SLC25A6-F	ATCGTCGACAGATCTCTCGAGATGGCGGACCAGGCCATC	897
SLC25A6-R	CTTGTAATCTCTAGACTCGAGTTAAATGACTTTCTTGAATTCATCGTAC

Primer names	Primer sequences (5′→3′)	Product length (bp)
SLC25A6-F	ATCGTCGACAGATCTCTCGAGATGGCGGACCAGGCCATC	897
SLC25A6-R	CTTGTAATCTCTAGACTCGAGTTAAATGACTTTCTTGAATTCATCGTAC

Primer names	Primer sequences (5′→3′)
SLC25A6 siRNA#1	AUAUCAGCUCCUUUGCGUCTT
SLC25A6 siRNA#2	AGUCACUGUCUGUGCAAUCTT
SLC25A6 siRNA#3	AAUACCUCCAGAACUGAGUTT

Primer names	Primer sequences (5′→3′)
SLC25A6 siRNA#1	AUAUCAGCUCCUUUGCGUCTT
SLC25A6 siRNA#2	AGUCACUGUCUGUGCAAUCTT
SLC25A6 siRNA#3	AAUACCUCCAGAACUGAGUTT

宿主SLC25A6蛋白与禽腺病毒血清4型感染的互作

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王昕蕊 ¹^,²^,³^,⁴ , 吴相龙 ¹^,²^,³^,⁴ , 史慧君 ¹^,²^,³^,⁴ , 楚阿克·阿扎提null ¹^,²^,³^,⁴ , 吴彤 ¹^,²^,³^,⁴ , 龙姝霏 ¹^,²^,³^,⁴ , 郑世军 ⁵ , 阿热阿依·海依拉提null ¹^,²^,³^,⁴

微生物学报 | 研究报告 2026,66(7): 3354-3365

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微生物学报 |研究报告 2026 , 66 (7) : 3354 -3365

宿主SLC25A6蛋白与禽腺病毒血清4型感染的互作

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王昕蕊¹^,²^,³^,⁴, 吴相龙¹^,²^,³^,⁴, 史慧君¹^,²^,³^,⁴, 楚阿克·阿扎提null¹^,²^,³^,⁴, 吴彤¹^,²^,³^,⁴, 龙姝霏¹^,²^,³^,⁴, 郑世军⁵, 阿热阿依·海依拉提null¹^,²^,³^,⁴

作者信息

^1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐

^2.农业农村部动物疫病乌鲁木齐野外科学观测研究站，新疆乌鲁木齐

^3.新疆草食动物新药研究与创制重点实验室，新疆乌鲁木齐

^4.新疆动物临床医学研究重点实验室，新疆乌鲁木齐

^5.中国农业大学动物医学院，北京

作者简介:

作者贡献声明

王昕蕊：实验操作、论文撰写；吴相龙：协助实验操作；史慧君：研究构思和设计；楚阿克·阿扎提、吴彤：数据处理；龙姝霏：参与论文讨论；郑世军：提供技术支持贡献；阿热阿依·海依拉提：论文修改和项目支持。

Interaction between the host protein SLC25A6 and fowl adenovirus serotype 4 infection

Xinrui WANG¹^,²^,³^,⁴, Xianglong WU¹^,²^,³^,⁴, Huijun SHI¹^,²^,³^,⁴, Chuake·Azhati¹^,²^,³^,⁴, Tong WU¹^,²^,³^,⁴, Shufei LONG¹^,²^,³^,⁴, Shijun ZHENG⁵, Areayi·Haiyilati¹^,²^,³^,⁴

Affiliations

^1.College of Veterinary Medicine, Xinjiang Agricultural University, Urumqi, Xinjiang, China

^2.Urumqi Field Scientific Observation and Research Station for Animal Diseases, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Urumqi, Xinjiang, China

^3.Xinjiang Key Laboratory of New Drug Research and Development for Herbivorous Animals (XJ-LNDRDHA), Urumqi, Xinjiang, China

^4.Xinjiang Regional Key Laboratory of Clinical Veterinary Medicine Research (XJRKLCVMR), Urumqi, Xinjiang, China

^5.College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing, China

出版时间: 2026-07-04 doi: 10.13343/j.cnki.wsxb.20250963

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摘要

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目的明确宿主蛋白溶质载体家族25成员6 (solute carrier family 25 member 6, SLC25A6)在禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype-4, FAdV-4)感染中的作用及分子机制，为深入阐明FAdV-4的致病机制和制定新型防控策略提供理论依据。方法首先确认FAdV-4在不同时间和感染复数(multiplicities of infection, MOI)下感染LMH细胞可产生明显的细胞病变。其次基于前期筛选获得的宿主蛋白SLC25A6，采用Western blotting方法检测FAdV-4对细胞内源性SLC25A6蛋白表达的影响；通过转染实验调控SLC25A6的表达(过表达或干扰内源性表达)，结合实时荧光定量PCR及Western blotting技术，从mRNA、蛋白及病毒滴度水平分析SLC25A6对FAdV-4复制的影响；采用免疫共沉淀方法验证SLC25A6与FAdV-4核心衣壳蛋白Hexon的相互作用。结果 FAdV-4可显著抑制细胞内源性SLC25A6的表达。过表达SLC25A6能显著抑制FAdV-4的复制，而干扰内源性SLC25A6则促进病毒复制。SLC25A6可与FAdV-4 Hexon蛋白的直接相互作用。结论宿主蛋白SLC25A6通过与FAdV-4 Hexon蛋白相互作用抑制病毒复制，为深入阐明FAdV-4的致病机制及制定新型防控策略提供了理论依据。

关键词

FAdV-4 / SLC25A6 / 病毒复制 / 蛋白互作

Abstract

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Objective To clarify the role and molecular mechanism of the host protein solute carrier family 25 member 6 (SLC25A6) during fowl adenovirus serotype-4 (FAdV-4) infection, thus providing a theoretical basis for elucidating the pathogenic mechanism of FAdV-4 and developing novel prevention and control strategies. Methods First, we confirmed that infection of LMH cells with FAdV-4 at different time points and multiplicities of infection (MOI) resulted in obvious cytopathic effects (CPE). Second, on the basis of the host protein SLC25A6 identified in previous screening, Western blotting was employed to examine the effect of FAdV-4 on the expression of endogenous SLC25A6 in cells. Subsequently, transfection experiments were performed to regulate the expression of SLC25A6 (overexpression or interference with endogenous expression). RT-qPCR and Western blotting were employed to analyze the effect of SLC25A6 on FAdV-4 replication from the aspects of mRNA level, protein level, and viral titer. Finally, co-immunoprecipitation (Co-IP) was employed to verify the interaction between SLC25A6 and the core capsid protein Hexon of FAdV-4. Results FAdV-4 significantly inhibited the expression of endogenous SLC25A6 in cells. The overexpression of SLC25A6 markedly inhibited FAdV-4 replication, while interference with endogenous SLC25A6 promoted viral replication. SLC25A6 could directly interact with the Hexon protein of FAdV-4. Conclusion The host protein SLC25A6 inhibits FAdV-4 replication through its interaction with the viral Hexon protein. The results provide a theoretical basis for further elucidating the pathogenic mechanism of FAdV-4 and developing novel prevention and control strategies.

Key words

FAdV-4 / SLC25A6 / viral replication / protein-protein interaction

引用本文

王昕蕊, 吴相龙, 史慧君, 楚阿克·阿扎提null, 吴彤, 龙姝霏, 郑世军, 阿热阿依·海依拉提null. 宿主SLC25A6蛋白与禽腺病毒血清4型感染的互作. 微生物学报, 2026 , 66 (7) : 3354 -3365 . DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20250963

Xinrui WANG, Xianglong WU, Huijun SHI, Chuake·Azhati, Tong WU, Shufei LONG, Shijun ZHENG, Areayi·Haiyilati. Interaction between the host protein SLC25A6 and fowl adenovirus serotype 4 infection[J]. Acta Microbiologica Sinica, 2026 , 66 (7) : 3354 -3365 . DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20250963

正文

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肝炎-心包积液综合征(hepatitis-hydropericardium syndrome, HHS)，又称“安卡拉病”，是由禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4，FAdV-4)引起的一种急性、高度接触性和免疫抑制性病毒病^[1]。该病于1987年首次在巴基斯坦安卡拉地区暴发并被报道，目前已在全球范围内广泛流行，对养禽业造成重大经济损失^[2]。FAdV-4属于腺病毒科(Adenoviridae)禽腺病毒属(Aviadenovirus)，病毒粒子呈无囊膜二十面体对称结构，直径约70-90 nm，对热和化学灭活具有较强的抵抗力^[3]。该病毒主要感染鸡，也可波及鸭、鹅等禽类，能够通过水平与垂直方式传播^[4]。此外，FAdVs能与传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus, IBDV)、禽白血病病毒(avian leukosis virus, ALV)和鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus, CIAV)等其他病原共感染，加剧病情的复杂性^[5-6]。FAdV-4多侵害3周龄左右的雏鸡，病死率可达30%-80%；患病鸡常表现为食欲减退、精神沉郁、排黄色稀便等，剖检可见肝脏与肾脏肿胀坏死以及心包内积聚淡黄色至深黄色液体^[7]。近年来，该病在我国多地鸡群和鸭群中频繁暴发，目前仍存在区域性流行的情况^[8-9]，因此深入阐明FAdV-4的感染机制并制定有效的干预策略已成为当前研究的重点。

溶质载体家族25成员6 (solute carrier family 25 member 6, SLC25A6)，又称ADP/ATP载体蛋白3，是定位于线粒体内膜的关键转运蛋白，在细胞能量代谢与稳态维持中发挥核心作用^[10-11]。该蛋白功能异常通常与抗炎、抗肿瘤和抗病毒等过程密切相关。例如，香芹酚通过抑制VDAC1调控SLC25A6表达以改善HMEC-1细胞线粒体功能及减轻LPS诱导的炎症损伤^[12]；MRPL13通过加速SLC25A6的降解抑制线粒体通透性转换孔的异常开放，进而增强卵巢癌细胞的线粒体功能，并促进卵巢癌的恶性进展^[13]；在流感病毒的研究中发现SLC25A6可与病毒PB1-F2蛋白相互作用，参与病毒诱导的细胞凋亡通路^[14]。

本研究通过实时荧光定量PCR、Western blotting、TCID₅₀及免疫共沉淀等方法，探究宿主因子SLC25A6与FAdV-4的相互作用机制，旨在揭示FAdV-4的致病机制，并为抗病毒策略的制定提供参考。

1 材料与方法

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1.1 细胞、毒株及质粒

LMH细胞购自上海酶研生物科技有限公司。FAdV-4 HuBWH株由中国农业大学免疫生物学实验室于2015年分离保存并惠赠。pCMV-C-flag质粒购自北京擎科生物科技股份有限公司。

1.2 主要试剂和仪器

2×RT OR-Easy^TM Mix试剂盒、2×PCR Hero^TM Mix (dye)-v2.0试剂盒、Trans2K DNA Marker，成都福际生物技术有限公司；TRIzol^®Reagent、Lipofectamine^TM3000，赛默飞世尔科技公司；同源重组试剂盒，上海碧云天生物技术股份有限公司；大肠杆菌DH5α感受态细胞，北京全式金生物技术有限公司；GAPDH单克隆抗体、Tubulin单克隆抗体、SLC25A6多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的高纯度山羊抗兔免疫球蛋白G及辣根过氧化物酶标记的高纯度山羊抗小鼠免疫球蛋白G，武汉三鹰生物技术有限公司。

-80 ℃超低温冰箱，海尔集团公司；医用净化工作台，苏州净化设备有限公司；CO₂培养箱，益世科(上海)企业发展有限公司；倒置荧光显微镜，尼康精机(上海)有限公司；Mini-Protean Tetra电泳槽和凝胶成像仪，伯乐生命医学产品(上海)有限公司；4 ℃高速离心机，赛默飞世尔科技公司；台式高速冷冻离心机，艾本德中国有限公司。

1.3 引物及siRNA序列设计

根据GenBank公布的鸡(Gallus gallus) SLC25A6 mRNA序列的CDS (coding sequence)区，设计真核表达载体pCMV-C-flag的同源重组引物(表1)。同源重组引物由杭州有康生物科技有限公司合成，siRNA引物(表2)由苏州吉玛基因股份有限公司合成。

1.4 真核表达重组质粒的构建

总RNA采用TRIzol法从LMH细胞中提取，经氯仿分层、异丙醇沉淀及乙醇洗涤后，用无酶水溶解并测定浓度。随后，取1 μg总RNA，使用2×RT OR-Easy^TM Mix试剂在20 μL体系中进行反转录，合成cDNA。以此cDNA为模板，采用DNA聚合酶扩增SLC25A6基因。利用引物SLC25A6-F和引物SLC25A6-R (表1)进行PCR扩增。PCR反应体系(25 μL)：2×PCR Easy^TM Mix 12.5 μL、上、下游引物(10 µmol/L)各0.5 μL、模板(cDNA) 2 μL，ddH₂O补足至25 μL。PCR反应条件：95 ℃预变性5 min；95 ℃变性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸2 min，共34个循环；72 ℃终延伸5 min。PCR产物经纯化后用于后续克隆实验。利用同源重组试剂盒，将SLC25A6基因克隆至载体pCMV-C-flag中，构建重组质粒pCMV-C-flag-SLC25A6。将上述质粒转化至大肠杆菌Top10感受态细胞中，经单酶切及测序验证。

1.5 Western blotting检测蛋白表达量

将细胞用预冷PBS洗涤3次后，加入300 μL含蛋白酶抑制剂的裂解液，冰上裂解10 min。裂解产物于4 ℃、12 000 r/min离心15 min，收集上清并测定蛋白浓度。将蛋白样品与5×SDS上样缓冲液混合，100 ℃加热变性10 min。取30 μg蛋白经10% SDS-PAGE分离后，采用半干转法将蛋白转印至PVDF膜。膜经5%脱脂牛奶常温封闭1 h，随后加入对应一抗4 ℃孵育过夜。TBST洗涤3次后，加入HRP标记的二抗室温孵育1 h，再次洗涤后使用ECL化学发光试剂进行显影。采用ImageJ软件分析目标条带的灰度值，结果以目的蛋白/内参蛋白条带的灰度比值表示。

1.6 FAdV-4对SLC25A6表达的影响

以5×10⁵个细胞/孔的密度将LMH细胞接种于6孔板中，置于37 ℃、5% CO₂培养箱中培养24 h。随后分别以感染复数(multiplicities of infection, MOI)=0.1、1、10的FAdV-4感染LMH细胞，或以相同MOI感染后于不同时间点(24、36、48 h)收取蛋白，按照1.5节所述方法进行Western blotting检测，分析SLC25A6蛋白的表达变化。

1.7 SLC25A6对FAdV-4复制的影响

1.7.1 过表达SLC25A6对FAdV-4复制的影响

以5×10⁵个细胞/孔的密度将LMH细胞接种于6孔板中，置于37 ℃、5% CO₂培养箱中培养24 h。将细胞分为2组，分别转染1 μg pCMV-C-flag-SLC25A6重组质粒(试验组)和1 μg pCMV-C-flag空载质粒(对照组)。转染时将质粒稀释于Opti-MEM^TM I中并加入P3000^TM试剂；同时将Lipofectamine^TM 3000与Opti-MEM^TM I轻柔混匀，室温静置5 min。随后将上述2种溶液轻轻混合，室温孵育15 min形成复合物，并均匀滴加至细胞培养液中。转染24 h后，以MOI=1的FAdV-4感染细胞，继续培养24 h。收集细胞蛋白样品，通过Western blotting检测SLC25A6及病毒蛋白的表达水平。病毒上清用于TCID₅₀测定：将LMH细胞以2×10⁴个/孔接种于96孔板，培养24 h后，将病毒上清进行10倍梯度稀释，按稀释度从高到低加入细胞中，每个稀释度设8个复孔，并设立阴性对照；病毒感染2 h后，将培养液更换为含2% Waymouth的维持液，继续培养5-7 d，显微镜下观察细胞病变效应，并采用Reed-Muench法计算病毒滴度。

1.7.2 干扰SLC25A6表达对FAdV-4复制的影响

按照Lipofectamine^TM 3000 RNAi Max转染试剂说明书，将25 pmol针对SLC25A6基因的siRNA及对照siRNA分别转染至LMH细胞中。转染48 h后收集细胞，通过Western blotting检测SLC25A6蛋白表达水平，以评估siRNA的干扰效率。为分析SLC25A6敲低对病毒感染的影响，在干扰48 h后，以MOI=1的FAdV-4感染细胞，继续培养24 h后分别收集细胞和病毒上清，检测方法同1.7.1节。

1.8 免疫共沉淀(co-immunoprecipitation, Co-IP)验证病毒蛋白Hexon与SLC25A6的相互作用

为验证flag-Hexon和内源性SLC25A6的相互作用，将状态良好的LMH细胞传代至6孔板中，待细胞完全贴壁后，将pRK5-flag或pRK5-flag-Hexon转染至LMH细胞中。转染24 h后，用500 μL裂解液收获细胞蛋白，12 000 r/min离心15 min。取50 μL上清作为Input，剩余裂解液中每管加入10 μL flag标记或Hexon标记的磁珠，在室温下与样品孵育4-6 h，随后利用PBST洗涤3次，去除非特异性结合蛋白，离心弃上清，用2×SDS-PAGE重悬沉淀，100 ℃加热10 min使蛋白变性后，进行SDS-PAGE及Western blotting检测flag-Hexon或FAdV-4 Hexon与内源性SLC25A6的相互作用。

1.9 数据统计分析

采用GraphPad Prism 6.02软件，通过独立样本t检验对数据进行组间差异显著性分析并作图。试验结果以平均值±标准差表示，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

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2.1 FAdV-4感染LMH细胞诱导的形态学变化

倒置显微镜观察结果显示，FAdV-4感染可诱导LMH细胞产生显著的细胞病变。与未感染的对照组相比，FAdV-4感染后12 h，LMH细胞开始出现病变；且随着感染时间的延长，细胞病变程度不断加剧(图1A)。此外，细胞病变程度与病毒剂量呈正相关：随着感染剂量的增加，细胞病变程度显著加剧(图1B)。细胞病变特征表现为细胞形态变圆、皱缩、贴壁能力下降并最终脱落，同时伴有细胞核体积增大等现象。

2.2 构建pCMV-C-flag-SLC25A6质粒

以LMH细胞提取的总RNA经反转录获得的cDNA为模板，PCR扩增SLC25A6全长基因。如图2所示，目的条带大小约为900 bp，与SLC25A6基因长度吻合。将扩增产物回收后，与经Xho I单酶切的载体质粒pCMV-C-flag进行同源重组连接，对连接产物进行转化和菌落PCR鉴定，阳性克隆送测序验证。测序结果表明，重组质粒pCMV-C-flag-SLC25A6构建成功。

2.3 FAdV-4抑制内源性SLC25A6的表达

分别以MOI=0.1、1、10的FAdV-4感染LMH细胞，或以MOI=1的FAdV-4感染后于不同时间点(24、36、48 h)收取细胞蛋白，通过Western blotting检测FAdV-4感染对宿主细胞内SLC25A6蛋白表达的影响。结果显示，不同剂量的FAdV-4感染均能明显抑制SLC25A6蛋白的表达，且SLC25A6蛋白的表达量随FAdV-4感染剂量的增加而逐渐降低(图3A、3B)。此外，这种抑制效应呈时间依赖性，即随着感染时间的延长，SLC25A6蛋白的表达量进一步降低，至48 h时其表达量明显下降(图3C、3D)。

2.4 过表达SLC25A6抑制FAdV-4的复制

如图4A、4B所示，过表达SLC25A6可显著降低病毒Hexon与PX基因的mRNA水平。与此一致，病毒Hexon和PX蛋白的表达也受到明显抑制(图4C-4E)。进一步通过病毒滴度测定证实，过表达SLC25A6能有效降低病毒滴度(图4F)。上述结果共同表明，过表达SLC25A6可抑制FAdV-4的复制。

2.5 siRNA干扰SLC25A6蛋白的表达

Western blotting检测结果显示(图5A)，siRNA#1对鸡SLC25A6基因的干扰效率显著高于siRNA#2和siRNA#3 (图5B)，因此后续实验选用siRNA#1。

2.6 干扰SLC25A6促进FAdV-4的复制

利用筛选获得的高效siRNA#1敲低LMH细胞中SLC25A6的表达后感染FAdV-4。qPCR检测结果显示，敲低SLC25A6可显著升高病毒Hexon与PX基因的mRNA转录水平(图6A、6B)。Western blotting检测结果显示，敲低SLC25A6可明显促进FAdV-4蛋白Hexon与PX的表达(图6C-6E)，同时病毒滴度也显著增加(图6F)。上述结果表明，敲低SLC25A6可促进FAdV-4的复制，与过表达实验结论相互印证，共同表明SLC25A6是调控FAdV-4复制的关键宿主因子。

2.7 Co-IP验证SLC25A6与FAdV-4 Hexon蛋白的相互作用

在LMH细胞中转染pRK5-flag-Hexon，检测外源性Hexon与内源性SLC25A6的相互作用。结果表明，在全细胞裂解液中SLC25A6、flag-Hexon及GAPDH均能被有效检测到，表明试验体系可靠。在实验组中，flag-Hexon被成功富集，同时检测到明显的SLC25A6蛋白条带，表明flag-Hexon与SLC25A6存在相互作用(图7A)。由于异位表达Hexon可能产生假阳性结果，需在病毒自然感染状态下进一步验证FAdV-4 Hexon是否与内源性SLC25A6存在相互作用。结果显示，在FAdV-4感染状态下，与外源表达Hexon结果一致，Hexon能够被成功富集，同时检测到明显的SLC25A6蛋白条带，表明在FAdV-4自然感染状态下Hexon仍与SLC25A6存在相互作用(图7B)。

3 讨论

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FAdV-4是引起HHS的主要病原。FAdV-4病毒粒子呈无囊膜的二十面体对称结构，直径约为70-90 nm，主要由六邻体蛋白(Hexon)、五邻体基底蛋白(penton base)、纤突蛋白(fiber)、蛋白VI (pVI)、蛋白VII (pVII)等结构蛋白构成。其中，Hexon是FAdV-4最为重要且含量最为丰富的结构蛋白之一，大小约109 kDa^[15]。多项研究已证实，Hexon与高致病性FAdV-4 (HPFAdV-4)的致病性密切相关。Zhang等^[16-17]利用反向遗传操作系统将非致病性毒株ON1的Hexon基因替换至高致病性毒株HLJFAd15中，成功构建了重组病毒rHN20。动物实验表明，与野生型高致病性毒株相比，rHN20感染鸡只后引起的病理损伤显著减轻，鸡群死亡率也明显下降。进一步的序列比对与验证实验证实，Hexon蛋白第188位的精氨酸是维持FAdV-4强毒力的关键残基，直接决定了病毒的致病性强弱。除毒力调控外，Hexon还可通过与宿主蛋白相互作用参与病毒复制过程。Gao等^[18]的研究显示，FAdV-4的Hexon蛋白能够与宿主细胞内的CCT7蛋白相互作用，维持自身稳定表达，从而促进病毒复制；Li等^[19]进一步发现，在HPFAdV-4感染细胞中Hexon与BAG3相互作用，BAG3结合域位于101-250 aa，HPFAdV-4 Hexon蛋白通过与BAG3相互作用诱导自噬，促进病毒复制。Pan等^[20]发现，HPFAdV-4的短纤维蛋白Fiber 1可与LMH细胞CAR受体的D2结构域相互作用，介导HPFAdV-4的入侵，最终导致机体感染发病。值得注意的是，同为禽腺病毒的减蛋综合征病毒(egg drop syndrome virus, EDSV)的Hexon蛋白在体外实验中可诱导鸭胚成纤维细胞发生明显凋亡^[21]。因此，深入鉴定与FAdV-4 Hexon相互作用的宿主蛋白，并阐明其互作的具体分子机制对于系统揭示该蛋白的致病机理具有重要意义。

线粒体被称为细胞内的“能量工厂”，细胞代谢需要大量ATP，而这些ATP需经线粒体氧化磷酸化途径合成，再通过线粒体内膜上的ADP/ATP载体蛋白SLC25A6转运至细胞质中发挥作用^[22]。SLC25A6又称ADP/ATP载体蛋白3，是定位于线粒体内膜的转运载体蛋白，其在细胞内的正确组装直接影响细胞内ATP水平及线粒体内其他蛋白质的运输与组装，其功能异常可导致癌症、败血症及细胞毒性等^[23-24]。SLC25A6作为腺嘌呤核苷酸转运体家族的核心成员，其主要功能是维持线粒体能量代谢并调控细胞凋亡，这两大功能为FAdV-4感染后宿主细胞的病理响应提供了关键分子基础^[25]。在能量代谢层面，SLC25A6是线粒体内膜上介导ADP/ATP跨膜交换的关键载体，可将细胞质中的ADP转运至线粒体基质以支持氧化磷酸化，同时将生成的ATP转运至细胞质供能，其功能异常会直接导致细胞能量稳态失衡^[26]。

本研究发现，FAdV-4能够显著抑制宿主细胞内源性SLC25A6的表达。功能实验结果表明，过表达SLC25A6可显著抑制病毒复制，而干扰该基因表达则促进病毒复制，提示SLC25A6具有抗FAdV-4感染的作用。在分子机制上，免疫共沉淀实验证实了FAdV-4的Hexon蛋白与SLC25A6存在直接相互作用。据此推测，该互作可能通过抑制SLC25A6的转运活性，一方面“劫持”宿主能量代谢以利于自身复制，另一方面导致线粒体能量输出障碍和肝细胞代谢紊乱，这与FAdV-4感染后肝脏肿大、易碎的病理特征相符。在细胞凋亡调控层面，SLC25A6表达水平与线粒体膜通透性密切相关，病毒对其的早期抑制可能延缓肝细胞凋亡，为自身复制争取时间；而后期其功能的过度异常则可能触发大量细胞坏死，加剧肝脏损伤及心包积液等全身症状^[13]。此外，鉴于已有研究证实SLC25A6与M1型巨噬细胞活化呈负相关^[27]，提示其还可能通过调控免疫细胞功能，间接影响FAdV-4的免疫逃逸过程，为后续探究病毒-宿主互作的多维度机制提供了方向。深入探究SLC25A6调控巨噬细胞活化的通路及其在FAdV-4免疫逃逸中的作用是一个颇具潜力的研究方向，解析该机制可能为开发通过调节宿主免疫代谢抗病毒的新策略提供理论依据。

4 结论

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本研究通过前期筛选获得宿主蛋白SLC25A6，首先明确了FAdV-4可显著抑制细胞内源性SLC25A6的表达；其次通过mRNA、蛋白及病毒滴度水平证实过表达SLC25A6能显著抑制FAdV-4的复制，而干扰内源性SLC25A6表达则促进病毒复制；最后，为阐明SLC25A6调控FAdV-4复制的分子机制，采用免疫共沉淀实验验证了其与FAdV-4 Hexon蛋白的直接相互作用。

基金

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新疆维吾尔自治区“天池英才”青年博士引进计划(2024)
新疆维吾尔自治区天山创新团队(2025)(2025D14006)

参考文献

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文献

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排序方式：

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2026年第66卷第7期

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doi: 10.13343/j.cnki.wsxb.20250963

接收时间：2025-12-24
首发时间：2026-07-06
出版时间：2026-07-04

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作者

出版历史

收稿日期：2025-12-24
录用日期：2026-01-19

基金

新疆维吾尔自治区“天池英才”青年博士引进计划(2024)

The 2024 “Tianchi Talent” Young Doctoral Recruitment Program of Xinjiang Uygur Autonomous Region and the 2025 Tianshan Innovation Team Program of Xinjiang Uygur Autonomous Region(2025D14006)

新疆维吾尔自治区天山创新团队(2025)(2025D14006)

作者信息

^1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐

^2.农业农村部动物疫病乌鲁木齐野外科学观测研究站，新疆乌鲁木齐

^3.新疆草食动物新药研究与创制重点实验室，新疆乌鲁木齐

^4.新疆动物临床医学研究重点实验室，新疆乌鲁木齐

^5.中国农业大学动物医学院，北京

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2种不同金属材料的力学参数

科 Family	属数 Number of genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)	属 Genus	种数 Number of species	占总种数比例 Percentage of total species (%)
鹅膏菌科Amanitaceae	2	11	5.26	鹅膏菌属 Amanita	10	4.78
小菇科 Mycenaceae	2	12	5.74	丝盖伞属 Inocybe	5	2.39
多孔菌科 Polyporaceae	8	14	6.70	蜡蘑属 Laccaria	5	2.39
红菇科 Russulaceae	3	23	11.00	小皮伞属 Marasmius	6	2.87
				小菇属 Mycena	11	5.26
				光柄菇属 Pluteus	5	2.39
				红菇属 Russula	17	8.13
				栓菌属 Trametes	5	2.39

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